Đánh Giá Hiệu Quả Của Colchicine Trong Chọn Tạo Giống Quýt Hồng Lai Vung Tứ Bội

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HOC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA COLCHICINE TRONG CHỌN TẠO GIỐNG QUÝT HỒNG LAI VUNG TỨ BỘI (Citrus reticulata Blanco) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS TRẦN NHÂN DŨNG SINH VIÊN THỰC HIỆN NGUYỄN THỊ NGỌC TRÂM MSSV: 3064489 LỚP: CNSH TT K32 Cần Thơ, Tháng 11/2010 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN (ký tên) TS Trần Nhân Dũng SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) Nguyễn Thị Ngọc Trâm DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày 04 tháng 12 năm 2010 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình học tập thực luận văn tốt nghiệp, nhận nhiều hỗ trợ động viên từ nhiều phía Để hồn thành luận văn tơi xin trân trọng bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: TS Trần Nhân Dũng tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, tạo điều kiện để tơi hồn thành luận văn Q Thầy Cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học tận tâm truyền đạt kiến thức cho tơi q trình học tập Các anh chị phịng thí nghiệm Sinh học phân tử phịng thí nghiệm khác Viện nhiệt tình chia sẻ kinh nghiệm, cung cấp tài liệu tham khảo, thiết bị thí nghiệm đưa góp ý để tơi hồn thiện luận văn Các hộ nơng dân thuộc xã Đông Thạnh, huyện Châu Thành, Hậu Giang huyện Lai Vung, tỉnh Đồng Tháp giúp đỡ tận tình lúc thu mẫu quýt Hồng Lai Vung gốc ghép Đồng thời chia sẻ kinh nghiệm quý báo bước ghép Cô cố vấn học tập Ngô Thị Phương Dung, bạn lớp Công nghệ sinh học tiến tiến K32 bạn Trịnh Kiều Thế Loan lớp Công nghệ Sinh học K32, bên cạnh, quan tâm, giúp đỡ động viên tơi vượt qua khó khăn suốt thời gian thực đề tài Ba mẹ nuôi nấng chỗ dựa tinh thần suốt thời gian qua Tác giả Nguyễn Thị Ngọc Trâm Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT TÓM TẮT Đề tài “Đánh giá ảnh hưởng colchicine chọn tạo giống quýt Hồng Lai Vung tứ bội (Citrus reticulata Blanco)” thực hai vật liệu khác nhau: in vitro mắt ghép cành bánh tẻ in vivo nhằm khảo sát ảnh hưởng nồng độ thời gian xử lý colchicine để tạo thể tứ bội từ hai vật liệu Kết ghi nhận chiều cao mẫu in vitro tối ưu để xử lý colchicine từ 3cm trở lên ngưỡng chết 100% mẫu 24 tất nồng độ colchicine xử lý Tỷ lệ sống cao thí nghiệm hai nghiệm thức 0,05% 0,1% xử lý Đối với thí nghiệm xử lý colchicine mắt ghép cành bánh tẻ, kết ghi nhận tỷ lệ sống mắt ghép cao giai đoạn sau xử lý, sau ghép 20 ngày tỷ lệ bật chồi cao nằm nghiệm thức 0,1% colchicine, 24 0,2% colchicine, 48 Ngưỡng chết 100% mắt ghép xử lý nồng độ colchicine 0,2% 72 Từ khoá: colchicine, ghép cây, phân tích dịng chảy tế bào, qt Hồng Lai Vung, tứ bội Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT ABSTRACT The thesis “Induction, regeneration, and analysis of tetraploids from Hong Lai Vung mandarin oranges (Citrus reticulata Blanco) treated with colchicine” was performed on two different materials: in vitro seedlings and in vivo sections of shoots with sprouting axillary buds The purpose was to study on the interfering of concentration of colchicine and immersed time in these materials to get tetraploid cells The results of colchicine application in vitro seedlings concluded that 3cm was the minimum length of in vitro seedlings to be applied colchicine, and the 100% mortality was all concentrations of colchicines at 24 hours The highest survival rate of seedlings was on two treatments of 0.05% colchicine and 0.1% colchicine for hours In colchicines application in vivo sections of shoots with sprouting axillary buds, the results indicated that highest survival rate of scions after colchicine treatment or after grafting 20 days were on two treatments of 0.1% colchicine, 24 hours and 0.2% colchicine, 48 hours They also showed the highest rate of sprouting buds Lastly, the lethal dose for 100% of sections was at colchicine concentration of 0.2% for 72 hours Key words: Citrus reticulata Blanco, colchicine, flow cytometry, tetraploids, grafting Chuyên ngành Công nghệ Sinh học ii Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT MỤC LỤC CHƢƠNG I: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG II: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu nguồn gốc quýt Hồng Lai Vung 2.1.1 Phân loại khoa học quýt 2.1.2 Quýt Hồng Lai Vung, Đồng Tháp 2.2 Sơ lƣợc đa bội hóa 2.2.1 Định nghĩa 2.2.2 Cơ sở tế bào học đa bội hóa 2.2.3 Đặc điểm thể đa bội 2.3 Sơ lƣợc kỹ thuật tạo thể đa bội colchicine 2.3.1 Cơ sở khoa học 2.3.2 Các nhân tố ảnh hưởng đến hiệu xử lý colchicine 2.4 Tình Hình nghiên cứu tạo thể đa bội colchicine nƣớc 2.4.1 Trong nước 10 2.4.2 Ngoài nước 11 2.5 Phƣơng pháp phân tích dịng chảy tế bào 12 2.5.1 Nguyên lý hoạt động máy đo đa bội thể 12 2.5.2 Những thuận lợi phương pháp phân tích dòng chảy tế bào 14 2.5.3 Một số ứng dụng phương pháp phân tích dịng chảy tế bào chọn giống thực vật 15 2.5.4 Một số nghiên cứu ứng dụng phương pháp phân tích dịng chảy tế bào để xác định mức bội thể trồng 15 2.6 Sơ lƣợc kỹ thuật ghép 16 2.6.1 Khái niệm chung kỹ thuật ghép 16 2.6.2 Những ưu điểm kỹ thuật ghép 16 2.6.3 Nguyên lý ghép ăn 17 2.6.4 Những yếu tố ảnh hưởng đến trình ghép 19 CHƢƠNG III: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGIÊN CỨU 20 3.1 Phƣơng tiện 20 3.1.1 Vật liệu 20 3.1.2 Dụng cụ thiết bị 20 3.1.3 Hóa chất 21 3.1.4 Địa điểm thời gian thực 21 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 21 3.2.1 Chuẩn bị môi trường 21 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iii Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT 3.2.2 3.2.3 3.2.4 3.2.5 3.2.6 Chuẩn bị mẫu 21 Xử lý colchicine 22 Thao tác ghép cành bánh tẻ vào gốc ghép 22 Bố trí thí nghiệm 23 Xác định mật số kích thước khí phát sinh từ mắt ghép xử lý colchicines 25 3.2.7 Phân tích mức đa bội thể máy Partec Ploidy Analyser PA-I 25 3.2.8 Phân tích số liệu 27 CHƢƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Đánh giá tác động colchicine mẫu in vitro để tạo quýt Hồng Lai Vung tứ bội 28 4.1.1 Tỷ lệ sống mẫu nhị bội in vitro sau xử lý colchicine 28 4.1.2 Mối tương quan chiều cao in vitro xử lý tỷ lệ sống sau xử lý 33 4.1.3 Chiều cao gia tăng, số chồi số gia tăng mẫu in intro sau tuần xử lý colchicine 36 4.1.4 Phân tích mức đa bội thể mẫu in vitro sống sau tuần xử lý colchicine phương pháp dòng chảy tế bào 38 4.2 Đánh giá tác động colchicine mắt ghép để tạo quýt Hồng Lai Vung tứ bội 40 4.2.1 Tỉ lệ sống mắt ghép sau xử lý colchicine 40 4.2.2 Tỉ lệ mắt ghép bật chồi, thời gian từ lúc ghép đến lúc bật chồi số phát sinh từ mắt ghép 41 4.2.3 Mật số khí kích thước khí mẫu phát sinh từ mắt ghép sau xử lý colchicine 44 4.2.4 Phân tích mức đa bội thể mắt ghép bật chồi sau xử lý colchicine phương pháp dòng chảy tế bào 47 CHƢƠNG V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 5.1 Kết luận 50 5.2 Đề nghị 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 PHỤ LỤC Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iv Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG SST BẢNG TÊN BẢNG Tỉ lệ sống (%) mẫu nhị bội in vitro sau tuần xử lý colchicine nồng độ thời gian khác Tỉ lệ sống (%) mẫu nhị bội in vitro sau tuần xử lý colchicine nồng độ thời gian khác Tỉ lệ sống (%) mẫu nhị bội in vitro sau tuần xử lý colchicine nồng độ thời gian khác Tỉ lệ sống (%) mẫu nhị bội in vitro sau tuần xử lý colchicine nồng độ thời gian khác Mối tương quan chiều cao in vitro trước xử lý tỉ lệ sống tuần sau xử lý Tổng hợp tỉ lệ nguyên nhân gây chết tuần sau xử lý Chiều cao, số chồi gia tăng /mẫu in vitro sau tuần xử lý colchicine nồng độ thời gian khác Mức đa bội thể mẫu in vitro sau tuần xử lý colchicine Tỉ lệ sống (%) mắt ghép sau xử lý colchicine nồng độ thời gian khác 10 Tỉ lệ mắt ghép bật chồi so với tổng số mắt ghép ghép, thời gian từ lúc ghép đến lúc bật chồi số phát sinh từ mắt ghép nồng độ colchicine thời gian xử lý khác 11 Mật số khí (số khí khẩu/mm2) kích thước khí (µm) mẫu phát sinh từ mắt ghép nồng độ colchicine thời gian xử lý khác 12 Mức đa bội thể mắt ghép bật chồi nồng độ colchicine thời gian xử lý khác Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v TRANG 28 29 30 31 33 35 36 39 40 43 45 48 Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 Trường ĐHCT DANH MỤC HÌNH STT HÌNH TÊN HÌNH Quýt Hồng Lai Vung Đồng Tháp Quá trình nguyên phân tế bào Công thức cấu tạo colchicine Dòng chảy tế bào tiêu điểm thủy lực Bộ phận dòng chảy tế bào Ảnh hưởng dung dịch đệm lên dòng vật chất bên dung dịch mẫu Minh họa hạt quýt Hồng cấy hạt chai 30ml môi trường MS hạt bịt 50ml môi trường MS Dung dịch colchicine bọc kín giấy nhơm đặt tủ kính Thao tác ghép mắt ghép vào gốc ghép Sơ đồ tóm tắt bước tiến hành phân tích đa bội thể mẫu Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu đối chứng quýt đường SH-M54 Biểu đồ thể tương tác nồng độ colchicine thời gian xử lý lên in vitro sau tuần xử lý Biểu đồ thể tương tác nồng độ colchicine thời gian xử lý lên in vitro sau tuần xử lý Biểu đồ thể tương tác nồng độ colchicine thời gian xử lý lên in vitro sau tuần xử lý Biểu đồ thể tương tác nồng độ colchicine thời gian xử lý lên in vitro sau tuần xử lý Các mẫu quýt hồng in vitro có chiều cao khác trước sau xử lý colchicine Các mẫu sau xử lý colchicine có tượng: vàng (C), bị rụng (A,B), chết từ rễ lên (C) từ xuống (B) Các mẫu phát sinh chồi, gia tăng chiều cao sau xử lý colchicine Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu quýt Hồng xã Long Hậu, huyện Lai Vung 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vi TRANG 13 13 14 22 22 23 26 27 29 30 31 32 34 36 37 38 Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 - 2010 20 21 22 23 24 25 26 27 Trường ĐHCT Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,05% colchicine Biểu đồ thể tương tác nồng độ colchicine thời gian xử lý lên tỷ lệ sống mắt ghép sau xử lý Các cành bánh tẻ thay đổi màu sắc sau thời gian xử lý colchicine Sự sinh trưởng mắt ghép Hình chụp khí mẫu phát sinh từ mắt ghép sau xử lý colchicine Các phát sinh từ mắt ghép sau xử lý colchicine Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân gốc ghép chanh Tàu Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,1% colchicine 24 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vii 39 40 41 41 46 47 48 49 Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Hình 32 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu gốc ghép chanh Volka trƣớc ghép Hình 33 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu gốc ghép chanh Tàu trƣớc ghép 1.2 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro sau xử lý colchicine Hình 34 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,025% colchicine Hình 35 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,05% colchicine Hình 36 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,1% colchicine Hình 37 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,01% colchicine Hình 38 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,025% colchicine Hình 39 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,05% colchicine Hình 40 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,1% colchicine Hình 41 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,01% colchicine 12 Hình 42 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,025% colchicine 12 Hình 43 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,05% colchicine 12 Hình 44 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu in vitro xử lý 0,1% colchicine 12 1.3 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu phát sinh từ mắt ghép xử lý colchicine Hình 45 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép đối chứng 24 Hình 46 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,1% colchicine 24 Hình 47 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,2% colchicine 24 Hình 48 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép đối chứng 48 Hình 49 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,1% 48 Hình 50 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,2% 48 Hình 51 Biểu đồ minh họa giá trị trung bình nội dung DNA nhân mẫu mắt ghép xử lý 0,1% 72 PHỤ LỤC CÁCH PHA CÁC DUNG DỊCH 2.1 Pha dung dịch colchicine stock Hoà tan 0,5g colchicine vào 100 ml nước cất vô trùng tạo dung dịch mẹ 0,5% Các thao tác thực tủ cấy vô trùng Dung dịch để tối Từ dung dịch mẹ pha loãng nồng độ cần dùng Dung dịch hoạt động bề mặt Tween bổ sung: giọt Tween cho 50ml dung dịch colchicine 2.2 Dung dịch carnua biến đổi  Thành phần Cồn tuyệt đối 990 60ml Acid acetic tinh khiết 20ml  Cách pha Lấy ống đong 100ml, đổ vào ống đong 60ml cồn 960, sau đổ thêm 20ml acid acetic nguyên chất 2.3 Dung dịch aceto carmin  Thành phần Acid acetic 45ml Nước cất 55ml Carmin alum lack gam  Cách pha - Cho gam carmin alum lack 45ml acid acetic nguyên chất + 55ml nước cất tất cho vào bình tam giác 250ml lắc - Đưa lên bếp khuấy từ, đun hồn lưu vịng 1,5-2 - Sau đun để nguội lọc qua giấy lọc đựng chai nâu đậy kín 2.4 Dung dịch HCl  Thành phần Dung dịch axit HCl đậm đặc Nước cất  Cách pha - Để pha 100ml HCl-1N thực sau: Lấy 8,5ml HCl đậm đặc thêm nước cất đến vạch 100 - Để pha dung dịch HCl 4N, áp dụng công thức: C1V1 = C2V2 PHỤ LỤC THÀNH PHẦN MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY HẠT QUÝT 3.1 Thành phần môi trường nuôi cấy mô hạt quýt tuần Môi trường MS (Murashige-Skoog, 1962) Sigma (mã số M5519) Thành phần Ammonium nitrate Boric acid mg/L 1650 6,2 Calcium chloric (anhydrous) 332,2 Cobalt chloride hexahydrate 0,025 Cupric sulfate pentahydrate 0,025 Disodium EDTA dihydrate 37,26 Ferrous sulfate heptahydrate 27,80 Glycine 2,0 Magnesium sulfate (anhydrous) 180,7 Manganese sulfate monohydrate 16,9 myo-Inositol 100 Nicotinic acid 0,5 Potassium iodide 0,83 Potassium nitrate 1900 Potassium phosphate monobasic 170 Pyridoxine hydrochloride 0,5 Sodium molybdate dihydrate 0,25 Thiamine hydrochloride 0,1 Zinc sulfate heptahydrate 8,6 Thành phần môi trường nuôi cấy mô hạt quýt tuần đầu để tạo thành Thành phần g/L MS 4,41 Agar 10 Đường succrose 30 pH 5,8 3.2 Thành phần môi trường nuôi cấy tuần sau xử lý colchicine Thành phần g/L MS 4,41 Agar 10 Đường succrose 30 pH 5,8 Thành phần Benzyladenin (BA) Napthalene acetic acid (NAA) mg/L 10 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THỐNG KÊ Mật số khí Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng Nghiệm thức 129140.0 21523.3 3.87 0.0024 Sai số 350658.0 63 5566.0 Tổng cộng 479798.0 69 CV (%) 23,59 Đƣờng kính dài khí Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng Nghiệm thức 418.886 69.8143 2.74 0.0199 Sai số 1606.2 63 25.4952 Tổng cộng 2025.09 69 CV (%) 1,60 Đƣờng kính ngắn khí Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng Nghiệm thức 152.943 25.4905 1.62 0.1560 Sai số 990.5 63 15.7222 Tổng cộng 1143.44 69 CV (%) 1,25 Tỷ lệ sống tuần Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng -Nhân tố A:thời gian xử lý 29375.6 7343.89 5.06 0.0021 B:nồng độ 2443.52 814.506 0.56 0.6438 Tương tác AxB 14673.9 12 1222.82 0.84 0.6081 Sai số 58062.0 40 1451.55 Tổng cộng 104555.0 59 CV (%) 22,00 Tỷ lệ sống tuần -Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng -Nhân tố A:thời gian xử lý 23424.6 5856.15 3.40 0.0174 B: nồng độ colchicine 1102.0 367.333 0.21 0.8866 Tương tác AxB 5721.67 12 476.806 0.28 0.9899 Sai số 68903.3 40 1722.58 TOTAL (CORRECTED) 99151.6 59 CV (%) 23,96 Tỷ lệ sống tuần -Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng -Nhân tố A:nồng độ colchicine 4412.98 1470.99 0.85 0.4767 B:thời gian xử lý 11296.0 2824.0 1.62 0.1869 Tương tác AxB 9680.27 12 806.689 0.46 0.9238 Sai số 69519.3 40 1737.98 -Tổng cộng 94908.6 59 CV (%) 24,07 Tỷ lệ sống tuần -Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng -Nhân tố A:thời gian xử lý 15954.2 3988.56 3.20 0.0227 B:nồng độ colchicine 3400.72 1133.57 0.91 0.4450 Tương tác AxB 8690.7 12 724.225 0.58 0.8441 Sai số 49851.3 40 1246.28 -Tổng cộng 77897.0 59 CV (%) 20,38 Tỷ lệ mắt ghép sống sau xử lý -Nguồn biến động Tổng bình phương Độ tự TB bình phương F tính F Bảng -Nhân tố A:thời gian xử lý 6662.06 3331.03 3.29 0.0546 B:nồng độ colchicine 3445.89 1148.63 1.13 0.3550 Tương tác AxB 674.611 112.435 0.11 0.9943 Sai số 24296.7 24 1012.36 -Tổng cộng 35079.2 35 CV (%) 18,37 ... Đề tài ? ?Đánh giá hiệu colchicine chọn tạo giống quýt Hồng Lai Vung tứ bội (Citrus reticulata Blanco)” thực nhằm bước đầu đánh giá hiệu colchicine việc tạo giống quýt Hồng Lai Vung tứ bội làm... đề đặt cho nhà chọn giống tạo giống quýt Hồng Lai Vung không hạt (tam bội) làm tăng chất lượng tính cạnh tranh cho sản phẩm phương pháp lai giống tứ bội lưỡng bội bình thường Trong phương pháp... tuần, kiểm tra mức độ đa bội quýt Hồng Lai Vung nghiệm thức máy Partec Ploidy Analyser PA-I b Thí nghiệm 2: Đánh giá tác động colchicine mắt ghép để tạo quýt Hồng Lai Vung tứ bội Xử lý mắt ghép cành