Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa và khả năng hạ đường huyết của dâm bụt (Hibiscus rosa-sinensis L.) trên mô hình chuột nhắt trắng (Mus musculus var. albino) bị tiểu đường

Theo một số công trình nghiên cứu của các tác giả như: Rajesh Mandade và cộng sự (2011), Falguni Sheth và Subrata De (2012), Deepa Garg và cộng sự (2012), Mirunalini Sankaran, Arulmozhi Vadivel (2011) đã chứng minh Dâm bụt có khả năng kháng oxy hóa và hạ đường huyết trên mô hình chuột. Đồng thời, theo Đông y, Dâm bụt còn có tác dụng trị viêm niêm mạc dạ dày, mất ngủ, mộng tinh, tiểu đường, đại tiện ra máu. Tuy nhiên, các bằng chứng khoa học về ứng dụng của loại dược liệu này trong nước còn chưa sáng tỏ. Trong đề tài này, tác giả tiến hành khảo sát khả năng kháng oxy hóa của nước sắc Dâm bụt và khả năng hạ đường huyết trên mô hình chuột nhắt trắng in vivo.

Năm học 2015 - 2016 KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HÓA VÀ KHẢ NĂNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA DÂM BỤT (Hibiscus rosa-sinensis L.) TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT NHẮT TRẮNG (Mus musculus var albino) BỊ TIỂU ĐƯỜNG Nguyễn Minh Chí, Nguyễn Thị Lệ Giang, Phạm Thị Ngọc Liễu, Trương Đình Phước, Trần Thị Thương (Sinh viên năm 4, 3, Khoa Sinh học) GVHD: ThS Nguyễn Thị Hằng TÓM TẮT Chúng sử dụng phương pháp phân hủy gốc tự DPPH để khảo sát khả kháng oxy hóa in vitro nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt Đồng thời, khả hạ đường huyết xác định mơ hình chuột nhắt trắng bị tiểu đường Streptozotocin Đề tài xác định giá trị IC50 nước sắc hoa, lá, rễ là: 0,119% ± 0,.023; 0,418%±0,078; 7,318%±0,982 (sự khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê với α=0,05) Tại nồng độ 0,119%, nước sắc hoa có khả hạ đường huyết mơ hình chuột in vivo từ 220,4 mg/dl xuống 186,5 mg/dl sau 14 ngày khảo sát ABSTRACT In the study, the antioxidant properties of decoctions from flowers, leaves, and roots of Hibiscus rosa-sinensis L was investigated by DPPH free radical scavenging activity assay in vitro The hypoglycemic activity was defined in streptozotocin induced diabetic rats The decoctions from the flowers, leaves, and roots possess significant IC50 values 0.23 ± 0.119%, 0.418% ± 0.078, and 7.318% ± 0.982, respectively Administrations of decoction from the flowers of Hibiscus in concentrations of 0.119% in the treated group possess hypoglycemia from 220.,4 mg/dL to 186.5 mg/dl after 14 days in streptozotocin induced diabetic rats in vivo Mở đầu Trong thể, oxy tham gia vào phản ứng oxy hóa – khử tạo phân tử trung gian gọi gốc oxy hoạt động (Reactive oxygen species – ROS) Ở nồng độ định, ROS cung cấp lượng cho thể, tham gia vào trình tổng hợp sắc tố melamine, tham gia vào đường truyền tín hiệu hoạt hóa insulin Ở nồng độ cao, gốc ROS không kiểm soát dễ dàng phản ứng với đại phân tử DNA, protein, lipid gây rối loạn trình sinh hóa thể Đồng thời, chúng gây chết theo chương trình (apoptosis) tế bào đảo tụy, ức chế biểu gen sản xuất insulin, làm sai lệch trình truyền đạt tín hiệu hoạt hóa insulin Hậu dẫn đến việc kháng insulin, làm sai lệch chức tế bào đảo tụy gây bệnh tiểu đường [4] 17 Kỉ yếu Hội nghị sinh viên NCKH Theo số cơng trình nghiên cứu tác giả như: Rajesh Mandade cộng (2011), Falguni Sheth Subrata De (2012), Deepa Garg cộng (2012), Mirunalini Sankaran, Arulmozhi Vadivel (2011) chứng minh Dâm bụt có khả kháng oxy hóa hạ đường huyết mơ hình chuột Đồng thời, theo Đơng y, Dâm bụt cịn có tác dụng trị viêm niêm mạc dày, ngủ, mộng tinh, tiểu đường, đại tiện máu Tuy nhiên, chứng khoa học ứng dụng loại dược liệu nước chưa sáng tỏ Dựa dẫn liệu Đông y nghiên cứu ngồi nước tiến hành, chúng tơi định thực đề tài với mong muốn góp phần cung cấp dẫn liệu khoa học dược lí để ứng dụng y học làm tiền đề cho nghiên cứu sau Vì vậy, chúng tơi tiến hành xác định khả kháng oxy hóa khả hạ đường huyết Dâm bụt mơ hình chuột nhắt trắng bị tiểu đường Mục tiêu, phạm vi, mẫu vật phương pháp nghiên cứu 2.1 Mục tiêu Đề tài tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa nước sắc Dâm bụt khả hạ đường huyết mơ hình chuột nhắt trắng in vivo 2.2 Phạm vi nghiên cứu Để khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa, đề tài sử dụng phương pháp phân hủy gốc tự DPPH nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt Để xác định khả hạ đường huyết mơ hình chuột nhắt trắng bị tiểu đường Streptozotocin, đề tài sử dụng giá trị IC50 nước sắc có hoạt tính kháng oxy hóa mạnh 2.3 Mẫu vật hóa chất Dâm bụt thu nhận bao gồm: hoa, lá, rễ huyện Cần Giờ - TPHCM, định danh theo Sách tra cứu tên cỏ Việt Nam (Võ Văn Chi, 2007) [1] Mẫu rửa sạch, sấy khô 500C đến trọng lượng không đổi, bảo quản nơi khơ ráo, thống mát Phịng Thí nghiệm Di truyền - Thực vật Trường Đại học Sư phạm TPHCM Chuột nhắt trắng (20 – 30 g) mua Viện Pasteur - TPHCM, ni ổn định Phịng Thí nghiệm Di truyền - Thực vật DPPH (2-2 diphenyl-1-picylhydrazyl) (Sigma) pha methanol đạt nồng độ 0,8 mM, bảo quản 40C Acid ascorbic (Sigma) pha nước cất đạt nồng độ 15 g/ml Streptozotocin (Sigma) pha dung dịch đệm citrate đạt nồng độ 100 mg/kg b.w 2.4 Phương pháp 18 Năm học 2015 - 2016 2.4.1 Phương pháp thu nhận nước sắc (theo Hồ Huỳnh Thùy Dương, 2003) 10 g mẫu khô (hoa, lá, rễ) ngâm với nước cất hai lần 15 phút Loại nước, bổ sung thêm 500 ml nước cất hai lần, cô nhiệt độ 70 – 80 0C Nước sắc thu nhận ly tâm 3000 vòng/phút, 10 phút để loại cặn, cô nhiệt độ 50 – 600C đạt tỉ lệ g mẫu khô : 1ml nước sắc Nước sắc xem có nồng độ 100% pha lỗng thành nồng độ khác để tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa [2] 2.4.2 Phương pháp thử hoạt tính phân hủy gốc tự DPPH (Brand Williams, 1995) Các chất có khả kháng oxy hóa trung hòa gốc DPPH cách cho H+, màu dung dịch phản ứng nhạt dần, từ màu tím thành vàng cam Cường độ màu xác định cách đo mật độ quang bước sóng 517 nm Giá trị mật độ quang OD thấp chứng tỏ khả phân hủy gốc tự DPPH cao Quy trình thí nghiệm thực sau: Bổ sung ml DPPH (0,8 mM, pha methanol) vào ống nghiệm chứa ml nước sắc nồng độ khác Ủ 30 phút điều kiện khơng có ánh sáng, sau đó, tiến hành đo mật độ quang OD bước sóng 517 nm Giá trị mật độ quang OD phản ánh khả kháng oxy hóa mẫu Chứng dương thí nghiệm acid ascorbic (15 g/ml), chứng âm nước cất hai lần Tỉ lệ phần trăm hoạt tính kháng oxy hóa xác định theo cơng thức sau: Trong đó: %HTKO: tỉ lệ phần trăm kháng oxy hóa mẫu theo phương pháp DPPH; ODm: giá trị mật độ quang OD mẫu thử; ODc: giá trị mật độ quang OD chứng âm 2.4.3 Phương pháp gây tiểu đường Streptozotocin Chuột nhắt trắng ni phịng thí nghiệm có khối lượng 20 – 30 g Trước gây tiểu đường Streptozotocin, chuột nhịn đói Tiêm vào màng bụng chuột Streptozotocin (100 mg/kg b.w) pha dung dịch đệm citrate (0,1 M, pH = 4,5) Chuột uống sucrose 10% qua đêm để tránh tượng sốc thuốc [3] Kiểm tra đường huyết chuột sau ngày ngày tiêm Streptozotocin Những chuột có giá trị nồng độ đường huyết > 200 mg/dl sử dụng để tiến hành khảo sát khả hạ đường huyết Dâm bụt 2.4.4 Phương pháp khảo sát khả hạ đường huyết nước sắc Dâm bụt mơ hình chuột tiểu đường Để xác định khả hạ đường huyết nước sắc Dâm bụt mơ hình chuột in vivo, nghiệm thức đề tài bố trí sau: 19 Kỉ yếu Hội nghị sinh viên NCKH Lô đối chứng: 10 chuột (20 – 30 g) gây tiểu đường Streptozotocin có giá trị đường huyết 200 mg/dl, không tiêm nước sắc Dâm bụt, cho ăn bình thường Lơ thí nghiệm: 10 chuột (20 – 30 g) gây tiểu đường Streptozotocin có giá trị đường huyết 200 mg/dl, tiêm 0,5 ml nước sắc Dâm bụt nồng độ giá trị IC50 thấp (trong thử nghiệm khảo sát khả kháng oxy hóa theo phương pháp DPPH trên), cho ăn bình thường, theo dõi đường huyết sau ngày 14 ngày tiêm 2.4.5 Phương pháp xử lí số liệu Tất số liệu đề tài xử lí phần mềm Microsoft Excel 2013 phần mềm thống kê SPSS 20.0 Kết bàn luận 3.1 Khả kháng oxy hóa Dâm bụt theo phương pháp phân hủy gốc tự DPPH 3.1.1 Khả kháng oxy hóa nước sắc hoa Dâm bụt theo phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Nước sắc hoa Dâm bụt khảo sát khả kháng oxy hóa phương pháp phân hủy gốc tự DPPH nồng độ từ 0,1% đến 1% Chứng dương acid ascorbic (15 µg/ml), chứng âm nước cất hai lần Thí nghiệm lặp lại ba lần Kết khả kháng oxy hóa nước sắc hoa Dâm bụt thể qua bảng Bảng Tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc hoa Nồng độ (%) %HTKO nước sắc hoa 0,000 a ± 0,000 0,1 44,888b ± 6,827 0,2 72,470c ± 7,005 0,4 90,520d ± 4,861 0,6 91,812d ± 2,239 0,8 89,558d ± 2,122 87,535d ± 3,284 Acid ascorbic (15 µg/ml) 51,079 ± 1,803 Ghi chú: - a, b, c, d: khác biệt có ý nghĩa thống kê theo hàng dọc với mức ý nghĩa α = 0,05 Theo bảng 1, nhận thấy từ nồng độ 0,1% đến 0,4%, (%) HTKO nước sắc hoa tăng dần theo chiều tăng nồng độ Cụ thể (%) HTKO tăng từ 44,888% lên 90,520%, khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê Tuy nhiên, từ nồng độ 0,4% đến 1%, tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH khơng có khác biệt mặt thống kê Đồng thời, mối tương quan tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nồng độ nước sắc minh họa qua đồ thị (theo hình 1) 20 Năm học 2015 - 2016 Hình Đồ thị tỉ lệ phần trăm HTKO nước sắc hoa Theo hình 1, chúng tơi nhận thấy tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH tăng theo chiều tăng nồng độ (từ nồng độ 0,1% đến 0,4%) Tuy nhiên, từ nồng độ 0,6% đến 1%, tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH khơng có thay đổi so với nồng độ 0,4% Chúng xác định giá trị IC50 nước sắc hoa Dâm bụt 0,119% ± 0,023 3.1.2 Khả kháng oxy hóa nước sắc Dâm bụt theo phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Tương tự, nghiệm thức bố trí trên, nước sắc Dâm bụt pha loãng từ nồng độ 1% đến 0,1% để tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Kết khả kháng oxy hóa nước sắc Dâm bụt thể qua bảng hình Bảng Tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc Nồng độ (%) %HTKO nước sắc 0,000 a± 0.000 0,1 9,983 a± 2,151 0,2 25,010b ± 4,019 0,4 49,930 c ± 11,937 0,6 66,712d± 3,190 0,8 76,891 e± 6,829 85,188e ± 3,067 Acid ascorbic (15 μg/ml) 52,487 ± 3,174 Ghi chú: - a, b, c, d, e: khác biệt có ý nghĩa thống kê theo hàng dọc với mức ý nghĩa α = 0,05 21 Kỉ yếu Hội nghị sinh viên NCKH Bảng cho thấy tăng nồng độ từ 0,1% lên 1%, (%) HTKO tăng từ 9,983% lên 85,188% Điều chứng tỏ, khả kháng oxy hóa nước sắc Dâm bụt tăng theo chiều tăng nồng độ Hoạt tính kháng oxy cao nồng độ lớn Sự khác biệt tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH có ý nghĩa thống kê nồng độ từ 0,1% đến 0,8% Tuy nhiên, nồng độ 0,8% đến 1%, (%) HTKO khơng có khác biệt mặt thống kê Tương tự trên, ghi nhận đồ thị tương quan tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nồng độ nước sắc hình Hình Đồ thị tỉ lệ phần trăm HTKO nước sắc Theo hình 2, tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc tăng theo chiều tăng nồng độ (từ 0,1% đến 1%) Tương tự trên, xác định giá trị IC50 nước sắc hoa Dâm bụt 0,418% ± 0,078 3.1.3 Khả kháng oxy hóa nước sắc rễ Dâm bụt theo phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Nước sắc rễ Dâm bụt khảo sát khả kháng oxy hóa phương pháp phân hủy gốc tự DPPH nồng độ từ 1% đến 20% Kết ghi nhận khả kháng oxy hóa nước sắc rễ minh họa qua bảng 3.3 Bảng Tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc rễ Nồng độ (%) %HTKO nước sắc rễ 0,000 a± 0,000 30,784b ± 0,713 42,814c ± 1,281 10 60,079d± 7,575 20 72,493e ± 6,904 Acid ascorbic (15 μg/ml) 47,500 ± 3,055 22 Năm học 2015 - 2016 Ghi chú: - a, b, c, d, e: khác biệt có ý nghĩa thống kê theo hàng dọc với mức ý nghĩa α = 0,05 Từ bảng 3, nhận thấy, tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc rễ tăng dần theo chiều tăng nồng độ từ 1% đến 20% Cụ thể, tỉ lệ phần trăm tăng từ 30,784% lên 72,493%, khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê với mức ý nghĩa α = 0,05 Đồng thời, qua đồ thị, tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH tăng phụ thuộc vào nồng độ nước sắc rễ (hình 3) Hình Đồ thị tỉ lệ phần trăm phân hủy gốc tự DPPH nước sắc rễ Tương tự trên, xác định giá trị IC50 nước sắc hoa Dâm bụt 7,318% ± 0,982 3.1.4 Giá trị IC50 nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt Từ kết trên, giá trị IC50 nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt minh họa bảng Giá IC50 Bảng Giá trị IC50 nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt Nước sắc hoa Nước sắc Nước sắc rễ trị 0,119%a ± 0,023 0,418%a ± 0,078 7,318%b ± 0,982 Ghi chú: - a, b: khác biệt có ý nghĩa thống kê theo hàng dọc với mức ý nghĩa α = 0,05 Theo bảng 4, chúng tơi nhận thấy nước sắc hoa có giá trị IC50 thấp nhất, nước sắc rễ có giá trị IC50 cao Từ cho thấy, nước sắc hoa thể hoạt tính kháng oxy hóa mạnh nhất, nước sắc rễ thể hoạt tính kháng oxy hóa yếu nhất, điều kiện thí nghiệm Tuy nhiên, giá trị IC50 nước sắc hoa nước sắc khác biệt mặt thống kê 23 Kỉ yếu Hội nghị sinh viên NCKH 3.2 Kết giá trị đường huyết sau gây tiểu đường STZ Bảng Giá trị đường huyết sau gây tiểu đường STZ STT Trước tiêm STZ Sau ngày tiêm STZ Sau ngày tiêm STZ 129 124 237 140 191 236 167 163 228 142 174 198 167 201 211 150 201 206 122 143 209 118 178 228 145 151 389 10 235 105 500 11 156 148 262 12 130 126 394 13 102 134 444 14 122 142 238 15 92 105 233 16 105 111 448 17 112 121 232 18 153 147 259 19 200 157 261 20 102 102 206 21 200 117 216 22 100 102 141 23 137 147 186 24 201 136 183 25 106 127 155 26 121 137 216 27 122 141 248 28 121 108 198 Trung bình 139.2 140.7 255.8 3.3 Khả hạ đường huyết nước sắc hoa Dâm bụt Kết khảo sát khả hạ đường huyết mơ hình chuột in vivo nước sắc hoa Dâm bụt nồng độ 0,119% thể qua bảng Bảng Giá trị nồng độ glucose máu Đường huyết (mg/dl) ngày Sau ngày Sau 14 ngày a 340,20 ± Đối chứng 174,10 b1± 26,278 210,90 b1± 29,670 105,546 Thí nghiệm 220,40a± 16,358 183,90 b1± 23,956 186,50 b2± 26,655 24 Năm học 2015 - 2016 Ghi chú: -1, 2: Sự khác biệt giá trị đường huyết lô đối chứng lơ thí nghiệm; -a, b: Sự khác biệt giá trị đường huyết ngày lơ đối chứng lơ thí nghiệm với mức ý nghĩa α = 0,05 Theo bảng 5, nhận thấy, mốc thời gian 0, 14 ngày sau tiêm nước sắc hoa Dâm bụt, nồng độ glucose huyết giảm từ 220,4 mg/dl xuống 183,9 mg/dl (giảm 16,56%sau ngày), 186,5 mg/dl (giảm 15,38%sau 14 ngày) Sự khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê Tuy nhiên, ghi nhận giá trị đường huyết sau ngày sau 14 ngày khác biệt So sánh lơ thí nghiệm lô đối chứng, mốc thời gian ngày, giá trị đường huyết khơng có khác biệt Tuy nhiên, sau 14 ngày, giá trị đường huyết lô thí nghiệm thấp so với lơ đối chứng (sự khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê) Ngồi ra, ghi nhận, lô đối chứng, giá trị đường huyết giảm sau ngày so với ban đầu Sự khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê Sau 14 ngày, giá trị đường huyết tăng trở lại từ 174,1 mg/dl lên 210,9 mg/dl, khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê 3.4 Thảo luận Từ kết nghiên cứu trên, xác định nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt thể khả kháng oxy hóa theo phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Kết đề tài phù hợp với số cơng trình nghiên cứu tác giả giới Rajesh Mandade (2011), Divya MJ (2013), Vishnu Kumar (2013), Deepa Garg (2012), Falguni Sheth Subrata De (2012), Khatib NA (2009) Các tác giả chứng minh cao chiết từ hoa, lá, rễ Dâm bụt có khả kháng oxy hóa theo nhiều phương pháp khác [6, 7] Trong đó, nước sắc hoa Dâm bụt thể hoạt tính kháng oxy hoa mạnh so với rễ điều kiện thí nghiệm Kết phù hợp với cơng trình nghiên cứu Khatib NA (2009); Anil Kumar (2012); Deepa Garg (2012) cho thấy hợp chất chiết xuất từ phận lá, hoa Dâm bụt chất thể khả kháng oxy hóa mạnh như: quercetin, acid ascorbic, flavonoid… Đồng thời, đề tài ghi nhận khả hạ đường huyết nước sắc hoa Dâm bụt sau 7, 14 ngày so với nồng độ đường huyết ban đầu (0 ngày).Tất giá trị đường huyết thấp 200 mg/dl Kết hoàn toàn phù hợp với số cơng trình tác giả như: Archana Sachdewa L.D Khemani (2003), Fahmi S Moqbel (2010), Mirunalini Sankaran, Arulmozhi Vadivel (2011), Anusha Bhaskar (2012) cho Dâm bụt có khả hạ đường huyết mơ hình động vật in vivo Tuy nhiên, theo kết nghiên cứu đề tài, sau ngày, giá trị nồng độ glucose huyết khơng có khác biệt mặt thống kê so với lơ đối chứng Điều giải thích sau: 25 Kỉ yếu Hội nghị sinh viên NCKH - Đối với lơ thí nghiệm, đề tài bước đầu khảo sát khả hạ đường huyết giá trị IC50 nước sắc hoa Dâm bụt để làm sở cho nghiên cứu sau ghi nhận giá trị glucose huyết giảm nhẹ (16,56% sau ngày) Cho nên, để chứng minh xác tiềm điều trị bệnh tiểu đường loài này,chúng ta cần nghiên cứu sâu khảo sát nồng độ khác nhau, thời gian dài - Đối với lô đối chứng, sau ngày, đề tài ghi nhận giá trị nồng độ glucose máu giảm so với ban đầu, dẫn đến khơng có khác biệt mặt thống kê lô đối chứng với lơ thí nghiệm Kết hồn tồn phù hợp với cơng trình nghiên cứu D C Damasceno (2014) Theo tác giả này, sau gây tiểu đường Streptozotocin từ khoảng 13 đến 17 ngày, thể có chế điều hịa giảm hậu tác động Streptozotocin Cụ thể, cơng trình chứng minh khoảng thời gian này, phối hợp gene Ngn3, Pax4, Arx dẫn đến chuyển biệt hóa từ tế bào α thành tế bào β đảo tụy Do vậy, sau 14 ngày sau tiêm Streptozotocin,giá trị nồng độ glucose huyết giảm so với mức ngày (7 ngày sau tiêm Streptozotocin) Tuy nhiên, tác giả khảo sát chuyển biệt hóa từ tế bào α thành tế bào β khoảng thời gian từ 13 đến 17 ngày sau tiêm Streptozotocin Ngoài khoảng thời gian này, chúng tơi ghi nhận chưa có cơng trình nghiên cứu chứng minh chế cấp độ phân tử tượng Chính thời điểm 14 ngày (21 ngày sau tiêm Streptozotocin) nồng độ glucose huyết bắt đầu tăng so với ngày (> 200 mg/dl) Điều tác động Streptozotocin tế bào β đảo tụy Streptozotocin vào tế bào β làm phân mảnh DNA, tạo gốc tự gây oxy hóa màng phospholipid ti thể, ảnh hưởng đến trình sản xuất lượng ATP Tất nguyên nhân dẫn đến chết tế bào β đảo tụy, dẫn đến ảnh hưởng trình sản xuất insulin Vì vậy, để nghiên cứu tác động Streptozotocin mơ hình chuột khả hạ đường huyết Dâm bụt cần có nghiên cứu sâu cấp độ phân tử [5] Với kết trên, đề tài chứng minh khả kháng oxy hóa khả hạ đường huyết Dâm bụt Tuy nhiên, để ứng dụng cho y học cần có thêm cơng trình nghiên cứu cụ thể đầy đủ để chứng minh tiềm sinh học loài Kết luận kiến nghị 4.1 Kết luận Đề tài xác định: - Nước sắc hoa, lá, rễ Dâm bụt thể khả kháng oxy hóa phương pháp phân hủy gốc tự DPPH Cụ thể: + Giá trị IC50 nước sắc hoa là: 0,119% ± 0,023; + Giá trị IC50 nước sắc là: 0,418% ± 0,078; + Giá trị IC50 nước sắc rễ là: 7,318% ± 0,982 26 Năm học 2015 - 2016 Trong đó, nước sắc hoa thể hoạt tính kháng oxy hóa tốt phương phân hủy gốc tự DPPH với giá trị IC50 thấp - Tại nồng độ khảo sát (0,119%), nước sắc hoa có tác dụng hạ đường huyếttừ 220,4 mg/dl xuống 186,5 mg/dl mô hình chuột nhắt trắng tiểu đường gây Streptozotocin sau 14 ngày khảo sát 4.2 Kiến nghị - Tiến hành khảo sát khả hạ đường huyết nước sắc hoa Dâm bụt nồng độ cao hơn, thời gian dài - Nghiên cứu chế hạ đường huyết nước sắc hoa Dâm bụt mơ hình động vật bị tiểu đường TÀI LIỆU THAM KHẢO Võ Văn Chi (2007), Sách tra cứu tên cỏ Việt Nam, Nxb Giáo dục, TP Hồ Chí Minh, tr 31-59 Hồ Huỳnh Thùy Dương (2010), Nghiên cứu khả kháng phân bào thực nghiệm số thuốc cổ truyền dân gian mức độ tế bào phân tử, Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh Nguyễn Trung Qn (2009), Tạo mơ hình tiểu đường chuột nhắt trắng thử tác dụng hạ đường huyết số chế phẩm tự nhiên, Luận văn Thạc sĩ, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Asmat Ullah, Abad Khan, Ismail Khan (2015), “Diabetes mellitus and oxidative stress––A concise review”, Saudi Pharmaceutical Journal D C Damasceno, A O Netto, I L Iessi, F Q Gallego, S B Corvino, B Dallaqua,Y K Sinzato, A Bueno, I M P Calderon, M V C Rudge (2014), “Streptozotocin – Induced Diabetes Models: Pathophysiological Mechanisms and Fetal Outcomes”, BioMed Research International, Vol 2014, Hindawi Publishing Corporation Deepa Garg, Ayesha Shaikh, Aditya Muley, Thankamani Marar (2012), “In-vitro antioxidant activity and phytochemical analysis in extracts of Hibiscus rosa-sinensis stem and leaves”, Free Radicals and Antioxidants, Vol 2(3), pp 41-46 Mirunalini Sankaran, Arulmozhi Vadivel (2011), “Antioxidant and Antidiabetic effect of Hibiscus rosa sinensis flower extract on Streptozotocin induced experimental rats – a Dose Response Study”, Notulae Scientia Biologicae, Vol (4), 13-21 27 ... hành khảo sát khả hạ đường huyết Dâm bụt 2.4.4 Phương pháp khảo sát khả hạ đường huyết nước sắc Dâm bụt mơ hình chuột tiểu đường Để xác định khả hạ đường huyết nước sắc Dâm bụt mô hình chuột. .. định khả kháng oxy hóa khả hạ đường huyết Dâm bụt mô hình chuột nhắt trắng bị tiểu đường Mục tiêu, phạm vi, mẫu vật phương pháp nghiên cứu 2.1 Mục tiêu Đề tài tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa. .. Dâm bụt Để xác định khả hạ đường huyết mơ hình chuột nhắt trắng bị tiểu đường Streptozotocin, đề tài sử dụng giá trị IC50 nước sắc có hoạt tính kháng oxy hóa mạnh 2.3 Mẫu vật hóa chất Dâm bụt