Kết quả bước đầu nghiên cứu tạo dòng bí xanh bằng công nghệ đơn bội kép

Phương pháp tạo dòng bằng nuôi cấy bao phấn cho phép các nhà nghiên cứu tạo ra các dòng thuần mới có khả năng kháng bệnh nhanh và hiệu quả hơn.

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 and H29 was created from crossed combination 30Y87 by selfing method Results of breeding and testing showed that VN636 was the medium early maturing maize hybrid (95 to 105 days), had strong stems, durable green leaf, drought tolerance, leaf spot diseases VN636 had some excellent characteristics such as big and well-filled ear; the orange kernel color was suitable with customer’s demand and wildly adapted; specially, this variety was adapted to Northern midlands and mountain regions of Vietnam The potential yield of VN636 was high and could reach - 11 tons per hectare Keywords: Maize breeding, combining ability, new maize hybrid, VN636 Ngày nhận bài: 28/1/2019 Ngày phản biện: 9/2/2019 Người phản biện: TS Bùi Mạnh Cường Ngày duyệt đăng: 11/3/2019 KẾT QUẢ BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU TẠO DỊNG BÍ XANH BẰNG CƠNG NGHỆ ĐƠN BỘI KÉP Lê Văn Hải1, Ngụy Thị Hương Lan2, Nguyễn Thị Ánh Thu2, Nguyễn Hải Yến2, Nguyễn Ngọc Diệp2, Nguyễn Văn Trường2 TĨM TẮT Phương pháp tạo dịng ni cấy bao phấn cho phép nhà nghiên cứu tạo dịng có khả kháng bệnh nhanh hiệu Kết bước đầu nghiên cứu tạo dịng bí xanh đơn bội kép 20 nguồn vật liệu xác định 18 nguồn có khả tạo callus, có 16 nguồn tạo phơi với tỷ lệ trung bình đạt 30,35% Các nguồn BX2, BX15, BX5, BX1, BX3, BX4 BX8 có tỷ lệ tạo phôi cao 34%; nguồn không tạo phôi nguồn BX7, BX14 Tỷ lệ tái sinh 16 nguồn vật liệu đạt trung bình 39,88% Có 14/16 nguồn tạo hồn thiện, tổng số hoàn thiện thu 14 nguồn 204 thành công 69 dịng điều kiện nhà lưới Trong có 11 dịng bí xanh có khả sinh trưởng phát triển tốt; gọn đẹp, khỏe có hình dạng bầu, ngắn - thon dài Từ khóa: Bí xanh, dịng đơn bội kép, nuôi cấy bao phấn I ĐẶT VẤN ĐỀ Ở hầu hết nước, việc chọn tạo giống bí xanh theo hướng tạo giống bí F1 có ưu lai cao từ dịng bố mẹ chủng Nhưng họ bầu bí có đặc điểm đơn tính gốc, giao phấn chủ yếu nhờ côn trùng nên việc tạo dòng phương pháp truyền thống thường tốn nhiều thời gian cơng sức Dịng tạo cách tự thụ phấn chọn lọc qua nhiều hệ (7 - hệ) Mặc dù phương pháp khơng đạt dịng bố mẹ đồng hợp tử tất cặp alen, nghiên cứu đơn bội nhà chọn giống quan tâm Sự phát triển hệ thống sản xuất đơn bội hiệu ứng dụng chọn giống thuộc họ bầu bí giảm thời gian cần thiết cho phát triển trồng (Sauton A., 1988) Nuôi cấy bao phấn tái sinh từ bào tử thuận lợi cho việc lựa chọn tái tổ hợp chọn giống Hơn nữa, công nghệ nuôi cấy bao phấn giảm thiểu thời gian cần thiết để đạt đồng hợp tử (Lazarte and Sasser, 1982) Vì việc ứng dụng kỹ thật ni cấy bao phấn yêu cầu quan trọng cơng tác chọn tạo giống nói chung chọn tạo giống bí xanh nói riêng Ni cấy bao phấn ghi nhận phương pháp hiệu cho sản xuất đơn bội nhiều loài thực vật (Ferrie et al., 1995) Phương pháp cho phép nhà lai tạo sản xuất dòng dưa chuột, bí xanh… mới, đặc biệt dịng dưa chuột, bí xanh kháng bệnh nhanh hiệu (Ashok Kumar et al., 2003) Cây đơn bội kép tạo từ ni cấy bao phấn có độ đồng hợp cao, hồn tồn khơng phân ly hệ sau tạo thời gian ngắn (1 hệ), tiết kiệm nhiều công lao động, kinh phí đặc biệt rút ngắn thời gian cho công tác chọn tạo giống Kỹ thuật tạo đơn bội in vitro thơng qua việc kích thích tiểu bào tử phát triển thành nuôi cấy bao phấn cho phép nhanh chóng tạo thể đơn bội Trung tâm Chuyển giao Tiến kỹ thuật Ngơ; Viện Nghiên cứu Ngơ Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 thơng qua đa bội hóa tạo thể đồng hợp tử Đây nguồn vật liệu quan trọng cho việc tạo giống bí xanh có ưu lai cao nội dung nghiên cứu thuộc Đề tài cấp Thành phố: “Nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ đơn bội chọn tạo giống bí xanh lai F1 suất cao, chất lượng tốt Hà Nội, giai đoạn 2017 - 2020” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu - 20 mẫu giống bí xanh (Bảng 1) Phịng Kỹ thuật - Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Sản phẩm Nông nghiệp Công nghệ cao (nay Trung tâm Chuyển giao TBKT Ngô) cung cấp gieo trồng nhà lưới nhằm thu thập nụ hoa đực cho nuôi cấy bao phấn Bảng Danh sách nguồn bí xanh sử dụng để nuôi cấy STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Ký hiệu nguồn BX1 BX2 BX3 BX4 BX5 BX6 BX7 BX8 BX9 BX10 BX11 BX12 BX13 BX14 BX15 BX16 BX17 BX18 BX19 BX20 Ký hiệu mẫu BX1.1 (1 mẫu) BX2.1-2.2 (2 mẫu) BX3.1 (1 mẫu) BX4.1 (1 mẫu) BX5.1-5.4 (4 mẫu) BX6.1-6.2 (2 mẫu) BX7.1-7.2 (2 mẫu) BX8.1-8.2 (2 mẫu) BX9.1-9.2 (2 mẫu) BX10.1-10.2 (2 mẫu) BX11.1-BX11.3 (3 mẫu) BX12.1-BX12.4 (4 mẫu) BX13.1-BX13.2 (2 mẫu) BX14.1 (1 mẫu) BX15.1 (1 mẫu) BX16.1-BX16.2 (2 mẫu) BX17.1-BX17.4 (4 mẫu) BX18.1-BX18.4 (4 mẫu) BX19.1-BX19.3 (3 mẫu) BX20.1-BX20.4 (4 mẫu) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Tạo callus kỹ thuật nuôi cấy bao phấn nguồn vật liệu bí xanh - Thu hoạch mẫu ni cấy xử lý mẫu nuôi cấy: mẫu nuôi cấy thu hoạch trung bình khoảng 40 đến 80 nụ hoa, nụ hoa đực thu thập đạt kích thước - 10 mm (kích thước nụ hoa đo theo chiều dài nụ hoa, từ đế nụ đến đỉnh nụ hoa), bọc giấy giữ ẩm, xử lý lạnh 4oC ngày - Tiền xử lý mẫu hoa, nuôi cấy mẫu hoa tạo callus: + Sau đủ thời gian xử lý lạnh, xác định giai đoạn phát triển bào tử kính hiển vi có độ phóng đại (10 ˟ 40) Chọn mẫu có độ đồng cao (có tiểu bào tử phát triển giai đoạn nhân sớm đến hai nhân sớm để ni cấy bao phấn Nguồn gốc Bí đá dài BX - Mỹ Lộc - Phù Mỹ - Bình Định BX hạt to - Đơng Triều Bí thơm số Bí đao chanh Bí xanh - Chiềng Khay - Quỳnh Nhai - Sơn La BX trạch - Đông Anh BX Xà Hồ - Trạm Tấu - Yên Bái BX Củ Chi TPHCM BX dài miền Nam BX Tủa Thàng - Tủa Chùa - Điện Biên BĐX Bản Lầm - Thuận Châu - Sơn La BĐX Chiềng Lương - Mai Sơn - Sơn La Bí xanh Bí xanh bộp Bí xanh Bí xanh số Thiên Bí sặt GS559 - Hồng Nơng Bí xanh Tre Việt Bao phấn chứa bào tử phát triển giai đoạn tốt trình sinh sản đơn tính in vitro) + Khử trùng trước nuôi cấy: Sau đủ thời gian tiền xử lý, tiến hành làm bề mặt hoa trước cấy 70% ethanol 60 giây sau khử trùng Ca(OCl)2 7,2% 10 - 15 phút, loại bỏ dung dịch khử trùng sau lắc rửa nước cất vô trùng - lần + Tạo callus: Tách bao phấn nuôi môi trường MS1 (nền khoáng đa, vi lượng MS): MS + 100g/l sucrose + mg/l 2,4-D cấy đĩa petri, đĩa petri cấy khoảng 15 bao phấn, 30 - 35 đĩa /nguồn nuôi điều kiện tối 35oC tuần Sau ni 25oC tuần Sau khoảng tuần, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 bao phấn chuyển màu sậm có biểu phình to, điểm phình to xuất callus có màu vàng sáng Khi callus đạt kích thước khoảng mm, tiến hành cấy chuyển sang môi trường MS2 để tạo callus thứ cấp (callus có khả tái sinh): MS + 30g/l sucrose + mg/l 2,4-D) nuôi tuần, điều kiện tối 25oC + Các công đoạn: Khử trùng mẫu cờ, tách cấy bao phấn, cấy chuyển thực tủ cấy vô trùng - Các tiêu theo dõi gồm: Số bao phấn nuôi cấy tỷ lệ % bao phấn bị nhiễm sau cấy mẫu; Số bao phấn có phản ứng tạo callus; Số tỷ lệ % callus có khả tái sinh 2.2.2 Tái sinh tạo hoàn chỉnh - Tái sinh cây: Khi callus đạt kích thước 2,5 3,3 mm cấy chuyển sang mơi trường MS3 để tạo phôi: MS + 0,05 mg/l Kinetin + 0,05 mg/l NAA Nuôi điều kiện nhiệt độ 25oC, có chiếu sáng 16 h/ngày tuần - Tạo hồn chỉnh: Các chồi cấy sang mơi trường MS4: MS + mg/l IBA - Lưỡng bội hóa: Nhúng rễ vào dung dịch colchicine 1% trước - Các tiêu theo dõi gồm: Số phôi tỷ lệ % phôi tạo thành, số tái sinh số hoàn chỉnh thu 2.2.3 Ra ngôi, đánh giá đặc điểm nông sinh học, yếu tố cấu thành suất dịng bí xanh Các tiêu theo dõi gồm: Số lượng dịng sống sót; Chiều dài thân (cm); Số nhánh thân chính; Chỉ tiêu đặc điểm quả: theo dõi đo đếm sau thu hoạch lấy giá trị trung bình gồm: chiều dài (cm), đường kính (cm), độ dày thịt (cm), hình dạng quả, … quan sát cho điểm theo thang điểm qui định phiếu mô tả bí xanh theo Quy chuẩn Bộ Nơng nghiệp Phát triển nông thôn (2012) 2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu tính tốn xử lý chương trình Excel 2010 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ năm 2017 đến năm 2018 Viện Nghiên cứu Ngô Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Sản phẩm Nông nghiệp Công nghệ cao (nay Trung tâm Chuyển giao TBKT Ngô) 10 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Tạo callus tái sinh kỹ thuật nuôi cấy bao phấn nguồn vật liệu bí xanh Tiến hành lấy mẫu nụ hoa đực xử lý lạnh, sau bắt đầu ni cấy bao phấn vào mơi trường tạo callus Sau - ngày nuôi cấy thống kê số bao phấn cấy bị nhiễm nấm khuẩn, kết cho thấy: Tổng số bao phấn bí xanh 20 nguồn vật liệu ni cấy 10.575, tương ứng với 700 đĩa petri vào môi trường cảm ứng Tỷ lệ nhiễm nấm vi khuẩn vào mẫu nuôi cấy dao động từ 11,5% (đối với nguồn BX18) đến 28,6% (đối với nguồn BX1, BX4 BX15), tỷ lệ nhiễm trung bình thí nghiệm 20,2% Đây nguyên nhân hạn chế đến tỷ lệ tạo callus tái sinh nuôi cấy bao phấn loại họ bầu bí Bảng Kết tạo callus nguồn vật liệu Số bao Số callus Tỷ lệ callus Ký hiệu phấn có có khả có khả STT nguồn bí phản ứng tái tái xanh tạo callus sinh sinh (%) BX1 225 75 33,33 BX2 240 60 25,00 BX3 255 90 35,29 BX4 225 60 26,67 BX5 600 150 25,00 BX6 765 300 39,22 BX7 375 180 48,00 BX8 360 216 60,00 BX9 240 180 75,00 10 BX10 375 177 47,20 11 BX11 660 306 46,36 12 BX12 510 195 38,24 13 BX13 390 144 36,92 14 BX14 300 111 37,00 15 BX15 225 60 26,67 16 BX16 375 0,00 17 BX17 495 240 48,48 18 BX18 810 219 27,04 19 BX19 390 186 47,69 20 BX20 765 0,00 Tổng 8.580 2.949 Trung bình 36,16 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 Sau nuôi cấy - tuần bao phấn trương lên xuất hình cầu nhỏ màu trắng bao phấn có phản ứng tạo callus Những bao phấn có phản ứng tạo callus chuyển sang môi trường MS2 tiếp tục nuôi tuần, điều kiện tối 25oC để tạo callus thứ cấp có khả tái sinh Thí nghiệm đánh giá sau tuần nuôi cấy môi trường MS2 tối nhiệt độ 25oC Kết thu bảng cho thấy: Sau tuần ni cấy mơi trường MS2: Có 18/20 nguồn thu callus thứ cấp có màu vàng sáng, callus có khả tái sinh; Trên tổng số 8.580 bao phấn có phản ứng tạo callus, thu 2.949 callus có khả tái sinh, tỷ lệ callus có khả tái sinh đạt trung bình 18 nguồn vật liệu 36,16% Nguồn vật liệu cho tỷ lệ callus có khả tái sinh cao BX9 với 75% BX8 với 60% Có nguồn vật liệu khơng thu callus có khả tái sinh BX16 BX20 Những callus có khả tái sinh màu vàng sáng hình thành cấy chuyển sang môi trường tái sinh MS3 ni 25oC có ánh sáng 16 giờ/ngày để tạo phôi Sau tuần nuôi cấy, callus xuất điểm xanh, sau tạo thành chồi, chồi cấy sang môi trường MS4: MS + mg/l IBA để tạo hoàn chỉnh, kết trình bày bảng Kết bảng cho thấy: Trong số callus có khả tái sinh 18 nguồn bí xanh 16 nguồn tạo phơi; nguồn không tạo phôi nguồn BX7 BX14 Tỷ lệ tạo phôi 16 nguồn vật liệu lại từ 10,05 đến 53,33%, tỷ lệ tạo phơi trung bình 16 nguồn đạt 30,35% Các nguồn BX2, BX15, BX5, BX1, BX3, BX4 BX8 nguồn có tỷ lệ tạo phơi cao 34%, nguồn BX2, BX15 có tỷ lệ tạo phơi cao đạt 53,3% Bảng Kết tạo phôi tái sinh nguồn vật liệu STT Ký hiệu nguồn bí xanh Số callus có khả tái sinh Số phôi tạo thành Tỷ lệ phôi tạo thành (%) Số tái sinh Tỷ lệ tái sinh (%) Số hoàn chỉnh BX1 75 36 48,00 22,22 BX2 60 32 53,33 18 56,25 15 BX3 90 42 46,67 25 59,52 15 BX4 60 27 45,00 12 44,44 5 BX5 150 75 50,00 35 46,67 25 BX6 300 87 29,00 38 43,68 24 BX7 180 0,00 0,00 BX8 216 75 34,72 37 49,33 23 BX9 180 51 28,33 24 47,06 19 10 BX10 177 56 31,64 15 26,79 10 11 BX11 306 90 29,41 36 40,00 24 12 BX12 195 36 18,46 15 41,67 10 13 BX13 144 42 29,17 10 23,81 14 BX14 111 0,00 0,00 15 BX15 60 32 53,33 15,63 16 BX17 240 36 15,00 17 47,22 11 17 BX18 219 22 10,05 22,73 18 BX19 186 45 24,19 23 51,11 18 Tổng 2.949 784 Trung bình 323 30,35 204 39,88 11 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 Kết tái sinh trình bày bảng cho thấy: Tất 16 nguồn vật liệu có phản ứng tạo phơi tái sinh tái sinh cây, tỷ lệ tái sinh 16 nguồn vật liệu dao động từ 15,63 đến 59,52% tỷ lệ tái sinh trung bình 16 nguồn vật liệu 39,88% Nguồn vật liệu cho tỷ lệ tái sinh cao BX3 (59,52%) nguồn cho tỷ lệ tái sinh thấp BX15 (15,63%) Tuy nhiên, có 14/16 nguồn tạo hoàn thiện (đầy đủ thân rễ) Tổng số hoàn thiện thu 14 nguồn 204 (bảng 3) cao nguồn BX5, BX6, BX11, BX8, BX9, BX19.Các hoàn chỉnh xử lý lưỡng bội hóa cách nhúng rễ vào dung dịch colchicine 1% h trước Ra khâu quan trọng việc tạo dịng phương pháp ni cấy bao phấn, giai đoạn chuyển từ môi trường nhân tạo sang môi trường tự nhiên Kế thừa kết nghiên cứu vụ Thu 2017, thu 204 hoàn chỉnh từ 14 nguồn vật liệu Từ 204 hồn chỉnh chúng tơi tiến hành giá thể trấu hun, kết trình bày qua bảng Qua bảng cho thấy có 3/14 nguồn khơng có số sống sót sau ngơi (BX11; BX15; BX 19) 11/14 nguồn có 69 sống sót, đạt tỷ lệ trung bình 36%, cao nguồn BX17 đạt 63,6% Bảng Kết nguồn vật liệu STT 10 11 12 13 14 Ký hiệu nguồn BX2 BX3 BX4 BX5 BX6 BX8 BX9 BX10 BX11 BX12 BX15 BX17 BX18 BX19 Tổng Trung bình Cây sống Tỷ lệ sót sống (cây) (%) 33,3 46,7 40,0 10 40,0 33,3 39,1 47,4 50,0 0,0 60,0 0,0 63,6 50,0 0,0 69 36,0 Sau 14 - 16 ngày ngôi, tiến hành trồng đồng ruộng theo dõi đặc điểm sinh trưởng, yếu tố cấu thành suất 69 dòng đơn bội kép Kết đánh giá 11 dòng sinh trưởng phát triển tốt điều kiện vụ Xuân 2018 A B C D E F G Số (cây) 15 15 25 24 23 19 10 24 10 11 18 204 H Hình Ni cấy bao phấn, tạo callus, tái sinh nguồn vật liệu bí xanh Ghi chú: A: Mẫu nụ hoa đực nguồn bí xanh trước xử lý lạnh; B: Xác định giai đoạn phát triển hạt phấn sau xử lý lạnh; C: Bao phấn bí cấy vào mơi trường sau khử trùng; D: Hình ảnh callus có khả tái sinh MS2; E: Chồi tạo thành môi trường tái sinh MS4; F: Cây bí xanh hồn thiện tái sinh: G, H: Dịng bí xanh ngơi, sinh trưởng phát triển nhà lưới 12 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 3(100)/2019 3.2 Đặc điểm sinh trưởng, phát triển suất dịng bí xanh Q trình quan sát đánh giá đặc điểm sinh trưởng phát triển 11 dịng bí xanh thể bảng cho thấy: Chiều dài đốt đặc tính di truyền giống Giống có đốt ngắn độ cao thấp, nhiên không mức thấp Chiều dài đốt 11 dòng dao động từ 11,4 cm (dòng BX6.2) đến 16,4 cm (dòng BX4.1), trung bình 13,38 cm Có dịng có chiều dài đốt dài so với trung bình BX4.1 (16,4 cm); BX5.2 (16,2 cm); BX3.1 (15,6); BX10.2 (13,5 cm) Nhìn chung chênh lệch chiều dài đốt dịng khơng q lớn chiều dài đốt mức trung bình, độ cao thích hợp Số đốt dịng bí xanh trung bình 36,55 đốt, cao nguồn BX5.2; BX3.1 (40 đốt) thấp BX6.2 (33 đốt) Có dịng có số đốt cao trung bình BX5.2; BX3.1; BX4.1; BX18.1; BX10.2 Số nhánh ảnh hưởng đến yếu tố suất Số nhánh cao đồng nghĩa với việc số hoa nhiều trồng bí lấy Số lượng nhánh dòng đạt trung bình nhánh, dao động từ nhánh/cây đến nhánh/cây Tuy nhiên thí nghiệm số nhánh cao không đồng nghĩa với số lượng suất cao tất dòng tiến hành lấy hạt, thu già nên thời gian sinh trưởng từ thụ phấn thành công đến thu hoạch tập chung dinh dưỡng để nuôi - quả/cây Đường kính thân dịng đạt trung bình 0,84 cm, dao động từ 0,8 cm đến 0,9 cm Bảng Đặc điểm sinh trưởng phát triển dịng bí xanh STT Ký hiệu dịng BX2.1 BX3.1 BX4.1 BX5.2 BX6.2 BX8.2 BX9.1 BX10.2 BX12.2 10 BX17.4 11 BX18.1 Trung bình Chiều dài đốt (cm) 12,4 15,6 16,4 16,2 11,4 11,5 12,4 13,5 11,8 12,6 13,4 13,38 Số đốt/ Số nhánh/ 34 40 38 40 33 35 36 37 35 36 38 36,55 5 6 5 5,0 Đường kính thân (cm) 0,8 0,9 0,8 0,9 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,9 0,9 0,84 Sau thụ phấn, tiến hành bao bọc nên mẫu mã, hình thức đẹp, chất lượng cao Kết đánh giá yếu tố cấu thành suất suất dịng bí xanh bảng cho thấy: Khối lượng trung bình dòng dao động từ 1,8 kg đến 3,8 kg Cao dòng BX18.1 (3,8 kg) thấp dòng BX2.1; BX12.1 (1,8 kg) Bảng Một số đặc điểm khác yếu tố cấu thành suất nguồn dịng bí xanh vụ Xn 2018 Khối Ký Dài Dài Rộng Dày lượng STT hiệu cuống quả cùi trung dịng (cm) (cm) (cm) (cm) bình (kg) BX2.1 1,8 4,7 56,2 7,3 2,2 BX3.1 3,2 5,8 56,7 10,8 2,8 BX4.1 2,9 5,5 54,2 10,5 4,2 BX5.2 2,3 8,0 34,4 9,5 2,0 BX6.2 1,9 7,0 23,2 12,0 2,0 BX8.2 2,0 6,5 42,1 8,2 2,1 BX9.1 2,7 6,0 47,5 11,2 2,6 BX10.2 2,3 5,8 35,5 9,8 2,8 BX12.2 1,8 7,2 32,0 8,9 2,4 10 BX17.4 2,2 6,8 38,6 9,8 2,6 11 BX18.1 3,8 3,8 28,0 15,7 3,0 Cuống có tác dụng nâng đỡ quả, cuống ngắn khả rụng dịng thấp Trong thí nghiệm tiến hành đo chiều dài cuống để xác định rõ ràng thêm đặc điểm giống khả chống chịu dòng Theo bảng cho thấy chiều dài cuống dao động từ 3,8 cm đến 8,0 cm Cuống dài dòng BX5.2 (8,0 cm), ngắn BX18.1 (3,8 cm) Chiều dài, chiều rộng số cho thấy hình dáng bí xanh Từ số liệu thu thập được, bí xanh phân thành loại hình dáng quả: (1) Dạng thon dài (BX2.1; BX8.2; BX17.4); (2) Dạng thon ngắn (BX10.2; BX12.2; BX5.2); (3) Dạng to, dài (BX3.1; BX4.1; BX9.1); (4) Dạng ngắn, to, bầu (BX 6.2; BX 18.1) Kết đánh giá cho thấy tất dòng đạt độ dày cùi dao động từ 2,0 cm đến 4,2 cm, đặc biệt có dịng BX 4.1 có độ dày cùi cao đạt 4,2 cm IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Kết bước đầu nghiên cứu tạo dịng bí xanh đơn bội kép 20 nguồn vật liệu xác định 18 nguồn có khả tạo callus, có 13 ... phố: ? ?Nghiên cứu ứng dụng công nghệ đơn bội chọn tạo giống bí xanh lai F1 suất cao, chất lượng tốt Hà Nội, giai đoạn 2017 - 2020” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu -... Lương - Mai Sơn - Sơn La Bí xanh Bí xanh bộp Bí xanh Bí xanh số Thiên Bí sặt GS559 - Hồng Nơng Bí xanh Tre Việt Bao phấn chứa bào tử phát triển giai đoạn tốt q trình sinh sản đơn tính in vitro) +... điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ năm 2017 đến năm 2018 Viện Nghiên cứu Ngô Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Sản phẩm Nông nghiệp Công nghệ cao (nay Trung tâm Chuyển giao TBKT Ngô) 10 III KẾT QUẢ