Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính kháng oxy hóa của tinh dầu cây hương thảo (Rosmarinus officinalis L.)

Mục tiêu của nghiên cứu nhằm phân tích thành phần hóa học và đánh giá khả năng kháng oxy hóa của tinh dầu cây hương thảo. Cây hương thảo thu hái từ Đà Lạt, Lâm Đồng được trích ly tinh dầu bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước. Thành phần hóa học của tinh dầu được xác định bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC-MS. Tinh dầu hương thảo được khảo sát khả năng kháng oxy hóa bằng phương pháp sử dụng gốc tự do DPPH.

Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HÓA CỦA TINH DẦU CÂY HƯƠNG THẢO (ROSMARINUS OFFICINALIS L.) Nguyễn Ngọc Yến*, Bùi Nguyễn Anh Thư Nguyễn Minh Kha Khoa Dược – Điều dưỡng, Trường Đại học Tây Đô (Email: yenkha1907@gmail.com) Ngày nhận: 13/3/2019 Ngày phản biện: 11/4/2019 Ngày duyệt đăng: 16/5/2019 TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu nhằm phân tích thành phần hóa học đánh giá khả kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo Cây hương thảo thu hái từ Đà Lạt, Lâm Đồng trích ly tinh dầu phương pháp chưng cất lơi nước Thành phần hóa học tinh dầu xác định phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC-MS Tinh dầu hương thảo khảo sát khả kháng oxy hóa phương pháp sử dụng gốc tự DPPH Kết tìm điều kiện trích ly tối ưu tinh dầu cho hiệu suất 2,93%, thành phần hóa học tinh dầu thu gồm 22 chất, chất chiếm hàm lượng chủ yếu α-Pinene (26,13%), Eucalyptol (19,41%), cis-verbenone (17,34%) Tinh dầu hương thảo có khả kháng oxy hóa cao với giá trị IC50 = 75,7µg/mL Từ khóa: DPPH, hương thảo, kháng oxy hóa, Rosmarinus officinalis L., tinh dầu Trích dẫn: Nguyễn Ngọc Yến, Bùi Nguyễn Anh Thư Nguyễn Minh Kha, 2019 Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo (Rosmarinus Officinalis L.) Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô 06: 190-201 *Thạc sĩ Nguyễn Ngọc Yến, Giảng viên Khoa Dược - Điều dưỡng, Trường Đại học Tây Đơ 190 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đơ GIỚI THIỆU Stress oxy hóa mối quan tâm hàng đầu với nhà khoa học Stress oxy hóa tượng xuất thể sinh vật có cân việc sản xuất gốc tự hoạt động chất kháng oxy hóa Hiện tượng nguyên nhân nhiều bệnh nguy hiểm có ung thư, bệnh tim mạch, bệnh suy giảm hệ thần kinh (Alzheimer, Parkinson) lão hóa sớm (Lại Thị Ngọc Hà Vũ Thị Thư, 2009) Các sản phẩm chống oxy hóa tự nhiên, đặc biệt hoạt chất từ thực vật, trở nên phổ biến tồn giới tính hiệu an tồn chúng Các chất chống oxy hóa có khả làm gốc tự có hại cho thể từ stress oxy hóa (Pal et al., 2011) Cây hương thảo có tên khoa học Rosmarinus officinalis L., loài thực vật có hoa họ Hoa mơi Cây địa vùng Địa Trung Hải, Việt Nam nhập trồng số tỉnh miền Trung miền Nam (Pételot, 1955) Hương thảo trồng loại cảnh, tỏa mùi hương nồng ngào ngạt, tươi hay khơ thơm, dùng làm gia vị ẩm thực Trong y học cổ truyền, hương thảo coi thảo dược hiệu để điều trị đau đầu, tuần hoàn kém, bệnh viêm mệt mỏi thể chất tinh thần (Yu MH et al., 2012) Trên giới có nhiều nghiên cứu tinh dầu Số 06 - 2019 hương thảo nghiên cứu hoạt tính kháng oxy hóa tiềm bảo vệ gan tinh dầu hương thảo (Rascovis et al., 2014); nghiên cứu tiềm trị liệu bệnh Alzheimer (Habtemariam et al., 2016) Tuy nhiên, chưa có nhiều nghiên cứu tinh dầu hương thảo trồng nước, nghiên cứu nhằm cung cấp thêm thơng tin thành phần hóa học khả kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo trồng thành phố Đà Lạt, Lâm Đồng PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phương tiện 2.1.1 Hóa chất Methanol, Natrisulfat, Diethylether, Chloroform, Ethanol (Trung quốc), DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl), Vitamin C (sigma) 2.1.2 Nguyên liệu Phần mặt đất hương thảo thu hái phường 8, thành phố Đà Lạt, Lâm Đồng Nguyên liệu định danh cách quan sát hình thái thực vật so sánh với tài liệu phân loại thực vật (Bruneton, 1999; Huỳnh Thị Ngọc Sương, 2014) 2.2 Trích ly tinh dầu 2.2.1 Phương pháp trích ly tinh dầu Tinh dầu hương thảo trích ly phương pháp chưng cất lôi nước trực tiếp, với chưng cất tinh dầu Clevenger 191 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Đồng thời khảo sát ảnh hưởng thời gian chưng cất, thể tích nước, kích thước nguyên liệu thời gian phơi mẫu đến hàm lượng tinh dầu thu Nguyên tắc khảo sát cố định ba yếu tố để khảo sát yếu tố lại Tất mẫu khảo sát thực với khối lượng 500 g nguyên liệu 2.2.2 Làm tinh khiết Tinh dầu thô thu với nước chưng đem lắc với diethylether Loại nước natrisulfat khan Sau đem đuổi dung mơi máy quay chân không thu tinh dầu tinh khiết Bảo quản chai nâu nơi thống mát 2.3 Phân tích thành phần hóa học tinh dầu Số 06 - 2019 100 oC Tiếp tục tăng oC/phút 200 oC Cuối tăng 20 oC/phút 300 oC, giữ phút 2.4 Hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu Hoạt tính chống oxy hóa xác định thử nghiệm DPPH (Viện Dược liệu, 2006; Chanda et al., 2009) DPPH gốc tự dùng để thực phản ứng mang tính chất sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa (HTCO) chất nghiên cứu Hoạt tính chống oxy hóa thể qua việc làm giảm màu gốc tự DPPH, xác định cách đo độ hấp thu quang bước sóng 517 nm Chuẩn bị thuốc thử mẫu thử: Thành phần hàm lượng cấu tử có tinh dầu phân tích phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC–MS), thực máy GC Agilent 6890N, MS 5973 Loại cột sử dụng cột HPS-MS, áp suất He đầu cột 9.3 psi Dung dịch DPPH: Pha dung dịch DPPH 0,6 mM methanol cách hòa tan 5,915 mg DPPH với lượng methanol vừa đủ tan DPPH Sau cho vào bình định mức thêm methanol vừa đủ 25 mL Pha xong dùng ngay, đựng chai thủy tinh màu Mẫu tinh dầu (25 µL) pha 1.0 mL n-hexan (Meck) Tiêm mẫu: 1.0 µL Mẫu thử: Pha tinh dầu methanol nồng độ400 µg/mL, 800 µg/mL, 1200 µg/mL, 1600 µg/mL, 2000 µg/mL Chương trình nhiệt độ cho mẫu: 50 oC giữ phút, tăng oC/phút Tiến hành quy trình thử nghiệm Bảng Phản ứng thử nghiệm DPPH Nghiệm thức Trắng Chứng âm Thử Dung dịch thử (mL) Dung dịch MeOH (mL) Dung dịch DPPH (mL) 0 0,5 3,5 0,5 0,5 192 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Hỗn hợp sau pha để tối, nhiệt độ phòng 30 phút Sau đem đo quang bước sóng 517 nm Hoạt tính chống oxy hóa HTCO (%) tính theo cơng thức: HTCO(%)  Số 06 - 2019 Từ nồng độ mẫu HTCO (%), phần mềm Excel, lập phương trình hồi quy có dạng y = ax + b thể mối tương quan HTCO (%) (y) nồng độ (x) Từ suy giá trị IC50 (khả đánh bắt 50% DPPH mẫu) (ODc  ODt)  100 ODc Trong đó: ODc: Mật độ quang dung dịch DPPH MeOH ODt: Mật độ quang DPPH mẫu thử Giá trị IC50 thấp tương ứng với HTCO cao ngược lại KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tính chất vật lý tinh dầu Một số tính chất vật lý tinh dầu hương thảo trình bày Bảng Bảng Tính chất vật lý tinh dầu hương thảo Tính chất Kết Độ tan Tỷ trọng Không tan nước, tan Màu vàng nhạt, thơm dung môi hữu cơ: methanol, 0,91 g/mL mùi đặc trưng, vị gắt diethylether, chloroform… Cảm quan 3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly tinh dầu 3.2.1 Ảnh hưởng thời gian trích ly Tiến hành khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng tinh dầu thu Cố định yếu tố nhiệt độ (100 oC), thể tích nước cất (1000 mL), kích thước mẫu (0,5 cm), thời gian phơi bóng râm (2 ngày) Kết trình bày Bảng Bảng Kết ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng tinh dầu Thời gian trích ly (phút) Hàm lượng tinh dầu (%) 60 0,46 90 0,75 120 0,88 193 150 0,97 180 1,05 240 1,10 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 Đồ thị biểu diễn mối tương quan thời gian trích ly thay đổi lượng tinh dầu thu Hàm lượng tinh dầu (%) Ảnh hưởng thời gian chưng cất 1.2 0.8 0.6 0.4 0.2 0 50 100 150 200 250 300 Thời gian trích ly (phút) Hình Ảnh hưởng thời gian chưng cất đến hàm lượng tinh dầu Qua q trình khảo sát phân tích số liệu thu từ Bảng cho thấy thời gian trích ly tăng lượng tinh dầu thu tăng, tốc độ tăng nhiều khoảng thời gian từ 60 đến 90 phút, sau giảm dần Hàm lượng tinh dầu thu sau 180 phútlà 1,05% sau thay đổi khơng đáng kể Vì để tiết kiệm công sức, nhiên liệu, thời gian chưng cất tối ưu chọn 180 phút 3.2.2 Ảnh hưởng thể tích nước chưng cất Khảo sát ảnh hưởng thể tích nước cất thêm vào thực trình chưng cất Cố định yếu tố nhiệt độ (100 oC), thời gian phơi âm cần ngày, kích thước mẫu 0,5 cm thời gian 180 phút Mối tương quan thể tích nước cất thay đổi hàm lượng tinh dầu biểu diễn Hình Bảng Kết ảnh hưởng thể tích nước chưng cất đến hàm lượng tinh dầu Thể tích nước cất (mL) Hàm lượng tinh dầu (%) 600 0,87 800 0,91 194 1000 1,04 1200 0,98 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 Hàm lượng tinh dầu (%) Ảnh hưởng thể tích nước chưng cất 1.05 0.95 0.9 0.85 500 1000 1500 Thể tích nước cất (mL) Hình Ảnh hưởng thể tích nước cất đến hàm lượng tinh dầu Khi thể tích nước cất thêm vào q trình chưng cất tăng lượng tinh dầu thu tăng thể tích nước lớn lượng nước bay lên nhiều lôi nhiều tinh dầu Hàm lượng tinh dầu thu lớn 1,04% thể tích nước thêm vào 1000 mL Nhưng thể tích nước lớn (quá 2/3 thể tích) làm bề mặt thống giảm nên lượng nước bay lên giảm kéo theo lượng tinh dầu thu giảm Vì thể tích nước cất thêm vào trình chưng cất chọn 1000 mL (hoặc khơng q 2/3 thể tích bình cầu) 3.2.3 Ảnh hưởng kích thước mẫu nguyên liệu đến hàm lượng tinh dầu Tiến hành khảo sát ảnh hưởng kích thước mẫu nguyên liệu đến lượng tinh dầu thu với kích thước: cm, cm, 0,5 cm xay nhuyễn Cố định yếu tố nhiệt độ ( 100 oC), thể tích nước cất 1000 mL, thời gian phơi âm can ngày, chưng cất thời gian 180 phút Bảng Kết ảnh hưởng kích thước mẫu đến hàm lượng tinh dầu Kích thước mẫu (cm) Hàm lượng tinh dầu (%) 0,90 0,94 0,5 1,05 0,1 (xay nhuyễn) 1,08 Đồ thị biểu thị mối tương quan thời gian trích ly thay đổi hàm lượng tinh dầu thu (Hình 3) 195 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 Hàm lượng tinh dầu (%) Ảnh hưởng kích thước mẫu nguyên liệu 1.1 1.05 0.95 0.9 0.85 0.8 Kích thước mẫu (cm) Hình Ảnh hưởng kích thước mẫu nguyên liệu đến thể tích tinh dầu Với điều kiện khảo sát ngun liệu có kích thước nhỏ diện tích bề mặt lớn nên lượng tinh dầu lôi theo nước nhiều Vì kích thước tối ưu để trích ly tinh dầu hương thảo xay nhuyễn khoảng 0,1 cm 3.2.4 Ảnh hưởng thời gian phơi nguyên liệu đến hàm lượng tinh dầu Tiến hành khảo sát ảnh hưởng thời gian phơi nguyên liệu đến lượng tinh dầu thu với mẫu phơi sau ngày, ngày, ngày, ngày, 10 ngày Cố định yếu tố khác điều kiện chọn Bảng Ảnh hưởng thời gian phơi mẫu đến hàm lượng tinh dầu Thời gian phơi mẫu (ngày) Hàm lượng tinh dầu (%) 1,08 2,41 2,93 2,89 10 2,80 Đồ thị biểu thị mối tương quan thời gian phơi thay đổi hàm lượng tinh dầu thu 196 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 Ảnh hưởng thời gian phơi Hàm lượng tinh dầu (%) 3.5 2.5 1.5 0.5 0 10 12 Thời gian phơi mẫu (ngày) Hình Ảnh hưởng thời gian phơi mẫu đến hàm lượng tinh dầu Với điều kiện khảo sát, thời gian phơi (trong bóng râm) lâu hàm lượng tinh dầu nhiều đạt cao khoảng ngày, sau hàm lượng tinh dầu giảm dần phơi lâu ngày Điều giải thích lượng nước giảm dần phơi nên lấy khối lượng cần khảo sát cần nhiều mẫu Có thể q trình phơi tinh dầu bị bay không đáng kể so với việc lấy lượng nhiều mẫu Như qua khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly tinh dầu hương thảo phương pháp chưng cất lôi nước chọn điều kiện trích ly tối ưu mẫu xay nhuyễn, phơi khoảng ngày, thể tích nước cất thêm vào 1000 mL nhiệt độ 100 oC, chưng cất thời gian 180 phút 3.3 Thành phần hóa học tinh dầu hương thảo Bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) thành phần hóa học tinh dầu xác định ghi Bảng 197 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 06 - 2019 Bảng Thành phần hóa học tinh dầu hương thảo STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 Hàm lượng Tên chất 1R-.alpha.-Pinene Camphene beta- Pinene beta.-Myrcene alpha.-Terpinene D-Limonene Eucalyptol gamma.-Terpinene Terpinolene Linalool Camphor Verbenol Borneol Isocamphopinone (-)-4- Terpineol Alpha-Terpinol Myrtenol cis-Verbenone 26,13 2,43 2,24 0,99 0,55 2,04 19,44 1,36 0,86 2,84 2,73 0,56 3,97 1,02 1,57 2,60 0,5 17,34 trans-Geraniol Bornyl acetate Caryophyllene Caryophyllene oxyd 3,00 4,42 1,38 0,24 Từ kết cho thấy thành phần hóa học tinh dầu hương thảo thu có 22 hợp chất, chất có hàm lượng cao làα-Pinene (26,13%), Eucalyptol (hay 1,8-cineole) (19,41%), cis-verbenone (17,34%) Kết nghiên cứu có khác biệt so với kết nghiên cứu thành phần tinh dầu hương thảo Tây Ban Nha theo nghiên cứu Rascovis cộng (2014) Cụ thể nghiên cứu cơng bố tìm 29 hợp chất, hợp chất xác định 1,8-cineole (43,77%), camphor (12,53%), α-pinene (11,51%) Trong nghiên cứu Huỳnh Thị Ngọc Sương (2014) cho kết thành phần Camphor (22,47%), 1,8- cinéol (19,3), α-pinen (12,53%) Nguyên nhân khác khác điều kiện khí hậu, thổ nhưỡng điều kiện thực nghiệm nên thành phần tinh dầu khác 198 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô 3.4 Khả kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo Số 06 - 2019 3.4.1 Kết khảo sát khả loại gốc tự DPPH Vitamin C Xây dựng đường chuẩn Vitamin C dựa vào phần trăm ức chế gốc tự nồng độ Vitamin C Hình Đường chuẩn khả kháng oxy hóa Vitamin C Từ phương trình suy giá trị IC50 cao Vitamin C là: IC50 = 20,98 (µg/mL) 3.4.2 Khảo sát khả loại gốc tự DPPH tinh dầu Tinh dầu hương thảo 100 HTCO (%) 80 60 y = 0.2314x + 32.51 R² = 0.9738 40 20 0 50 100 150 200 250 300 Nồng độ tinh dầu (µg/mL) Hình Sự tương quan hoạt tính ức chế gốc tự nồng độ tinh dầu hương thảo 199 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Từ phương trình suy tinh dầu hương thảo có giá trị IC50 = 75,7 µg/mL, lớn gấp 3,5 lần so với giá trị IC50 Vitamin C Như vậy, so với Vitamin C hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo thấp khoảng 3,5 lần Nghiên cứu có kết phù hợp với nghiên cứu Rascovis A cộng (2014) với giá trị IC50 = 77,6 µL/mL Trong nghiên cứu Sevgi Gezici cộng (2017) hương thảo Thổ Nhĩ Kỳ cho giá trị IC50 khoảng 10,08 đến 18,05 µg/mL KẾT LUẬN Nghiên cứu tìm điều kiện tối ưu để trích ly tinh dầu hương thảo mẫu xay nhuyễn, tỉ lệ thể tích nước cất với khối lượng nguyên liệu 2:1, nhiệt độ chưng cất khoảng 100 oC thời gian 180 phút Với điều kiện tối ưu đó, hiệu suất q trình trích ly đạt 2,93% Thành phần hóa học tinh dầu hương thảo thu hái Đà Lạt xác định gồm 22 cấu tử Tinh dầu hương thảo có khả kháng oxy hóa in vitro tương đối tốt, với giá trị IC50 = 75,7 µg/mL Nghiên cứu góp phần định hướng nghiên cứu khả kháng oxy hoá từ loại giàu tinh dầu hương thảo, tiếp tục khảo sát khả kháng oxy hóa in vivo, khả kháng vi sinh vật Tuy nhiên, cần lưu ý khác biệt thành phần hóa học tinh dầu hương thảo điều kiện sinh thái khác Số 06 - 2019 TÀI LIỆU THAM KHẢO A.Petelot, 1955 Botanical Bibliography of Indochina Arch Regn Agron Pastor Vietnam no 24, Saigon Bruneton J,1999 Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants TEC & DOC Paris 249-250, 484-512, 536537, 539-540, 545-547 Habtemariam S Rutin as a natural therapy for Alzheimer's disease: insights into its mechanisms of action, 2016 Curr Med Chem 23:860–873 Huỳnh Thị Ngọc Sương, Phan Thanh Dũng, Võ Thị Bạch Huệ, 2014 Khảo sát thực vật phân tích thành phần tinh dầu họ Lamiaceae (Rosemarinus officinalis L.; Mentha piperita L.; Thymus vulgaris L.)Y Học TP Hồ Chí Minh, Tập 18, Phụ Số Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007 Phương pháp cô lập hợp chất hữu NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, tr 28 – 54, 181-200 Pal, R., Girhepunje, K., Shrivastav, N., Hussain, M M., and Thirumoorthy, 2011.Antioxydant and free radical scaveging activity of ethanolic extract of Morinda citrifilia Annals of Biological Research, (1): 127-131 Rašković, 2014.Antioxydant activity of rosemary (Rosmarinus officinalis L.) essential oil and its hepatoprotective potential BMC Complement Altern Med 2014; 14: 225 200 Tạp chí Nghiên cứu khoa học Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Sevgi Gezici1 , Nazim Sekeroglu2 , Anake Kijjoa3, 2017 In vitro Anticancer activity and antioxydant properties of essential oils from populus alba L and Rosmarinus officinalis L from south eastern anatolia of Turkey Indian Journal of Pharmaceutical Education and Research | Vol 51 Viện Dược liệu, 2006 Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý Số 06 - 2019 thuốc từ dược thảo NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội tr 279- 293 10 Yu MH, Choi JH, Chae IG, Im HG, Yang SA, More K, Lee IS, Lee J, 2013 Suppression of LPS-induced inflammatory activities by Rosmarinus officinalis L Food Chem 136:1047– 1054 CHEMICAL COMPOSITION AND ANTIOXYDANT ACTIVITY OF ROSEMARY ESSENTIAL OILS (ROSMARINUS OFFICINALIS L.) Nguyen Ngoc Yen, Bui Nguyen Anh Thu and Nguyen Minh Kha Faculty of Pharmacy and Nursery, Tay Do University (Email: yenkha1907@gmail.com) ABSTRACT The objectives of this study were to determine the chemical composition and to evaluate the antioxidant ability of Rosemary Plants samples were collected from Da Lat city, Lam Dong It was extracted with essential oil by the steam distillation method The chemical composition of essential oils was determined by GC-MS gas chromatography Rosemary essential oil was investigated for its antioxydant activity by using DPPH free radical method The results showed that the extraction in efficient conditions of essential oils was 2,93% The chemical composition of essential oils included of 22 substances of which the principle substances accounted for α-Pinene (26,13%), Eucalyptol (19,41%), cis-verbenone (17,34%) In addition, Rosemary essential oil had a high antioxydant ability with an IC50 value of 75,7 µg / mL Keywords: Antioxydant, DPPH, essential oil, Rosmarinus officinalis L., rosemary 201 ... cứu khả kháng oxy hoá từ loại giàu tinh dầu hương thảo, tiếp tục khảo sát khả kháng oxy hóa in vivo, khả kháng vi sinh vật Tuy nhiên, cần lưu ý khác biệt thành phần hóa học tinh dầu hương thảo điều... tinh dầu hương thảo trồng nước, nghiên cứu nhằm cung cấp thêm thông tin thành phần hóa học khả kháng oxy hóa tinh dầu hương thảo trồng thành phố Đà Lạt, Lâm Đồng PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phương... cất thêm vào 1000 mL nhiệt độ 100 oC, chưng cất thời gian 180 phút 3.3 Thành phần hóa học tinh dầu hương thảo Bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) thành phần hóa học tinh dầu xác