Mục đích cơ bản của luận án này là Bào chế được viên nén cefaclor 375 mg giải phóng kéo dài ở quy mô phòng thí nghiệm. Đề xuất tiêu chuẩn cơ sở và bước đầu đánh giá độ ổn định của chế phẩm. Bước đầu đánh giá tương đương sinh học của chế phẩm.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHỊNG HỌC VIỆN QN Y TRẦN XN TRÍ NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC CỦA VIÊN NÉN CEFACLOR 375MG GIẢI PHĨNG KÉO DÀI Chun ngành: Cơng nghệ dược phẩm và Bào chế thuốc Mã số: 62 72 04 02 LUẬNÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. PGS.TS Bùi Tùng Hiệp 2. PGS.TS Nguyễn Minh Chính HÀ NỘI 2017 LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới: PGS.TS. Bùi Tùng Hiệp PGS.TS. Nguyễn Minh Chính Những người thầy đã tận tình hướng dẫn và hết lịng giúp đỡ tơi hồn thành luận án này Tơi xin chân thành cảm ơnGS.TS. Đỗ Quyết (Giám đốc Học Viện Qn Y) đã cho phép và tạo mọi điều kiện cho tơi học tập và thực hiện luận án này. Tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS. Nguyễn Minh Chính,PGS.TS Trịnh Nam Trung, TS Nguyễn Văn Bạch cùng các đồng chí giảng viên, kỹ thuật viên, các cán bộ giáo vụ Trung tâm Đào tạoNghiên cứu Dược đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án này Tơi xin chân thành cảm ơn PGS. TS.Trần Hải Anh, TS. Nghiêm Danh Bảy, TS. Nguyễn Văn Tuấn cùng các chun viên phịng Đào tạo sau đại học đã quan tâm giúp đỡ tơi trong q trình học tập và nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn TGĐ Kim Jong Sungcùng tồn thể nhân viên Cơng ty TNHH dược phẩm SHINPOONG DAEWOO – TP.BIÊN HỊA – Đồng Nai đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án này Tơi xin chân thành cảm ơn GĐ. BSCKII. Trần Văn Khanh cùng tập thể Bác sĩ, Y sĩ, CN… Bệnh viện quận 2 TP.HCM đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án này Tơi xin chân thành cảm ơn Viện trưởng Nguyễn Ngọc Vinh cùng tồn thể nhân viên Viện Kiểm nghiệm thuốc Tp.HCM – TP.HCM đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án này Tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS. Hồng Minh Châu và các cán bộ giảng viên, kỹ thuật viên Bộ mơn Cơng Nghệ Dược (Trường Đại học Y Dược TP. HCM) đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án này Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè, đồng nghiệp đã ủng hộ và động viên tơi trong q trình thực hiện luận án này Quảng ngãi, ngày 03 tháng 02 năm 2014 Nghiên cứu sinh Trần Xn Trí LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan đây là cơng trình nghiên cứu của riêng tơi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực, chưa được ai cơng bố trong bất kỳ cơng trình nào và khơng thuộc một đề tài nghiên cứu khoa học nào khác Tác giả TRẦN XN TRÍ MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục Danh mục chữ viết tắt trong luận án Danh mục các bảng Danh mục các hình ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 1.1. THUỐC GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 1.1.1.Hệ thống trị liệu giải phóng kéo dài 1.1.2. Ưu nhược điểm của thuốc giải thích kéo dài 1.1.3. Cơ chế giải phóng dược chất từ hệ cốt thân nước 1.1.4. Các tá dược dùng cho viên giải phóng kéo dài 1.1.5. Một số yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ giải phóng dược chất đối với hệ cốt thân nước 1.2. CEFACLOR VÀ BÀO CHẾ VIÊN CEFACLOR GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 11 1.2.1. Cefaclor 11 1.2.2. Các đặc tính kỹ thuật bào chế viên cefaclor giải phóng kéo dài 21 1.2.3.Một số nghiên cứu về dạng bào chế giải phóng kéo dài chứa Cefaclor 1.3. ĐỘ ỔN ĐỊNH VÀ TUỔI THỌ CỦA THUỐC 23 27 1.3.1. Độ ổn định của thuốc 27 1.3.2. Điều kiện nghiên cứu độ ổn định của thuốc 29 1.3.3. Tuổi thọ của thuốc 31 1.4. SINH KHẢ DỤNG VÀ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC 1.4.1. Khái niệm về sinh khả dụng và tương đương sinh học 32 32 1.4.2. Phương pháp đánh giá sinh khả dụng 1.4.3. Đánh giá tương đương sinh học in vitro 33 34 1.4.4. Đánh giá tương đương sinh học in vivo 35 CHƯƠNG 2. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VÀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 39 39 2.1.1. Nguyên liệu 39 2.1.2. Thiết bị và dụng cụ 40 2.1.3. Thuốc đối chiếu và thuốc thử 41 2.1.4. Người tình nguyện khỏe mạnh tham gia nghiên cứu 41 2.1.5. Địa điểm và thời gian nghiên cứu 41 2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1. Phương pháp nghiên cứu bào chế 41 41 2.2.2.Đề xuất tiêu chuẩn cơ sở và nghiên cứu độ ổn định của viên nén cefaclor 375 mg giải phóng kéo dài 2.2.3. Nghiên cứu đánh giá tương đương sinh học 49 51 CHƯƠNG3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 63 3.1. NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ 63 3.1.1. Thẩm định phương pháp định lượng hoạt chất trong thành phẩm 63 3.1.2. Khảo sát các chỉ tiêu của viên đối chiếu 67 3.1.3. Bào chế viên cefaclorgiải phóng kéo dài 69 3.1.4. Bao phim viên nhân giải phóng kéo dài chế phẩm cefaclor 375 mg 84 3.2. ĐỀ XUẤT TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NÉN CEFACLOR 375 MG GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 86 3.2.1. Nghiên cứu đề xuất tiêu chuẩn cơ sở 86 3.2.2. Kết quả thẩm định 89 3.2.3. Độ ổn định và tuổi thọ của thuốc 92 3.3. ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HOC 94 3.3.1. Thẩm định phương pháp định lượng hoạt chất trong huyết tương 3.3.2. Tương đương sinh học in vitro 94 107 3.3.3. Tương đương sinh học in vivo CHƯƠNG 4.BÀN LUẬN 107 116 4.1. KỸ THUẬT BÀO CHẾ 116 4.1.1. Thẩm định phương pháp định lượng cefaclor trong chế phẩm 116 4.1.2. Bào chế viên nén cefaclor 375mggiải phóng kéo dài 117 4.1.3. Kiểm nghiệm thành phẩm 123 4.2. ĐỀ XUẤT TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NÉN CEFACLOR 375 MG GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 124 4.2.1. Tiêu chuẩn cơ sở của viên nén cefaclor 375 mg giải phóng kéo dài 124 4.2.2. Độ ổn định của chế phẩm 124 4.3. TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC 126 4.3.1. Thẩm địnhphương pháp định lượng cefaclor trong huyết tương 126 4.3.2. Tương đương sinh học in vitro 128 4.3.3. Tương đương sinh học in vivo 129 KẾT LUẬN 131 KIẾN NGHỊ 133 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT TRONG LUẬN ÁN TT Phần viết tắt ACN Phần viết đầy đủ Acetonitril AUC Area Under Curve ( diện tích dưới đường cong) BE Biological Equivalence( tương đương sinh học ) BP British Pharmacopoeia ( dược điển Anh ) Cmax Maximum Plasma Concentration ( nồng độ cực đại trong máu ) CEF Cefaclor CV Coefficient of Variation ( hệ số phân tán ) DC Dược chất 10 dd Dung dịch 11 DĐH Dược động học 12 DĐVN Dược điển Việt Nam 13 ĐT Đối tượng 14 FDA Food and Drug Administration ( cơ quan quản lý thuốc và thực phẩm ) 15 GMP Good manufacturing practice (thực hành sản xuất tốt) 16 GPKD Giải phóng kéo dài 17 HPLC High Performance Liquid Chromatography ( sắc ký lỏng hiệu năng cao ) 18 HPMC Hydroxypropyl metylcellulose 19 HQC Hight Quality Control sample (mẫu kiểm chứng giới hạn trên ) 20 IS Internal Standard ( chuẩn nội ) 21 KLTB Khối lượng trung bình TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 22 LLOQ Lower Limit Of Quantification ( giới hạn định lượng nh nồng độ thuốc trong máu. Các kết quả được xử lý và tính theo phương pháp thống kê để đánh giá mức độ tương đương theo các hướng dẫn về đánh giá tương đương sinh học qui định Cho uống thuốc và lấy mẫu: NTN sẽ đuợc uống thuốc 1 viên (thuốc thử hoặc thc chứng) 375mg/lần/ngày vào buổi sáng. Bữa tối trước ngày dùng thuốc, NTN ăn nhẹ trước 0 giờ đêm; nước uống theo nhu cầu. Ngày dùng thuốc, ngườ i tình nguyện khơng ăn sáng. Kiểm tra l ại sức khỏe để đảm bảo tình trạng sức khỏe tốt. Mỗi NTN uống duy nhất 1 viên thuốc thử hoặc thuốc đối chứng với 200ml nước, duới sự giám sát của bác sỹ và người nghiên cứu.Trong vịng 2 giờ sau uống thuốc, chỉ được dùng nước tinh khiết. Sau 2 giờ, NTN được ăn nhẹ và sau 4 giờ thì ăn bữa chính theo khẩu phần quy định trong suốt thời gian tiến hành lấy máu,NTN khơng được uống sữa, nước chè, cà phê, coca hoặc bất kỳ một loại nước tăng lực nào Dùng kim luồn tĩnh mạch vơ khuẩn đặt vào tính mạch chân tay của mỗi NTN và cố định sao cho khơng cản trở các hoạt động bình thường của chân tay. Sử dụng kết quả nghiên cứu thăm dị trên 2 NTN và chọn tường trình lấy mẫu thích hợp đảm bảo tối thiểu lấy được 3 mẫu trước cực đại và 6mẫu sau cực đại Mỗi lần lấy khoả n 3 ml máu cho vào các ống nghi ệm đã đánh số chứa s ẵn một lượng Heparin (5UI/ml) thích hợp, sau 15 – 20 phút, ly tâm lấy riêng huyết tương. Bảo quản các mẫu huyết tuơng trong tủ đá có nhiệt độ 25oC, thời gian bảo quản tùy thuộc vào kết quả khảo sát độ ổn định của mẫu thử trong huyết tương Cho uống thuốc và l ấy mẫu máu được thực hiện tại phịng lấy mẫu đặt tại Bệnh Việ n. Phịng lấy mẫu được trang bị đầy đủ giường, tủ thuốc và các phương tiện c ấp cứu Bác sĩ và y tá của Khoa Chống độc, Bệnh viện có cộng tác nghiên cứu tr ực theo dõi, giám sát, chăm sóc y t ế cho ngườ i tình nguyện trong suốt q trình lấy mẫu. Nếu có phản ứng bất lợi, sốc phản vệ được xử lý sơ cứu tại chỗ Các biện pháp theo dõi và xử trí: Trường hợ p có phản ứ ng bất l ợi, sốc phản vệ được xử lý sơ cứu tại chỗ theo phác đồ hướng dẫn của Bộ y tế: cho thở Oxy, tiêm epinephrin hoặc steroid tĩnh mạch Trường hợp nặng sẽ được gửi tới Khoa chống độc của bệnh viện (hoặc gọi cấp cứu 115) 3. Trách nhiệm và quyền lợi của NTN: Quyền lợi: Khi tham gia nghiên cứu, mỗi NTN được trả thù lao cho việc tham gia nghiên cứu với số tiền là 40.000 VNĐ/ 1 lần lấy máu và được nhận khi kết thúc phần lấy mẫu. Trườ ng hợp NTN tự ý ngừng tham gia nghiên cứu vì lý do cá nhân mà khơng phả i do tác dụng phụ của thuốc hoặ c ý ki ến của ngườ i nghiên cứu thì s ẽ khơng được hưởng thù lao nghiên cứu. Trường hợp NTN ngừng tham gia nghiên cứu có lý do: do tâm lý, do kết quả nghiên c ứu hoặc do tác dụng phụ của thuốc thì sẽ được hưởng thù lao tính theo thời gian tham gia nghiên cứu NTN được u c ầu xử trí các phản ứng bất lợi xảy ra trong q trình nghiên cứu. Những trường hợ p nặ ng sẽ được điều trị tại bệnh viện, mọi chi phí cho điều trị sẽ do cơ quan chủ trì nghiên cứu chi trả theo viện phí Các thơng tin về NTN cùng kế t quả xét nghiệm, nghiên cứu sẽ được gi ữ bí mật trong hồ sơ nghiên cứu. Tên, địa chỉ, hình ảnh NTN s ẽ khơng được cơng bố trong các bản báo cáo kết quả, báo, tạp chí nếu khơng được sự đồng ý của NTN Trách nhiệm: Tình nguyện tham gia nghiên cứu và tn thủ đúng những u cầu của bên nghiên cứu Cung c ấp những thơng tin chính xác về bệnh sử, tình trạng sức khoẻ hiện tại cho nhóm nghiên cứu Tình nguyện ký vào Bản cam kết tình nguyện tham gia nghiên cứu Trong trường hợ p khơng muốn tiếp tục tham gia nghiên cứu, phải có thơng báo trước bằng văn bản cho bên nghiên cứu CAM KẾT Tơi đã đọc kỹ các thơng tin trên và thấy mình đủ tiêu chẩn để tham gia. Tơi xin tn thủ tuyệt đối mọiqui định của nhóm nghiên cứu. Tơi đã ký vào bản cam kết này với ý thức hồn tồn tự nguyện Tơi: đồng ý hoặc khơng đồng ý ghi tên thật của mình vào trong các báo cáo nghiên cứu Ngày: Người tình nguyện Người làm chứng (Ký ghi rõ họ, tên) (Không là cán bộ nghiên cứu) Chúng tôi đã thông báo đầy đủ các thông tin ở trên cho NTN, đồng ý tiếp nhận tham gia vào nghiên cứu của chúng tôi. Chúng tôi cam kết thực hiện đúng những điều đã nêu trên và tuân thử theo qui chế về đạo đức trong nghiên cứu y sinh Ngày: Thay mặt nhóm nghiên cứu (Ký ghi rõ họ, tên) Mẫu Bản cam kết tình nguyện tham gia nghiên cơ này đã được thơng qua tại phiên họp Hội đồng đạo đức của Bệnh Viện. Thay mặt hội đồng đạo đức Chủ tịch (ký tên & đóng dấu ) Phụ Lục 16:Kết quả sử lý TĐSH bằng phần mềm Equitest của Viện kiểm nghiệm thuốc TP.HCM ... Vì vậy, nhằm đáp ứng u cầu điều trị? ?và? ?kinh tế trong nước, chúng tơi chọn đề tài: ? ?Nghiên? ?cứu? ?bào? ?chế? ?và? ?bước? ?đầu? ?đánh? ?giá? ?tương? ? đương? ?sinh? ?học? ?của? ?viên? ?nén? ?cefaclor? ?375mg? ?giải? ?phóng? ?kéo? ?dài? ?? với các mục tiêu sau: Bào? ?chế? ?được? ?viên? ?nén? ?cefaclor? ?375 mg? ?giải? ?phóng? ?kéo? ?dài? ?ở quy ... Bào? ?chế? ?được? ?viên? ?nén? ?cefaclor? ?375 mg? ?giải? ?phóng? ?kéo? ?dài? ?ở quy mơ phịng thí nghiệm Đề xuất tiêu chuẩn cơ sở? ?và? ?bước? ?đầu? ?đánh? ?giá? ?độ ổn định? ?của? ? chế? ?phẩm Bước? ?đầu? ?đánh? ?giá? ?tương? ?đương? ?sinh? ?học? ?của? ?chế? ?phẩm... cefaclor? ?375 mg, hoạt chất? ?giải? ?phóng? ?kéo? ?dài? ?theo cơ ? ?chế hịa tan Nghiên? ?cứu? ?đề xuất tiêu chuẩn cơ sở? ?và? ?đánh? ?giá? ?độ ổn định của? ?chế? ?phẩm? ?nghiên? ?cứu? ?ở điều kiện thường? ?và? ?lão hóa cấp tốc Đánh? ?giá? ?tương? ?đương? ?sinh? ?học? ?viên? ?nghiên? ?cứu? ?so với thuốc