Ảnh hưởng của nitrite lên một số chỉ tiêu sinh lý của cá tra (pangasianodon hypophthalmus)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN NGUYỄN THÀNH DU ẢNH HƯỞNG CỦA NITRITE LÊN MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ CỦA CÁ TRA ( Pangasianodon hypophthalmus ) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2011 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN NGUYỄN THÀNH DU ẢNH HƯỞNG CỦA NITRITE LÊN MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ CỦA CÁ TRA ( Pangasianodon hypophthalmus ) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGs.Ts ĐỖ THỊ THANH HƯƠNG 2011 LỜI CẢM TẠ Xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu trường, Ban chủ nhiệm khoa Thủy Sản, quý thầy cô anh chị môn Dinh Dưỡng Chế Biến Thủy Sản ñã tạo ñiều kiện cho tơi suốt q trình học tâp làm đề tài Cảm ơn cán hướng dẫn PGs.Ts Đỗ Thị Thanh Hương ln quan tâm, động viên tận tình hướng dẫn suốt q trình làm đề tài Xin chân thành cảm ơn chị Nguyễn Thị Thúy Liễu, chị Nguyễn Thị Kim Hà, anh Nguyễn Văn Toàn bạn lớp liên thơng K35 hết lịng giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Xin chân thành cám ơn! i TÓM TẮT - Nitrite làm giảm khả sử dụng oxy nước cá, nồng độ nitrite mơi trường cao tiêu hao oxy cá giảm Ngựơc lại, ngưỡng oxy cá tăng hàm lượng nitrite môi trường tăng - Phân tích tiêu huyêt học ta thấy có sư gia tăng số lượng hồng cầu giũa nghiệm thức khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p >0,05) Riêng số lượng bạnh cầu tăng mạnh ñặc biệt nghiệm thức có nồng độ nitrite cao mơi trường (nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) so với nghiệm thức ñối chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) ii MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ i TÓM TẮT ii MỤC LỤC iii DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi PHẦN I: GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu 1.2 Mục tiêu ñề tài 1.3 Nội dung ñề tài 1.4 Thời gian thực PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Một số ñặc ñiểm cá 2.1.1 Đặc ñiểm hình thái phân loại 2.1.2 Đặc ñiểm phân bố 2.1.3 Đặc điểm mơi trường sống 2.1.4 Đặc ñiểm dinh dưỡng 2.1.5 Đặc ñiểm sinh trưởng 2.2 Nguồn gốc biến ñộng nitrite ao nuôi thủy sản 2.3 Ảnh hưởng nitrite lên số tiêu huyết học 2.4 Một số nghiên cứu ảnh hưởng ñộc chất lên tiêu huyết học ñộng vật thủy sản PHẦN III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 3.1 Địa ñiểm thời gian thực thí nghiệm 10 3.2 Vật liệu nghiên cứu 10 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 10 iii 3.2.2 Hóa chất, thiết bị dụng cụ dùng thí nghiệm 10 3.3 phương pháp thí nghiệm 10 3.3.1 Các tiêu phân tích 11 3.3.2 Phương pháp phân tích số liệu 12 PHẦN IV KẾT QUẢ THẢO LUẬN 13 4.1 Yếu tố môi trường 13 4.1.1 Biến ñộng nhiệt ñộ (ºC) 13 4.1.2 Biến ñộng pH 14 4.1.3 Biến ñộng oxy hòa tan (DO mg/L) 14 4.1.4 Biến ñộng ammonia (NH4+/NH3 mg/L) 15 4.1.5 Biến ñộng nitrite (NO2 mg/L) 16 4.2 Ảnh hưởng nitrite lên tăng trưởng cá 17 4.2.1 Tăng trưởng khối lượng (g/con) 17 4.2.2 Tốc ñộ tăng trưởng theo ngày (g/ngày) 19 4.2.3 Tốc ñộ tăng trưởng tương ñối (%/ngày) 20 4.3 Tỷ lệ sống (%) 21 4.4 Hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) 22 PHẦN V KẾT LUẬN ĐỀ XUẤT 24 5.1 Kết luận 24 5.2 Đề xuất 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 24 Phụ lục 1: 1a Phụ lục 2: 1b Phụ lục 3: 1c iv DANH SÁCH BẢNG Bảng 4.1: Biến ñộng yếu tố nhiệt ñộ nghiệm thức 13 Bảng 4.2: Biến động trung bình pH nghiệm thức 14 Bảng 4.2 Biến ñộng hàm lượng oxy hòa tan nghiệm thức 15 Bảng 4.4 Tăng trưởng theo khối lượng cá 18 Bảng 4.5 Đặc Tốc ñộ tăng trưởng tuyệt ñối (DWG g/ngày) 19 Bảng 4.6 Tăng trưởng tương ñối (%/ngày) 21 v DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Biến động ammonia (NH4+ mg/L) 16 Hình : Biến ñộng nitrite (NO2 mg/L) 17 Hình 3: Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ sống cá sau 23 ngày thí nghiệm 22 Hình 4: Biểu đồ biểu diễn hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) 23 vi PHẦN I: GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu Hiện nay, ngành thủy sản giới phụ thuộc ngày nhiều vào nguồn thủy sản từ nuôi trồng Nghề nuôi thủy sản nước ta giới ñang phát triển mạnh mẽ Ở nước ta, ước tính sản lượng thủy sản ni trồng thánh đầu năm ñạt 1.207 triệu tấn, tăng 5,2% so với kì năm trước Trong đó, sản lượng cá đạt 964.600 tấn, tăng 5,5% Tơm đạt 143.500 (trong tơm chân trắng ước 26.000 tấn) tăng 6,1% so với năm 2009 Bên cạnh đồng Sơng Cửu Long vùng kinh tế trọng ñiểm vùng nuôi trồng thủy sản lớn nước Đến nay, diện tích ni trồng thủy sản tồn vùng lên 824.000 Sản lượng ñạt 1,9 triệu tấn, sản lượng cá tra chiếm 756.940 tăng 19,4% Với mức độ tăng ngành ni trồng thủy sản phát triển mạnh diện tích lẫn mơ hình ni mức độ thâm canh, đặc biệt cá tra Hiện nay, mật độ ni cá tra ao thâm canh lên cao trung bình khoảng 50 con/m2 Sinh lượng cá vào cuối vụ nuôi đạt mức 300 – 500 tấn/ha Vì vậy, lượng lớn thức ăn ñược cung cấp vào ao ni ngun nhân làm tăng nhanh yếu tố dinh dưỡng chất ñộc ao ni Hàm lượng H2S có trường hợp đạt ñến 0,64 mg/l ( Huỳnh Trường Giang ctv.,2008), vượt xa mức cho phép nuôi trồng thủy sản Lê Anh Tuấn, (2007) cơng bố để có 1kg cá da trơn thành phẩm cần 3-5kg thức ăn Thực tế khoảng 17% thức ăn hấp thu phần cịn lại hịa lẫn mơi trường trở thành chất hữu phân hủy Kết khảo sát cục môi trường Tây Nam Bộ, (2007) cho thấy nguồn chất thải từ ni trồng thủy sản đồng Sơng Cửu Long hàng năm thải 450 triệu m3 bùn thải chất thải chưa xử lý Riêng chất thải nuôi cá tra cá basa triệu tấn/ năm Các chất thải thức ăn thừa chưa phân hủy, chất nuôi trồng thủy sản tồn dư môi trường nước Đặc biệt chất thải ao ni cơng nghiệp có chứa 45% nitơ, 22% chất hữu ñã vượt mức cho phép gây cần sinh thái nuôi trồng thủy sản Theo Schmittou, (2004) khoảng 80-85% dưỡng chất thức ăn viên bị tan rã nước Thành phần hợp chất Phosphat, amonia, carbon dioxide, chúng kích thích thực vật phù du phát triển Một loại khí độc khác tạo thành ao ni cá tra với hàm lương cao NH3 Kết qủa nghiêm cứu Cao Văn Thích, (2008) Nguyễn Hữu Lộc, (2009) hàm lượng tổng đạm amơn (TAN) nước ao nuôi cá tra vào cuối vụ cao, khoảng 6-10 mg/l Mật độ tảo ao ni cá tra thâm canh cao, khoảng 6,2 triệu cá thể/l, mật độ cao đạt 12,6 triệu cá thể/l ( Dương Thị Hoàng Oanh ctv., 2008) Trong ao nuôi cá tra tảo thường xuyên nở hoa nên tượng pH tăng cao xảy liên tục vào buổi trưa, ñiều ñã làm tăng khả gây ñộc cuả NH3 Nếu yếu tố môi trường bất lợi tồn lâu dài ao ni sẻ ảnh hưởng đến sinh trưởng, tỉ lệ sống phẩm chất cá nuôi Đặc biệt nitrite (NO-2), hàm lượng nitrite ao nuôi cá tra cao, đạt mức 1,5-2 mg/l, mức vượt mức giới hạn cho phép ni trồng thủy sản (0,3 mg/l) (Cao Văn Thích, (2008) Nguyễn Hữu Lộc, (2009)) NO-2 chất ñộc gây nên “bệnh máu nâu” làm cảng trở trình vận chuyển oxy tế bào máu làm cá chết ngạt Đối với cá da trơn hàm lượng nitrite cao tác động hiệp đồng với tính độc NH3 (Chen Chim, 1988) Vì việc nghiên cứu ảnh hưởng nitrite ao nuôi cần thiết Trên sở đó, đề tài “ Ảnh hưởng nitrite lên số tiêu sinh lý cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) ” ñược thực 1.2 Mục tiêu ñề tài Xác ñịnh mức ñộ ảnh hưởng nitrite cá tra Thơng qua kết thí nghiệm nhằm khuyến cáo người ni quản lý mơi trường tốt hơn, nhằm hạn chế việc tích trữ nitrite ao ni cá tra 1.3 Nội dung đề tài Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite lên số tiêu sinh lý (tiêu hao oxy ngưỡng oxy) cá tra Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite lên số tiêu huyết học (hồng cầu, bạch cầu, methemoglobin) cá tra 1.4 Thời gian thực Từ tháng 6/2010 ñến tháng 9/2010 3.5 Phương pháp phân tích số liệu Các số liệu tính giá trị trung bình, độ lệch chuẩn phân tích Anova để tìm khác biệt trung bình nghiệm thức Sử dụng phần mềm Stastitica 5.5, phần mềm Excel ñể tính tốn 14 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Các yếu tố môi trường 4.1.1 Các yếu tố mơi trường thí nghiệm huyết học (hồng cầu, bạch cầu) Nhiệt ñộ Sáng 27,04± 0,9 pH Chiều 28,5± 0,85 Oxy hòa tan Sáng 7,72± 0,17 Chiều 7,74± 0,19 Sáng 5,03± 0,69 Chiều 4,29± 0,66 Bảng 4.1: Nhiệt ñộ, pH, Oxy thí nghiệm ảnh hưởng nitrite lên số tiêu huyết học cá tra Các yếu tố môi trường ñược ño vào thời ñiểm sáng, chiều Đo trước thu mẫu 15 phút Kết cho thấy yếu tố mơi trường khơng có biến động lớn trung bình hàm lượng oxy dao động từ 3-5mg/l Nhiệt độ ngày khơng có lệch lớn từ 27- 28oC, pH tương ñối ổn ñịnh 7,5- 7,7 Nhìn chung yếu tố mơi trường q trình thí nghiệm thuận lợi cho phát triển cá 4.1.2 yếu tố mơi trường thí nghiệm sinh lý cá tra - Nhiệt ñộ: Sự biến ñộng yếu tố nhiệt ñộ dao ñộng khoảng 28±0,3 Do q trình thí nhiệm tiến hành phịng kính, nhiệt độ phịng giữ ổn định 26oC nhờ máy điều hịa kết hợp với hecter nâng nhiệt suốt q trình thí nghiệm nên nhiệt độ khơng có biến động lớn Nhiệt độ ñược xem yếu tố quan trong q trình trao đổi chất Nhiệt độ tăng q trình trao đổi chất tăng, nhiệt độ giãm q trình trao đổi chất giãm (nhưng phải giới hạn cho phép) Do nhiệt độ ảnh hưởng trực tiếp hay gián tiếp ñến hoạt ñộng dinh dưỡng hàng ngày cá Theo Niconski (1951, trích dẫn Trương Quốc Phú, 2001) nhiệt ñộ thể cá lệch với nhiệt độ mơi trường khoảng 0,5 – 1oC Khi nhiệt ñộ tăng, cá tăng cường trao ñổi chất, dẫn ñến gia tăng cường ñộ hô hấp 15 Theo Trương Quốc Phú, (2001) nhiệt ñộ tốt cho phát triển cá 25 – 30 C tốc ñộ thay ñổi nhiệt ñộ khoảng 0,2oC/ phút sẻ khơng ảnh hưởng đến cá o - pH: Trong q trình thí nghiệm pH ln ñược theo dõi dao ñộng từ 7,5- 7,8 Theo Boyd ( 1990), pH phù hợp cho phát triển tôm cá từ 6,5- Nếu pH < 6,5 ảnh hưởng ñến tăng trưởng phát triển tôm cá tăng tiết dịch nhờn bề mặt mang làm giãm q trình trao đổi khí ion, gây cân acid- bazơ, khả điều hịa áp suất thẩm thấu pH thí nghiệm tương đối ổn định khơng ảnh hưởng đến hoạt động trao đổi khí cá mơi trường - Oxy: Nguồn nước dùng thí nghiệm sục khí trước ngày suốt q trình thí nghiệm nhằm loại bỏ hồn tồn hàm lượng chlorine nước Theo Swingle (1969; trích dẫn Trương Quốc Phú, 2001) hàm lượng oxy hịa tan nước lý tưởng ppm Tuy nhiên, khơng nên vượt q mức bảo hịa cá bị bệnh bọt khí máu Cá tra có quan hơ hấp phụ nên chịu đựng mơi trường có hàm lượng oxy hịa tan thấp ( 0,05) so với nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N ( 67mgO2/kg/giờ) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) ñối với nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N ( 56 mgO2/kg/giờ ) nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N ( 42 mgO2/kg/giờ) Tóm lại, cường độ hô hấp cá giảm tất nghiệm thức 80 70 60 50 40 Series1 30 20 10 DC LC10 LC25 LC50 Bảng 4.2 Tiêu hao oxy trung bình cá tra nghiệm thức Kết thí nghiệm cho thấy khả tiêu hao oxy cá giãm dần nồng ñộ tiêu hao oxy cá tăng nguyên nhân tiếp xúc với mơi trường có nồng độ nitrite cao (nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) hemoglobin chuyển hó thành methemoglobin khơng cịn khả kết hợp với oxy Khi hàm lượng oxy máu giãm cá tăng cường hàm lượng hồng cầu ñến mang ñể vận chuyển oxy hemoglobin đến mang lại bị nitrite oxy hóa sắt (II) hemoglobin thành sắt (III) khơng cịn khả kết hợp với oxy Do mơi trường có nitrite cao cá sẻ phản ứng lại cách tăng tần số hơ hấp để tăng cường trao đổi khí mức ñộ sử dụng oxy lại giãm nên tiêu hao oxy giãm nồng độ nitrite mơi trường tăng Kết nghiêm cứu phù hợp với kết nghiên cứu cá Cyprynus Carpio cho tiếp xúc với nitrite có nồng độ cao tì lệ tiêu thụ oxy giãm dần ( theo Tilak et al (2007) trích dẫn từ Mai Diệu Quyên, 2010) 17 Kết nghiên cứu Lương Diễm Trang (2009) cá tra tiêu hao oxy cá giãm tiếp xúc với nồng ñộ Malachite green cao 4.2.2 Ảnh hưởng nitrite lên ngưỡng oxy cá tra Theo Mark Boyley hans Malte (2008) ngưỡng oxy giá trị mà động vật khả lấy oxy để trì sống Ngưỡng oxy giá trị đại diện tình trạng giãm oxy máu, mang tim Kết thí nghiệm cho thấy ngưỡng oxy cá tra nghiệm thức có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) 2.5 1.5 Series1 0.5 DC LC10 LC25 LC50 Bảng 4.3 Ngưỡng oxy cá tra trung bình nghiệm thức Thời gian chết cá nghiệm thức có sư khác biệt Đối với cá có nống độ nitrite cao (75,6 mg/l NO2 – N) cá chết nhanh hon so với nghiệm thức ñối chứng, nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N nghiệm thức 66,4 mg/l NO2N Hoạt động cá lúc thí nghiệm: trước chết cá hoạt động liên tục nhằm tìm nguồn oxy cung cấp cho thể ñồng thời co thể tăng cường trao ñổi chất ñể tiết chất ñộc ngồi Nhưng cá tăng cường hoạt động phải tiêu tốn nhiều lượng cho trình vận động nên q trình trao đổi chất, q trình hơ hấp cá tăng lên Q trình trao đổi chất tăng phải cần nhiều oxy tần số hô hấp cá tăng lên Khi tần số hơ hấp tăng lại tạo điều 18 kiện cho hemoglobin máu tiếp xúc với nitrite môi trường bị oxy hóa thành methemoglobin (khơng cịn khả vận chuyển oxy) Sau cá sẻ từ từ chìm xuống đáy bình chết Điếu cho thấy cá nghiệm thức có hàm lượng nitrite môi trường lại chết nhanh so với nghiệm thức ñối chứng nghiệm thức có nồng ñộ nitrite cao (75,6 mg/l NO2 – N) lại chết nhanh so với nghiệm thức có nồng độ nitrite thấp (59,1 mg/l NO2 – N, 66,4 mg/l NO2 – N) hàm lượng oxy mơi trường cịn phù hợp cho sống cá (O2 > 2,5 mg/L nghiệm thức có nồng độ nitrite nước) Điều tương tự kết nghiên cứu Nguyễn Thanh Phương Đỗ Thị Thanh Hương, (1997, trích dẫn từ Nguyễn Ngọc Hiền, 2007) nghiên cứu thay đổi bên ngồi cá rơ phi (Oreochromis niloticus) giống sau ñưa thuốc Methyl parathion (MP) vào bể thí nghiệm lơ có nồng độ thuốc cao (17mg/L 24mg/L) cá bất ñộng chìm xuống đáy bể sau tiếp xúc với thuốc 1-2 cá di chuyển lên mặt nước để đốp khơng khí, sau cá dần khả bơi lội, trở nên thăng bằng, hoạt ñộng thể yếu dần cá bắt ñầu chết Theo Đỗ Thị Thanh Hương Nguyễn Anh Tuấn (1997) cho ngưỡng oxy tiêu hao oxy cá sống mơi trường có thuốc trừ sâu ln cao điều kiện khơng có thuốc, rối loạn hô hấp dấu hiệu ñầu tiên nhiễm ñộc Theo Bass, (1977) thí nghiệm cá mang xanh (Lepomis macrochirus) cá hồi (salmo gairdneri) cho nồng ñộ chlorine gần mức gây chết làm cho tế bào biểu bì phiến mang dầy lên, mang bị tổn thương nên làm giảm vận chuyển oxy qua mang, nồng ñộ chlorine cao làm hoại tử mang 4.3 Ảnh hưởng nitrite lên tiêu huyết học cá tra 4.3.1 Ảnh hưởng nitrite lên số lượng hồng cầu Hồng cầu loại huyết cầu có số lượng nhiều tế bào máu Hồng cầu cá trưởng thành hầu hết hình bầu dục Hồng cầu cá có nhân, hai mặt lồi Do có nhân nên hồng cầu cá có mức độ trao đổi chất cao, tiêu hao lượng oxy lớn Số lượng hồng cầu máu cá thay ñổi lớn Ở cá nước số lượng hồng cấu dao ñộng khoảng 1- 3,5 triệu tế bào/ mm3 (www.Agriviet.com) 19 Bảng 4.4: Số lượng hồng cầu (triệu tế bào/ mm3) cá tra thí nghiệm Nghiệm thức Thời gian thu mẩu Đối chứng 59,1mg/L (LC10) 66,4mg/L (LC25) 75,6mg/L (LC50) 2,77±0,40a 2,50±0,55a 2,35±0,47a 2,29±0,23a A A 2,81±0,28a giờ 24 48 72 96 A 2,77±0,58a A 2,72±0,23a A A A A A A A bA 2,30±0,35b A 2,33±0,52b A 2,37±0,49a bA 2,32±0,45b 2,33±0,58b 2,54±0,28a 2,71±0,24a A A A 2,35±0,41a 2,34±0,24b 2,30±0,59b 2,71±0,20a A 2,36±0,69a 2,85±0,20a 2,85±0,20a A A 2,29±0,22b A 2,21±0,33b A 2,26±0,44b A Số liệu trình bày trung bình ± độ lệch chuẩn Các giá trị hàng mang chữ (a, b) khác biệt khơng có ý nghỉa thống kê (p>0,05) Các giá trị cột mang chữ A khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p> 0,05) Qua kết xử lý thống kê cho thấy số lượng hồng cầu giảm có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với ñối chứng sau cá tiếp xúc với nitrite 24 nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N Nguyên nhân làm cho số lượng hồng cầu giảm tiếp xúc với mơi trường có nitrite nitrite ñã oxy hóa Fe2+ hemoglobin thành Fe3+, hemoglobin chuyễn thành methemoglobin máu từ màu ñỏ chuyển thành màu nâu Đây nguyên nhân làm cho lượng hồng cầu máu giảm mạnh nghiệm thức có nồng độ cao 20 (nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) so với nghiệm thức ñối chứng Riêng nghiệm thức 59,1 mg/L NO2 – N số lượng hồng cầu có giảm thời điểm giờ, giờ, 24 so với nghiệm thức đối chứng khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Nguyên nhân thời gian ñầu (1 giờ, giờ, 24 giờ) cá tiếp xúc với thuốc, ñồng thời nồng ñộ nitrite môi trường thấp so với nghiêm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) nên hàm lượng Hemoglobin bị chuyển hóa thành methemoglobin cị (khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với nghiệm thức ñối chứng) thời ñiểm sau (48 giờ, 72 giờ, 96 giờ) hàm lượng methemoglobin tăng (khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng (p0,05) Ngun nhân xãy trình cá tiếp xúc với mơi trường có nồng độ nitrite hàm lượng hemoglobin hồng cầu bị giảm xuống trình chuyển hóa hemoglobin thành methemoglobin tác ñộng nitrite nên cá phản ứng lại trình cách huy ñộng lượng hồng cầu dự trữ kho chứa máu vào máu ñể ñảm bảo trình trao đổi khí cá Theo nghiên cứu cho thấy lượng máu co thể cá phần tuần hồn tim mao quản, phần cịn lại ñược dự trữ kho chứa máu Lượng máu tuần hồn chiếm khoảng 50% song tỉ lệ ln ln thay đổi tùy thuộc vào trạng thái sinh lý thể, lúc bình thường máu tích trữ tăng nhằm làm giảm bớt gánh nặng cho tim, vận động máu tích trữ vào hệ thống tuần hồn để đảm bảo nhu cầu lượng cho thể (www.Agriviet.com) Đó nguyên nhân làm tănglượng hồng cầu máu sau số lượng hồng cầu lại giảm nitrite mơi trường chuyển hemoglobin thành methemoglobin nên làm cho số lượng hồng cầu giãm theo (sự giảm làm ảnh hưởng ñến lượng oxy cung cấp cho co thể khả cá chết ngạt mơi trường có nitrite cao) Bởi vì, hemoglobin la thành phàn cấu tạo nên hồng cầu, chiếm 90% lượng chất khô hồng cầu làm cho hồng cầu có màu đỏ 21 Hemoglobin protein phức tạp gồm phân tử globin (96%) kết hợp với phân tử heme (4%).Globin có chất protein nên mang chất đặc chưng cho lồi Hiện tượng tương tự nghiên cứu khác cho cá vào ni mơi trường có hàm lượng oxy giảm đột ngột số lượng hồng cầu cá tăng lên mãnh liệt, cá sống lâu dài môi trường thường xuyên thiếu oxy số lượng hồng cầu lại giảm xuống, đưa cá trở lại mơi trường bình thường số lượng hồng cầu lại hồi phục (www.Agriviet.com) Das el al (2004 b,c) trích dẫn từ Mai Diệu Quyên, thí nghiệm ảnh hưởng nitrite hai loài cá cirrhinus mrigala catla catla cho thấy số lượng hồng cầu giảm nồng ñộ nitrite tăng cá cirrhinus mrigala hầu hết hồng cầu bị teo lại cá tiếp xúc nồng ñộ mg/l NO2 – N, 10,4 mg/l NO2 – N tổng hồng cầu giảm sau tiếp xúc với nitrite tất nồng độ cịn cá catla catla sau tiếp xúc với nitrite số lượng hồng cầu giảm thời ñiểm tăng thời ñiểm 12 giờ, tiếp tục giảm tới 96 (giảm khoảng 21,2-31,8 % nồng ñộ 10,4 mg/l NO2 – N) Theo Trần Cẩm Tú, (2010) nghiên cứu ảnh hưởng clorine lên số tiêu sinh lí máu cá rơ phi số lượng hồng cầu nghiệm thức (ñối chứng, 0,03 ppm, 0,28ppm, 0,35 ppm) có xu hướng giảm so với nghiệm thức đối chứng khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) riêng thời ñiểm 48 nghiệm thức 0,35 ppm khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức cá ñối chứng (p0,05) Các giá trị cột mang chữ (A, B, C, D) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p> 0,05) Qua bảng số liệu ta thấy số lượng bạch cầu thấp số lượng hồng cầu hàng chục lần Đồng thời số lượng bạch cầu nghiệm thức có nồng độ nitrite mơi trường (nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N, nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) tăng nhẹ so với đối chứng ( có ý nghĩa thống kê (p< 0,05)) 23 Nếu xét cột (từ xuống ) ta thấy số lượng bạch cầu khơng có thay đổi lớn nghiệm thức đối chứng qua thời ñiểm thu mẫu (1 giờ, giờ, 24 giờ, 48 giờ, 72 giờ, 96 giờ), khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) nghiệm thức có nồng độ nitrite trơng môi trường (nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N, nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) có gia tăng số lượng bạch cầu qua thời ñiểm thu mẫu Đặc biệt thời điểm 72 giờ, 96 số lượng bạch cầu tăng cao thời ñiểm giờ, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Nguyên nhân làm cho số lượng bạch cầu tăng nitrite mơi trường xâm nhập vào thể cá hemoglobin chuyển hóa thành methemglobin thể phản ứng lại với biến ñổi bất lợi cách tăng cường sản sinh bạch cầu ñể giải ñộc cho máu Nhưng nitrite chất oxy hóa mạnh nên Fe2+ hồng cầu thành Fe3+ làm cho máu chuyển sang màu nâu (bệnh máu nâu) nên tác dụng bạch cầu khó chuyển Fe3+ thàng Fe2+ (tái tạo lại chức hồng cầu) Do cá tiếp xúc với mồi trường có nitrite lâu hàm lượng methemoglobin máu tăng nên số lượng bạch cầu tăng theo Đó lý làm cho số lượng bạch cầu nghiệm thức có nồng độ nitrite cao môi trường (nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) tăng cao so với nghiệm thức có nồng độ nitrite môi trường thấp (nghiệm thức 59,1 mg/l NO2 – N) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Bên cạnh màu sắc cá thí nghiệm mơi trường có nitrite có khác biệt so với ñối chứng, ñặc biệt nghiệm thức có nồng độ nitrite cao (nghiệm thức 66,4 mg/l NO2 – N nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) da cá có màu sậm so với nghiệm thức ñối chứng Nguyên nhân thể cá bị nhiễm độc nitrite hệ thần kinh trung ương tác ñộng ñến da giúp phân tán tế bào sắc tố (tế bào melanin) làm cho da trở nên sậm màu Das et al, (2004b, trích dẫn từ Mai Diệu Quyên, 2010) thí nghiệm cá Crihinus mrigala cho thấy số lượng hồng cầu giãm số lượng bạch cầu tăng lên nồng ñộ 1- ppm NO2 – N ñến 48 sau giãm đến 96 Ở nồng độ nitrite cao 4- 10,4 ppm NO2 – N số lượng bạch cầu giãm sau tiếp xúc tăng lúc 12 khơng có ý nghĩa thống kê Trên cá catla catla số lượng bạch cầu giãm tăng lại 12 24 Theo Trần Cẩm Tú, (2010) nghiên cứu ảnh hưởng clorine lên số tiêu sinh lí máu cá rô phi số lượng bạch cầu nghiệm thức ñều tăng so với nghiệm thức ñối chứng Ở thời ñiểm ñến số lượng bạch cầu khác biệt có ý nghĩa thống kê nghiệm thức so với nghiệm thức ñối chứng Thời điểm 24, 48,72, 96 nghiệm thức có xử lí chlorine cao số lượng bạch càu nhiều khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức ñối chứng (p0,05) Riêng số lượng bạnh cầu tăng mạnh đặc biệt nghiệm thức có nồng ñộ nitrite cao môi trường (nghiệm thức 75,6 mg/l NO2 – N) so với nghiệm thức ñối chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 5.2 Đề Xuất - Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite lên trình tăng trưởng cá tra - Xác ñịnh mức ñộ ảnh hưởng nitrite ñối với số tiêu sinh hóa cá tra - Thí nghiệm mức độ ảnh hưởng nitrite cá tra có trọng lượng lớn 25 Tài Liệu Tham Khảo Châu Thị Đa, Bùi Xuân Thành, Hakan Berg Nguyễn Minh Du, 2008 Ảnh hưởng môi trường thức ăn từ hệ thống nuôi thủy sản sông mê công tỉnh An Giang Báo cáo khoa học số 31 Đỗ Thị Thanh Hương, 2010 Một số vấn ñề sinh lý cá giáp xác NXB Nơng Nghiệp Trang 13-42 Nguyễn Đình Trung, 2004 Quản lý chất lượng nước nuôi trồng thủy sản NXB Nông nghiệp Trang 34- 36 Nguyễn Thanh Long Võ Thành Toàn, 2008 Đánh giá mức độ tích lũy đạm, lân mơ hình ni tơm sú thâm canh Tạp chí khoa học, Trường Đại Học cần Thơ, 1, 2008, trang 45-53 Bùi Lai, Nguyễn Quốc Khang, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Quang Long, Ai Đình 1985 sở sinh lý sinh thái cá NXB Nông Nghiệp ` J R TOMASSO., 1986 Comparative Toxicity of Nitrite To Freshwater fishes, 129-137 Trương Quốc Phú, 2010 Một số lưu ý môi trường ao nuôi cá tra Chuyên ñề thủy sản Vemedim corporation & Khoa thủy sản trường Đại Học Cần Thơ, số ñặc biệt, 24-04-2010 Trang 4-7 26 William M Lewis, JR., and Donald P Morris., 1986 Toxcity of Nitrite to fish: A Review 115 : 183- 195 Wilfrid Marshall and Charles R Marshall 1943 The action of nitrite on blood 187- 208 10 Mai Diệu Quyên, 2010 Ảnh hưởng nitrite lên số tiêu sinh lý cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Luận văn Thạc sĩ Nuôi Trồng Thủy Sản Khoa Thủy Sản, Đại Học Cần Thơ 53 trang 11 Trần Cẩm Tú, 2010 Ảnh hưởng chlorine lên số tiêu sinh lý máu cá rô phi ( Oreochromis niloticus) Luận văn Thạc sĩ Nuôi Trồng Thủy Sản Khoa Thủy Sản, Đại Học Cần Thơ 63 trang 12 Lương Thị Diễm Trang, 2009 Ảnh hưởng Malachite green lên sinh lý, sinh hóa tồn lưu trre6n cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Luận văn Thạc sĩ Nuôi Trồng Thủy Sản Khoa Thủy Sản, Đại Học Cần Thơ 63 trang 13 Nguyễn Thị Kiêm Liêm, (1988) Ảnh hưởng thuốc Basudin 40ND lên tiêu sinh lý, huyết học men Actylcholinesterase cá rô phi (Oreochromis niloticus Bleeker) cá mè vinh (Puntius gonionontus Linacus) Luận văn tốt nghiệp Đại Học 83 trang 14 Nguyễn Thị Huyền, (2008) Thử nghiệm mơ hình xử lý nước ao ni cá tra (Pangasianodon Hypophthalmus) thâm canh phương pháp hóa sinh học Luận văn thạc sĩ 61 trang 15 Nguyễn Ngọc Hiền, (2007) Ảnh hưởng mật ñộ Enrofloxacin lên số tiêu sinh hóa cá tra (Pangasianodon Hypophthalmus) điều kiện thí nghiệm Luận văn tốt nghiệp Cao Học 56 trang 27 Cần thơ, ngày………… tháng…………năm 2011 Chữ ký CBHD Chữ ký sinh viên PGs.Ts Đỗ Thị Thanh Hương Nguyễn Thành Du 28 ... Đề Xuất - Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite lên trình tăng trưởng cá tra - Xác ñịnh mức ñộ ảnh hưởng nitrite ñối với số tiêu sinh hóa cá tra - Thí nghiệm mức độ ảnh hưởng nitrite cá tra có trọng lượng... lý mơi trường tốt hơn, nhằm hạn chế việc tích trữ nitrite ao ni cá tra 1.3 Nội dung đề tài Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite lên số tiêu sinh lý (tiêu hao oxy ngưỡng oxy) cá tra Xác ñịnh ảnh hưởng nitrite. .. nghiệm 4.2 Ảnh hưởng nitrite lên tiêu sinh lý 4.2.1 Ảnh hưởng nitrite lên tiêu hao oxy cá tra Tiêu hao oxy lượng oxy cần thiết cung cấp cho cá tính ñơn vị thời gian (mgO2/Kg/h) Đây tiêu quan trọng