Đang tải... (xem toàn văn)
1.1. Đặt vấn đề Chăn nuôi gia cầm là nghề truyền thống của nước ta và là nguồn thu nhập quan trọng đối với các hộ gia đình ở nông thôn. Ngành chăn nuôi gia cầm ở Việt Nam theo những tài liệu đ
http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Chăn nuôi gia cầm nghề truyền thống nước ta nguồn thu nhập quan trọng hộ gia đình nơng thơn Ngành chăn nuôi gia cầm Việt Nam theo tài liệu để lại có từ 3200 – 3500 năm trước (Nguyễn Đăng Vang 2002) Đối với nước có kinh tế 90 % sản xuất nông nghiệp Việt Nam chăn ni gia cầm khơng ngành khơng thể thiếu mà cịn đóng vai trò quan trọng cấu ngành nghề đất nước Theo số liệu thống kê thời điểm 01/10/2009 tổng cục thống kê, tổng đàn gia cầm Việt Nam có khoảng 280,18 triệu [29] Cùng với phát triển ngành nghề khác nước chăn ni gia cầm đà phát triển nhanh số lượng chất lượng Bên cạnh phát triển chăn ni gia cầm phải đối mặt với nhiều nguy cơ, có nguy xảy dịch cúm gia cầm A/H5N1 Dịch cúm gia cầm gây thiệt hại to lớn kinh tế, lẫn người Dịch cúm gia cầm xuất lần Việt Nam vào cuối tháng 12/2003, tỉnh Hà Tây, Long An Tiền Giang, sau lây lan sang nhiều tỉnh thành khác nước Trong vòng hai tháng dịch xuất 2.574 xã, phường thuộc 381 quận, huyện, thị xã 57 tỉnh, thành phố trực thuộc trung ương Tổng số gia cầm mắc bệnh, chết tiêu huỷ 43,9 triệu chiếm 16,9% tổng đàn, gà có 30,4 triệu thuỷ cầm 13,5 triệu Ngồi cịn có 14,76 triệu chim cút loài chim khác bị chết tiêu huỷ Cúm gia cầm bệnh truyền nhiễm nguy hiểm có tốc độ lây lan nhanh với tỷ lệ chết cao đàn gia cầm bị nhiễm bệnh Bệnh xảy khắp nơi giới, gây thiệt hại nặng nề mặt kinh tế có ảnh hưởng lớn đến tình hình kinh tế, trị, xã hội… Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao HPAI (High Pathogenic Avian Influenza) tổ chức dịch tễ giới (OIE) xếp vào bảng A bệnh truyền nhiễm nguy hiểm Từ cuối năm 2003 trở lại bệnh cúm gia cầm đã, dự đoán nhiều năm mối đe dọa nguy hiểm cho phát triển ngành chăn nuôi gia cầm nước ta cho sức khoẻ cộng đồng Do phịng chống dịch cúm gia cầm chương trình phịng chống dịch bệnh cấp quốc gia Ngoài biện pháp an toàn sinh học chăn nuôi tiêu huỷ đàn gia cầm http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl nhiễm bệnh, cấm lưu thông tiêu thụ, … việc sử dụng vaccine tiêm phịng để tạo đáp ứng miễn dịch chủ động chống lại bệnh cúm biện pháp hỗ trợ tích cực khơng thể thiếu việc phịng hạn chế bệnh Vì cơng tác phịng chống dịch việc giám sát khả đáp ứng miễn dịch với vaccine gia cầm nhiệm vụ bắt buộc Riêng tỉnh Nghệ An, kể từ năm 2007, dịch cúm gia cầm xảy làm chết tiêu hủy 66.281 Năm 2008 dịch xuất huyện Hưng Nguyên, Nghi Lộc, Quỳnh Lưu, Diễn Châu làm chết tiêu hủy 5.025 gia cầm Năm 2009 dịch xảy Đô Lương, số gia cầm ốm chết phải tiêu hủy 946 Chỉ tính riêng tháng đầu năm 2010 dịch lại xuất Nghi Lộc, Nam Đàn thành phố Vinh, tổng số gia cầm ốm chết buộc phải tiêu hủy 4.486 Trước tình hình chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài “Đánh giá khả đáp ứng miễn dịch đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 tỉnh Nghệ An” 1.2 Mục tiêu đề tài Mục tiêu đề tài xác định hiệu giá kháng thể gà, vịt sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 Qua đánh giá khả bảo hộ đàn gia cầm tiêm vaccine cúm năm 2009 tỉnh Nghệ An khuôn khổ dự án sử dụng vaccine cúm A/H5N1 giai đoạn III (2009 - 2010) quốc gia http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl PHẦN TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu chung bệnh cúm gia cầm 2.1.1 Khái niệm bệnh cúm gia cầm Bệnh cúm gia cầm (Avian Influenza) cịn gọi bệnh cúm gà hay cúm lồi chim Là bệnh truyền nhiễm gây virus cúm type A thuộc họ orthomyxoviridae Virus cúm gia cầm gây bệnh cho gà, vịt, ngan, ngỗng, gà tây, chim cút, đà điểu, loài chim cảnh chim hoang dã Và nguy hiểm bệnh lây sang người số loài thú khác Trước bệnh gọi bệnh dịch tả gà (fowl plague) từ hội nghị quốc tế lần thứ bệnh cúm gia cầm Beltsville - Mỹ năm 1981 thay tên tên bệnh cúm gia cầm độc lực cao (HPAI - Highty Pathogenic Avian Inluenza) để virus cúm type A có độc lực mạnh, gây lây lan nhanh, tỷ lệ tử vong cao [2] 2.1.2 Lịch sử bệnh cúm gia cầm Năm 412 trước công nguyên, Hippocrates mô tả bệnh cúm Năm 1680 vụ đại dịch cúm mô tả kỹ từ đến xảy 31 vụ đại dịch Trong 100 năm qua xảy vụ đại dịch cúm vào năm 1889, 1918, 1957, 1968 Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao (HPAI) phát lần Italia vào năm 1878 đặt tên bệnh dịch hạch gà, bệnh gây tỷ lệ tử vong cao đàn gia cầm Đến năm 1901, virus bệnh nguyên Centanny Samnozzi xác định tác nhân virus qua lọc Nhưng phải đến năm 1955 xác định virus virus cúm type A (H7N1 H7N7) gây chết nhiều gà, gà tây loài khác Qua nhiều năm nghiên cứu nhà khoa học phát bệnh dịch nghiêm trọng xảy với gà chủng gây bệnh cao thuộc phân type H5 H7 Scotland năm 1959 H5N1, Mỹ năm 1983 - 1984 H5N2 Cuối thập kỷ 60, phân type H1N1 phát lợn có liên quan đến ổ dịch gà tây với biểu đặc trưng triệu chứng đường hô hấp giảm đẻ [2] http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Vào kỷ 20, bệnh xuất hầu Châu Âu, Nga, Bắc Phi, Trung Đông Châu Á, Nam Bắc Mỹ Virus cúm gia cầm subtype H5 tìm thấy Canada vào năm 1966 vùng Wisconsin thuộc nước Mỹ năm 1968 Từ năm 1977, nhiều subtype thuộc virus cúm A H5 H7 phân lập mô tả Trong năm 1972, virus cúm gia cầm phát từ vịt chạy đồng qua chương trình giám sát virus bệnh Newcastle theo dõi chim hải âu Australia Đầu năm 1996, bệnh cúm gia cầm thông báo ngỗng Năm 1997, dịch xảy Hồng Kông, xác định virus H5N1 gây phải tiêu huỷ khoảng 1,5 triệu gà [26] 2.1.3 Tình hình dịch bệnh cúm A/H5N1 giới Cúm A/H5N1 virus có độc lực cao, gây bệnh người vụ dịch cúm gà năm 1996 - 2008, đặc biệt ác liệt virus cúm A/H5N1 thể độc lực cao (HPAI, highly pathogenic avian influenza) gây kể từ năm 2003 phát sinh nhiều nhóm, phân nhóm (clade) có độc lực cao Chủng virus cúm A/H5N1 phát lần gây bệnh dịch gà Scotland vào năm 1959 Từ nay, H5 N1 có thay đổi lớn xét cấu trúc thành phần gen kháng nguyên miễn dịch Sau gần 40 năm không phát hiện, cúm A/H5N1 xuất Quảng Đông (1996), Hồng Kông (1997) với biến đổi sâu sắc, gây chết gia cầm mà cịn thích ứng gây chết người bệnh Có thể coi dòng virus cúm A/H5N1 từ 1996 đến cúm A/H5N1 đại xuất Đặc biệt, từ 2003 đến nay, virus H5N1 gây dịch cúm gia cầm Hồng Kông, Trung Quốc lây lan sang hàng chục quốc gia giới châu Á, châu Âu châu Phi Cúm A/H5N1 giai đoạn 2003 đến nay, cấu trúc trước đó, xét độc lực (tính gây bệnh), lồi vật chủ nhiễm bệnh, tính kháng ngun - miễn dịch mức độ truyền lây có nhiều nét đặc trưng khác với nhiều biến chủng H5N1 trước Từ cuối 2005, cúm A/H5N1, chủ yếu chủng virus thuộc phân dòng Thanh Hải (nguồn gốc vùng Bắc Trung Quốc) bắt đầu lan sang số nước vùng Trung Á, có Nga, tràn ngập Đông Âu xâm nhập vào nước vùng Tiểu Á, bao gồm Thổ Nhĩ Kỳ, nước Bắc- Trung Phi, đặc biệt Ai Cập Nigeria nước chịu thiệt hại nhiều Nhằm ngăn chặn dịch bệnh lây lan, mười năm qua, giới có hàng trăm triệu gia cầm bị tiêu hủy, gây thiệt hại nặng nề cho ngành chăn nuôi kinh tế Đặc biệt, số người nhiễm tử vong virus cúm A/H5N1 năm cao hơn, theo thống kê số người bị nhiễm cúm gia http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl cầm H5N1 báo cáo với Tổ chức Y tế giới (WHO), từ năm 2003 đến tháng 6/2008, có tới 385 trường hợp mắc cúm A/H5N1, đó, 243 trường hợp tử vong chiếm tới 63,11% Việt Nam Indonesia quốc gia có số người nhiễm tử vong cao virus cúm A/H5N1 giới Trong số 16 nước có người chết cúm gia cầm, Indonesia Việt Nam WHO xác định quốc gia “điểm nóng” cúm A/H5N1 có điều kiện thuận lợi để tiến hóa thích nghi lây nhiễm trở thành virus người [24] 2.1.4 Tình hình dịch bệnh cúm A/H5N1 Việt Nam Dịch cúm gia cầm A/H5N1 bùng phát Việt Nam vào cuối tháng 12/2003 tỉnh phía Bắc, sau nhanh chóng lan tới hầu hết tỉnh/thành nước thời gian ngắn Đây lần dịch cúm gia cầm A/H5N1 xảy Việt Nam, có tới hàng chục triệu gia cầm bị tiêu hủy, gây thiệt hại nặng tới kinh tế quốc dân Tính đến cuối năm 2009, dịch cúm gia cầm liên tục tái bùng phát hàng năm nhiều địa phương nước, phân chia thành đợt dịch lớn sau: Từ cuối tháng 12 năm 2003 đến hết tháng 01 năm 2004: Cuối tháng 12 năm 2003 dịch cúm gia cầm xuất tỉnh Hà Tây, Tiền Giang, Long An sau lây nhanh sang tỉnh An Giang, Vĩnh Long, Bến Tre, Đồng Tháp, Cần Thơ, Hậu Giang Giữa tháng năm 2004 dịch xảy Thành Phố Hồ Chí Minh tỉnh miền Đơng Nam Bộ Bình Dương, Tây Ninh, Đồng Nai Tại miền Bắc dịch xuất Hà Nội, Bắc Ninh, Nam Định, Sơn La, Hòa Bình, Thanh Hóa, Hà Nam, Phú Thọ tiếp tỉnh miền Trung Tây Nguyên [11] Từ ngày 01 đến ngày10 tháng năm 2004: Dịch bùng phát nhanh, xảy quy mô lớn diễn biến phức tạp Bình qn ngày có khoảng 150 - 230 xã, 15 - 20 huyện phát sinh ổ dịch phạm vi nước Ngày cao điểm có 267 xã, 20 huyện thị phát sinh ổ dịch Số gia cầm phải tiêu hủy hàng ngày từ - triệu con, ngày cao điểm 06/02/2004 phải tiêu hủy đến triệu [11] Từ ngày 11 tháng 02 đến ngày 27 tháng năm 2004: Tính đến ngày 27 tháng 02 dịch bệnh xảy 2.574 xã, phường (chiếm 24.6 % số xã, phường), 381 huyện, thị (chiếm 60 %) thuộc 57 tỉnh, thành phố [11] Tình hình dịch năm 2005: Được chia làm nhiều đợt nhỏ: http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Đợt dịch thứ nhất: Từ ngày 01/01 - 29/04, dịch xẩy 670 xã 182 huyện thuộc 35 tỉnh, thành phố nước Tổng số gia cầm mắc bệnh, chết tiêu hủy 1.847.213 con, đó: 470.495 gà, 825.689 vịt, ngan 551.029 chim cút Đợt 2: Từ ngày 29/06 - 32/08, dịch xẩy 14 xã, 12 huyện thuộc tỉnh, thành phố Số gia cầm tiêu hủy 12.164 5.294 gà 6.870 vịt, ngan Đợt 3: Từ ngày 01/10 - 15/12, dịch xẩy 305 xã, phường 108 quận, huyện thuộc 24 tỉnh, thành phố Số gia cầm tiêu hủy 3.972.943 con, 1.338.523 gà, 2.135.116 vịt, ngan 499.304 chim cút, bồ câu, chim cảnh Đợt dịch cuối năm: Dịch xẩy chủ yếu đàn gia cầm chăn nuôi nhỏ lẻ chưa bảo hộ vaccine [11] Tình hình dịch cuối năm 2006 đầu 2007: Đợt 1: Từ ngày 06/12/2006 - 07/03/2007, dịch xẩy 83 xã, phường 33 huyện, quận thuộc 11 tỉnh, thành Tổng số gia cầm mắc bệnh, chết tiêu hủy 103.094 con, 13.622 gà, 89.472 vịt, ngan Hai tỉnh nặng Cà Mau Bạc Liêu Đợt 2: Từ 01/05 - 23/08/2007, dịch xẩy 167 xã, phường 70 huyện, quận thuộc 23 tỉnh, thành Tổng số gia cầm mắc bệnh chết tiêu hủy 2.294.849 con, 21.525 gà, 264.549 vịt, 8.775 ngan Dịch nặng Nghệ An, Nam Định Điện Biên Dịch tái phát lại vào ngày 01/10/2007 15 xã huyện thuộc tỉnh Tổng số gia cầm mắc bệnh, chết, tiêu hủy 8.850 con, 1.024 gà, 7.826 vịt [11] Từ đầu tháng đến 21/06/2007: Dịch xẩy 60 xã 18 tỉnh nước Nghệ An sau đến Nam Định, Bắc Giang, Đồng Tháp, Cần Thơ, Ninh Bình, Vĩnh Phúc, Hà Nam, Quảng Nam, Hưng Yên, Thái Bình, Phú Thọ, Hà Tĩnh, Cao Bằng [11] Từ cuối năm 2007 đến đầu 2008: Dịch cúm gia cầm xuất 17 tỉnh, thành nước gồm Hà Nội, Hà Nam, Hải Dương, Lào Cai, Long An, Nam Định, Ninh Bình, Phú Thọ, Quảng Bình, Quảng Nam, Quảng Ninh, Quảng Trị, Sóc Trăng, Thái Nguyên, Trà Vinh, Tuyên Quang, Vĩnh Long [11] Tình hình dịch năm 2008: http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Năm 2008 dịch cúm gia cầm xuất 80 xã thuộc 54 huyện, quận, thị xã 27 tỉnh, thành phố Tổng số gia cầm chết buộc phải tiêu hủy 106.580 (gồm gà, ngan, vịt) [28] Tình hình dịch năm 2009: Năm 2009, dịch cúm gia cầm xảy 68 xã, phường, thị trấn 34 huyện, thị xã thuộc 17 tỉnh, thành với tổng số gia cầm mắc bệnh, chết tiêu hủy 127.000 [25] 2.1.5 Những kết nghiên cứu đạt bệnh cúm gia cầm Việt Nam [5] 2.1.5.1 Sự lưu hành virus cúm gia cầm Việt Nam Virus cúm gia cầm H5N1 gây bệnh cho gia cầm Việt Nam có nguồn gốc từ Trung Quốc thuộc gennotyp Z Trong năm ổ dịch, virus tiếp tục xâm nhập từ Trung Quốc vào Việt Nam, thơng qua đường nhập lậu gia cầm Loại virus xâm nhập sau này, gennotyp Z có gennotyp G (loại virus chuyên lưu hành Quảng Tây Hồ Nam (Trung Quốc)) Virus lưu hành Việt Nam biến đổi cấu trúc di truyền Chỉ riêng đoạn gen vị trí tách (cleavage site) có cấu trúc khác Các loại virus lưu hành Việt Nam bao gồm H3, H4, H5, H6, H9, H11 H12 Sự biến đổi di truyền virus cúm H5N1 Việt Nam xảy vị trí thụ thể virus với tế bào Virus H5N1 gây bệnh cho gia cầm năm 2003 tiếp tục tồn Việt Nam Các loại virus lưu hành phía Nam phát triển thành nhóm riêng (nhóm S), khác với nhóm virus (nhóm N) lưu hành phía Bắc Virus cúm H5N1 có tính kháng ngun đa dạng từ xuất Việt Nam xuất số chủng có tính kháng ngun hồn tồn khác phân vào nhóm kháng nguyên HA Clade Genotyp G Mặc dù lợn động vật mẫn cảm với virus cúm nơi gây tổ hợp virus cúm H5N1 với virus cúm người để tạo chủng virus gây đại dịch Nhưng nghiên cứu cho thấy tỷ lệ lợn nhiễm virus H5N1 thấp Nói cách khác khả nhiễm phát bệnh lợn H5N1 không đáng kể Hơn lợn gây bệnh thực nghiệm không phát bệnh lâm sàng không làm lây lan virus sang lợn tiếp xúc Virus H5N1 tồn lâu môi trường so với loại virus cúm khác Điều quan trọng điều kiện mơi trường bình thường (nước sơng suối, http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl nhiệt độ 20 - 300C) virus bị hoạt lực sau 90 giờ, mơi trường có chất hữu virus tồn lâu Đối với virus thể gia cầm bệnh chơn đất chúng giữ tính gây nhiễm khơng q ngày Để làm nâng cao tính nhạy cảm phương pháp chẩn đoán nên chẩn đoán virus cúm phương pháp RT-PCR, xác định virus type A trước (thông qua xác định gen M) sau xét nghiệm đặc tính subtype khác Đã phát cầy hương rừng Cúc Phương bị chết virus H5N1 Điều cho thấy cần phải có biện pháp an toàn sinh học cho vườn quốc gia sở thú Đã chế tạo thành công kháng nguyên HA H5N1 dùng giám sát huyết cúm gia cầm Mặt khác chế tạo thành công kháng huyết kháng H5N1 dùng nghiên cứu chẩn đoán bệnh Đã khảo sát chất sát trùng Alpha Terpineol từ tinh dầu tràm có khả sát khuẩn làm giảm nhân lên virus H5N1 môi trường tế bào 2.1.5.2 Kết nghiên cứu phát triển vaccine phòng bệnh cúm gia cầm Việt Nam Đã nghiên cứu thành công: - Quy trình sản xuất vaccine cúm A/H5N1 - Quy trình bảo quản sử dụng vaccine cúm A/H5N1 - Quy trình tiếp truyền giống gốc sản xuất giống cấp 2.2 Đặc điểm virus học virus cúm A phân type H5N1 gây bệnh gia cầm 2.2.1 Phân loại Virus nói riêng virus cúm nói chung thường phân loại chủ yếu theo tính kháng nguyên Khi dùng phản ứng kết tủa thạch kết hợp bổ thể người ta thấy có nhóm virus khác đặt tên cho nhóm virus A, B, C Dùng phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu người ta thấy virus type A lại có nhiều loại khác Trên sở kết phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu, phát kháng thể kháng ngưng kết hồng cầu kháng thể tạo để chống lại protein HA khơng ức chế tồn virus type A Từ virus type A chia type phụ (subtype) sở có phản ứng HI đặc hiệu Cho đến năm 2004 tổng số subtype chia theo khả ngưng kết hồng cầu 16 Cũng với protein NA, người ta phát loại NA có tính kháng ngun khác đặt tên từ N1 N9 Virus cúm type A kết tổ hợp loại protein Chính có virus cúm đặt tên HxNy Việc phân loại virus ủy ban định danh quốc tế tiến hành [6] http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Các loại virus cúm đa dạng, chúng có danh hiệu khơng có nguồn gốc gen di truyền chúng có khác Với virus H5N1 gây bệnh đại dịch cho gia cầm, có nguồn gốc từ Châu Á gọi tên đầy đủ "virus H5N1 dòng Châu Á" nhằm phân biệt với loại H5N1 khác Virus H5N1 lại phân loại chi tiết Có kiểu phân loại virus cúm dịng Châu Á (theo quy định WHO) là: Phân loại theo kiểu gen: Virus cúm dòng Châu Á phải có đoạn RNA chịu trách nhiệm tổng hợp protein HA NA có nguồn gốc từ virus cúm H5N1 phân lập từ ngỗng Quảng Đông (Trung Quốc) vào năm 1996 Tùy theo nguồn gốc đoạn gen lại mà người ta đặt tên cho kiểu gen virus Tại Việt Nam phát có kiểu gen, Z, G, V Phân loại theo nhóm kháng nguyên: Do biến đổi di truyền liên tục nên protein HA virus cúm H5N1 dòng Châu Á có tính kháng ngun thay đổi Bằng phản ứng HI xác định hiệu giá kháng thể loại virus cúm H5N1 dịng Châu Á virus cúm có hiệu giá kháng thể chênh lệch không 1log phân vào nhóm kháng nguyên Khi hiệu giá HI lệch 2log trở lên virus thuộc nhóm kháng nguyên khác Hiện có đến nhóm kháng nguyên khác [6] 2.2.2 Tên gọi virus cúm A/H5N1 Tên virus cúm đặt theo quy ước quốc tế bắt đầu type virus, subtype (nghĩa theo tên gọi protein HA NA) Như viết: virus type A H5N1 Tên chủng virus viết tên type, tên lồi động vật mà từ virus phân lập, tên địa phương nơi phân lập (tên nước, tên tỉnh, tên bang), sau ký hiệu riêng phịng thí nghiệm nơi phân lập được, năm phân lập để ngoặc tên chung virus Ví dụ: A/DK/VNM/450/06[H5N1] Riêng với virus cúm phân lập từ người khơng cần để tên động vật nữa, ví dụ A/Việt Nam/1303/03[H5N1] [6] 2.2.3 Cấu trúc virus cúm A/H5N1 2.2.1.1 Cấu trúc chung [6] Vius cúm gà có tên khoa học Avian Influenza virus, thuộc họ Orthomyxoviridae, họ virus đa hình thái, có vỏ ngồi, genome RNA đơn Hạt virus có dạng hình khối trịn hình trứng dạng khối kéo dài, đường kính khoảng 80 - 120nm, nhiều virus có dạng hình sợi dài đến vài µm Phân tử lượng hạt virus khoảng 4,6 - 6,4 Dalton http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Vỏ virus màng lipid Trên màng có hai loại protein Hemagglutinin (HA) Neuraminidase (NA) Bên virus có hai thành phần gồm axit nhân loại RNA protein RNA virus cúm sợi đơn gồm đoạn riêng biệt, sợi RNA bao bọc protein chủ yếu NP (Nucleoprotein) protein M (Mactrix) tạo Nucleocapsid Các protein virus bao gồm có chức sau: HA: Là trimer có chất glycoprotein type1 có chức bám dính vào thụ thể tế bào NA: Là tetramer có nhiệm vụ cắt axit sialic, giúp HA gắn vào thụ thể giúp giải phóng RNA từ endosom (thể nội bào) tạo hạt virus M2: Là tetramer có chức tạo khe H+ nhằm giúp cởi vỏ virus M1: Tập hợp thành phần virus gây tượng nảy chồi để giải phóng virus hình thành PB1, PB2, NP PA: Có nhiệm vụ bảo vệ, chép phiên dịch RNA NS2 kết hợp với M1 có nhiệm vụ chuyển RNA từ nhân tế bào ngồi ngun sinh chất NS2 protein khơng cấu trúc (không đơn vị tạo thành hạt virus) tổng hợp q trình nhân lên virus có nhiệm vụ cắt xén RNA kích thích phiên mã trình nhân lên virus 2.2.1.2 Cấu trúc gennom [24] Hệ gen virus cúm chứa Axit ribonucleic (RNA) sợi, có cấu trúc sợi âm, ký hiệu SS (-) RNA (Negative single stranded RNA) Sợi âm RNA có độ dài 10.000 - 15.000 nucleotit, không nối với tạo thành sợi RNA hoàn chỉnh mà phân chia thành - phân đoạn có cấu trúc riêng biệt, mà phân đoạn gen chịu trách nhiệm cho loại protein virus Phân đoạn - mã hóa cho protein PB1, PB2 PA loại protein có chức Enzyme polymeraza, PB1 có phân tử lượng tính tốn 87 x 103 Da, PB2 có phân tử lượng tính tốn 84 x 103 Da PA có phân tử lượng tính tốn 83 x 103 Da Phân đoạn mã hóa cho protein hemagglutinin (HA) với phân tử lượng 63 x 103 Da (khơng glycosyl hóa), 72 x 103 Da glycosyl hóa Phân đoạn mã hóa cho protein nucleoprotein (NP) với phân tử lượng tính tốn 56 x 103 Da 10 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Bảng 6: Đánh giá khả miễn dịch gà vịt sau tiêm phịng theo quy mơ chăn nuôi Gà Vịt Số Số Tỷ lệ mẫu mẫu bảo kiểm bảo hộ tra hộ (%) < 200 210 79 37,62 200 - 500 390 291 >500 - - Quy mô (con) Số Số Tỷ lệ mẫu mẫu bảo kiểm bảo hộ tra hộ (%) 3,22 270 112 41,48 4,54 74,62 16,91 210 135 64,29 13,21 - - 120 106 88,33 36,97 GMT GMT Qua bảng ta thấy: * Đối với gà: - Ở đàn gà quy mô < 200 con: Trong tổng số 210 mẫu huyết lấy từ đàn gà nuôi theo quy mơ nhỏ có 79 mẫu có hiệu giá kháng thể đạt mức bảo hộ (chiếm 37,62%), với GMT 3,22 Phân bố hiệu giá kháng thể đạt ngưỡng bảo hộ sau: Ở 4log2: 26 mẫu, 5log2: 21mẫu, 6log2: 18 mẫu, 7log2: mẫu, 8log2: mẫu, 9log2: mẫu, 10log2: mẫu Như vậy, phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà quy mô < 200 chủ yếu tập trung mức 4log2 5log2 - Ở đàn gà quy mô từ 200-500 con: Có 291 mẫu huyết có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2 tổng số 390 mẫu kiểm tra (chiếm 74,62%), GMT 16,91 Sự phân bố hiệu giá kháng thể quần thể gà đạt ngưỡng bảo hộ sau: Ở 4log2: 76 mẫu, 5log2: 87 mẫu, 6log2: 61 mẫu, 7log2: 41 mẫu, 8log2: 18 mẫu, 9log2: mẫu, 10log2: mẫu Như vậy, phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà quy mô 200-500 chủ yếu tập trung mức 4log2 5log2 Phân bố cao log2 - Quy mô đàn gà 500 có số mẫu xét nghiệm 53 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Qua phân tích cho thấy, đàn gà có quy mơ vừa có tỷ lệ bảo hộ (74,62%) giá trị trung bình nhân hiệu giá kháng thể (16,91) cao đàn gà nuôi theo quy mơ nhỏ (có tỷ lệ bảo hộ 37,62% GMT = 3,22) * Đối với vịt: - Ở đàn vịt có quy mơ nhỏ (< 200 con): Có 112/270 mẫu có hiệu giá kháng thể đạt mức bảo hộ, chiếm tỷ lệ 41,48%, GMT 4,54 Các hiệu giá kháng thể đạt ngưỡng bảo hộ phân bố sau: Ở 4log2: 34 mẫu, 5log2: 38 mẫu, 6log2: 23 mẫu, 7log2: mẫu, 8log2: 11 mẫu, 9log2: mẫu, 10log2: mẫu Như phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt quy mô < 200 chủ yếu tập trung mức 4log2 5log2 - Ở đàn vịt có quy mơ vừa (200 - 500 con): Có 135/210 mẫu xét nghiệm có hiệu giá kháng thể đạt ngưỡng bảo hộ, đạt tỷ lệ bảo hộ 64,29%, GMT 13,21 Phân bố hiệu giá kháng thể đạt ngưỡng bảo hộ sau: Ở 4log2: 29mẫu, 5log2: 32 mẫu, 6log2: 26 mẫu, 7log2: 27 mẫu, 8log2: 15 mẫu, 9log2: mẫu, 10log2: mẫu Như phân bố hiệu giá kháng thể đồng tập trung nhiều mức 5log2 - Ở đàn vịt có quy mơ lớn (trên 500 con): Trong tổng số 120 mẫu xét nghiệm có 106 mẫu có hiệu giá kháng thể đạt mức bảo hộ, chiếm tỷ lệ 88,33%, GMT 36,97 Sự phân bố hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ sau: Ở 4log2: 16 mẫu, 5log2: 28 mẫu, 6log2: 36 mẫu, 7log2: 19 mẫu, 8log2: mẫu, 9log2: mẫu, 10log2: mẫu Như phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt quy mô 500 chủ yếu tập trung mức 5log2 6log2, phân bố cao 7log2 Qua kết so sánh tỷ lệ bảo hộ vịt theo quy mô chăn nuôi ta thấy: Đàn vịt nuôi theo quy mô nhỏ, tỷ lệ bảo hộ đàn giá trị trung bình nhân hiệu giá kháng thể thấp (tỷ lệ bảo hộ đạt 41,48%, GMT đạt 4,54) Cao đàn vịt nuôi theo quy mô lớn (tỷ lệ bảo hộ đạt 88,33% GMT đạt 36,97) Kết nói lên quy mơ ni có ảnh hưởng đến khả đáp ứng miễn dịch gà vịt Tỷ lệ gà vịt bảo hộ quy mô vừa lớn cao gà vịt nuôi theo 54 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl quy mơ nhỏ Sự khác biệt gà, vịt ni theo quy mơ nhỏ hầu hết đàn gà, vịt thả vườn hộ gia đình với số lượng ít, chăn ni chủ yếu với mục đích tự cung, tự cấp, phần nhỏ mục đích kinh tế Vì vậy, người dân chưa quan tâm nhiều đến việc chăm sóc, ni dưỡng phịng bệnh cho gia cầm Chế độ dinh dưỡng cho đàn gia cầm không đảm bảo, đặc biệt phần protein Điều làm giảm khả đáp ứng miễn dịch gia cầm Cơng tác tiêm phịng cho đàn gia cầm gặp nhiều khó khăn, tỷ lệ gia cầm tiêm phịng đàn thường thấp Ngồi lọ vaccine đóng chai với liều lớn (500liều/ lọ) mà với số lượng gia cầm/ hộ nên sau mở nắp lọ vaccine phải sử dụng thời gian dài hơn, việc bảo quản vaccine trình tiêm lại chưa đảm bảo nên hiệu lực vaccine bị giảm Còn đàn gà, vịt ni theo quy mơ lớn thường chủ yếu mục đích kinh tế nên có đầu tư kỹ thuật hơn, việc chăm sóc tốt hơn, chế độ dinh dưỡng đảm bảo hơn, người chăn nuôi hiểu biết hơn, ý thức cao nguy hiểm dịch bệnh (thiệt hại dịch bệnh gây cho đàn gia cầm có quy mô lớn lớn nhiều so với đàn gia cầm có quy mơ nhỏ) Vì họ ý thức vấn đề phòng bệnh cho đàn gia cầm Ngồi với số lượng đàn gia cầm lớn cơng tác tiêm phòng thuận lợi hơn, tỷ lệ gia cầm tiêm/đàn cao hơn, thời gian sử dụng lọ vaccine ngắn nên hiệu cơng tác tiêm phịng đạt cao 55 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết đạt trình nghiên cứu chúng tơi có số kết luận sau: - Tỷ lệ bảo hộ đáp ứng miễn dịch sau tiêm phòng đàn gia cầm tỉnh Nghệ An đợt tiêm phòng năm 2009 thấp: + Đối với gà: Đợt 1: Tỷ lệ bảo hộ 61,67%, GMT = 9,46 Đợt 2: Tỷ lệ bảo hộ 64,63%, GMT = 11,96 + Đối với vịt: Đợt 1: Tỷ lệ bảo hộ 58,83%, GMT = 10,03 Đợt 2: Tỷ lệ bảo hộ 42,12%, GMT = 3,95 - Tỷ lệ bảo hộ vịt thấp gà - Quy mơ ni có ảnh hưởng đến khả đáp ứng miễn dịch gà vịt: gà, vịt nuôi với quy mô vừa lớn có tỷ lệ bảo hộ giá trị trung bình nhân hiệu giá kháng thể cao quy mô nhỏ + Đối với gà: Quy mơ lớn: Khơng có mẫu huyết kiểm tra Quy mô vừa: Tỷ lệ bảo hộ 74,62% , GMT = 16,91 Quy mô nhỏ: Tỷ lệ bảo hộ 37,62%, GMT = 3,22 + Đối với vịt: Quy mô lớn: Tỷ lệ bảo hộ 88,33% , GMT = 36,97 Quy mô vừa: Tỷ lệ bảo hộ 64,29% , GMT = 13,21 Quy mô nhỏ: Tỷ lệ bảo hộ 41,48%, GMT = 4,54 5.2 Đề nghị Qua trình nghiên cứu tìm hiểu tình hình thực tế địa phương chúng tơi có số kiến nghị sau: - Cần tiếp tục cho thực đề tài hàng năm địa phương khác để có biện pháp phòng chống dịch cúm gia cầm hiệu 56 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl - Tỷ lệ bảo hộ đàn gia cầm số huyện địa bàn tỉnh Nghệ An thấp Vì cần tổ chức tiêm phịng nhắc lại cho đàn gia cầm đồng thời tiến hành tiêm phòng bổ sung cho đàn gia cầm nhập - Tổ chức tốt công tác tiêm phòng nâng cao chất lượng tiêm phòng - Giám sát chặt chẽ đàn gia cầm sau tiêm phịng quản lý đàn gia cầm ni - Tăng cường tuyên truyền, nâng cao ý thức người chăn ni cơng tác tiêm phịng - Tập huấn, nâng cao tay nghề cho đội ngũ thú y sở 57 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt [1] Bùi Quang Anh, Văn Đăng Kỳ, Bệnh cúm gia cầm: Lưu hành bệnh, chẩn đoán kiểm sốt dịch bệnh, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XI, số 3, 2004, 69 - 75 [2] Trần Hữu Cổn, Bùi Quang Anh, Bệnh cúm gia cầm biện pháp phịng chống, NXB Nơng Nghiệp - Hà Nội, 2004, - 33 [3] Ban đạo quốc gia phòng chống dịch cúm gia cầm, Sổ tay giám sát bệnh cúm gia cầm, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2007, 11 - 12 [4] Bùi Bá Bổng, Bùi Quang Anh, Trần Kim Anh, Lê Văn Bầm, Trương Văn Dung, Phạm Văn Đông, Đậu Ngọc Hào, Văn Đăng Kỳ, Hoàng Văn Năm, Lê Thị Kim Oanh, Nguyễn Thanh Sơn, Cẩm nang phòng chống bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao (H5N1), NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2007, - 9, 25 - 30 [5] Trương Văn Dung, Những kết đạt bệnh cúm gia cầm Việt Nam, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XV, số 4, 2008, - [6] Nguyễn Tiến Dũng, Vài nét virus cúm gia cầm H5N1, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XV, số 4, 2008, 80 - 86 [7] Marie Edan, Thomas Delquigny, Hồng Hải Hóa, Patrice Gautier, Điều tra dịch tễ, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2007, 18 [8] Marie Edan , Thomas Delquigny, Hoàng Hải Hóa, Patrice Gautier, Chẩn đốn cúm gia cầm, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2007, - 21, 27 - 28 [9] Trần Xuân Hạnh, Một vài vấn đề phịng bệnh virus cúm gia cầm vaccine, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XI, số 3, 2004, 84 - 85 [10] Trần Thị Hồi, Thơng tin chăn nuôi - thú y - Hội chăn nuôi Thừa Thiên Huế, 2003, 30 31 [11] Văn Đăng Kỳ, Diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam giải pháp phịng chống, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XV, số 4, 2008, 87 - 89 [12] Lê Văn Năm, Kết khảo sát biểu lâm sàng bệnh tích đại thể bệnh cúm gia cầm số sở chăn ni tỉnh phía Bắc, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XI, số 3, 2004, 87 - 89 58 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl [13] Phạm Hồng Sơn, Nghiên cứu tạo kháng nguyên ngưng kết hồng cầu gián tiếp gắn virus cúm A vận dụng chẩn đốn bệnh cúm gia cầm, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XVI, số 2, 2009, 12 - 22 [14] Tô Long Thành, Miễn dịch chống virus, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XVI, số 2, 2009, 77 - 89 [15] Tô Long Thành, Các loại vaccine cúm gia cầm đánh giá hiệu tiêm phịng, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XIV, số 2, 2007, 84 - 90 [16] Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài, Nguyễn Văn Tó, Bệnh cúm H5N1 gà chim, NXB Lao động, Hà Nội, 2006 [17] Tin khoa học kỹ thuật cúm gia cầm, Tại virus cúm có tính lây nhiễm cao nhiệt độ lạnh mùa đơng?, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XV, số 4, 2008, 92 - 93 [18] Trung tâm chẩn đoán thú y trung ương, Các phương pháp chẩn đoán, xét nghiệm bệnh cúm gia cầm, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2004, 5, 33 - 38 [19] Trung tâm chẩn đoán thú y trung ương, Tài liệu giám sát bệnh cúm gia cầm, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội, 2004, - Các trang web tiếng việt [20] Cục thú y, 2009 Báo cáo dịch cúm gia cầm biện pháp phòng dịch http://www.cucthuy.gov.vn [21] Cục thú y, 2005, Quy trình chẩn đốn bệnh cúm gia cầm http://www.cucthuy.gov.vn [22].http://www.benhcum.com/kien-thuc-ve-benh-cum/240-benh-cum-gia-cam-h5n1.htm/ [23] Nguyễn Quốc Bình, Vũ Thủy Tiên, Thơng tin chung hướng giải pháp vaccine cúm gia cầm TrungtmcngnghsinhhcThnhPhHChMinh_htm.zip - ZIP archive, unpacked size 12,681 bytes [24] Le Thanh Hoa*, Dinh Duy Khang, Phan Văn Chi, Nong Van Hai, Truong Nam Hai, Pham Viet Cuong, Nguyen Thi Bich Nga, Le Tran Binh, Tổng quan virus cúm A/H5N1: vấn đề dịch tễ học, tiến hóa, hình thành genotype tương đồng kháng nguyên-miễn dịchvaccine Institute of Biotechnology http://www.impe-qn.org.vn/impe-qn/vn/portal/InfoDetail.jsp?area=58&cat=1101&ID=3194 [25] http://travinh.gov.vn/ * 59 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl [26] Phát virus cúm gia cầm lây nhiễm chó http://www.baotructuyen.com/c10/A535577/ [27] Tình hình dịch bệnh gia súc, gia cầm năm 2008 biện pháp phòng chống dịch năm 2009 http://sonongnghiep.binhduong.gov.vn/thuy/tintuc/chitiettintuc/tabid/1291/ [28] Tổng đàn gia cầm đàn lợn tăng trưởng http://vovnews.vn/Home/Tong-dan-gia-cam-va-dan-lon-tang-truong-kha/20101/130971.vov [29] H.Y (2005), Dịch cúm gia cầm Việt Nam http://vietnamnet.vn/dichcumga/tulieu/2005/10/504128/ Các trang web tiếng Anh [30] Tien Dung Nguyen, The Vinh Nguyen, Dhanasekaran Vijaykrishna, Robert G Webster, Yi Guan, J.S Malik Peiris and Gavin J.D Smith (2008), Multiple sublineages of Influenza A virus (H5N1), Vietnam, 2005-2007 http://www.cdc.gov/eid/content/14/4/632.htm [31] Jennifer L Mckimm-Breschkin, Paul W Selleck, Tri Bhakti Usman, and Michael A Johnson, Reduced sensitivity of Influenza A (H5N1) to Oseltamivir http://www.cdc.gov/eid/content/13/9/1354.htm [32] Avian Influenza-Highly Pathogenic (HPAI), Fowl Plague http://www.thepoultrysite.com/diseaseinfo/62/avian-influenzahighly-pathogenic-hpai-fowlplague 60 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl MỤC LỤC Trang TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 1: Kết kiểm tra khả đáp ứng miễn dịch gà sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 đợt Bảng 2: Kết kiểm tra khả đáp ứng miễn dịch vịt sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 đợt Bảng 3: Kết kiểm tra khả đáp ứng miễn dịch gà sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 đợt Bảng 4: Kết kiểm tra khả đáp ứng miễn dịch vịt sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 đợt Bảng 5: Kết tổng hợp khả đáp ứng miễn dịch gà vịt Bảng 6: Đánh giá khả miễn dịch gà vịt sau tiêm phòng 62 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Các dạng hình thái khác kính hiển vi điện tử (A), mơ hình cấu tạo hạt virus (B), cấu trúc phức hợp ribonucleoprotein RNP (C) virus cúm A .11 Hình 2: Cơ chế xâm nhiễm nhân lên virus cúm A tế bào chủ 14 Hình Mối quan hệ lây nhiễm thích ứng loài vật chủ virus cúm A 63 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl 64 http://svnonglam.org - http://facebook.com/windsvnl Lời cảm ơn Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp hồn thành khóa học năm qua, thân em nhận dìu dắt, dạy bảo tận tình q thầy giáo khoa Chăn ni - Thú y nói riêng Trường đại học Nơng lâm nói chung Đặc biệt thầy giáo Th.S Trần Quang Vui trực tiếp hướng dẫn, bảo, giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu đề tài Em xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ quý báu đó! Em xin chân thành cảm ơn ban lãnh đạo, cán công chức Cơ quan thú y vùng III hết lòng giúp đỡ, tạo điều kiện cho em thực đề tài suốt thời gian thực tập tốt nghiệp Mặc dù có nhiều cố gắng kiến thức, lực kinh nghiệm nghiên cứu thân hạn chế, thời gian thực tập không nhiều nên tránh khỏi sai sót Kính mong nhận đóng góp ý kiến q thầy giáo bạn để khóa luận tốt nghiệp hồn thiện Xin chân thành cảm ơn! Sinh viên thực tập HOÀNG THI MAI 65 ... tài ? ?Đánh giá khả đáp ứng miễn dịch đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm A/H5N1 tỉnh Nghệ An? ?? 1.2 Mục tiêu đề tài Mục tiêu đề tài xác định hiệu giá kháng thể gà, vịt sau tiêm phòng vaccine cúm. .. Đáp ứng miễn dịch đặc hiệu Cả hai nhánh đáp ứng miễn dịch thu đáp ứng miễn dịch dịch thể đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào đóng vai trị chế thực đặc hiệu miễn dịch chống virus Các đáp ứng. .. Vinh, Nghệ An 3.3 Nội dung nghiên cứu - Đánh giá khả đáp ứng miễn dịch đàn gà đàn vịt sau tiêm phòng vaccine đợt đợt - So sánh tỷ lệ bảo hộ gà vịt sau tiêm phòng vaccine - Đáp ứng miễn dịch gà
