Nghiên cứu tác dụng của dịch chiết mướp đắng đối với thể lực và hoạt động thần kinh của chuột : Đề tài NCKH. QT.07.34

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA DỊCH CHIẾT MƯỚP ĐẮNG ĐỐI VỚI THỂ Lực VÀ HOẠT ĐỘNG THAN KINH CỦA CHUỘT MÃ SỐ: QT-07-34 CHỦ TRÌ ĐỂ TÀI: ThS Lưu Thị Thu Phương CÁC CÁN B ộ THAM GIA: ThS Phạm Trọng Khá CN Hồng Thị Bích IA HA NjQl IN ỉ HU VIỀN PTV HÀ NỘI - 2008 -4 -4 - BAO CAO TÓM TẢT a Tên đề tài: Nghiên cứu tác dụng dịch chiết mướp đắng (Momordica charantia L.) thê lực hoạt động thần kinh chuột M ã sô: Q T-07-34 b C h ủ trì đề tài: Ths Lưu Thị Thu Phương c C ác cán th a m gia: Ths Phạm Trọng Khá, CN Hoàng Thị Bích d M ục tiêu nội dung nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành 100 chuột nhắt trắng đực tuần tuổi, khoẻ mạnh, trọng lượng trung bình 24±2g/con Thê lực chuột nhắt trắng đánh giá thông qua số: trọng lượng thể, thời gian bám rôto, số lượng hổng cầu, hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi Hoạt động thần kinh chuột đề cập đến chức hệ thần kinh trung ương, đánh giá qua tốc độ hình thành dập tắt phản xạ vận động tự vệ có điều kiện Để tài nhằm mục tiêu sau: - Xác định thay đổi trọng lượng chuột nhắt trắng sau uống dịch chiết từ mướp đắng - Xác định thời gian bám rôto chuột nhắt trắng sau uống dịch chiết từ mướp đắng test thực máy Rota Rod For Mice - So sánh số lượng hổng cầu, hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi chuột nhắt trắng trước sau uống dịch chiết từ mướp đắng - Đánh giá khả hình thành dập tắt phản xạ vân động tự vệ có điều kiện chuột nhắt trắng sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng - So sánh tác dụng dịch chiết từ mướp đắng khô tươi lên số nghiên cứu e Các kết đạt - Trọng lượng chuột nhắt trắng giảm 22,5% so với đối chứng sau 14 ngày uống nước chiết từ mướp đắng tươi Chỉ số tương ứng lô chuột uống dịch chiết từ mướp đắng khô 10,4% - Thời gian bám rôto chuột nhắt trắng uống dịch chiết từ mướp đắng tăng gấp 1,5 đến lần tuỳ test sử dụng so với đối chứng thời điểm nghiên cứu - Số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi chuột trắng không bị ảnh hưởng sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng - Dịch chiết từ mướp đắng có tác dụng tốt đến q trình hình thành phản xạ vận động tự vệ có điều kiện chuột nhắt trắng (khoảng 28-29 lần tập, so với đối chứng 35 lần tập) Tác dụng mướp đắng so với Tanakan (21 lần tập) Tuy nhiên, dịch chiết từ mướp đắng tác dụng trì phản xạ vận động tự vệ có điều kiện chuột trắng - Dịch chiết từ mướp đắng tươi có tác dụng làm giảm trọng lượng chuột nhắt trắng tốt dịch chiết từ mướp đắng khơ Ngồi ra, chưa thấy khác biệt tác dụng mướp đắng tươi mướp đắng khơ lên số nghiên cứu khác f Tình hình kinh phí đề tài: Kinh phí cấp: 20.000.000đ (Hai mươi triệu đồng) Đã toán với Phịng Kế hoạch Tài vụ KHOA QUẢN LÝ CHỦ TRÌ ĐỀ TÀI Phó Chủ nhiêm Khoa PGS.TS Phan Tuấn Nghĩa Ths Lưu Thị Thu Phưưng TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN B R IE F O F R E P O R T a The title o f study: Research cffects o f bitter melon extract on physical strength and funtions o f nervous system in mice Code: QT-07-34 b C o o d in a to r o f stu d y : Msc Luu Thi Thu Phuong c T h e m em b ers o f stu d y : Msc Pham Trong Kha, B.Sc Hoang Thi Bich d The target and contain o f study Research was carried out on 100 male mice, week age, healthy, average weight 24±2g/mouse Physical strength was elucidated by body weight, time of catching roto, erythrocyte counts, concentration of hem oglobin Funtions of central nervous system was elucidated by acquisition and extinction of conditioned response for protection The study aimed at - Elucidating changes m ice’s weight after using extracts o f bitter melon orally - Investigating time o f catching roto after using extracts of bitter melon by tests carrying out on Rota Rod For Mice - Comparing erythrocyte counts and concentration of hem oglobin in mice peripheral blood before and after using extracts of bitter m elon orally - Finding abilities o f acquisition and extinction of conditioned response for protection after using extracts - Comparing effects o f fresh bitter melon with dry bitter m elon on research The results show ed that - Mice using extract of fresh bitter melon continously 14 days reduced 22.5% body weight com paring with control Mice using extract of dry bitter melon continously 14 days reduced 10.4% body weight - Time of catching roto increased 1.5 to folds in mice using extracts depending on dem onstrated tests - The extracts had no effects on concentration of hemoglobin and erythrocyte counts - The extracts of bitter melon reduced turn of exercises (about 28-29 times of exercises, while control group needed 35 times of exercises) However the extracts showed less effective than Tanakan (21 tim es of exercises) Additionally the extracts had no effect on m aintaining conditioned response for protection - Extract of dry bitter melon showed less effective on reducing m ice’s weight com paring to extract of fresh bitter melon These extracts showed no differences in effects on other studied factors M Ề & @ cẢ M Ơ 7l Cĩronụ q u trìn h ỉh ự e h iê n i t ỉ tà i, e ltú n ụ tô i ĩtã n h ậ n ỉtư ổ e l q tm n tá m , ụ ù ip (Trí tủa H a n @hù n ltìim DChoa Ẵinlt hạ*, ếe thiỉụ cị ụiáớ, ếe ến /lẬ 1-ịnụ n n o i i n rũ m n íiU tà n h tìe —S in h !ụ h ọ e , rB ộ m n OT h o /Hồ p l t i o Ấítị i ù iít rB ỉn eạn it đ ó ehúng tò i eồtt điirie l q u a n iả n t, huốn g, d ẫ n eỉtit đ o (‘á rpitÀ 4iụ ~Kitfítỉ hoe (Jồnạ nạítĩ, rphờttạ DCê'hoụeh r ĩà ì oụ, CJrufíftạ rt ìạ i họe DUtfla họe £7 Ị / n ltiỉn , rĐ ạ! /|ẠÙ QtẠi Q lạ n i r a , fit ú n tồ i Í/Ì/I n h n itiiợ e l ự g iú p iTrí e u eú e t h ầ ụ ụ ì Ú n, cú n liồ t h u f r3 ò m ồ*t S ìn h !ụ n i ứ i ù itờ n ự ụ t, 'T ĩniồtiụ 'D a i hoe Sa phạm Jf)à (ìlộ i @ A ií*tự ỉà i XÙ€ À àự ( /ếì* tự ế ền eÁ uú t /A stA a / ttÁ ũ h # f f ttif i đ S ợ ự Aứí/ íỉiị áfáà &ỈỘÌ, r tợ ụ í/tsí/iự -/ n tn 0 ‘ Pii-iii < 0,001 Pn-Iir < 0,0 P11-111 < 0,001 Pi-Ii ^ Phi Pi-iii > 0,05 Pii-iii > 0,05 > 0,05 Bảng Tốc độ hình thành phản xạ vận động tự vệ có điếu kiện lô Chỉ Lô MĐ khô Lô MĐ tươi Lô Tanakan Lô ĐC ( 1) (2 ) (3) (4) 28,11 ±5,18 29,11 ±3,41 21,53 ±4,78 35,40 ±7,97 Số lần phối hợp tín hiệu có điều kiên khơng điều kiện Pi-2 > 0,05 Pi-3 < 0,05 pM < 0,05 p P2.3 < ,0 p2_4 < 0,05 P3.4 < 0,05 Kết trôn bảng cho thấy chuột uống dịch chiết từ mướp đắng kỉơ vầ tươi có số ỉần tập trung bình để hình thành phản xạ có điểu kiện 28,11± ,18 29,11 ± 3,41 thấp hẳn so với lô đối chứng uống nước (truig DÌnh 35,40 ± 7,97 lần tập) Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,0 Như vậy, mướp đắng có tác dụng tốt đến trình hình thành phản xạ vận độrg :ự vệ có điều kiện chuột nhắt trắng Tuy nhiên, tác dụng mướp đắrg :òn so với tác dụng Tanakan (trung bình 21,53 ± 4,78 lần tập) Sự khíc oiệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Khơng có khác biệt lác dụng cỉa lai loại dịch chiết khô tươi lên tốc độ hình thành phản xạ có điều kiện cu ;huột (p > 0,05) 3.5 Tác dụng mướp đắng lên tốc độ dập tắt phản xạ vận động tự vệ o íicu kiện Sau phản xạ vận động tự vệ có điểu kiện chuột thành lập, t iến hành dập tắt phản xạ cách phát tín hiệu có điểu kiện (tiến, :hng) mà khơng có tín hiệu củng cố (dịng điện) Phản xạ vận động tự vệ o ỉiều kiện coi dập tắt sau phát tiếng chuông giây mà chut chông nhảy lên trụ lồng (Hình 3) chiLữntị Hình Phản xạ vận động tự vệ có điều kiện bị dập tắt (tốc độ giấy 25m m /giáy) Tốc độ dập tắt phản xạ có điều kiện tính số lần phát tín hiệu (CĨ liều kiện khơng phối hợp với tín hiệu củng cố từ phản xạ có điều kiện đưcợt hành lập bị dập tắt Kết nghiên cứu trình bày bảng Bảng Tốc độ dập tắt phản xạ vận dộng tự vệ có điêu kiện Phân lơ Chỉ số Lô MĐ khô Lô MĐ tươi Lô Tanakan Lô ĐC ( 1) (2 ) (3) (4) 7,84 ± 1,12 8,51 ± 1,75 15,34 ±2,53 8,33 ± 1,977 Sô' lần phát tín hiệu có điểu kiện khơng kèm tín hiệu củng cố Pi-2 > 0,05 P j _3 < 0,001 p Pm > 0,05 P2.3 < 0,0 p2.4 > 0,05 p3_4 < 0,001 ỉ Kết bảng cho thấy, tốc độ dập tất phản xạ vận động tự vệ có điểu àện chuột lơ uống dịch chiết từ mướp đắng khơng có khác biệt (p > ),05) so với chuột lô đối chứng nước (khoảng 7,84 đến 8,51 lần tập) Trong ửii đó, chuột lơ uống tanakan thể khả lưu giữ phản xạ tốt hơm rung bình 15,34 ± 2,53 lần tập (p < 0,001) BÀN LUẬN 1.1 Tác dụng tăng cường thể lực dịch chiết từ mướp đáng í.1.1 Tác dụng mướp đắng đến trọng lượng chuột th í nghiệm Kết nghiên cứu cho thấy sau uống mướp đắng 14 ngày, trọng lượnig :ác chuột thí nghiệm giảm so với chuột nhóm đối chứng (bảng 1) Sự ịiảm trọng lượng thể rõ lô chuột uống mướp đắng tươi, giảm 22,5% hể trọng so với nhóm chuột đối chứng (chỉ số lô chuột uống mướp đắng :hơ 10,4%) Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) Như vậy, dịch ịp từ mướp đắng tươi có tác dụng làm giảm trọng lượng tốt so với dịch chiết mướp đắng khô Điều phù hợp với kinh nghiệm người Trung Quốc, síhât Bản Mỹ [6 ] N ghiên cứu Chan L.L cộng cho thấy mướp ĩắng có tác dụng làm tăng q trình oxy hố lipid dẫn đến giảm béo phì chuột 3] Theo ước tính Tổ chức Y tế giới tới năm 2015 có 700 triệu Ìgười béo phì [ ], theo nhận định nhiều chuyên gia tất huốc giảm cân gây tác dụng phụ khó kiểm sốt [9] Vì vậy, kết nghiên cứu nghĩ đến việc sử dụng mướp đắng làm thực >hẩm chức nãng người béo phì Sử dụng mướp đắng biện pháp vừa ẻ tiền, vừa dễ thực mang lại nhiều tác dụng tốt Tuy nhiên, dùng mướp iắng vào thời điểm để đạt hiệu tốt liều lượng sử dụng cho Igười bệnh cần có nghiên cứu với mơ hình Ighiên cứu cụ thể Bởi nghiên cứu này, cho chuột uống dịch :hiết mướp đắng liên lục nửa tháng Sau dừng uống dịch chiết mướp ỉắng 14 ngày (tức ngày 28 q trình nghiên cứu), trọng lượng chuột lơ iống mướp đắng khô lại tăng lên trọng lượng chuột đối chứng, song lô uống dịch ép từ mướp đắng tươi trì trọng lượng thấp so với lô ỉối chứng 18,2% í.1.2 Tác dụng mướp đắng lên khả bám rôto chuột Trong nghiên cứu này, thể lực chuột cịn đánh giá thơng qua thời ỊĨan chuột bám rơto test 1, rơto ln trì tốc độ quay 30vòng/phút rốc độ vừa phải dùng test để đánh giá sức bền (sự dẻo dai) :ủa chuột Kết bảng cho thấy thời gian bám rôto lô chuột đéu ăng theo thời gian chuột dẩn dần quen thích nghi với điều kiện thí Ìghiệm Tại thời điểm ban đầu, giá trị khoảng 136-140 giây khơng có :hác biệt lồ Sự khác biệt lô quan sát từ ngày thứ 14 thời ịian bám rôto lô uống dịch chiết từ mướp đắng đạt 800 giây, trorg :hi giá trị lô đối chứng 500 giây (p < ,00 ) Tại thời điểm ại, thời gian bám rô to lô chuột uống mướp đắng cao so với lô tối chứng Ngồi ra, chúng tơi cịn dùng test (tốc độ quay rôto thay đổi) est (chiều quay rôto thay đổi) để đánh giá sức mạnh độ bám rơto Rõ àng độ khó hai test cao test Nếu sức bám chuột yếu cht ẽ bị rơi xuống đỡ máy rôto đảo chiều tốc độ tăng lên M 'ậy, thời gian bám rôto ba lô chuột test thấp ncm test cếc hời điểm tương ứng điều hợp lý Mặt khác, kết bảng cho hấy khả bám rôto chuột uống dịch chiết từ mướp đắng ốt so với lơ đối chứng Chính vậy, chúng tơi cho mướp đắng có tác [ụng tăng cường thể lực cho chuột nhắt trắng Cơ chế tác dụng :ần tiếp tục nghiên cứu sáng tỏ ĩ 1.3 Tác động mướp đắng đến tập tính dinh dưỡng vài sô' mái chuột Kết nghiên cứu cho thấy mướp đắng có tác dụng làm giảm trọng lượni chuột song có phải mướp đắng làm cho chuột chán ăn (giống thuốc giảm câi hứa am phetam in) làm đầy ống tiêu hoá (giống thuốc giảm cân chúa nethylcellulose) dẫn đến giảm trọng lượng hay không? Theo Leslie Taylor 10 đnh nghiệm người dân Haiti, mướp đắng có khả kích thích tiêu hố ịiúp ăn ngon miệng Đồng thời nghiên cứu chúng tơi cho thấy với liều dùng ihư tất lô chuột khoẻ mạnh binh thường, biểu ỉa :háy Lượng thức ăn tiêu thụ tương đương lơ (trung bình khoảng [30-140g/lơ/ngày), số thay đổi thời điểm trước sau uống iịch chiết mướp đắng Lượng nước uống khơng có khác biệt lô :huột Kết cho thấy mướp đắng không gây tác dụng phụ chán in, tiêu chảy, nước giống phần lớn loại thuốc giảm cân 9] Mặt khác, mướp đắng có sắt vitamin B nên Cuba, Haiti Nicaragua người ta sử dụng mướp đắng để chữa bệnh thiếu máu [ 11 ], :húng chưa thấy có nghiên cứu khẳng định điều Kết nghiên :ứu cho thấy dù không làm tăng số lượng hổng cầu hàm lượng íb mướp đắng khơng làm giảm số 1.2 Tác dụng mướp đắng lèn chức hệ thần kinh trung ương Mọi hoạt động sống người động vật coi tập hợp ihiều phản xạ, phản xạ có điểu kiện giữ vai trị quan trọng Một rong chức hệ thần kinh trung ương điều hoà phối hợp >hản xạ để đảm bảo thể khối thống thích nghi với mơi rường Trong phạm vi nghiên cứu này, đánh giá chức hệ thần inh trung ương qua tốc độ hình thành dập tắt phản xạ vận động tự vệ có điểu iện chuột nhắt trâng Ngồi lô chuột uống dịch chiết từ mướp đắng lô :ối chứng uống nước, chúng tơi cịn bổ sung lơ chuột uống Tanakan Lô :ược coi đối chứng dương Tanakan dược phẩm Pháp bán ộng rãi thị trường, định cho trường hợp bệnh nhân suy giảm trí nhớ Kếĩ nghiên cứu bảng cho thấy dịch chiết mướp đắng làm giảm số ỉn tập chuột, giúp chúng thành lập phản xạ có điều kiện nhanh huột đối chứng uống nước Kết chuột uống dịch chiết lếp nhận xử lý thơng tin nhanh xác so với đối chứng Tuy nhiên, íc dụng mướp đắng cịn so với Tanakan Ngồi ra, kết ảng cho thấy mướp đắng khơng có tác dụng trì phản xạ có điều kiện iống Tanakan hay số thuốc tăng cường trí nhớ khác 11 KẾT LUẬN - Trọng lượng chuột nhắt trắng giảm 22,5% so với đối chứng sau 14 ngày uống nước ép từ mướp đắng tươi Chỉ số tương ứng lô chuột uống nước sắc mướp đắng khô 10,4% - Thời gian bám rôto chuột nhắt trắng uống dịch chiết từ mướp đắng tăng gấp 1,5 đến 3-4 lần tuỳ test sử dụng so với đối chứng thời điểm nghiên cứu - Số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi chuột nhắt trắng không bị ảnh hưởng sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng - Dịch chiết từ mướp đắng có tác dụng tốt đến q trình hình thành phản xạ vận động tự vệ có điểu kiện chuột nhắt trắng (khoảng 28-29 lần tập, so với đối chứng 35 lần tập) Tác dụng mướp đắng so với Tanakan (21 lần tập) Tuy nhiên, dịch chiết từ mướp đắng tác dụng trì phản xạ vận động tự vệ có điều kiện chuột trắng - Dịch chiết từ mướp đắng tươi có tác dụng làm giảm trọng lượng chuột nhắt trắng tốt dịch chiết từ mướp đắng khơ Ngồi ra, chưa thấy khác biột tác dụng mướp đắng tươi mướp đắng khô lên số nghiên cứu khác TÀI LIỆU THAM KHẢO Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Ansari N.M et al (2005), “Antioxidant activity of five vegetables traditionally consumed by South-Asian migrants in Bradford Yorkshire, UK.” Phytother.Res., 19(10), -9 1 Chan L.L et al (2005), “Reduced adiposity in bitter melon (Momordica charantia) fed rats is associated with increased lipid oxidative enzym activities and uncoupling protein expression”, J Nutr., 135 (11), 2517-2523 Chen Q et al (2005), “Reduced adiposity in bitter melon (M omordica charantia) fed rats is associated with lower tissue triglyceride and higher plasma catecholam ines”, B rJ.N utr., 93(5), 747-754 Sathishsekar D et al (2005), “Antioxidant properties of M omordica charantia seeds on streptozotocin induced diabctic rats”, Asia PacJ.Clin.N utr., 14(2), 153-158 Huyền Linh, “Mướp đắng giúp giảm cân” 12 Trần Xuân Thuyết, “Quả mướp đắng - vị thuốc quý” Thuỵ Vũ, “Béo phì vấn nạn tồn cầu” Tất thuốc giảm cân gây tác dụng phụ - Người lao động < http://vnexpress.net/V ietnam /Suc-khoe/2002/06/3B9BD404/> 10 M om ordica charantia (Bitter melon), Clinical report 11 Leslie Taylor, “The healing power of rain forest H erbs” 13 CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHÚ NGHĨA VIỆT NAM lụ p — £7 ti — “ fỉf>ạitlt phút' GIÂY XÁC NHẬN • Tổng biên tập tạp chí Sinh lý học Việt Nam nhận báo có tên “Nghiên cứu tác dụng mướp đắng đến trọng lượng thể lực chuột nhắt trắng” tác giả Lưu Thị Thu Phương, Nguyễn Văn An, Nguyễn Thanh Huyền Bài báo đăng sô' tập 12 tháng năm 2008 Ngày tháng năm 2008 TỔNG BIÊN TẬP GS.TS Đỗ Công Huỳnh NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA MƯỚP ĐẮNG ĐẾN TRỌNG LƯỢNG VÀ THỂ L ự c CHUỘT NHẮT TRẮNG Lun Thị Thu Phương1, Nguyễn Văn An2, Nguyễn Thanh Huyền '.Trường Đại học Khoa học Tự nhiên 2.Trường Đại học Sư phạm Hà nội Nghiên cứu tác dụng mướp đắng lên thể trọng thể lực động vật thí nghiệm tiến hành 60 chuột nhắt trắng đực tuần tuổi, khỏe mạnh, trọng lượng trung bình 24±2g/con Chuột thí nghiệm chia làm lơ (lơ uống dịch chiết từ mướp đắng khô, lô uống dịcli ép từ mướp đắng tươi, lô đối chứng), lô gồm 20 chuột Lô chuột đối chứng cho uống nước cất 0,3ml/con/lần Chuột uống dịch chiết từ mướp đấng khô (liều 4g/kg thể trọng) chuột uống dịch ép từ mướp đắng tươi (liều 30qlkg thể trọng) liên tục 14 ngày Thời điểm xác định sơ'nghiên CÍŨI ngày 0, 7, 14, 21 28 Kết cho thấy sau 14 ngày chuột uống dịch ép từ mướp dáng tươi giám 22,5% th ể trọng, chuột uống dịch chiết tử mướp đắng khô giảm 10,4% thè trọng so với chuột lô đối chứng Đồng thời dịch ép dịch chiết từ mướp đắng cịn có tác dụng làm tăng khả bám rôto chuột lên gấp nhiều lần (1,5 - lẩn tuỳ theo test) Dịch chiết dịch ép từ mướp đắng khơìĩạ ảnh hưởng đến sô lượng hồng cẩu hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi cùa chuột thí nghiệm Đặt vấn đề Từ lâu, mướp đắng (Momordica charantia L.) dùng loại rau thông dụng sống hàng ngày Theo Đơng y, mướp đắng có tính hàn, khơng độc Quả mướp đắng xanh có tính giải nhiệt, mát tim, nuôi can huyết, bớt mệt mỏi [1] Ở số nước phương Đông, mướp đắng dùng loại thuốc bổ, giảm béo [5], [6 ] Nhiểu nghiên cứu gịới cho thấy mướp đắng loại thảo dược có nhiều :ơng dụng, có tác dụng giảm cân [2], [3], [4], [9], Tại Việt Nam, mướp đắng :hưa nghiên cứu nhiều Trong đó, với xu phát triển xã hội, nạn :hừa cân, béo phì tăng lên nhanh chóng nước phát triển phát triển, lầy nhiều biến chứng bệnh tật tiểu đường typ , tai biến mạch máu não, tăng luyết áp [7], Đây lý thúc đẩy chúng tơi nghiên cứu tác dụng mướp íắng lên trọng lượng thể lực chuột nhắt trắng nhằm góp phần làm sáng tỏ tác iụng loại thực phẩm chức Đề tài nhằm mục tiêu sau: Xác định thay đổi trọng lượng chuột nhắt trắng sau uống dịch chiết từ mướp đắng Đánh giá thể lực chuột trắng sau uống dịch chiết từ mướp đắng thông qua thời gian bám rôto chuột So sánh số lượng hổng cầu hàm lượng hemoglobin chuột nhắt trắng trước sau uống dịch chiết từ mướp đắng, ỉ Đối tượng, nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu 60 chuột nhắt trắng đực, tuần tuổi, khoẻ mạnh, trọng lượng trung bình 24 ± 2g/con Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột ni phịng thí nghiệm cho ổn định ngày, sau chia thành lơ cách ngẫu nhiên Tồn chuột ni điều kiện môi trường chế độ dinh dưỡng 2.2 Nguyên liệu nghiên cứu - Mướp đắng khô: mướp đắng tươi bỏ ruột, thái mỏng, sấy khô (lOOg tươi sấy cịn g khơ) - Dịch chiết mướp đắng khô: lOOg mướp đắng khô 300ml nước, sắc 100ml Sắc lần liên tục 300ml cạn cịn lại 200ml Như từ lOOg mướp đắng khô sắc 200 ml dịch chiết hay lg mướp đắng khô tương đương với ml dịch chiết - Dịch ép mướp đắng tươi: mướp đắng tươi bỏ ruột, thái mỏng trộn với nước theo tỉ lệ 2:1 (2 g mướp đắng + lml nước) sau nghiền nát lọc lấy toàn nước ép (được khoảng l,5ml dịch ép) 2.3 Mơ hình phương pháp nghiên cứu • Mơ hình nghiên cứu Chuột nhắt trắng chia thành nhóm: Nhóm 1: gồm 30 chuột chia thành lô để theo dõi trọng lượng, số lượng hổng cầu hàm lượng Hemoglobin Lô (lô MĐ khô): n = 10, uống dịch chiết mướp đắng khô với liều 4g/kg thể trọng (tương đương ,2 ml/con/lần) Lô (lô MĐ tươi): n = 10, uống dịch ép mướp đắng tươi với liều 30g/kg thể trọng (tương đương 0,5ml/con/lần) Lô (lô ĐC): n = 10, uống nước (0,3ml nước/con) Chuột uống dịch chiết từ mướp đắng 1lần/ngày vào buổi sáng, liên tục 14 ngày Số lượng hổng cầu hàm lượng Hb xác định thời điổm ngày 14 Trọng lượng chuột kiểm tra thời điểm ngày 0, 7, 14, 21 28 Nhóm 2: gồm 30 chuột, chia thành lô, uống dịch chiết từ mướp đắng tương tự nhóm Tồn chuột nhóm đánh giá thể lực thời điểm ngày 0, 7, 14,21 28 • - Phương pháp nghiên cứu Số lượng hổng cầu, hàm lượng Hb máu chuột xác định theo phương pháp thường quy • Thể lực chuột đánh giá thông qua thời gian bám rôto test thực máy Rota Rod For Mice Model 47600 hãng Ugo Basile sản xuất ■ Test 1: rôto quay với tốc độ khơng đổi 30 vịng/phút • Test 2: tốc độ quay rôto liên tục tăng dđn từ 30 đến 50 vòng/phút (trong lphút) sau lại giảm dần từ 50 xuống 30 vịng/phút (trong phút) Test 3: tốc độ quay rôto giữ ổn định mức 30 vòng/phút sau quay vịng theo chiều kim hổ rơto lại quay theo chiều ngược lại vòng - Thời gian bám rôto chuột tính từ lúc rơto bắt đầu quay chuột không bám rôto bị rơi xuống đỡ máy Thời gian máy tự động ghi lại Tại thời điểm nghiên cứu, chuột tập lần, lấy kết trung bình Kết nghiên cứu 3.1 Sự thay đổi trọng lượng chuột nhắt trắng thời điểm nghiên cứu Bảng Trọng lượng chuột (g) thời điểm nghiên cứu Lô Ngày (2) Ngày 14 (3) Ngày 21 Ngày 28 (5) n/ Ngày 0(1) p (4) MĐ 10 27,85 ± 1,58 33,53 ± 2,93 31,56 ±4,02 32,22 ± 5,34 36,37 ±4,33 khô p p,.2 < 0,001 p4.5 > 0,05 p 3_4 > 0,05 P2-3 > 0,05 MĐ 10 27,23 ± 1,92 32,98 ±3,16 27,31 ± 3,34 29,22 ±3,39 30,05 ± 2,63 tươi p 3_4 > 0,05 p p,.2 < 0,001 P4.5 > 0,05 p2_3 < 0,05 27,21 ± 1,00 34,12 ± 1,16 35,25 ± 1,20 36,11 ± 1,05 36,75 ± 1,37 p4_5 > 0,05 p 3_4 > 0,05 p2.3 < 0,05 p,_2 < 0,001 Kết bảng cho thấy sau ngày, trọng lượng chuột lô tăng đáng kể (p < 0,001), trung bình khoảng - g/con Sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng, trọng lượng chuột lơ đối chứng tiếp tục tăng nhẹ, trung bình khoảng lg/con Trong đó, trọng lượng chuột lơ lại giảm nhẹ (giảm trung bình 2g/con), cịn trọng lượng chuột lồ giảm rõ rệt (giảm trung bình g/con) Kết có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tại thời điểm ngày thứ 21 28 trọng lượng chuột lô tăng nhẹ Tuy nhiôn, trọng lượng chuột lô hai thời điổm nêu thấp lô 3.2 Thời gian bám rôto chuột test Kết nghiên cứu thời gian bám rôto chuột nhắt trắng test trình 3ày bảng 2, Bảng Thời gian bám rôto (giây) test thời điểm nghiên cứu Ngày 28 Ngày 21 Ngày 14 \^ N g y Ngày Ngày Phân (5) (2 ) (4) (3) ( 1) MĐ khô (I) 136,2 ±22,4 298,4 ± 39,5 863,4 ± 90,3 1081,8± 117,6 1107,6 ± 122,0 n = 10 P4 > 0,05 p3_4< 0,001 Pj.2< 0,001 p2-3< 0,001 MĐ tươi 145,7 ± 20,7 293,2 ± 50,5 878,2 ± 69,8 1086,0 ± 118,2 1105,0± 110,2 p3_4 < 0,001 p2_3< 0,001 (II), n = 10 P4 > 0,05 Pi_2< 0,001 848,2 ± 97,2 137,3 ±26,8 266,3 ± 63,9 579,2 ± 86,3 807,1 ±95,3 ĐC (III) n = 10 P4.5 > 0,05 p3_4 < 0,001 P2_3< 0,001 Pi_2< 0,001 ĐC 10 p Phi > 0,05 Pmi ^ 0,05 Pi-Ii 0,05 Pi-11 ^ 0,05 Pi-11 ^ 0,05 Pi-Iii ^ 0,001 Pi-in ^ 0,001 Pi-Iii ^ 0>001 Pi-iii > 0-05 Pi-iii > 0’05 p Pii-iii < 0,001 Pii-m > 0,05 P11-111 > 0>05 Pii-iii < 0,001 Pii-Iii < 0,001 Kết bảng cho thấy thời gian ám rôto c luột thời điểm ban đầu ác lô (p > 0,05) Từ ngày đến ngày 21, thời gian bám rôto lô huột tăng lên có ý nghĩa thống kê (p < ,001 ), ngày 28 mức tăng hơng có khác biệt so với thời điểm ngày thứ 21 (p > 0,05) ĩi t e ■tt So sánh kết nghiên cứu cho thấy thịi gian bám rơto lô chuột uống dịch chiết từ mướp đấng cao (p < ,001 ) so với số lô chuột đối chứng Bảng Thời gian bám rôto (giây) test thời điểm nghiên cứu Ngày Ngày Ngày Ngày 14 Ngày 21 Ngày 28 Phân lô (2 ) (3) (4) (5) ( 1) MĐ khô (I) 38,7 ± 7,6 80,1 ± 15,8 253,9 ± 74,8 504,2± 159,8 702,1± 120,0 n = 10 p3_4 < 0,001 p4.5 < 0,05 P2-3< 0,001 Pi_2< 0,001 76,3 ± 18,1 288,5 ± 100,7 535,7± 134,4 712,4 ± 130,0 MĐ tươi (II) 39,7 ± 8,0 n = 10 p3_4 < 0,001 p4.5< 0,05 p2-3< 0,001 Pi < 0,001 ĐC (III) 37,6 ± 8,4 39,8 ±9,5 69,2 ± 18,7 206,1 ±62,0 452,3 ± 147,2 n = 10 p3_4 < 0,001 p4_5< 0,001 p,_2> 0,05 P2.3 < 0,001 Pi-11 ^ 0,05 Pi-Ii ^ 0,05 Pi-ii > 0,05 Pi-ii > Pl-ll -> Pi-iii > 0,05 Pi-Iii ^ 0,001 Pi-in ^ 0*001 Pi-iu ^ 0,001 Pi-in ^ 0,001 p Pii-iii > 0,05 Pii-m < 0,001 P11-111 < 0,001 Pn-Iii < 0,001 Pii-IH < Kết bảng cho thấy thời gian bám rôto chuột lơ lúc bắt đầu thí nghiệm (khoảng 37,6 - 39,7 giây) (p > 0,05) Đến ngày 7, thời gian bám rôto test chuột uống mướp đắng tăng lên đáng kể so với số ngày (p< ,001 ), đó, chuột đối chứng chưa tăng khả bám rơto cách có ý nghĩa (p>0,05) Tại ba thời điểm nghiên cứu (ngày 14, 21 28), chuột uống dịch chiết từ mướp đắng đéu thể khả bám rôto tớt so với chuột đối chứng (p < ,001 ) Bảng Thời gian bám rôto (giây) test thời điổm nghiên cứu \ N g y Ngày Ngày Ngày 14 Ngày 21 Ngày 28 Phân'ìồv\ ^ (2 ) (4) (5) (3) ( 1) MĐkhô 17,0 ± 3,2 36,2 ± 12,3 104,1 ±23,1 352,3 ± 73,5 572,2 ± 154,1 n = 10 p4.5< 0,05 Pi_2 < ,0 p2-3< 0,001 P3.4 < 0,001 MĐ tươi 18,5 ± 2.3 39,5 ± 11,1 115,0 ±36,5 383,1± 102,9 545,7 ± 96,2 n = 10 p3_4< 0,001 P 4.5 < ,0 p2_3 < 0,001 Pi_2 < 0,001 ĐC 1 ,4 ± , 3 ,5 ± 115,7 6,6 ± , 19,3 ± , ,7 ± 15,0 n = 10 p2_3 < , 0 p4.5 < , 0 P3-4 < 0,001 Pi-2> 0,05 Pi-Ii ^ 0,05 Pi-11 -> 0*05 Pi-11 ^ 0>05 Pi-Ii -> 0>05 Pi-11 ^ Pi III ^ 0,0 Pi-Iii > 0.05 Pi-iii < Pi III ^ 0,001 Pi-Iii ^ p Pn-ni < 0,001 Pii-iii < 0,001 Pii-iii < 0,001 P i i -i i i < 0,001 P11-111 > Kết bảng cho thấy thời gian bám rôto c luột thời điểm ban đầu :ác lô (khoảng 16,6 - 18,5 giây) (p > 0,05) Đến ngày 7, thời gian bám rôto :ủa chuột uống mướp đắng tăng lên gấp lần so với số Ìgày (p < ,001 ), đó, thời gian bám rơto chuột đối chứng khổng :ó khác biệt so với ngày (p>0,05) Tại ba thời điểm nghiên cứu tiếp theo, chuột ô thể khả bám rổto tốt so với chuột đối chứng 1.3 Số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin chuột sau 14 ngày uống thuốc Kết nghiên cứu số hổng cầu, hàm lượng hemoglobin trình bày bảng Bảng Sô lượng hổng cầu, hàm lượng hemoglobin máu lô chuột thời điểm ngày ngày 14 Phân lô n Số lượng hổng cầu (triộu/mm3) Hàm lượng Hb (g%) Ngày Ngày 14 Ngày Ngày 14 MĐ khô 10 8,17 ±0,27 8,23 ± 0,23 14,38 ±0,17 14,21 ±0,38 MĐ tươi 10 8,16 ± 0,31 8,28 ± 0,21 14,10 ±0,27 14,28 ±0,49 ĐC 10 8,26 ± 0,27 8,18 ±0,34 14,09 ±0,37 14,19 ±0,32 Kết bảng cho thấy thời điểm ban đầu (ngày 0), số ượng hồng cầu hàm lượng Hb chuột lô (p > 0,05) Sau 14 ngày uống mướp đắng, số lượng hồng cầu, hàm lượng Hb có tăng lên song khơng có khác biệt so với số ngày (p > 0,05) Bàn luận 4.1 Tác dụng giảm cân mướp đắng Kết nghiên cứu cho thấy sau uống mướp đấng 14 ngày, trọng lượng chuột thí nghiệm giảm so với chuột nhóm đối chứng (bảng 1) Sự giảm trọng lượng thể rõ lô chuột uống mướp đắng tươi, giảm 22,5% thổ trọng so với nhórn chuột đối chứng (chỉ số lô chuột uống mướp đắng khô 10,4%) Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) Như vậy, dịch ép từ mướp đắng tươi có tác dụng làm giảm trọng lượng tốt so vói dịch chiết từ mướp đắng khô Điều phù hợp với kinh nghiỗm người Trung Quốc, Nhật Bản Mỹ [5] Nghiên cứu Chan L.L cộng cho thấy mướp đắng có tác dụng làm tăng trình oxy hố lipid dẫn đến giảm béo phì chuột [3] Theo ước tính Tổ chức Y tế giới tới năm 2015 có 700 triệu người béo phì [7], theo nhận định nhiều chuyên gia tất thuốc giảm cân gây tác dụng phụ khó kiểm sốt [8 ] Vì vậy, từ kết nghiên cứu nghĩ đến việc sử dụng mướp đắng làm thực phẩm chức nâng người béo phì Sử dụng mướp đắng biện pháp vừa rẻ tiền, vừa dễ thực hiên mang lại nhiều tác dụng tốt Tuy nhiên, dùng mướp đắng vào thời điểm để đạt hiệu tốt liều lượng sử dụng cho người bệnh :ần có nghiên cứu với mơ hình nghiên cứu cụ thể Bởi nghiên :ứu này, cho chuột uống dịch chiết mướp đắng liên lục nửa tháng Sau dừng uống dịch chiết mướp đắng 14 ngày (tức ngày 28 q trình nghiên :ứu), trọng lượng chuột lơ uống mướp đắng khô lại tăng lên trọng lượng :ác chuột đối chứng, song lô uống dịch ép từ mướp đắng tươi trì trọng lượng hấp so với lô đối chứng 18,2% ị.2 Tác dụng tăng cường thể lực mướp đắng Trong nghiên cứu này, thể lực chuột đánh giá thông qua thời gian chuột )ám rôto Ở test 1, rơto ln trì tốc độ quay 30vòng/phút Tốc độ vừa phải dùng test để đánh giá sức bền (sự dẻo dai) chuột Kết rên bảng cho thấy thời gian bám rôto lô chuột đéu tăng theo thời gian :huột dẩn dần quen thích nghi với điểu kiện thí nghiộm Tại thời điểm ban đầu, PH Ụ LỤC Phụ lục Chuột dang tập máy Rota Rod For Mice Chuột vị trí sơ' V'à sơ' đ ã bi rơi xuống đỡ máy - Tính từ trái sang phải) Phụ lục Chuột bám trụ lồng d ể tránh bị điện giật thí nghiệm thành lập phản xạ vận động tự vệ có điều kiện PHIÊU ĐÃNG KÝ KẾT QUẢ NGHIÊN cứu KH-CN Tên đề tài: Nghiên cứu tác dụng dịch chiết mướp đắng (Momordica charantia L.) đôi với thể lực hoạt động thần kinh chuột Mã số: Q T-07-34 C q u a n chủ trì đề tài: Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN Địa chỉ: 334 Nguyễn Trãi, Thanh Xuân, Hà Nội Tel: C q u a n q u ả n lý đề tài: Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Địa chỉ: 334 Nguyễn Trãi, Thanh Xuân, Hà Nội Tel: 04 8584734 Tỗng kinh phí thực chi: 20.000.000 Trong đó: - Từ ngân sách Nhà nước: 20.000.000 đồng - Kinh phí trường: - Vay tín dụng: - Vốn tự có: - Thu hồi: Thời gian nghièn cứu: 12 tháng Thời gian bắt đầu: 4/2007 Thời gian kết thúc: 4/2008 Tên cán phối hợp nghiên cứu: ThS Phạm Trọng Khá, CN Hoàng Thị Bích SỐ đăng ký đề Số chứng nhận đăng ký kết tài nghiên cứu: Bảo mật: a Phổ biến rộng rãi: X b Phổ biến hạn chế: Ngày: c Bảo mật: Tóm tắt kết nghiên cứu: Nghiên cứu tiến hành 100 chuột nhắt trắng đực tuần tuổi, khoẻ mạnh, trọng lượng trung bình 24±2g/con Kết nghiên cứu cho thấy: - Trọng lượng chuột nhắt trắng giảm 22,5% so với đối chứng sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng tươi Chỉ số tương ứng lô chuột uống dịch chiết từ mướp đắng khô 10,4% - Thời gian bám rôto chuột nhắt trắng uống dịch chiết từ mướp đắng tăng gấp 1,5 đến lần tuỳ test sử dụng so với đối chứng thời điểm nghiên cứu - Số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin máu ngoại vi chuột nhắt trắng không bị ảnh hưởng sau 14 ngày uống dịch chiết từ mướp đắng - Dịch chiết từ mướp đắng có tác dụng tốt đến trình hình thành phản xạ vận động tự vệ có điều kiện chuột nhắt trắng (khoảng 28-29 lần tập, so với đối chứng 35 lần tập) Tác dụng mướp đắng so với Tanakan (21 lần tập) Tuy nhiên, dịch chiết từ mướp đắng khơng có tác dụng trì phản xạ vận động tự vệ có điều kiện chuột nhắt trắng - Dịch chiết từ mướp đắng tươi có tác dụng làm giảm trọng lượng chuột nhắt trắng tốt dịch chiết từ mướp đắng khơ Ngồi ra, chưa thấy khác biệt tác dụng mướp đắng tươi mướp đấng khô lên số nghiên cứu khác Kiên nghị quy mô đối tượng áp dụng nghiên cứu: - Cần xây dựng mơ hình gây béo phì thực nghiệm động vật - Nghiên cứu tác dụng giảm hàm lượng lipid máu dịch chiết mướp đắng động vật thực nghiêm Chủ nhiệm Thủ trưởng Chủ tịch Hội Thủ trưửng đề tài quan chủ trì đánh giá quan quản đề tài thức lý đề tài Lưu Thi Họ tên Học hàm ũ Thu Phương ThS- / Ỵ í /T hoc vi T L.G IÁ M Đ Ố C KT.TT?ư ,N Kí tên Đóng dấu PGĨÌ.TS ỐL -JJia j tjiX tu ĩh s S ^ ^ 'é s i