1. Trang chủ
  2. » Thể loại khác

Nghiên cứu tác dụng chống đông máu của các phân đoạn dịch chiết Sâm vũ diệp và Tam thất hoang trên in vitro

58 19 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 58
Dung lượng 1,4 MB

Nội dung

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC NGUYỄN THỊ TUYẾT TRINH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG ĐÔNG MÁU CỦA CÁC PHÂN ĐOẠN DỊCH CHIẾT SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) VÀ TAM THẤT HOANG (Panax stipuleanatus H T Tsai et K M Feng) TRÊN IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Hà Nội - 2017 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC Ngƣời thực hiện: NGUYỄN THỊ TUYẾT TRINH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG ĐÔNG MÁU CỦA CÁC PHÂN ĐOẠN DỊCH CHIẾT SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) VÀ TAM THẤT HOANG (Panax stipuleanatus H T Tsai et K M Feng) TRÊN IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa: QH.2012.Y Ngƣời hƣớng dẫn: PGS.TS Dƣơng Thị Ly Hƣơng TS Vũ Thị Thơm Hà Nội - 2017 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên em xin gửi lời cảm ơn đến toàn Ban chủ nhiệm khoa YDƣợc, Đại học Quốc Gia Hà Nội, môn Dƣợc lý - Dƣợc lâm sàng, Bộ môn Y - Dƣợc học sở tạo điều kiện cho em để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giảng dạy, giúp đỡ em hồn thành chƣơng trình học tập suốt năm qua Em xin bày tỏ tri ân lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Dƣơng Thị Ly Hƣơng, TS Vũ Thị Thơm, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, tạo điều kiện giúp em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô môn Dƣợc lý - Dƣợc lâm sàng, thầy cô môn Y - Dƣợc học sở giúp đỡ em q trình hồn thành khóa luận Em xin cảm ơn chƣơng trình thuộc đề tài Tây Bắc: “Ứng dụng giải pháp khoa học công nghệ để phát triển nguồn nguyên liệu tạo sản phẩm từ loài thuốc Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H T Tsai et K M Feng) vùng Tây Bắc”, mã số KHCN-TB.07C/13-18 tài trợ kinh phí để em thực đƣợc nội dung nghiên cứu Em xin cảm ơn Khoa Xét nghiệm Huyết Học, Bệnh viện 19.8 - Bộ Cơng An giúp đỡ em thực thí nghiệm Cuối em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ngƣời thân ln quan tâm, động viên, giúp đỡ em hồn thành khóa luận Dù cố gắng, nhƣng lần đầu làm nghiên cứu khó tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp thầy để khóa luận thêm hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Tuyết Trinh DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Giải nghĩa APTT Thời gian thromboplastin phần hoạt hóa (Activated Partial Thromboplastin Time) DIC Đơng máu nội mạc rải rác (Disseminated Intravascular Coagulation) DMSO Dimethyl sulfoxide HP Heparin IC50 Liều ức chế 50% đối tƣợng thử (Inhibitory Concentration 50%) INR Chỉ số bình thƣờng hóa quốc tế (International Nomalized Ratio) LD50 Liều gây chết 50% đối tƣợng thử (Lethal Dose 50%) PBBt Cao chiết dung môi n - butanol Sâm vũ diệp PBEA Cao chiết dung môi ethyl acetat Sâm vũ diệp PBEt Cao chiết dung môi ete Sâm vũ diệp PBT Cao tổng chiết dung môi ethanol 70% Sâm vũ diệp PSBt Cao chiết dung môi n - butanol Tam thất hoang PSnH Cao chiết dung môi n - hexan Tam tất hoang PST Cao tổng chiết dung môi ethanol 70% Tam thất hoang PSW Cao chiết dung môi nƣớc Tam thất hoang PT Thời gian Prothrombin (Prothrombin Time) SVD Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) TTH Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H.T Tsai et K.M.Feng) v/v Thể tích/Thể tích DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 1.1 Sơ đồ đơng máu Hình 1.2 Mạng lƣới fibrin giam giữ hồng cầu Hình 1.3 Nguyên lý quy trình xét nghiệm đo thời gian PT 13 Hình 1.4 Nguyên lý quy trình xét nghiệm đo thời gian APPT 15 Hình 1.5 Nguyên lý quy trình xét nghiệm định lƣợng fibrinogen 17 Hình 1.6 Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) 18 Hình 1.7 Hợp chất saponin khung oleanan từ rễ SVD 19 Hình 1.8 Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H T Tsai et K M Feng) 21 Hình 1.9 Thành phần hóa học TTH 22 Hình 2.1 Sơ đồ chiết thu phân đoạn SVD 25 Hình 2.2 Sơ đồ chiết thu phân đoạn TTH 26 Hình 2.3 Ống đơng máu chứa sodium citrat 3,8% 28 Hình 2.4 Pipet 28 Hình 2.5 Máy ACL TOP500 nguyên lý đo quang máy ACL TOP500 29 Hình 3.1 Ảnh hƣởng phân đoạn dịch chiết SVD lên số đơng máu nội sinh APTT(s) 34 Hình 3.2 Ảnh hƣởng phân đoạn dịch chiết TTH lên số đông máu nội sinh APTT(s) 37 DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 3.1 Ảnh hƣởng PBT thời gian đông máu in vitro 31 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng PBBt thời gian đông máu in vitro 32 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng PBEA thời gian đông máu in vitro 33 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng PBEt thời gian đông máu in vitro 33 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng PST thời gian đông máu in vitro 35 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng PSBt thời gian đông máu in vitro 35 Bảng 3.7 Ảnh hƣởng PSnH thời gian đông máu in vitro 36 Bảng 3.8 Ảnh hƣởng PSW thời gian đông máu in vitro 37 MỤC LỤC DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Sinh lý q trình đơng máu 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Cơ chế đông máu 1.2 Điều hịa đơng máu sinh lý 1.3 Rối loạn đông máu 1.3.1 Rối loạn bẩm sinh 1.3.2 Rối loạn mắc phải 1.4 Các xét nghiệm đông máu 13 1.4.1 Thời gian Prothrombin 13 1.4.2 Thời gian thromboplastin phần hoạt hóa 15 1.4.3 Định lượng fibrinogen 16 1.5 Tổng quan Sâm vũ diệp Tam thất hoang 18 1.5.1 Sâm vũ diệp……………………………………………………….18 1.5.2 Tam thất hoang 20 CHƢƠNG - ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Khía cạnh đạo đức nghiên cứu 24 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu 25 2.3 Phƣơng pháp 27 CHƢƠNG - KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 31 3.1 Kết thực nghiệm 31 3.1.1 Sâm vũ diệp 31 3.1.2 Tam thất hoang 34 3.2 Bàn luận 38 CHƢƠNG - KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 43 4.1 Kết luận 43 4.2 Đề xuất 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, việc sử dụng thuốc chống đơng máu dự phịng điều trị bệnh nguyên nhân huyết khối đóng vai trị quan trọng Các thuốc chống đơng máu nhƣ heparin, wafarin, cho thấy hiệu điều trị tốt Tuy nhiên mặt hạn chế thuốc gây nhiều tác dụng phụ nhƣ: giảm tiểu cầu, dị ứng… [16] Y- dƣợc học giới nƣớc có xu hƣớng sử dụng thuốc có nguồn gốc thực vật để nhằm hạn chế tác dụng khơng mong muốn Việt Nam có hai loài sâm mọc tự nhiên vùng núi cao phía Tây Bắc Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H T Tsai et K M Feng) thuộc họ Ngũ gia bì - Araliace theo kinh nghiệm dân gian có tác dụng giảm đau, hoạt huyết, bổ máu [13] Tuy nhiên nghiên cứu tác dụng sinh học cịn hạn chế Cả lồi thuốc đặc biệt quý có nguy tuyệt chủng nƣớc ta Các nghiên cứu ban đầu thành phần hóa học Sâm vũ diệp (SVD) Tam thất hoang (TTH) cho thấy rễ lồi có chứa saponin khung dammaran oleanan với hàm lƣợng cao [50,57] Đặc biệt, saponin số thuộc chi Panax L đƣợc chứng minh có tác dụng chức đơng máu [40,44] Để làm rõ sở khoa học giá trị sử dụng lồi SVD TTH, góp phần sử dụng hợp lý hóa tài nguyên thiên nhiên áp dụng giải pháp khoa học công nghệ nhằm phát triển dƣợc liệu vùng, đặc biệt nghiên cứu tác dụng q trình đơng máu, tơi thực đề tài “Nghiên cứu tác dụng chống đông máu phân đoạn dịch chiết Sâm vũ diệp Tam thất hoang in vitro” Mục tiêu đề tài là: - Xây dựng mơ hình đánh giá tác dụng chống đông máu in vitro - Nghiên cứu tác dụng chống đông máu in vitro phân đoạn dịch chiết SVD TTH thông qua số PT APTT CHƢƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Sinh lý q trình đơng máu Đông máu trạng thái tự bảo vệ thể, chuỗi phản ứng hóa học yếu tố đơng máu có huyết tƣơng, mơ tổn thƣơng tiểu cầu [25,36,39] Sau khỏi lịng mạch - phút, máu đơng lại Trong máu mơ có khoảng 50 chất có ảnh hƣởng tới q trình đơng máu Các chất kích thích q trình gây đơng máu gọi chất gây đơng máu Các chất ức chế q trình gây đông máu gọi chất chống đông Máu có đơng hay khơng phụ thuộc vào cân chất gây đông máu chất chống đơng máu Bình thƣờng, chất chống đơng máu chiếm ƣu thế, chất gây đông dạng tiền chất khơng có hoạt tính, máu khơng đơng q trình lƣu thơng mạch máu Khi máu, mạch máu bị tổn thƣơng, máu lấy thể, chất gây đơng máu đƣợc hoạt hóa trở nên ƣu thế, đông máu đƣợc thực [11,15,25,36] 1.1.1 Định nghĩa Đơng máu q trình chuyển máu thể lỏng sang thể đặc, mà thực chất chuyển fibrinogen dạng hòa tan huyết tƣơng thành fibrin dạng khơng hịa tan dƣới xúc tác thrombin [20,25] 1.1.2 Cơ chế đông máu Lý thuyết dịng thác đơng máu từ năm 1979 [15] hoạt hoá theo chuỗi từ tiền yếu tố zymogen thành dạng enzym hoạt hố.Q trình đơng máu diễn qua giai đoạn (Hình 1.1) [20,25,36]: - Giai đoạn I: Hình thành phức hợp prothrombinase - Giai đoạn II: Hình thành thrombin - Giai đoạn III: Hình thành fibrin 1.1.2.1 Sự hình thành phức hợp prothrombinase Khởi động cho chế đơng máu hình thành phức hợp prothrombinase Đây chế phức tạp kéo dài q trình đơng máu Q trình đƣợc xảy có chấn thƣơng thành mạch mô, (***p

Ngày đăng: 23/09/2020, 21:50

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
7. Nguyễn Thƣợng Dong (2007), Sâm Việt Nam và một số cây thuốc họ Nhân sâm, NXB Khoa học Kỹ thuật Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sâm Việt Nam và một số cây thuốc họ Nhân sâm
Tác giả: Nguyễn Thƣợng Dong
Nhà XB: NXB Khoa học Kỹ thuật
Năm: 2007
8. Nguyễn Cẩm Dương (2010), Phân tích đa dạng di truyền nguồn tài nguyên một số loài cây dược liệu ở Việt Nam bằng chỉ thị ADN, Luận văn thạc sỹ khoa học, 38 - 39 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Phân tích đa dạng di truyền nguồn tài nguyên một số loài cây dược liệu ở Việt Nam bằng chỉ thị ADN
Tác giả: Nguyễn Cẩm Dương
Năm: 2010
9. Trần Thanh Hà, Đỗ Thị Hà, Nguyễn Minh Khởi (2014), “Thành phần hóa học cặn chiết ethyl acetat Sâm vũ diệp”, Tạp chí Dược liệu, 2 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Thành phần hóa học cặn chiết ethyl acetat Sâm vũ diệp”, "Tạp chí Dược liệu
Tác giả: Trần Thanh Hà, Đỗ Thị Hà, Nguyễn Minh Khởi
Năm: 2014
10. Đỗ Văn Hào, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Hữu Tùng (2017), “Nghiên cứu thành phần hóa học của rễ Sâm vũ diệp Panax bipinnatifidius”, Báo cáo khoa học Khoa Y- Dƣợc, Đại học Quốc Gia Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu thành phần hóa học của rễ Sâm vũ diệp "Panax bipinnatifidius”
Tác giả: Đỗ Văn Hào, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Hữu Tùng
Năm: 2017
11. Trần Văn Hòa (2008), Nghiên cứu một số yếu tố rối loạn đông cầm máu ở bệnh nhân xơ gan tại bệnh viện đa khoa trung ưng Thái Nguyên, Luận văn thạc sỹ y học Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu một số yếu tố rối loạn đông cầm máu ở bệnh nhân xơ gan tại bệnh viện đa khoa trung ưng Thái Nguyên
Tác giả: Trần Văn Hòa
Năm: 2008
12. Trần Công Luận (2002), “Nghiên cứu thành phần hóa học và một số tác dụng dƣợc lý của 2 loài Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) và Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu thành phần hóa học và một số tác dụng dƣợc lý của 2 loài Sâm vũ diệp ("Panax bipinnatifidus Seem
Tác giả: Trần Công Luận
Năm: 2002
13. Trần Công Luận, Lưu Thảo Nguyên, Nguyễn Tập (2009), “Nghiên cứu thành phần hóa học của 2 loài Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) và Tam thất hoang (Panax stipuleanatus. Tsai et Feng)”, Tạp chí Dược liệu, 1(14), 17-23 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu thành phần hóa học của 2 loài Sâm vũ diệp ("Panax bipinnatifidus" Seem.) và Tam thất hoang ("Panax stipuleanatus". Tsai et Feng)”, "Tạp chí Dược liệu
Tác giả: Trần Công Luận, Lưu Thảo Nguyên, Nguyễn Tập
Năm: 2009
14. Trần Công Luận (2009), “Nghiên cứu một số tác dụng dƣợc lý của Tam thất hoang - Panax stipuleanatus Tsai et Feng, Họ Araliacea”, Tạp chí Dược liệu, 14(2) Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu một số tác dụng dƣợc lý của Tam thất hoang - "Panax stipuleanatus" Tsai et Feng, Họ Araliacea”, "Tạp chí Dược liệu
Tác giả: Trần Công Luận
Năm: 2009
15. Nguyễn Ngọc Minh (2007), Bài giảng huyết học truyền máu, NXB Y học, Trường đại học Y khoa Huế, 414 - 441 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Bài giảng huyết học truyền máu
Tác giả: Nguyễn Ngọc Minh
Nhà XB: NXB Y học
Năm: 2007
16. Đỗ Trung Phấn (2009), Kỹ thuật xét nghiệm huyết học và truyền máu ứng dụng trong lâm sàng, NXB Y học Sách, tạp chí
Tiêu đề: Kỹ thuật xét nghiệm huyết học và truyền máu ứng dụng trong lâm sàng
Tác giả: Đỗ Trung Phấn
Nhà XB: NXB Y học
Năm: 2009
17. Nguyễn Tập (2005), “Các loài thuộc chi Panax L. ở Việt Nam”, Tạp chí Dược liệu, 3(10), 71 - 76 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Các loài thuộc chi Panax L. ở Việt Nam”, "Tạp chí Dược liệu
Tác giả: Nguyễn Tập
Năm: 2005
18. Đỗ Minh Thành (2013), Nghiên cứu đặc điểm di truyền của loài sâm mới Panax sp. Thu ở Phong Thổ Lai Châu, Luận văn thạc sỹ Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu đặc điểm di truyền của loài sâm mới Panax sp. Thu ở Phong Thổ Lai Châu
Tác giả: Đỗ Minh Thành
Năm: 2013
19. Ngô Vân Thu, Trần Hùng (2011), Dược liệu học, tập 1, NXB Y học Sách, tạp chí
Tiêu đề: Dược liệu học
Tác giả: Ngô Vân Thu, Trần Hùng
Nhà XB: NXB Y học
Năm: 2011
21. Nguyễn Anh Trí (2002), Đông máu ứng dụng trong lâm sàng, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, 40 - 41 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Đông máu ứng dụng trong lâm sàng
Tác giả: Nguyễn Anh Trí
Nhà XB: Nhà xuất bản Y học
Năm: 2002
22. Viện nghiên cứu thực vật Vân Nam (1975), Triterpene trong cây thuộc chi nhân sâm và mối liên quan đến hệ thống phân loại, phân bố địa lý, Thực vật phân loại học báo cáo, 13(2), 29 - 44.Tài liệu nước ngoài Sách, tạp chí
Tiêu đề: Triterpene trong cây thuộc chi nhân sâm và mối liên quan đến hệ thống phân loại, phân bố địa lý
Tác giả: Viện nghiên cứu thực vật Vân Nam
Năm: 1975
23. Appert F. A., Fischer F., Jambou D., Toulon P. (2007), “Evaluation and performance characteristics of the automated coagulation analyzer ACL TOP”, Thrombosis research, 120(5), 733-743 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Evaluation and performance characteristics of the automated coagulation analyzer ACL TOP”, "Thrombosis research
Tác giả: Appert F. A., Fischer F., Jambou D., Toulon P
Năm: 2007
24. Beck E. (1987), "Blood coagulation disorders", Schweizerische medizinische Wochenschrif, 117(18), 682 - 687 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Blood coagulation disorders
Tác giả: Beck E
Năm: 1987
25. Bloom A. L. (1990), “Physiology of blood coagulation”, Pathophysiology of Haemostasis and Thrombosis, 20(1), 14 - 29 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Physiology of blood coagulation”, "Pathophysiology of Haemostasis and Thrombosis
Tác giả: Bloom A. L
Năm: 1990
26. Byars T. D. (2007), "Blood Coagulation Disorders", Equine Emergencies: Treatment and Procedures, 259 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Blood Coagulation Disorders
Tác giả: Byars T. D
Năm: 2007
27. Choi K. T. (2008), "Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng CA Meyer", Acta Pharmacologica Sinica, 29(9), 1109 - 1118 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng CA Meyer
Tác giả: Choi K. T
Năm: 2008

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w