xây dựng phương pháp xác định một số thuốc kháng histamin h1 trộn trái phép trong chế phẩm đông dược bằng hplc và hptlc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ LAN XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC KHÁNG HISTAMIN H1 TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG HPLC HPTLC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ LAN XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC KHÁNG HISTAMIN H1 TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG HPLC HPTLC ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh HÀ NỘI 2020 LỜI CẢM ƠN Trong suốt q trình nghiên cứu hồn thành luận văn tốt nghiệp này, nhận giúp đỡ tận tình thầy giáo, anh chị cán bộ, ủng hộ gia đình bạn bè Tơi xin chân thành bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh, người trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình thực hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn thầy cô mơn Hóa phân tích- Độc chất, mơn Dược học cổ truyền anh chị cán Viện Công nghệ Dược Phẩm Quốc Gia bảo, hỗ trợ tạo điều kiện cho thiết bị, máy móc để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn thầy Ban Giám hiệu, phịng Đào tạo sau đại học, tồn thể thầy mơn trường Đại học Dược Hà Nội tận tình dạy dỗ giúp đỡ suốt thời gian học tập trường Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè động viên, quan tâm tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 10 tháng 03 năm 2020 Trần Thị Lan MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH v ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan đối tượng nghiên cứu 1.1.1.Nhóm thuốc kháng histamin H1 1.1.2 Một số nghiên cứu phát thuốc kháng histamin H1 trộn trái phép chế phẩm đông dược 1.2 Tổng quan phương pháp nghiên cứu 12 1.2.1 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ( HPLC) 12 1.2.2 Phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu cao (HPTLC) 13 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 14 2.1.1 Hoá chất - chất chuẩn 14 2.1.2 Máy móc - trang thiết bị 14 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Chuẩn bị mẫu 15 2.2.2 Xây dựng phương pháp phân tích 15 2.2.3 Xử lý mẫu 17 2.2.4 Thẩm định quy trình phân tích xây dựng 17 2.2.5 Ứng dụng phân tích mẫu thu thập 19 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 19 Chương THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 20 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích 20 3.1.1 Xây dựng phương pháp HPLC 20 i 3.1.2 Xây dựng phương pháp HPTLC 24 3.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu 27 3.3 Thẩm định phương pháp phân tích 29 3.3.1 Thẩm định phương pháp HPLC 29 3.3.2 Thẩm định phương pháp HPTLC 35 3.4 Ứng dụng phương pháp phân tích mẫu thực lưu hành thị trường 41 3.4.1 Kết phân tích mẫu thực HPTLC 41 3.4.2 Kết phân tích mẫu thực phương pháp HPLC 45 Chương BÀN LUẬN 48 4.1 Tạo mẫu 48 4.2 Xây dựng phương pháp phân tích 49 4.2.1 Lựa chọn phương pháp phân tích 49 4.2.2 Xây dựng phương pháp sắc ký 50 4.2.3 Lựa chọn xử lý mẫu 51 4.3 Thẩm định phương pháp 51 4.4 Ứng dụng 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 KẾT LUẬN 54 KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC 64 ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt ACN AOAC AR Tiếng Anh tên khoa học Acetonitrile Association of Official Analytical Hiệp hội nhà hóa phân Chemists tích thống Analytical Reagent Thuốc thử phân tích Chuẩn Chuẩn Viện kiểm nghiệm thuốc Trung ương VKNTTW CIN Cinnarizin CLO Clorpheniramin maleat CYP Cyproheptadin hydroclorid HPLC Tiếng Việt High Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Performance Chromatography HPTLC High Performance Thin Layer Sắc ký lớp mỏng hiệu Chromatography ICH International cao Conference on Hội nghị hòa hợp quốc tế Harmonisation LC – MS/MS Liquid Chromatography – Mass Sắc ký lỏng hai lần khối phổ Spectrometry/ Mass Spectrometry LOD Limit of Detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantitation Giới hạn định lượng LOR Loratadin MeOH Methanol PA Tinh khiết phân tích Pure Analysis PRO Promethazin hydroclorid RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối S/N Signal/Noise Tín hiệu/Nhiễu TLC Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các nghiên cứu phân tích số thuốc kháng histamin H1 trộn trái phép chế phẩm đông dược Bảng 2.1 Các nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 14 Bảng Kết quả khảo sát dung môi chiết (n=3) 28 Bảng Kết quả thẩm định tính thích hợp hệ thống HPLC 30 Bảng 3 Kết quả đánh giá khoảng nồng độ tuyến tính HPLC 31 Bảng Kết quả đánh giá độ độ xác mẫu (HPLC) 33 Bảng Kết quả xác định LOD, LOQ phương pháp HPLC 34 Bảng Kết quả thẩm định tính thích hợp hệ thống HPTLC 37 Bảng Kết quả đánh giá khoảng nồng độ tuyến tính HPTLC 38 Bảng Kết quả đánh giá độ độ xác mẫu (HPTLC) 39 Bảng Kết quả xác định LOD, LOQ HPTLC 40 Bảng 10 Kết quả định tính mẫu thực phương pháp HPTLC 42 Bảng 11 Kết quả định lượng mẫu thực dương tính HPTLC 43 Bảng 12 Kết quả định tính mẫu thực phương pháp HPLC 45 Bảng 13 Kết quả định lượng mẫu thực dương tính HPLC 46 iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Sắc ký đồ khảo sát hệ pha động HPLC 21 Hình Sắc ký đồ khảo sát tốc độ dòng pha động 21 Hình 3 Sắc ký đồ khảo sát lựa chọn cột sắc ký HPLC 22 Hình Phổ hấp thụ UV chất nghiên cứu máy HPLC 23 Hình Sắc ký đồ khảo sát pha động HPTLC 24 Hình Sắc ký đồ lựa chọn tỉ lệ thành phần pha động HPTLC 25 Hình Phổ hấp thụ UV chất nghiên cứu (phương pháp HPTLC) 26 Hình Kết quả khảo sát lựa chọn dung môi chiết 27 Hình Sơ đồ quy trình xử lý mẫu 29 Hình 10 Sắc ký đồ đánh giá độ đặc hiệu phương pháp HPLC 30 Hình 11 Sắc ký đồ xác định LOD phương pháp HPLC (nền N3) 34 Hình 12 Sắc ký đồ sắc đồ analog đánh giá độ đặc hiệu phương pháp HPTLC 36 Hình 13 Sắc ký đồ analog xác định LOD viên nang (N3) (HPTLC) 40 Hình 14 Sắc ký đồ phân tích mẫu thực phương pháp HPTLC 41 Hình 15 Sắc ký đồ HPTLC analog mẫu dương tính M22 (a) chồng phổ UV vị trí có Rf = 0,26 ( vết CLO) M22 CLO chuẩn (b) 44 Hình 16 Sắc ký đồ HPLC mẫu dương tính M22 (a) chồng phổ UV tại vị trí có tR = 6,016 ( pic CLO) M22 CLO chuẩn (b) 47 v ĐẶT VẤN ĐỀ Với đặc điểm khí hậu nhiệt đới ẩm tình trạng ô nhiễm môi trường ngày gia tăng Việt Nam, tỉ lệ người mắc bệnh dị ứng tăng nhanh [42], [56] Thuốc điều trị triệu chứng nên bệnh tái tái lại Bên cạnh sử dụng thuốc hóa dược, người bị dị ứng hay tìm sử dụng chế phẩm đông dược, với “niềm tin” chế phẩm an tồn tác dụng phụ Tuy nhiên, lợi nhuận nhiều người sản xuất trộn thêm thuốc hóa dược để bệnh người dùng mau giảm triệu chứng, bán số lượng nhiều Việc mối quan tâm lớn quan quản lý mà cộng đồng có nhiều báo cáo rủi ro ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe mà nguyên nhân từ chế phẩm đơng dược khẳng định "hồn tồn tự nhiên" Nhóm thuốc hóa dược để điều trị dị ứng hay sử dụng nhóm kháng histamin H1 Các dược chất thuộc nhóm thuốc có giá rẻ, tác dụng nhanh, mạnh mức liều thấp nên khả chất trộn chế phẩm đông dược trị mề đay, mẩn ngứa, dị ứng, cảm cúm…là cao khó bị phát Ngồi chúng cịn có tác dụng an thần, chống nơn, chống đau đầu (cinarizin), kích thích ăn ngon (cyproheptadin hydroclorid)… Tuy nhiên, thuốc thuộc nhóm gây tác dụng phụ, đặc biệt trộn lẫn vào chế phẩm đông dược dùng thời gian kéo dài Các tác dụng phụ thường gặp như: buồn ngủ, ngủ gà, mệt mỏi, chóng mặt, tăng co giật trẻ em, khô miệng, khô họng, khô mũi, gây ăn ngon, buồn nôn, tiêu chảy… [4-6] Do đó, việc phát triển phương pháp phân tích phát chất trộn trái phép quan trọng để đảm bảo chất lượng thuốc đông dược thực phẩm chức phục vụ tốt công tác chăm sóc sức khỏe cộng đồng Các quy trình phát thành phần thuốc đông dược phức tạp thách thức Phương pháp hay sử dụng phát thuốc hóa dược nói chung thuốc hóa dược kháng histamin H1 nói riêng trộn trái phép chế phẩm đông dược thường LC-MS [30], LC-MS-MS [14], [19], [38], [39],[53],[54], GC –MS [41] với độ đặc hiệu cao LOD thấp Tuy nhiên hệ thống LC-MS đắt tiền không phổ biến so với HPLC HPTLC Xuất phát từ thực tế đó, đề tài: “Xây dựng phương pháp xác định số thuốc kháng histamin H1 trộn trái phép chế phẩm đông dược HPLC HPTLC” thực với mục tiêu: Xây dựng quy trình định tính, định lượng đồng thời số thuốc kháng histamin H1 (Cinarizin, Clorpheniramin maleat, Cyproheptadin hydroclorid, Loratadin, Promethazin hydroclorid) trộn trái phép chế phẩm đông dược HPLC HPTLC Áp dụng quy trình xây dựng để xác định thuốc kháng histamin H1 trộn lẫn số chế phẩm đơng dược ( có) 4.11 Mẫu M22 196 Hình PL4A.11.1.Sắc ký đồ mẫu dương tính M22 200 300 400 500 755 658 487 392 244 261 500 309 329 mAU 1500 6.016/ 1.00 0.9998 clo.jcm/ 1.04 1000 600 700 Hình PL4A.11.2 Kết quả chồng phổ vị trí CLO 106 nm 4.12 Mẫu M25 Hình PL4A.12.1.Sắc ký đồ mẫu dương tính M25 199 mAU 750 5.923/ 1.00 0.9997 clophe.jcm/ 0.97 500 200 300 400 500 600 752 637 657 582 485 435 303 324 250 700 Hình PL4A.12.2 Kết quả chồng phổ vị trí CLO 107 nm 4B HPTLC Hình PL4B.1 Sắc ký đồ bản mỏng phân tích mẫu thực Hình PL4B.2 Sắc ký đồ analog mẫu chuẩn Hình PL4B.3 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M01 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M01 CLO chuẩn 108 Hình PL4B.4 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M02 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M02 CLO chuẩn Hình PL4B.5 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M03 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO,CIN) M03 CLO, CIN chuẩn Hình PL4B.6 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M08 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M08 CLO chuẩn 109 Hình PL4B.7 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M12 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết PRO) M12 PRO chuẩn Hình PL4B.8 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M13 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CYP) M13 CYP chuẩn Hình PL4B.9 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M14 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CYP) M14 CYP chuẩn 110 Hình PL4B.10 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M16 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CYP,CIN) M16 CYP, CIN chuẩn Hình PL4B.11 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M19 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết LOR) M19 LOR chuẩn Hình PL4B.12 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M21 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M21 CLO chuẩn 111 Hình PL4B.13 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M22 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M22 CLO chuẩn Hình PL4B.14 Sắc ký đồ analog mẫu dương tính M25 chồng phổ UV vị trí có Rf ( vết CLO) M25 CLO chuẩn 112 PHỤ LỤC 5: DANH MỤC CÁC CHẾ PHẨM ĐƠNG DƯỢC ĐƯỢC PHÂN TÍCH Bảng PL5 Danh mục mẫu thực chế phẩm đơng dược phân tích ST Nguồ T Tên thuốc Số lô, hạn dùng, nơi sản xuất n gốc/ Liều dùng Cách mua Intern Đặc trị chữa et Số lơ: Khơng có bệnh Hạn dùng: Khơng có lần/ngày (Bột) SĐK: Khơng có 1/2 Nhà sản xuất: Đơng y gia truyền – gói/lần Khánh Hịa Intern Thuốc đặc trị et Số lơ: Khơng có 2-3 viêm mũi thấp Hạn dùng: Khơng có lần/ngày khớp SĐK: Khơng có gói/lần (Bột) Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền – Y học dân tộc Thị trấn Trà Sư – Khánh Hòa Lươn Đặc trị bệnh Số lơ: Khơng có gy ngồi da - Đơng Hạn dùng: Khơng có lần/ngày y gia truyền SĐK: Khơng có Phúc Thanh Nhà sản xuất: Đông y gia truyền viên/lần Đường – (Viên Phúc Thanh Đường – Hà Nội nang cứng) Lươn Đặc trị bệnh Số lô: Không có gy ngồi da) Hạn dùng: Khơng có lần/ngày (Nang cứng) SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Đơng y gia truyền viên/lần 113 Hà Nội Lươn Không có tên Số lơ: Khơng có gy (thuốc đặc trị Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay) SĐK: Khơng có (Bột) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đơng y thìa/lần gia truyền Khương Viên – Hà Nội Lươn Khơng có tên Số lơ: Khơng có gy (thuốc đặc trị Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay, dị ứng) SĐK: Khơng có muỗng (Hồn cứng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc Đức Phú canh/lần Đường – Đà Nẵng Lươn Khơng có tên Số lơ: Khơng có gy (thuốc đặc trị Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay) SĐK: Khơng có (Hồn mềm) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đông y viên/lần gia truyền Đức Hưng – Hà Nội Lươn Trị viêm mũi Số lô: Không có gy (Bột) Hạn dùng: Khơng có lần/ngày SĐK: Khơng có gói/lần Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền Đông y Đỗ Thái Nam – An Giang Lươn Khơng có tên Số lơ: Khơng có gy (thuốc đặc trị Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay, dị ứng) SĐK: Khơng có muỗng (Bột) Nhà sản xuất: Hiệu thuốc bắc cafe/lần Xuân Phước Đường - Đà Nẵng 114 10 Lươn gy Khơng có tên Số lơ: Khơng có (thuốc trị ngứa Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay) SĐK: Khơng có 1/5 (Bột) Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền – gói/lần Hà Tĩnh 11 Mẫu gửi Tiêu độc mát Số lơ: Khơng có gan Hạn dùng: Khơng có lần/ngày (Hồn mềm) SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền – viên/lần Hà Nội 12 Mẫu gửi Khơng có tên Số lơ: Khơng có (thuốc trị ngứa Hạn dùng: Khơng có lần/ngày mề đay) SĐK: Khơng có (Nang cứng) Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền – viên/lần Hà Nội 13 Mẫu gửi BVGV-3 Số lơ: Khơng có (thuốc bổ can Hạn dùng: 25/11/2020 lần/ngày thận, tráng SĐK: Khơng có gói/ dương, tăng Nhà sản xuất: lần cường sinh lực) Thuốc đông y gia truyền- Hà Nội (Bột) 14 15 Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ngày gửi (thuốc tiêu độc Hạn dùng: Khơng có viên/lần giải nhiệt, mát SĐK: Khơng có gan thận) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đơng y gia (Hồn mềm) truyền Hồng Phúc – Hà Nội Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ ngày gửi (Thuốc trị mẩn Hạn dùng: Khơng có gói/lần ngứa, mề đay, dị SĐK: Khơng có 115 16 ứng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đơng y gia (Bột) truyền Thanh Thanh – Hà Nội Mẫu TTGV-3 Số lơ: Khơng có lần/ngày gửi (thuốc khu Hạn dùng: 25/11/2020 30-50 phong, trừ thấp, SĐK: Khơng có viên/ lần tiêu viêm, hóa Nhà sản xuất: đàm, tán ứ, Thuốc đông y gia truyền – Hà Nội thông kinh lạc) ( Hồn cứng) 17 Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ ngày gửi (Thuốc trị mẩn Hạn dùng: Khơng có gói/lần ngứa, mề đay, dị SĐK: Khơng có 18 ứng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đông y gia (Bột) truyền – Nam Định Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ ngày gửi (Thuốc trị mẩn Hạn dùng: Khơng có gói/lần ngứa, mề đay, dị SĐK: Khơng có 19 ứng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đông y gia (Bột) truyền – Thái Bình Mẫu Trị viêm mũi Số lơ: Khơng có lần/ngày gửi (Bột) Hạn dùng: Khơng có gói/lần SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: An Giang 20 Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ ngày gửi (Thuốc trị cảm, Hạn dùng: Khơng có 20 viên/lần ho, sổ mũi, viêm SĐK: Khơng có 21 Mẫu họng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đơng y gia (Hồn cứng) truyền Thanh Thanh – Hà Nội Trân châu mạo Số lơ: Khơng có 116 gói chia gửi khải tán NSX: 10/08/2018 (Hoàn cứng) Hạn dùng: 10/08/2021 lần/ngày SĐK: V118-H12-18 Nhà sản xuất: Khơng có ( An Giang) 22 Mẫu Viêm mũi xoang Số lơ: Khơng có 10 viên/ gửi (nang cứng) ngày/ lần NSX: 10/05/2017 Hạn dùng: 10/05/2020 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Cơ sở sản xuất kinh doanh Đặng Thiên Phúc- An Giang 23 Mẫu Khơng có tên Số lơ: Khơng có lần/ ngày gửi (Thuốc trị mẩn Hạn dùng: Khơng có viên/lần ngứa, mề đay, dị SĐK: Khơng có 24 Mẫu gửi 25 Mẫu gửi ứng) Nhà sản xuất: Nhà thuốc đông y gia (Nang cứng) truyền– Hà Nội Khơng có tên (thuốc trị cảm cúm, sổ mũi, viêm họng, ho đờm) (Nang cứng) Khơng có tên (thuốc đặc trị mề đay) (Bột) Số lơ: Khơng có lần/ ngày Hạn dùng: Khơng có viên/lần SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Nhà thuốc đông y gia truyền– Hà Nội Số lô: Khơng có Hạn dùng: 20 ngày kể từ ngày sản xuất SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền 17 Trần Xuân Soạn – Hà Nội 117 lần/ngày gói/lần PHỤ LỤC : CƠNG THỨC CÁC BÀI THUỐC VÀ HÌNH ẢNH CÁC NỀN MẪU XÂY DỰNG Bảng PL6 Các mẫu nghiên cứu STT Thành phần 9 10 11 12 13 14 10 11 Tên khoa học Nền N1: ( viên hoàn ) Ngân kiều tán Kim ngân hoa Flos Lonicerae Liên kiều Fructus Forsythiae Cát cánh Radix Platycodi Bạc hà Herba Menthae Đạm trúc diệp Herba Lophatheri Cam thảo Radix Glycyrrhizae Kinh giới tuệ Herba Ocimi saneticristataae Đạm đậu xị Sojae praeparatum Ngưu bàng tử Fuctus Arctii Nền N2: ( bột cốm ) Liên kiều bại độc tán Liên kiều Fructus Forsythiae Chi tử Fructus Gardeniae Khương hoạt Rhizoma et Radix Notopterygii Huyền sâm Radix Scrophulariae Bạc hà Herba Menthae Phòng phong Radix Saposhnikoviae divaricatae Sài hồ Radix Bupleuri Cát cánh Radix Platycodi Thăng ma Rhizoma Cimicifugae Xuyên khung Rhizoma Ligustici wallichii Đương quy Radix Angelicae sinensis Hoàng cầm Radix Scutellariae Bạch thược Radix Paeoniae lactiflorae Ngưu bàng tử Fructus Arctii Nền N3: ( Viên nang ) Tiêu phong tán gia giảm Kinh giới Spica Elsholtziae Phòng phong Radix Saposhnikoviae divaricatae Ngưu bàng tử Fructus Arctii Thuyền thoái Periostracum Cicadae Sinh địa Radix Rehmanniae glutinosae Đan bì Cortex Paeoniae suffruticosae Bạch thược Radix Paeoniae lactiflorae Thổ phục linh Smilax glabra Ké đầu ngựa Fructus Xanthii strumarii Bồ công anh Herba Taraxaci Cam thảo Radix Glycyrrhizae 118 Khối lượng 40 g 40 g 24 g 24 g 16 g 20 g 16 g 20 g 24 g 12 g 12 g 10 g 10 g 8g 10 g 12 g 10 g 10 g 10 g 12 g 10 g 10 g 8g 16 g 12 g 12 g 8g 16 g 8g 8g 16 g 8g 12 g g - Nền (viên hoàn) Tiến hành thang thuốc theo tỷ lệ thành phần bảng 3.1 + Điều chế cao đặc dược liệu: Cân thành phần kim ngân hoa, liên kiều, cát cánh, trúc diệp, đạm đậu xị, ngưu bàng tử, cam thảo Thái nhỏ, thêm nước ngập dược liệu, đun sôi Giảm nhiệt độ, tiếp tục đun sôi tiếng, bổ sung nước để đảm bảo nước ngập dược liệu Sau đó, lọc qua vải lọc thu dịch chiết lần Thêm tiếp nước vào bã dược liệu lần đến ngập, đun sôi Giảm nhiệt độ, tiếp tục đun sôi tiếng, bổ sung nước để đảm bảo nước ngập dược liệu Sau đó, lọc qua vải lọc thu dịch chiết lần Gộp dịch lọc lần lần 2, cô đến thành cao đặc + Điều chế bột mịn dược liệu: Cân thành phần bạc hà, kinh giới tuệ, thái nhỏ, sấy khô xay thành bột mịn, rây qua rây kích thước 0,2 mm, đồng mẫu + Trộn bột dược liệu với cao đặc dược liệu tạo khối ẩm, vê trịn thành viên sấy khơ viên Bao màu dịch bao màu (hòa tan than hoạt, bột talc vào siro tỷ lệ 1:1) đến viên có màu đồng nhất, sấy khơ viên đóng gói Khối lượng trung bình gói (1 liều): 5,0064 g - Nền (bột cốm) Tiến hành 10 thang thuốc theo tỷ lệ thành phần bảng 3.1 - Điều chế cao đặc dược liệu: Thái nhỏ, thêm nước ngập dược liệu, nấu thành cao đặc theo quy trình tương tự Bổ sung glucose tá dược dính polyvidon/ethanol 96% vào cao đặc tạo khối ẩm Xát hạt qua rây 1,0 mm sấy nhiệt độ 60˚C đến cốm khô Sửa hạt qua rây 1,25 mm thu bột cốm tan, đóng gói Khối lượng trung bình gói (1 liều): 1,4058 g - Nền (viên nang cứng) Tiến hành 10 thang thuốc theo tỷ lệ thành phần bảng 3.1 - Điều chế cao đặc dược liệu: Cân thành phần trừ kinh giới Thái nhỏ, thêm nước ngập dược liệu, nấu thành cao đặc theo quy trình tương tự - Điều chế bột mịn dược liệu: Cân thành phần kinh giới thái nhỏ, sấy khô xay thành bột min, rây qua rây kích thước 0,2 mm, làm đồng 119 - Trộn bột dược liệu với cao đặc dược liệu tạo khối ẩm, rây qua rây 1,0 mm tạo hạt, sấy hạt nhiệt độ 60˚C đến có hàm ẩm thích hợp Trộn hạt với tá dược trơn (bột talc, magnise sterat tỷ lệ 1%) đóng nang số Khối lượng trung bình viên: 0,6494 g Khối lượng liều (5 viên): 3,247 g Hình PL6.1 Nền N1 – viên hồn Hình PL6.2 Nền N2 – bột cốm Hình PL6.3 Nền N3 – viên nang 120 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ LAN XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC KHÁNG HISTAMIN H1 TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG HPLC HPTLC ĐỀ CƯƠNG... với HPLC HPTLC Xuất phát từ thực tế đó, đề tài: ? ?Xây dựng phương pháp xác định số thuốc kháng histamin H1 trộn trái phép chế phẩm đông dược HPLC HPTLC? ?? thực với mục tiêu: Xây dựng quy trình định. .. thuốc kháng histamin H1 1.1.2 Một số nghiên cứu phát thuốc kháng histamin H1 trộn trái phép chế phẩm đông dược 1.2 Tổng quan phương pháp nghiên cứu 12 1.2.1 Phương pháp