nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định một số thành phần trong quế bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VIỆT NGÂN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN TRONG QUẾ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VIỆT NGÂN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN TRONG QUẾ QUẾ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo PGS.TS Lê Đình Chi HÀ NỘI 2020 LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ kính trọng lịng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Lê Đình Chi PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo tâm huyết tận tình hướng dẫn, bảo tơi suốt thời gian thực hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc chân thành tới PGS TS Nguyễn Thị Ánh Hường cho lời khuyên quý báu, dành nhiều thời gian tạo điều kiện tối đa giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn ThS Vũ Thị Trang anh chị, bạn khoa Dinh dưỡng phụ gia thực phẩm – Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện nhiệt tình giúp đỡ tơi thời gian thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Hiệu, phòng Sau đại học, mơn Hóa phân tích – trường Đại học Dược Hà Nội, thầy cô giảng dạy giúp đỡ tơi q trình học tập trường Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè – người đồng hành thiếu học tập sống ln động viên khích lệ tơi ngày qua Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 15 tháng 04 năm 2020 Sinh viên LÊ VIỆT NGÂN MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan quế 1.1.1 Đặc điểm thực vật phân bố 1.1.2 Bộ phận dùng 1.1.3 Thành phần hoá học 1.1.4 Tác dụng dược lý quế 1.1.5 Tính vị, cơng năng, cơng dụng quế 1.2 Tổng quan số hoạt chất quế 10 1.2.1 Coumarin 10 a Độc tính động vật 10 b Độc tính người 11 1.2.2 Acid cinnamic 11 1.2.3 Cinnamyl alcohol 12 1.2.4 Cinnamaldehyd 12 1.2.5 Eugenol 13 1.2.6 Cinnamyl acetat 14 1.2.7 Acid 2-hydroxycinnamic 14 1.3 Tổng quan phương pháp xác định số thành phần quế 15 1.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 15 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 18 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Đối tượng nghiên cứu 20 2.2 Nguyên vật liệu – thiết bị 20 2.2.1 Nguyên vật liệu 20 2.2.2 Thiết bị 21 2.2.3 Nội dung nghiên cứu 22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Khảo sát điều kiện phân tích chất HPLC 22 2.3.2 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu 23 2.3.3 Thẩm định quy trình 23 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 24 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Thiết lập điều kiện sắc ký để phân tích số chất quế phương pháp HPLC 25 3.1.1 Chọn bước sóng phát 25 3.1.2 Khảo sát điều kiện chạy sắc ký 27 3.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu 29 3.2.1 Khảo sát dung môi chiết 30 3.2.2 Khảo sát nhiệt độ chiết mẫu 30 3.2.3 Khảo sát thời gian chiết mẫu 31 3.2.4 Khảo sát cách chiết mẫu 32 3.2.5 Khảo sát cách làm mẫu 32 3.3 Thẩm định phương pháp 34 3.3.1 Tính đặc hiệu / chọn lọc 34 3.3.2 Độ thích hợp hệ thống 35 3.3.3 Khoảng tuyến tính 36 3.3.4 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) 38 3.3.5 Độ lặp lại 39 3.3.6 Độ thu hồi 43 3.4 Kết phân tích số mẫu quế thực phẩm chứa quế 47 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 50 4.1 Lựa chọn phương pháp 50 4.2 Điều kiện xử lý mẫu 50 4.3 Xây dựng phương pháp định lượng 51 4.4 Kết mẫu thực 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tiếng anh Tiếng việt AOAC Association of Official Analytical Communities Hiệp hội cộng đồng phân tích thức BW Body weight Trọng lượng thể ESI Electrospray ionization Ion hóa tia điện GC-MS Gas chromatography mass spectrometry Sắc kí khí khối phổ Liquid chromatography coupled to LC-UV/MS diode array UV detection and mass spectrometry sắc ký lỏng kết hợp với đầu dò mảng diode UV khối phổ LOD Limit of detection Giới hạn phát LOQ Limit of quantification Giới hạn định lượng MS Mass spectrometry Khối phổ PDA Photodiode Array Mảng diod quang PSA Primary Secondary Amine Amin bậc bậc QuEChERS Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, Safe Nhanh chóng, dễ dàng, rẻ tiền, hiệu quả, chắn an toàn R(%) Recovery Hiệu suất thu hồi SPE Solid phase extraction Chiết pha rắn SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn TDI Tolerable daily intake Lượng dung nạp hàng ngày HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao TPCN Thực phẩm chức TP Thực phẩm tt:tt Thể tích : thể tích DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1.1: Một số phương pháp xác định chất quế 16 Bảng 2.1: Khối lượng chuẩn cân 21 Bảng 2.2: Danh mục pha động HPLC khảo sát 23 Bảng 3.1: Bước sóng hấp thụ cực đại chất 25 Bảng 3.2: Chương trình gradient 28 Bảng 3.3: Độ thích hợp hệ thống theo diện tích chất chuẩn 35 Bảng 3.4: Độ thích hợp hệ thống theo thời gian lưu chất chuẩn 36 Bảng 3.5: Kết khảo sát khoảng tuyến tính chất chuẩn acid 2hydroxycinnamic, coumarin, acid cinnamic, cinnamyl alcohol, cinnamyl acetat 37 Bảng 3.6: Kết khảo sát khoảng tuyến tính eugenol cinnamaldehyd 38 Bảng 3.7: LOD LOQ chất phân tích 39 Bảng 3.8: Độ lặp lại chất mẫu thực phẩm chứa quế 40 Bảng 3.9: Độ lặp lại chất mẫu quế 41 Bảng 3.10: Độ thu hồi chất mẫu quế 42 Bảng 3.11: Độ thu hồi chất mẫu thực phẩm chứa quế 45 Bảng 3.12: Kết phân tích số mẫu quế thực phẩm chứa quế 48 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Tên hình Trang Hình 1.1: Hình ảnh dược liệu quế Hình 1.2: Cơng thức cấu tạo coumarin 10 Hình 1.3: Cơng thức cấu tạo acid cinnamic 11 Hình 1.4: Cơng thức cấu tạo cinnamyl alcohol 12 Hình 1.5: Cơng thức cấu tạo cinnamaldehyd 12 Hình 1.6: Cơng thức cấu tạo eugenol 13 Hình 1.7: Cơng thức cấu tạo cinnamyl acetat 14 Hình 1.8: Cơng thức cấu tạo acid 2-hydroxycinnamic 15 Hình 3.1: Phổ hấp thụ UV-Vis chất theo thứ tự từ xuống: acid 2-hydroxycinnamic, coumarin, acid cinnamic, cinnamyl alcohol, cinnamaldehyd, eugenol, cinnamyl acetat 26 Hình 3.2: Sắc ký đồ dung dịch chuẩn chất với pha động 27 Hình 3.3: Sắc ký đồ dung dịch dung dịch chất chuẩn với hệ pha động 28 Hình 3.4: Sắc ký đồ dung dịch chuẩn chất với chương trình gradient 28 Hình 3.5: Kết khảo sát dung mơi chiết mẫu 30 Hình 3.6: Kết khảo sát nhiệt độ chiết mẫu 31 Hình 3.7: Kết khảo sát thời gian chiết mẫu 31 Hình 3.8: Kết khảo sát cách chiết 32 Hình 3.9: Kết khảo sát quy trình làm 33 Hình 3.10: Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp bước sóng 250 nm 34 Hình 3.11: Sắc ký đồ mẫu trắng bước sóng 250 nm 34 Hình 3.12: Sắc ký đồ mẫu trắng thêm chuẩn bước sóng 250 nm 35 Hình 3.13: Sắc ký đồ mẫu thực bước sóng 250 nm 35 Hình 3.14: Đường hồi quy tuyến tính diện tích pic nồng độ acid 2-hydroxycinnamic, coumarin, acid cinnamic, cinnamyl alcohol, cinnamyl acetat 37 Hình 3.15: Đường hồi quy tuyến tính diện tích pic nồng độ cinnamaldehyd eugenol 38 ĐẶT VẤN ĐỀ Quế chi loài thực vật thuộc họ Long não (Lauraceae) Quế loại gia vị quan trọng sử dụng nhiều quốc gia giới Quế chủ yếu chứa loại dầu quan trọng chẳng hạn cinnamaldehyd, acid cinnamic cinnamat Ngồi khả chống oxy hóa, chống viêm, trị đái tháo đường, kháng khuẩn, chống ung thư, hạ lipid hợp chất hạ thấp bệnh tim mạch, quế cịn báo cáo có hoạt động chống lại rối loạn thần kinh, bệnh Parkinson Alzheimer [20] Ngồi chất có tác dụng có lợi quế chứa coumarin chất có khả gây độc cho gan gây ung thư sử dụng thời gian dài Có nhiều liệu thí nghiệm coumarin có độc tính gan động vật có liệu lâm sàng nhiễm độc gan người từ bệnh nhân điều trị coumarin Dữ liệu cho thấy nhóm nhỏ quần thể người dễ bị ảnh hưởng đến gan lồi động vật thí nghiệm Ngun nhân nhạy cảm cao chưa biết Dựa liệu sẵn có, Cơ quan An toàn Thực phẩm Châu Âu chấp nhận lượng dung nạp hàng ngày (TDI) coumarin 0,1 mg/kg bw/ngày [7] Hiện nay, thị trường có nhiều sản phẩm bổ sung quế thực chất bổ sung hương quế chứa số thành phần quế Do đó, cần có phương pháp đánh giá việc sử dụng quế thị trường sử dụng quế tự nhiên hay sử dụng hương quế nhắm giúp quan kiểm tra có đánh giá xác việc ghi nhãn thành phần sản phẩm Quế tự nhiên có thành phần cinnamaldehyd, acid cinnamic, coumarin, cinnamyl alcohol, cinnamyl acetat, acid 2hydroxycinnamic, eugenol với tỷ lệ khác tùy thuộc vào lồi khu vực trồng, cịn hương quế có cinnamaldehyd Trên giới có nhiều phương pháp nghiên cứu thành phần có quế như: HPLC-PDA, LC-MS/MS,… Tuy nhiên, Việt Nam chưa có phương pháp tiêu chuẩn để xác định hàm lượng số hoạt chất quế mẫu thực phẩm thực phẩm chức có thành phần quế 15.890 0.14 0.12 0.10 AU 0.08 0.04 12.461 10.947 0.06 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 14.222 Dung môi chiết H2O 0.20 0.10 0.05 12.505 10.899 AU 0.15 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 16.00 18.00 20.00 14.404 Dung môi chiết CH3CN Phụ lục 6: Khảo sát cách chiết mẫu 0.20 0.10 0.05 12.651 11.093 AU 0.15 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 Lắc tay 14.315 0.20 0.10 0.05 12.584 11.002 AU 0.15 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 14.244 Lắc máy lắc ngang 0.10 0.05 12.502 10.930 AU 0.15 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 18.00 20.00 Rung siêu âm Phụ lục 7: Khảo sát cách làm mẫu 0.40 0.10 16.767 - 50448 0.20 12.455 - 26288 10.866 - 195496 AU 0.30 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Sử dụng PSA (0.05g), MgSO4 (0.15g) PL 0.12 0.06 0.04 16.765 - 14098 AU 0.08 12.477 - 5005 10.879 - 171501 0.10 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 14.00 16.00 18.00 20.00 18.00 20.00 Sử dụng C18 (0.05g), MgSO4 (0.15g) 0.10 0.05 12.479 - 12952 10.880 - 195843 AU 0.15 16.787 - 25826 0.20 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 Sử dụng C18,PSA, MgSO4 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 cinnamic acid - 9.604 - 654843 0.30 AU AU 0.10 0.40 coumarin - 8.511 - 1178668 0.15 cinnamaldehyde - 11.446 - 3238671 2-Hydroxycinnamic acid - 6.519 - 2688 Thẩm định phương pháp Phụ lục 8: Khảo sát độ lặp lại Nền mẫu quế Lần Khơng lỗng Lỗng lần 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm 0.20 0.10 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 18.00 20.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.494 - 2763 Bước sóng 250 nm Lần Khơng lỗng 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 cinnamic acid - 9.559 - 660247 0.30 AU 0.10 0.40 coumarin - 8.484 - 1178931 AU 0.15 Loãng lần cinnamaldehyde - 11.453 - 3263849 AU 0.30 cinnamyl acetat - 15.778 - 114100 cinnamyl alcohol - 10.868 - 272411 0.40 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 Bước sóng 280 nm AU 0.30 0.20 0.10 cinnamyl acetat - 15.777 - 112967 cinnamyl alcohol - 10.872 - 271756 0.40 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm Lần PL 18.00 20.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.05 0.00 2.00 4.00 cinnamic acid - 9.567 - 676399 6.00 8.00 0.30 AU 0.10 0.40 coumarin - 8.495 - 1196056 AU 0.15 cinnamaldehyde - 11.457 - 3315872 Loãng lần 2-Hydroxycinnamic acid - 6.483 - 2869 Khơng lỗng 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm 0.20 0.10 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.483 - 2641 Bước sóng 250 nm Lần Khơng lỗng 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 0.40 8.00 cinnamic acid - 9.545 - 663873 0.30 AU 0.10 Loãng lần coumarin - 8.474 - 1179792 AU 0.15 20.00 cinnamaldehyde - 11.468 - 3271584 AU 0.30 cinnamyl acetat - 15.784 - 113858 cinnamyl alcohol - 10.881 - 270204 0.40 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm 0.20 0.10 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 16.00 18.00 20.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.517 - 2859 Bước sóng 250 nm Lần Khơng lỗng 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 cinnamic acid - 9.588 - 661249 0.30 AU 0.10 0.40 coumarin - 8.503 - 1180547 AU 0.15 Loãng lần cinnamaldehyde - 11.495 - 3306386 AU 0.30 cinnamyl acetat - 15.795 - 112948 cinnamyl alcohol - 10.890 - 267070 0.40 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm 0.20 0.10 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 18.00 20.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.516 - 2760 Bước sóng 250 nm Lần Khơng lỗng 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 cinnamic acid - 9.570 - 674065 10.00 Minutes 0.40 AU 0.10 0.50 coumarin - 8.492 - 1192925 AU 0.15 Loãng lần cinnamaldehyde - 11.746 - 3346758 AU 0.30 cinnamyl acetat - 15.811 - 110924 cinnamyl alcohol - 10.910 - 272095 0.40 0.30 0.20 0.10 0.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 PL 2.00 4.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 AU 0.00 2.00 4.00 0.06 0.04 0.02 0.00 6.00 8.00 Bước sóng 280 nm 0.04 0.02 0.00 8.00 10.00 Minutes 0.000 0.08 10.00 Minutes 12.00 14.00 12.00 14.00 16.00 16.00 18.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Lần 20.00 Bước sóng 280 nm Lần 20.00 Bước sóng 280 nm Lần 0.00 0.020 0.010 0.00 0.00 2.00 2.00 4.00 2.00 4.00 4.00 6.00 0.030 0.020 0.010 0.00 0.000 4.00 6.00 0.030 0.020 0.010 6.00 0.030 0.020 0.010 0.000 6.00 8.00 8.00 8.00 10.00 Minutes 8.00 Bước sóng 250 nm PL 10.00 Minutes 10.00 Minutes 10.00 Minutes 12.00 12.00 12.00 12.00 12.00 14.00 14.00 14.00 cinnamyl acetat - 15.915 - 30961 eugenol - 13.645 - 79690 cinnamaldehyde - 11.699 - 20712 10.00 Minutes cinnamyl acetat - 15.858 - 31951 2.00 8.00 cinnamyl acetat - 15.880 - 30003 eugenol - 13.609 - 83312 cinnamaldehyde - 11.667 - 22029 cinnamyl alcohol - 11.021 - 44139 cinnamic acid - 9.524 - 25433 coumarin - 8.540 - 40001 12.00 cinnamyl acetat - 15.850 - 30541 0.030 10.00 Minutes eugenol - 13.605 - 84205 0.00 6.00 cinnamaldehyde - 11.662 - 22113 20.00 4.00 cinnamyl alcohol - 11.049 - 43477 0.000 8.00 cinnamyl alcohol - 11.014 - 45887 0.010 cinnamic acid - 9.523 - 25405 0.020 2-Hydroxycinnamic acid - 6.822 - 15336 AU 0.030 coumarin - 8.541 - 38222 Bước sóng 280 nm Lần 2.00 6.00 eugenol - 13.597 - 79255 18.00 0.00 4.00 cinnamic acid - 9.537 - 26888 20.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.812 - 14897 AU Bước sóng 280 nm Lần 2.00 cinnamaldehyde - 11.650 - 21845 16.00 18.00 0.00 cinnamyl acetat - 15.850 - 32878 0.08 14.00 AU cinnamyl acetat - 15.900 - 30306 eugenol - 13.639 - 83139 cinnamaldehyde - 11.696 - 21166 cinnamyl alcohol - 11.043 - 44197 cinnamic acid - 9.524 - 27476 coumarin - 8.530 - 38776 2-Hydroxycinnamic acid - 6.820 - 15114 0.000 eugenol - 13.595 - 85649 0.06 12.00 16.00 18.00 20.00 cinnamaldehyde - 11.644 - 21402 10.00 Minutes 0.000 14.00 16.00 18.00 coumarin - 8.520 - 41045 0.00 12.00 16.00 cinnamyl alcohol - 11.006 - 42898 8.00 14.00 0.010 cinnamyl alcohol - 11.003 - 46588 0.02 12.00 0.020 cinnamic acid - 9.496 - 25308 0.08 0.030 coumarin - 8.512 - 39043 0.04 14.00 18.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.832 - 14165 10.00 Minutes 12.00 16.00 cinnamic acid - 9.499 - 26048 6.00 8.00 14.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.795 - 13993 0.08 12.00 coumarin - 8.503 - 40926 4.00 6.00 10.00 Minutes cinnamyl alcohol - 10.911 - 267736 cinnamyl acetat - 15.804 - 114213 0.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.814 - 14093 0.02 10.00 Minutes AU 0.00 eugenol - 13.642 - 470492 0.08 cinnamaldehyde - 11.759 - 21510 0.10 AU 0.04 cinnamic acid - 9.520 - 47542 coumarin - 8.528 - 138181 0.20 AU 2.00 4.00 6.00 8.00 eugenol - 13.612 - 481366 0.00 cinnamaldehyde - 11.739 - 20660 0.08 eugenol - 13.648 - 462020 0.02 cinnamic acid - 9.520 - 45133 AU 0.30 eugenol - 13.609 - 467826 0.04 10.00 Minutes eugenol - 13.601 - 463718 2.00 4.00 6.00 8.00 cinnamaldehyde - 11.771 - 20266 0.06 coumarin - 8.539 - 139680 0.02 cinnamic acid - 9.523 - 44097 AU 0.04 cinnamaldehyde - 11.729 - 21385 0.06 coumarin - 8.543 - 134551 AU 0.06 cinnamic acid - 9.538 - 47357 2.00 4.00 6.00 8.00 eugenol - 13.598 - 480533 0.00 2.00 4.00 6.00 cinnamaldehyde - 11.724 - 21697 0.00 2.00 4.00 cinnamaldehyde - 11.707 - 20664 0.06 coumarin - 8.524 - 138237 0.00 2.00 cinnamic acid - 9.495 - 44392 0.00 coumarin - 8.515 - 134762 AU 0.00 cinnamic acid - 9.496 - 45637 AU 0.00 coumarin - 8.508 - 139536 AU Bước sóng 280 nm 20.00 Bước sóng 250 nm Độ lặp lại mẫu thực phẩm chứa quế Lần 14.00 16.00 14.00 14.00 16.00 16.00 18.00 16.00 16.00 16.00 18.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Phụ lục 9: Khảo sát độ thu hồi Nền mẫu quế Lần – mức 50% Không loãng 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 AU 0.30 0.20 0.10 0.00 2.00 4.00 6.00 18.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 AU 0.20 0.10 0.00 4.00 8.00 6.00 AU 18.00 8.00 10.00 Minutes 0.20 0.00 20.00 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm Lần 3– mức 50% Khơng loãng 2.00 4.00 10.00 Minutes 18.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 AU 0.30 0.20 0.10 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 AU 0.10 0.00 14.00 16.00 18.00 cinnamyl alcohol - 10.901 - 408750 Bước sóng 280 nm 8.00 10.00 Minutes coumarin - 8.514 - 169224 0.50 0.20 20.00 0.00 2.00 cinnamyl acetat - 15.811 - 165454 1.00 0.30 eugenol - 13.623 - 5207 1.50 16.00 18.00 20.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Loãng lần cinnamic acid - 9.639 - 1164529 2-Hydroxycinnamic acid - 6.569 - 4846 AU 2.00 14.00 20.00 0.40 2.50 12.00 20.00 0.00 16.00 cinnamyl alcohol - 10.859 - 401005 0.30 2.00 6.00 10.00 Minutes 0.10 14.00 Bước sóng 280 nm 0.00 8.00 cinnamyl acetat - 15.741 - 165914 0.50 6.00 0.30 eugenol - 13.621 - 5311 1.00 4.00 Loãng lần cinnamic acid - 9.647 - 1165934 AU 1.50 2.00 0.40 2-Hydroxycinnamic acid - 6.569 - 4425 2.00 0.00 20.00 Bước sóng 250 nm Lần 2– mức 50% Khơng lỗng 2.50 cinnamaldehyde - 11.773 - 2421362 AU 16.00 cinnamyl alcohol - 10.853 - 400859 Bước sóng 280 nm 0.00 0.00 14.00 cinnamaldehyde - 11.736 - 2404114 0.00 0.10 cinnamaldehyde - 11.734 - 2403735 0.00 coumarin - 8.539 - 167401 0.50 0.20 coumarin - 8.516 - 169265 1.00 0.30 cinnamyl acetat - 15.749 - 166102 1.50 eugenol - 13.638 - 5366 AU 2.00 cinnamic acid - 9.691 - 1164593 2.50 Loãng lần 0.40 2-Hydroxycinnamic acid - 6.630 - 4696 3.00 12.00 14.00 16.00 18.00 Bước sóng 250 nm PL 10 20.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Lần – mức 100% Khơng lỗng 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 cinnamaldehyde - 11.766 - 3121912 coumarin - 8.528 - 215683 0.50 0.40 eugenol - 13.623 - 10731 1.00 cinnamic acid - 9.621 - 1627157 0.30 AU 1.50 coumarin - 8.537 - 2309057 AU 2.00 0.00 0.50 2-Hydroxycinnamic acid - 6.557 - 6674 2.50 Loãng lần 0.20 0.10 0.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.25 0.20 0.10 0.05 0.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.561 - 6324 Bước sóng 250 nm Lần – mức 100% Khơng lỗng 1.00 0.50 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 0.40 10.00 Minutes 12.00 0.30 AU 1.50 eugenol - 13.621 - 10092 AU 2.00 Loãng lần 0.50 cinnamic acid - 9.617 - 1633889 2.50 20.00 cinnamaldehyde - 11.768 - 3106501 2.00 coumarin - 8.527 - 214734 AU 0.15 cinnamyl acetat - 15.894 - 214589 cinnamyl alcohol - 10.997 - 527879 Bước sóng 280 nm 0.20 0.10 0.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.25 0.15 0.10 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm Lần – mức 100% Khơng lỗng 18.00 20.00 Lỗng lần cinnamaldehyde - 11.722 - 3124378 AU 0.20 cinnamyl acetat - 15.844 - 213122 cinnamyl alcohol - 10.956 - 516186 Bước sóng 280 nm 2-Hydroxycinnamic acid - 6.582 - 6261 0.50 1.00 0.50 0.00 0.30 AU 0.20 0.10 0.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes coumarin - 8.499 - 211984 1.50 0.40 eugenol - 13.621 - 10395 AU 2.00 cinnamic acid - 9.619 - 1629681 2.50 12.00 14.00 16.00 18.00 2.00 20.00 0.25 AU 0.20 0.15 0.10 0.05 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes cinnamyl acetat - 15.841 - 211824 cinnamyl alcohol - 10.960 - 511130 Bước sóng 280 nm 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm PL 11 18.00 20.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Lần – mức 200% Không loãng cinnamaldehyde - 11.711 - 4736663 Loãng lần 0.80 1.00 0.50 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 coumarin - 8.489 - 312719 1.50 0.60 AU AU 2.00 eugenol - 13.619 - 21806 2.50 cinnamic acid - 9.605 - 2602920 2-Hydroxycinnamic acid - 6.544 - 9585 3.00 0.40 0.20 0.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.30 AU 0.20 0.10 0.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm Lần – mức 200% Khơng lỗng 1.00 0.50 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 0.60 12.00 AU AU 1.50 eugenol - 13.613 - 21567 2.00 0.80 cinnamic acid - 9.598 - 2609670 2.50 20.00 Loãng lần 2-Hydroxycinnamic acid - 6.550 - 9417 3.00 18.00 0.40 0.20 0.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 cinnamaldehyde - 11.729 - 4670839 4.00 coumarin - 8.473 - 310560 2.00 cinnamyl acetat - 15.906 - 320661 cinnamyl alcohol - 11.018 - 768146 Bước sóng 280 nm 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm 0.25 AU 0.20 0.15 0.10 0.05 cinnamyl acetat - 15.861 - 308888 cinnamyl alcohol - 10.983 - 767107 0.30 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Minutes Bước sóng 250 nm Lần – mức 200% Khơng lỗng 0.00 0.40 0.20 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 0.20 AU 0.15 0.10 0.05 cinnamyl acetat - 15.861 - 312092 cinnamyl alcohol - 10.985 - 770094 Bước sóng 280 nm 0.25 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 Minutes Bước sóng 250 nm PL 12 cinnamaldehyde - 11.721 - 4696540 0.50 coumarin - 8.464 - 315729 1.00 0.60 AU 1.50 0.80 eugenol - 13.618 - 21510 2.00 cinnamic acid - 9.603 - 2606456 2.50 AU Loãng lần 2-Hydroxycinnamic acid - 6.522 - 9747 3.00 20.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 8.00 10.00 Minutes AU 0.000 16.00 18.00 0.00 20.00 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 AU 0.010 0.000 16.00 18.00 0.00 20.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.04 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 eugenol - 13.617 - 931697 0.06 cinnamaldehyde - 11.756 - 43966 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.000 16.00 18.00 0.00 20.00 0.04 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.06 0.04 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 280 nm 10.00 Minutes eugenol - 13.619 - 927993 8.00 10.00 Minutes 0.010 0.000 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 0.030 0.020 0.010 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.030 0.020 AU 0.08 6.00 0.000 cinnamaldehyde - 11.758 - 41796 AU 0.10 cinnamic acid - 9.554 - 96081 0.12 18.00 20.00 14.00 16.00 18.00 20.00 12.00 14.00 16.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 18.00 20.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm coumarin - 8.546 - 291342 2-Hydroxycinnamic acid - 6.539 - 50673 0.14 4.00 0.020 Bước sóng 280 nm Lần – mức 100% 0.16 2.00 AU 0.06 eugenol - 13.615 - 932178 0.08 12.00 0.030 cinnamaldehyde - 11.757 - 41377 AU 0.10 coumarin - 8.547 - 282446 0.12 16.00 Bước sóng 250 nm cinnamic acid - 9.545 - 96800 2-Hydroxycinnamic acid - 6.539 - 48210 0.14 10.00 Minutes 0.010 Bước sóng 280 nm Lần – mức 100% 0.16 8.00 AU 0.08 cinnamic acid - 9.542 - 96274 AU 0.10 coumarin - 8.543 - 289540 0.12 14.00 Bước sóng 250 nm 2-Hydroxycinnamic acid - 6.531 - 50248 0.14 6.00 0.020 Bước sóng 280 nm Lần – mức 100% 0.16 4.00 AU eugenol - 13.617 - 723398 0.02 cinnamaldehyde - 11.758 - 33022 0.04 cinnamic acid - 9.546 - 72226 0.06 2.00 0.030 coumarin - 8.547 - 222349 AU 0.08 12.00 Bước sóng 250 nm 2-Hydroxycinnamic acid - 6.546 - 23828 0.10 10.00 Minutes 0.020 Bước sóng 280 nm Lần 3– mức 50% 0.12 8.00 cinnamyl acetat - 15.935 - 45515 0.04 6.00 cinnamyl acetat - 15.897 - 46080 0.06 4.00 0.030 eugenol - 13.659 - 724463 AU 0.08 cinnamaldehyde - 11.794 - 32235 0.10 cinnamic acid - 9.555 - 72595 0.12 2.00 Bước sóng 250 nm coumarin - 8.566 - 222360 2-Hydroxycinnamic acid - 6.529 - 24058 Bước sóng 280 nm Lần 2– mức 50% cinnamyl acetat - 15.872 - 44956 14.00 cinnamyl alcohol - 11.008 - 88662 12.00 cinnamyl acetat - 15.902 - 59515 6.00 cinnamyl acetat - 15.897 - 58988 4.00 0.010 0.000 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 250 nm PL 13 cinnamyl acetat - 15.904 - 57990 2.00 cinnamyl alcohol - 11.061 - 88457 0.00 cinnamyl alcohol - 11.027 - 88760 0.00 0.010 cinnamyl alcohol - 11.027 - 133089 0.02 0.020 cinnamyl alcohol - 11.024 - 133332 0.04 0.030 cinnamyl alcohol - 11.028 - 133141 0.06 eugenol - 13.598 - 718253 AU 0.08 cinnamaldehyde - 11.740 - 31985 0.10 coumarin - 8.523 - 216040 0.12 cinnamic acid - 9.502 - 72756 2-Hydroxycinnamic acid - 6.503 - 25503 Độ thu hồi mẫu thực phẩm chứa quế Lần – mức 50% 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Lần – mức 200% Không loãng 2-Hydroxycinnamic acid - 6.544 - 106945 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 eugenol - 13.545 - 137643 0.05 0.020 eugenol - 13.661 - 1339054 0.10 cinnamaldehyde - 11.798 - 65053 0.015 AU AU 0.15 coumarin - 8.569 - 430210 0.20 Loãng 10 lần 0.025 cinnamic acid - 9.573 - 140778 0.25 0.010 0.005 0.000 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 cinnamyl alcohol - 11.063 - 212406 0.040 0.030 0.020 0.010 0.000 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.556 - 108520 Bước sóng 250 nm Lần – mức 200% Khơng lỗng 0.05 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes eugenol - 13.618 - 1381196 0.10 cinnamaldehyde - 11.757 - 66063 12.00 14.00 0.020 0.015 AU AU 0.15 cinnamic acid - 9.570 - 149320 0.20 Loãng 10 lần 0.025 coumarin - 8.552 - 449115 0.25 20.00 eugenol - 13.548 - 138059 AU cinnamyl acetat - 15.948 - 88824 Bước sóng 280 nm 0.010 0.005 0.000 16.00 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.040 0.020 0.010 0.000 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 Bước sóng 250 nm Lần – mức 200% Khơng lỗng 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes eugenol - 13.620 - 1340841 0.00 cinnamaldehyde - 11.755 - 64330 0.05 12.00 14.00 0.020 0.015 AU cinnamic acid - 9.603 - 137647 0.10 coumarin - 8.535 - 431022 AU 0.15 Loãng 10 lần 0.025 2-Hydroxycinnamic acid - 6.578 - 103957 0.20 20.00 eugenol - 13.564 - 138125 AU 0.030 cinnamyl acetat - 15.904 - 86125 cinnamyl alcohol - 11.027 - 222389 Bước sóng 280 nm 0.010 0.005 0.000 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 18.00 20.00 cinnamyl alcohol - 11.025 - 211978 0.040 AU 0.030 0.020 0.010 0.000 0.00 cinnamyl acetat - 15.900 - 88526 Bước sóng 280 nm 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 Bước sóng 250 nm PL 14 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Phụ lục 10: Khảo sát giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng mẫu thực Tại tỷ lệ ta xác định chiều cao pic chất gấp khoảng - lần chiều cao tín hiệu nhiễu AU 0.003 0.002 0.001 0.000 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 0.0020 AU 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 cinnamyl alcohol - 11.047 - 1291 2.00 coumarin - 8.590 - 1973 2-Hydroxycinnamic acid - 6.587 - 2386 0.004 0.0015 0.0010 0.0005 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 0.003 0.002 AU 14.00 16.00 18.00 20.00 cinnamaldehyde - 11.818 - 1588 2.00 0.001 0.000 -0.001 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 cinnamic acid - 9.416 - 1328 2.00 0.003 AU 0.002 0.001 0.000 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes PL 15 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 eugenol - 13.628 - 1297 0.0020 AU 0.0015 0.0010 0.0005 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 Minutes 18.00 20.00 22.00 0.014 0.012 0.010 AU 24.00 26.00 28.00 30.00 cinnamyl acetat - 15.750 - 3459 2.00 0.008 0.006 0.004 0.002 0.000 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.02 0.00 1.00 0.50 0.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 6.00 8.00 0.05 0.00 2.00 1.50 1.00 0.50 0.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 0.02 0.00 1.50 1.00 0.50 0.00 6.00 8.00 Bước sóng 280 nm 10.00 Minutes 2.00 AU AU 0.04 cinnamyl acetat - 15.880 - 55827 0.06 4.00 14.00 16.00 18.00 20.00 12.00 14.00 16.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm cinnamyl alcohol - 10.991 - 108169 Bước sóng 280 nm Quế 2.00 12.00 eugenol - 13.007 - 476378 0.10 2.00 10.00 Minutes cinnamaldehyde - 11.742 - 15219976 0.15 0.00 4.00 AU AU 0.20 cinnamyl acetat - 15.814 - 157542 0.25 0.00 2.00 Bước sóng 250 nm cinnamyl alcohol - 10.940 - 453393 Bước sóng 280 nm Quế 0.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 250 nm PL 16 10.00 Minutes cinnamaldehyde - 11.577 - 15228619 6.00 cinnamic acid - 9.523 - 329360 4.00 coumarin - 8.474 - 1555027 2.00 cinnamic acid - 9.259 - 328156 0.00 1.50 cinnamaldehyde - 11.711 - 18067567 0.04 2.00 cinnamic acid - 9.532 - 405862 0.06 coumarin - 8.300 - 1547570 AU 0.08 2.50 coumarin - 8.472 - 1950467 0.10 AU 0.12 cinnamyl acetat - 15.886 - 90819 cinnamyl alcohol - 10.993 - 220537 0.14 2-Hydroxycinnamic acid - 6.703 - 4329 Phụ lục 11: Sắc ký đồ mẫu thực Quế 12.00 18.00 20.00 AU 0.00 2.00 4.00 6.00 6.00 8.00 8.00 8.00 Bước sóng 280 nm Quế 10 10.00 Minutes 0.30 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 0.40 0.30 0.20 0.10 0.00 10.00 Minutes 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 10.00 Minutes 12.00 12.00 12.00 12.00 14.00 14.00 14.00 16.00 14.00 16.00 16.00 16.00 18.00 18.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Quế 20.00 Bước sóng 280 nm Quế 18.00 Bước sóng 280 nm Quế 20.00 0.00 20.00 0.00 PL 17 1.50 1.00 0.50 0.00 0.00 2.00 2.00 0.00 2.00 4.00 3.00 2.50 2.00 1.50 1.00 0.50 0.00 4.00 4.00 2.00 4.00 6.00 6.00 4.00 6.00 6.00 6.00 8.00 1.00 0.50 0.00 8.00 2.00 1.50 1.00 0.50 0.00 8.00 0.60 0.40 0.20 0.00 8.00 Bước sóng 250 nm 8.00 10.00 Minutes 1.50 10.00 Minutes 2.50 10.00 Minutes 10.00 Minutes 12.00 10.00 Minutes 12.00 12.00 12.00 eugenol - 13.484 - 1654 cinnamaldehyde - 11.619 - 15668143 cinnamic acid - 9.574 - 15859737 coumarin - 8.353 - 1539893 2-Hydroxycinnamic acid - 6.571 - 5551 2.00 10.00 Minutes eugenol - 13.800 - 5047 2.00 8.00 cinnamaldehyde - 11.613 - 24293365 Bước sóng 280 nm Quế 0.00 6.00 cinnamic acid - 9.322 - 1224840 20.00 4.00 coumarin - 8.343 - 2593032 18.00 2.00 eugenol - 13.987 - 4426 0.00 16.00 0.00 cinnamaldehyde - 11.807 - 9877449 0.10 AU cinnamyl acetat - 15.828 - 79925 eugenol - 13.737 - 5821 cinnamaldehyde - 11.589 - 15654505 cinnamic acid - 9.272 - 341233 coumarin - 8.315 - 1573638 2-Hydroxycinnamic acid - 6.542 - 3609 0.00 cinnamic acid - 9.737 - 195715 0.20 AU Bước sóng 280 nm Quế coumarin - 8.616 - 960432 0.30 14.00 0.50 cinnamaldehyde - 11.706 - 19718217 0.40 12.00 1.00 cinnamic acid - 9.517 - 466188 6.00 8.00 10.00 Minutes 20.00 coumarin - 8.465 - 2246223 0.00 18.00 2-Hydroxycinnamic acid - 6.564 - 8013 0.05 16.00 AU 0.10 AU 0.15 14.00 1.50 eugenol - 13.595 - 2102 4.00 6.00 8.00 12.00 2.00 cinnamaldehyde - 11.721 - 4690523 2.00 4.00 6.00 10.00 Minutes 2.50 cinnamic acid - 9.461 - 245072 2.00 4.00 8.00 AU 2.00 4.00 6.00 coumarin - 8.464 - 325501 0.00 2.00 4.00 AU 0.00 cinnamyl acetat - 15.801 - 1377788 0.02 cinnamyl alcohol - 10.963 - 153811 0.04 cinnamyl acetat - 15.804 - 104880 0.20 cinnamyl alcohol - 11.101 - 153393 AU 0.06 cinnamyl acetat - 15.796 - 94575 0.40 cinnamyl alcohol - 10.892 - 273531 AU 0.08 cinnamyl acetat - 15.791 - 98948 0.00 2.00 cinnamyl acetat - 15.566 - 659899 0.00 cinnamyl alcohol - 10.889 - 261963 AU 0.00 cinnamyl alcohol - 10.886 - 273295 AU 0.00 cinnamyl alcohol - 10.884 - 615980 AU Quế 14.00 12.00 14.00 14.00 12.00 14.00 14.00 14.00 16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 16.00 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Bước sóng 250 nm 20.00 Bước sóng 250 nm 0.80 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 1.00 0.50 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Thực phẩm cinnamaldehyde - 11.708 - 123946 0.010 0.005 0.000 4.00 6.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 8.00 10.00 Minutes 0.004 0.003 0.002 AU coumarin - 8.419 - 2955 AU 0.015 2.00 0.00 Bước sóng 250 nm 0.020 0.00 1.50 0.00 12.00 cinnamaldehyde - 11.636 - 21406905 2.00 cinnamic acid - 9.333 - 1160013 0.00 coumarin - 8.369 - 1829472 0.20 2.50 AU AU 0.40 3.00 cinnamyl acetat - 15.585 - 646075 cinnamyl alcohol - 10.916 - 442730 0.60 0.001 0.000 -0.001 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm cinnamaldehyde - 11.741 - 99118 0.015 0.005 0.000 0.005 0.004 0.003 AU AU 0.010 0.002 0.001 0.000 -0.001 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Thực phẩm cinnamaldehyde - 11.817 - 74426 0.008 0.006 0.004 0.002 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.002 0.001 0.000 -0.001 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 280 nm 12.00 10.00 Minutes cinnamyl acetat - 15.783 - 4642 14.00 16.00 AU 0.010 0.000 18.00 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 0.020 0.015 14.00 AU eugenol - 13.073 - 19571 cinnamaldehyde - 11.816 - 1034695 cinnamic acid - 9.757 - 15673 coumarin - 8.633 - 107647 AU 0.00 8.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 0.15 0.05 6.00 0.020 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 0.10 4.00 0.030 eugenol - 13.070 - 24753 cinnamaldehyde - 11.817 - 1300097 0.00 cinnamyl alcohol - 11.078 - 1289 0.05 cinnamic acid - 9.751 - 20070 0.10 2.00 Bước sóng 250 nm coumarin - 8.627 - 134802 0.15 0.00 cinnamyl acetat - 15.775 - 69386 6.00 0.010 0.005 cinnamyl acetat - 15.772 - 40706 4.00 cinnamyl alcohol - 11.078 - 13179 2.00 0.20 AU 8.00 0.003 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 0.00 6.00 0.004 0.000 0.00 4.00 0.005 AU 0.010 0.00 2.00 Bước sóng 250 nm 0.012 AU 0.00 cinnamyl alcohol - 11.079 - 21307 0.00 0.000 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 250 nm Thực phẩm PL 18 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 0.06 0.04 0.02 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 cinnamyl acetat - 15.815 - 9193 AU 0.08 0.020 AU cinnamic acid - 9.746 - 11839 coumarin - 8.629 - 80340 0.10 eugenol - 13.072 - 14981 cinnamaldehyde - 11.815 - 772455 0.030 0.12 0.010 0.000 14.00 16.00 18.00 2.00 20.00 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 0.06 0.04 0.02 0.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.005 0.000 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 0.004 0.002 0.000 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 0.001 0.000 6.00 14.00 16.00 18.00 20.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.015 0.010 0.005 0.000 14.00 16.00 18.00 20.00 cinnamaldehyde - 11.832 - 23985 2.00 4.00 6.00 8.00 8.00 10.00 Minutes 0.006 0.004 AU 0.002 cinnamic acid - 9.839 - 7740 coumarin - 8.614 - 20743 AU 0.003 4.00 12.00 Bước sóng 250 nm 0.004 2.00 10.00 Minutes 0.020 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 0.00 8.00 AU 0.006 4.00 6.00 0.025 cinnamaldehyde - 11.830 - 18528 coumarin - 8.607 - 2243 AU 0.008 2.00 4.00 Bước sóng 250 nm 0.010 0.00 2.00 0.002 0.000 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 0.004 AU 0.002 0.000 0.025 0.020 0.015 AU coumarin - 8.640 - 4027 cinnamaldehyde - 11.797 - 23357 Bước sóng 280 nm Thực phẩm 10 2.00 cinnamyl acetat - 15.808 - 5464 6.00 0.010 cinnamyl alcohol - 11.092 - 4584 4.00 0.015 AU AU 0.08 0.020 eugenol - 13.712 - 11134 coumarin - 8.669 - 3065 0.10 cinnamyl acetat - 15.765 - 10255 cinnamaldehyde - 11.854 - 106015 0.12 2.00 20.00 Bước sóng 250 nm 0.14 0.00 18.00 0.010 0.005 0.000 -0.002 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 AU 0.030 0.020 0.010 0.000 2.00 4.00 6.00 Bước sóng 280 nm 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 0.006 0.004 AU 0.040 0.00 4.00 Bước sóng 250 nm cinnamaldehyde - 11.844 - 276034 Bước sóng 280 nm TPCN 2.00 0.002 0.000 14.00 16.00 18.00 -0.002 0.00 20.00 2.00 4.00 6.00 Bước sóng 250 nm TPCN PL 19 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 AU 0.10 0.05 0.00 16.00 18.00 0.00 20.00 0.010 0.000 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 0.000 16.00 18.00 -0.002 0.00 20.00 10.00 Minutes 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 14.00 16.00 AU 0.004 0.002 0.000 18.00 -0.002 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 0.025 0.020 AU eugenol - 13.617 - 321505 cinnamaldehyde - 11.756 - 296760 coumarin - 8.530 - 155197 AU 0.010 20.00 0.006 0.030 0.020 18.00 12.00 14.00 16.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 Bước sóng 250 nm 0.050 0.030 16.00 0.008 Bước sóng 280 nm TPCN 0.040 14.00 0.002 cinnamyl acetat - 15.750 - 4559 AU 0.00 eugenol - 13.654 - 10723 cinnamaldehyde - 11.801 - 649194 coumarin - 8.626 - 17078 0.08 0.02 12.00 Bước sóng 250 nm 0.10 0.04 10.00 Minutes 0.004 Bước sóng 280 nm TPCN 0.06 8.00 AU AU 0.020 6.00 0.006 eugenol - 13.688 - 5631 coumarin - 8.638 - 21804 0.040 0.030 4.00 Bước sóng 250 nm cinnamaldehyde - 11.836 - 292383 Bước sóng 280 nm TPCN 2.00 cinnamyl acetat - 15.796 - 35414 2.00 0.15 cinnamyl alcohol - 11.021 - 32972 0.00 cinnamyl acetat - 15.588 - 141294 0.50 0.20 eugenol - 13.509 - 1100738 cinnamic acid - 9.301 - 208428 AU 1.00 cinnamaldehyde - 11.628 - 10327112 0.25 1.50 0.015 0.010 0.005 0.000 0.000 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 12.00 14.00 16.00 18.00 0.00 20.00 Bước sóng 280 nm TPCN 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Minutes 0.30 0.05 0.00 0.00 cinnamaldehyde - 11.757 - 317041 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 280 nm 10.00 Minutes 12.00 0.20 AU coumarin - 8.550 - 29298 AU 0.10 20.00 Bước sóng 250 nm 0.20 0.15 18.00 0.10 0.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 Bước sóng 250 nm PL 20 10.00 Minutes 12.00 cinnamyl acetat - 15.707 - 25429 2.00 cinnamyl alcohol - 11.026 - 20910 0.00 14.00 16.00 18.00 20.00 ... cứu xây dựng phương pháp xác định số thành phần quế sản phẩm chứa quế phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao - Ứng dụng phương pháp nghiên cứu để phân tích thành phần số mẫu quế sản phẩm chứa quế thị... NGÂN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN TRONG QUẾ QUẾ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ:... dụng quế hay hương quế sản phẩm có ghi nhãn chúng tơi thực đề tài: ? ?Nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định số thành phần quế phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao? ??, với mục tiêu sau: - Nghiên cứu xây