Xác định đồng thời paracetamol và cafein trong dược phẩm bằng phương pháp quang phổ đạo hàm và phương pháp chemometrics

M, ĐẠI HỌC HUẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM  CHÂU VIẾT THẠCH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL VÀ CAFEIN TRONG DƢỢC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ ĐẠO HÀM VÀ PHƢƠNG PHÁP CHEMOMETRICS CHUYÊN NGÀNH : HĨA PHÂN TÍCH MÃ SỐ : 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS TRẦN THÚC BÌNH Thừa Thiên Huế, năm 2016 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu ghi luận văn trung thực, đƣợc đồng tác giả cho phép sử dụng chƣa đƣợc công bố công trình khác Tác giả luận văn Châu Viết Thạch ii LỜI CẢM ƠN Trong dòng luận văn, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Trần Thúc Bình – Thầy tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt thời gian thực luận văn, đồng thời Thầy bổ sung cho nhiều kiến thức chuyên môn kinh nghiệm quý báu nghiên cứu khoa học Tơi chân thành cảm ơn q thầy Khoa Hóa học, Phòng Đào tạo sau Đại học, Trường Đại học Sư phạm Huế tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành tốt luận văn Xin cảm ơn q thầy cán phịng thí nghiệm Hóa phân tích, Trường Đại học Khoa Học nơi tơi tiến hành luận văn hổ trợ, giúp đỡ tơi hồn thành tốt luận văn Chân thành cảm ơn quan tâm, động viên gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt q trình học tập hồn thành luận văn Huế, tháng năm 2016 Tác giả Châu Viết Thạch iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa i Lời cam đoan ii Lời cảm ơn iii MỤC LỤC Danh mục từ viết tắt Danh mục bảng .6 Danh mục hình MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 11 1.1 CÁC ĐỊNH LUẬT CƠ SỞ CỦA SỰ HẤP THỤ ÁNH SÁNG .11 1.1.1 Định luật Bouguer – Lambert – Beer 11 1.1.2 Tính chất cộng tính độ hấp thụ 11 1.2 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH QUANG PHỔ UV-VIS XÁC ĐỊNH CÁC CẤU TỬ CÓ PHỔ HẤP THỤ XEN PHỦ NHAU 12 1.2.1 Phƣơng pháp quang phổ đạo hàm [2],[4] 12 1.2.2 Phƣơng pháp phổ tồn phần (phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu hệ đa biến) [1],[2],[4] 14 1.2.3 Phƣơng pháp lọc Kalman [2],[4] 16 1.2.4 Phƣơng pháp Vierordt [2],[4] 17 1.2.5 Phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu [1],[2],[4] .18 1.2.6 Phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu phần (PLS) [2][4] 19 1.2.7 Phƣơng pháp hồi quy cấu tử (PCR) [2],[4] .19 1.3 TỔNG QUAN VỀ PARACETAMOL [6],[7] 20 1.3.1 Giới thiệu chung 20 1.3.2 Một số phƣơng pháp xác định riêng lẽ PAR .23 1.4 TỔNG QUAN VỀ CAFFEIN [6],[7] 24 1.4.1 Giới thiệu chung 24 1.4.2 Một số phƣơng pháp xác định riêng lẽ CAF .28 1.5 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PAR VÀ CAF 29 CHƢƠNG NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 32 2.1.1 Khảo sát lựa chọn điều kiện thí nghiệm thích hợp để xác định PAR CAF phƣơng pháp chemometrics 32 2.1.2 Khảo sát lựa chọn điều kiện thí nghiệm thích hợp để xác định PAR CAF phƣơng pháp quang phổ đạo hàm .32 2.1.3 Đánh giá độ tin cậy phƣơng pháp .32 2.1.4 Đề xuất quy trình xác định PAR CAF dƣợc phẩm .32 2.1.5 Áp dụng quy trình để xác định PAR CAF dƣợc phẩm .32 2.1.6 So sánh kết hai phƣơng pháp nghiên cứu 33 2.1.7 Đánh giá độ tin cậy quy trình phân tích .33 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Phƣơng pháp trắc quang - chemometrics 33 2.2.2 Phƣơng pháp quang phổ đạo hàm .33 2.2.3 Phƣơng pháp khảo sát đơn biến 33 2.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 39 2.3.1 Thuốc Panadol Extra 39 2.3.2 Thuốc Colocol Extra 39 2.4 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 39 2.4.1 Thiết bị, dụng cụ .39 2.4.2 Hóa chất 40 2.4.3 Dung môi 40 2.4.4 Chuẩn bị dung dịch chuẩn 40 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 KHẢO SÁT LỰA CHỌN ĐIỀU KIỆN THÍ NGHIỆM CHO PHƢƠNG PHÁP CHEMOMETRICS .41 3.1.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử PAR CAF 41 3.1.2 Khảo sát tính cộng tính phổ hấp thụ phân tử PAR CAF .42 3.1.3 Khảo sát ổn định phổ hấp thụ phân tử PAR, CAF hỗn hợp hai chất theo thời gian 43 3.2 KHẢO SÁT LỰA CHỌN ĐIỀU KIỆN THÍ NGHIỆM CHO PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ ĐẠO HÀM 44 3.2.1 Khảo sát phổ đạo hàm PAR CAF 44 3.2.2 Khảo sát phổ đạo hàm PAR nồng độ khác .45 3.2.3 Khảo sát ảnh hƣởng PAR tới CAF dung dịch hỗn hợp 45 3.2.4 Khảo sát phổ đạo hàm CAF nồng độ khác .46 3.2.5 Khảo sát tính cộng tính phổ đạo hàm 47 3.2.6 Khảo sát tính cộng tính phổ đạo hàm bƣớc sóng 260 nm .48 3.2.7 Khảo sát khoảng tuyến tính PAR bƣớc sóng 260 nm 49 3.2.8 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lƣợng PAR 50 3.2.9 Khảo sát khoảng tuyến tính CAF bƣớc sóng 216,4 nm 51 3.2.10 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lƣợng CAF 52 3.2.11 Khảo sát tìm giá trị hệ số độ hấp thụ phổ đạo hàm CAF bƣớc sóng 260 nm (ε’260 nm CAF) 52 3.3 ĐÁNH GIÁ ĐỒNG THỜI ĐỘ TIN CẬY CỦA HAI PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .53 3.3.1 Đánh giá độ tin cậy phƣơng pháp mẫu chuẩn tự pha 53 3.3.2 Đánh giá độ phƣơng pháp mẫu chuẩn tự pha tỉ lệ nồng độ khác 55 3.3.3 Đánh giá độ phƣơng pháp mẫu chuẩn tự pha tỉ lệ nồng độ PAR:CAF = 100 : 13 56 3.4 XÂY DỰNG QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PAR VÀ CAF TRONG DƢỢC PHẨM BẰNG HAI PHƢƠNG PHÁP .59 3.5 ÁP DỤNG QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PAR VÀ CAF TRONG DƢỢC PHẨM TRÊN THỊ TRƢỜNG 60 3.5.1 Áp dụng quy trình xác định đồng thời PAR CAF thuốc viên nén Panadol Extra 60 3.5.2 Áp dụng quy trình xác định đồng thời PAR CAF thuốc viên nén Colocol Extra 62 3.6 SO SÁNH KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CỦA HAI PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .64 3.7 ĐÁNH GIÁ ĐỘ TIN CẬY CỦA QUY TRÌNH PHÂN TÍCH 65 3.7.1 Độ thu hồi 65 3.7.2 So sánh kết phƣơng pháp nghiên cứu với phƣơng pháp HPLC 69 KẾT LUẬN 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 PHỤ LỤC P1 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT STT Viết tắt Tiếng Việt Tiếng Anh A Độ hấp thụ Absorbance CAF Cafein Caffeine HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao High performance liquid chromatography LOD Giới hạn phát Limit of detection LOQ Giới hạn định lƣợng Limit of quantitation PAR Paracetamol Paracetamol RE Sai số tƣơng đối Relative error Rev Độ thu hồi Recovery SD S Độ lệch chuẩn Standard deviation DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Các dung dịch hỗn hợp với nồng độ PAR khác .46 Bảng 3.2 Giá trị phổ đạo hàm bƣớc sóng 260 nm PAR, CAF hỗn hợp 49 Bảng 3.3 Giá trị phổ đạo hàm PAR bƣớc sóng 260 nm nồng độ khác 50 Bảng 3.4 LOQ, LOD PAR λ = 260 nm theo phổ đạo hàm 51 Bảng 3.5 Giá trị phổ đạo hàm CAF bƣớc sóng 216,4 nm nồng độ khác 51 Bảng 3.6 LOD, LOQ CAF λ = 216,4 nm theo phổ đạo hàm .52 Bảng 3.7 Giá trị ε’260 nm CAF nồng độ khác 53 Bảng 3.8 Kết xác định độ độ lặp lại phƣơng pháp chemometrics 54 Bảng 3.9 Kết xác định độ độ lặp lại phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 54 Bảng 3.10 Các dung dịch hỗn hợp với tỉ lệ nồng độ khác 55 Bảng 3.11 Kết xác định PAR CAF tỉ lệ khác theo phƣơng pháp chemometrics 55 Bảng 3.12 Kết xác định PAR CAF tỉ lệ khác theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 56 Bảng 3.13 Nồng độ dung dịch hỗn hợp PAR CAF tỉ lệ 100:13 57 Bảng 3.14 Kết xác định PAR CAF tỉ lệ 100:13 theo phƣơng pháp chemometrics 58 Bảng 3.15 Kết xác định PAR CAF tỉ lệ 100:13 theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 58 Bảng 3.16 Kết xác định PAR CAF dung dịch mẫu, hàm lƣợng tƣơng ứng thuốc Panadol Extra theo phƣơng pháp chemometrics 61 Bảng 3.17 Kết xác định PAR CAF dung dịch mẫu, hàm lƣợng tƣơng ứng thuốc Panadol Extra theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 62 Bảng 3.18 Kết xác định PAR CAF dung dịch mẫu, hàm lƣợng tƣơng ứng thuốc Colocol Extra theo phƣơng pháp chemometrics 63 Bảng 3.19 Kết xác định PAR CAF dung dịch mẫu, hàm lƣợng tƣơng ứng thuốc Colocol Extra theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 63 Bảng 3.20 So sánh kết hai phƣơng pháp nghiên cứu mẫu thuốc Panadol Extra 64 Bảng 3.21 So sánh kết hai phƣơng pháp nghiên cứu mẫu thuốc Colocol Extra 65 Bảng 3.22 Kết xác định độ thu hồi thuốc Panadol Extra theo phƣơng pháp chemometrics 67 Bảng 3.23 Kết xác định độ thu hồi thuốc Panadol Extra theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 67 Bảng 3.24 Kết xác định độ thu hồi thuốc Colocol Extra theo phƣơng pháp chemometrics 68 Bảng 3.25 Kết xác định độ thu hồi thuốc Colocol Extra theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm 69 Bảng 3.26 Kết so sánh hàm lƣợng PAR CAF thuốc Panadol Extra phƣơng pháp chemometrics với phƣơng pháp HPLC .70 Bảng 3.27 Kết so sánh hàm lƣợng PAR CAF thuốc Panadol Extra phƣơng pháp quang phổ đạo hàm với phƣơng pháp HPLC 71 Bảng 3.27 Kết so sánh hàm lượng PAR CAF thuốc Panadol Extra phương pháp quang phổ đạo hàm với phương pháp HPLC Hàm lƣợng PAR Hàm lƣợng CAF (mg/viên) (mg/viên) Lần QPĐH HPLC QPĐH HPLC 497,96 497,77 67,33 67,46 494,77 495,28 67,12 68,16 494,83 496,87 66,48 67,93 TB 495,85 496,64 66,98 67,85 SD 1,82 1,26 0,44 0,36 So sánh FTN = 2,09 FTN = 1,54 FLT(0,05;2;2) = 19 FLT(0,05;2;2) = 19 FTN < FLT FTN < FLT tTN = 0,61 tTN = 2,65 tLT(0,05;4)=2,78 tLT(0,05;4)=2,78 tTN < tLT tTN < tLT Nhận xét: Kết bảng 3.26 3.27 sau sử dụng chuẩn Fisher chuẩn Student cho thấy khơng có sai khác giá trị trung bình mặt thống kê xác định hàm lƣợng PAR CAF mẫu thuốc theo phƣơng pháp chemometrics hay phƣơng pháp quang phổ đạo hàm so với phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao Nhƣ vậy, kết hai phƣơng pháp nghiên cứu đáng tin cậy 71 KẾT LUẬN Sau trình nghiên cứu xác định đồng thời PAR CAF dƣợc phẩm phƣơng pháp quang phổ đạo hàm phƣơng pháp chemometrics, thu đƣợc kết sau: Đã khảo sát lựa chọn điều kiện thích hợp để xác định đồng thời PAR CAF dƣợc phẩm phƣơng pháp chemometrics: - Khoảng bƣớc sóng có tính cộng tính tốt để xác định PAR CAF từ 215 – 300 nm - Trong khoảng thời gian khảo sát giờ, phổ hấp thụ PAR, CAF hỗn hợp chúng ổn định Đã khảo sát lựa chọn điều kiện thích hợp để xác định PAR CAF dƣợc phẩm phƣơng pháp quang phổ đạo hàm: - Chọn phổ đạo hàm bậc với bƣớc sóng xác định PAR CAF tƣơng ứng 260 nm 216,4 nm - Khoảng tuyến tính PAR bƣớc sóng 260 nm từ 0,2 đến 30 µg/mL, LOD = 0,022 µg/mL; LOQ = 0,073 µg/mL - Khoảng tuyến tính CAF bƣớc sóng 216,4 nm từ 0,2 đến 15 µg/mL, LOD = 0,025 µg/mL; LOQ = 0,083 µg/mL Đã đánh giá độ tin cậy phƣơng pháp chemometrics phƣơng pháp quang phổ đạo hàm mẫu tự pha tỉ lệ nồng độ (µg/mL) 5:5, tỉ lệ nồng độ khác tỉ lệ hàm lƣợng 100:13 thƣờng gặp thuốc viên Cả hai phƣơng pháp cho độ lặp tốt sai số thấp Xây dựng đƣợc quy trình phân tích đồng thời thuốc viên chứa hai thành phần dƣợc chất PAR CAF hai phƣơng pháp chemometrics quang phổ đạo hàm Đã áp dụng quy trình để phân tích mẫu thuốc Panadol Extra Colocol Extra hai phƣơng pháp nghiên cứu Các kết thu đƣợc có độ lặp lại tốt 72 với hai thành phần PAR CAF thuốc Đã tiến hành so sánh kết phân tích phƣơng pháp chemometrics với phƣơng pháp quang phổ đạo hàm mẫu thuốc Panadol Extra Colocol Extra Kết so sánh cho thấy kết phân tích hai phƣơng pháp nhƣ Đã tiến hành đánh giá độ tin cậy quy trình mẫu thuốc thơng qua: - Thêm chuẩn vào mẫu thuốc sau tính độ thu hồi Kết tính tốn độ thu hồi hai phƣơng pháp nghiên cứu mẫu thuốc tốt - So sánh kết phân tích mẫu thuốc Panadol Extra hai phƣơng pháp nghiên cứu với phƣơng pháp chuẩn HPLC, nhận thấy khơng có khác mặt thống kê với mức ý nghĩa p = 0,95 Từ kết việc nghiên cứu, ứng dụng phƣơng pháp chemometrics phƣơng pháp quang phổ đạo hàm để xác định PAR CAF dƣợc phẩm, hy vọng mở hƣớng phát triển hai phƣơng pháp ngành kiểm nghiệm dƣợc Việt Nam, góp phần nâng cao hiệu kinh tế tiết kiệm thời gian phân tích 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trần Thúc Bình (2002), Nghiên cứu phương pháp xác định đồng thời chất có phổ hấp thụ xen phủ sử dụng vi tính, Luận văn Tiến Sĩ Hóa Học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Trần Đức Thục Đoan, Vĩnh Định (2002), “ Áp dụng quang phổ đạo hàm phân tích thuốc đa thành phần: hỗn hợp pseudoéphédrine - triprolidine; betamethasone - chlorpheniramin; métronidazole – spiramycine, Y học TP Hồ Chí Minh, Tập 6, số 1, trang 263 – 265 Trần Tứ Hiếu (2003), Phân tích trắc quang, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội Trần Tứ Hiếu (2004), Hóa học phân tích, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội Trƣơng Xuân Hiếu (2014), Xác định đồng thời paracetamol, cafein phenobarbital thuốc thần kinh D3 phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), Luận văn thạc sỹ, Đại học Thái Nguyên Bộ Y tế (2009), Dược thư quốc gia, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2010), Dược điển quốc gia, NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Ngọc Yến Nhi, Vĩnh Định (2013), “Xây dựng quy trình xác định đồng thời paracetamol cafein phƣơng pháp điện di mao quản, tối ƣu hóa phần mềm JMP”, Tạp chí dược học, trang 53, số Trần Thúc Bình, Trần Tứ Hiếu (2005), Định lượng đồng thời paracetamol ibuprofen thuốc viên nén phương pháp phân tích tồn phổ, Tuyển tập Hội nghị Phân tích Hóa, Lý Sinh học toàn quốc lần thứ II, tr 80-85 10 Đặng Họa My (2009), Xác định đồng thời paracetamol, cafein ibuprofen thuốc viên nén phương pháp trắc quang – chemometrics, Luận văn Thạc sĩ Hóa học, Trƣờng Đại học Sƣ phạm Huế 74 11 Đặng Văn Nhân (2008), Nghiên cứu xác định đồng thời số Vitamin B phương pháp trắc quang chemometrics, Luận văn Thạc sĩ Hóa học, Trƣờng Đại Học Khoa học Huế 12 Trần Thị Thu Thủy, Nguyễn Đức Tuấn (2008), “Định lƣợng đồng thời paracetamol , cafein clorpheniramin chế phẩm đa thành phần phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao với đầu dò dãy diod quang”, Tạp chí dược học, số 386, năm 48 13 Phạm Luận (2000), Sổ tay pha chế dung dịch, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học quốc gia Hà Nội 14 Thái Duy Thìn, Thái Phan Quỳnh Nhƣ, Trần Việt Hùng, Nguyễn Tƣờng Vy, Võ Nhị Hà, Nguyễn Tuấn Anh, Hoàng Văn Đức (2005), Nghiên cứu ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao đo quang phổ UV-Vis để định lượng hoạt chất số thuốc có từ đến thành phần, Đề tài nghiên cứu cấp Bộ Y tế, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội 15 Lê Hải Ánh (2013), Xác định đồng thời Valsartan Hydrochlorothiazide dược phẩm phương pháp trắc quang- chemometrics, Luận văn thạc sĩ Hóa học, Trƣờng Đại học Khoa học Huế 16 Nguyễn Đức Thái (2015), Xác định Paracetamol axit ascorbic dược phẩm phương pháp quang phổ đạo hàm, Luận văn thạc sĩ Hóa học, Trƣờng Đại học Khoa học Huế 17 Lê Dƣơng Thị Thảo Nhi (2015), Xác định paracetamol caffein dược phẩm phương pháp quang phổ đạo hàm, Luận văn thạc sĩ Hóa học, Trƣờng Đại học Khoa học Huế Tiếng Anh 18 A Hakan Aktas and Filiz Kitis (2013), “Spectrophotometric simultaneous Determination by Principal Component Regession, Partial Least Squares and Artificial Neural Networks Chemometrics Methods”, Croat Chem Acta, 87, pp 6774 75 19 Ahmed Ashoura, Maha A Hegazyb, Mohamed Abdel-Kawyb, Mohamad B ElZeinyc (2015), “Simultaneous spectrophotometric determination of overlapping spectra of paracetamol and cafein in laboratory prepared mixtures and pharmaceutical preparations using continuos wavelet and derivative transform”, Journal of Saudi Chemical Society, Volume 19, Issue 2, pp 186-192 20 Bernardo J.G, de Aragão, Yoines Mesaddeq (2008) “Peak separation by derivative spectroscopy applied to ftir analysis of hydrolyzed silica”, Journal of the Brazilian Chemical Sociery, Vol 19, No.8, pp, 1582-1594 21 Criado A, Cardenas S, Gallego M, Valcarcel M (2000), “Continuous flow spectrophotometric determination of paracetamol in pharmaceuticals following continuous microwave assisted alkaline hydrolysis”, Talanta, 53(2), pp 17-23 22 A Adam Algren, MD (2008), Review of N-acetylcysteine for the treatment of acetaminophen (paracetamol) toxicity on pediatrics, second Meeting of the Sebcommittee on the selection and Use of Essential Medicines 23 Frank Ellis (2002), Paracetamol-a curriculum resource, Royal society of Chemistry (RS.C) 24 Guzin Alpdogan, Kadir Karabina and Sidika Sungurg (2000), “Derivative Spectrophotometric Determination of Cafein in Some Beverages”, Turk J Chem, pp 295-302 25 H Tavallali and M Sheikhaei (2009), “Simultaneous kinetic determination of paracetamol and cafein by H-point standard addition method”, African Journal of Pure and Applied Chemistry Vol 3, pp 11-19 26 J.J Berzas nevado, J.M Lemus gallego and G Castaneda penalvo (1993), “spectral ratio derivative spectrophotometric determination of sulphaquinoxaline and pyrimathamine in veterinary formulations”, Journal of Pharmaceutical & Biomadical Analysis, Vol 11, No 7, pp 601-607 27 J.Meyer and U Karst (2001), “Determination of paracetamol (acetaminophen) by HPLC with post-column enzymatic derivatization and fluorescence detection”, 76 Chromatographia, Volume 54, Issue 3-4, pp 163-167 28 J Pharm Biomed (1998), “spectrophotometric determination of paracetamol in pure form and tablets”, Anal, 7(6), pp 77-84 29 P Nawrot, S Jordan, J Eastwood J Rotstein, A Hugenholtz and M Feeley (2003), “Effects of cafein on human health”, Food Additives and Contaminants, Vol 20, No 1, pp 1-30 30 Kuldeep Delvadiya, Ritu Kimbahune, Parchi Kabra, Sunsil K, Pratik Patel (2011), “Spectrophotometric simultaneous analysis of paracetamol, propyphenazone and cafein in tablet dosage from” International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Vol 31 Kenneth N Campbell and Barbara K Campbell, South Bend, Ind (1950), “Method of preparing xanthine and methylated xanthines” United States patent office, No 55, 828, pp 252-260 32 Marta Jóźwiak- Bębenista, Jerzy z Nowak (2014), “Paracetamol: mechanism of action, applications and safety concern”, Acta Poloniae Pharmaceutica, Vol 71, No 1, pp 11-23 33 M Prodan, E Gere-Paszti, O Farkas, E Forgacs (2003) “Validation and Simultaneous Determination of Paracetamol and Cafein in Pharmaceutical Formulations by RP-HPLC” Chem Anal (Warsaw) Vol 48, pp 901-907 34 M Levent Altun (2001), “HPLC Method for the Analysis of Paracetamol, Cafein and Dipyrone”, Turk J Chem, Vol 26, pp 521-528 35 Mohammed Determination of Khair E.A Paracetamol Al-Shwaiyat by Reduction (2013), of “Spectrophotometric 18-Molybdo-2-Phosphate Heteropoly Anion”, Jordan Journal of Chemistry, Vol 8, No 2, pp 79-89 36 Nadia M.Mostafa (2010), “ Stability indicating method for the determination of paracetamol in its pharmaceutical preparations by TLC densitometric method”, Journal of Saudi Chemical Society, Vol 14, Issue 4, pp 341-344 37 Neal L Benowitz, M.D (1990), “Clinical Pharmacology of Cafein”, Vol.41, pp 77 277-288 38 Sinan Suzen, Cemal Akay, Senol Tartilmis, R.Serdar Erdol, Atilla Onal and Semsettin Cevheroglu (1998), “Quantitative of acetaminophen in pharmaceutical formulations using high-performance liquid chromatography”, J Fac Pharm Ankara, Vol 27(2), pp 93-100 39 Shulin Zhao, Wenling Bai, Hongyan Yuan and Dan Xiao (2006), “Detection of paracetamol by capillary electrophoresiswith chemiluminescence detection”, Analytica Chimica Acta, Vol 559(2), pp 195-199 40 SM Ashraful Islam, Shamima Shultana, Muhammad Shahdaat Bin Sayeed and Irin Dewan (2012), “UV- spectrophotometric and RP-HPLC methods fof the simultanios estimation of acetaminophen an cafein: valiation, comparison and application for marketed tablet analysic”, International journal of pharmacy, Vol.2, Issue 1, p39 41 Van Staden JK, Tsanwani MM (2002), “Determination of paracetamol in pharmaceutical formulations using a sequential injection system”, Talanta 58(6), pp 101-109 42 Viswanath Reddy Pyreddy, Useni Reddy Mallu, Varaprasad Bobbarala and Somasekhar Penumajji (2001), “A novel RP-HPLC method for analysis of paracetamol, pseudoephedrine, cafein and chlorpheniramine maleate in pharmaceutical dosage forms”, Journal of Pharmacy Research, Vol 4, Issue 4, pp 1225-1227 43 Vijaya Vichare, Preeti Mujgond, Vrushali Tambe and Dhole S.N (2010), “Simultaneous Spectrophotometric determination of Paracetamol and Cafein in tablet formulation” , International Journal of PharmTech Research, Vol 2, No 4, pp 2512-2516 44 Wenrui Jin, Daiqing Yu, Qian Dong, and Xiaoying Ye (2000), “Quantitation of Cafein by Capillary Zone Electrophoresis with End-Column Amperometric Detection at a Carbon Microdisk Array Electrode”, Journal of Chromatographic Science, Vol 38, pp 11-15 78 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Tính cộng tính phổ hấp thụ PAR µg/mL CAF µg/mL khoảng bƣớc sóng 215- 300 nm Bƣớc sóng APAR ACAF ALT AHH RE% 300,0 0,0095 0,0019 0,0114 0,0116 1,66 299,0 0,0116 0,0037 0,0153 0,0155 1,44 298,0 0,0137 0,0060 0,0197 0,0199 0,96 297,0 0,0160 0,0092 0,0252 0,0251 -0,20 296,0 0,0183 0,0131 0,0314 0,0313 -0,32 295,0 0,0206 0,0179 0,0386 0,0384 -0,36 294,0 0,0232 0,0239 0,0471 0,0468 -0,59 293,0 0,0256 0,0308 0,0564 0,0562 -0,34 292,0 0,0283 0,0390 0,0673 0,0669 -0,53 291,0 0,0310 0,0484 0,0793 0,0790 -0,39 290,0 0,0338 0,0585 0,0923 0,0919 -0,43 289,0 0,0366 0,0696 0,1062 0,1057 -0,50 288,0 0,0393 0,0812 0,1204 0,1202 -0,19 287,0 0,0420 0,0932 0,1352 0,1351 -0,06 286,0 0,0444 0,1054 0,1498 0,1500 0,15 285,0 0,0469 0,1176 0,1644 0,1648 0,24 284,0 0,0492 0,1293 0,1786 0,1791 0,31 283,0 0,0515 0,1407 0,1922 0,1930 0,43 282,0 0,0537 0,1515 0,2052 0,2061 0,42 281,0 0,0559 0,1616 0,2175 0,2184 0,41 280,0 0,0580 0,1707 0,2287 0,2296 0,37 279,0 0,0601 0,1788 0,2389 0,2398 0,37 278,0 0,0620 0,1859 0,2480 0,2489 0,38 277,0 0,0640 0,1918 0,2558 0,2569 0,44 276,0 0,0663 0,1965 0,2628 0,2639 0,44 275,0 0,0686 0,1998 0,2684 0,2698 0,52 274,0 0,0715 0,2020 0,2735 0,2749 0,54 P1 273,0 0,0751 0,2029 0,2780 0,2794 0,50 272,0 0,0791 0,2026 0,2817 0,2829 0,44 271,0 0,0839 0,2010 0,2849 0,2860 0,39 270,0 0,0895 0,1981 0,2875 0,2885 0,33 269,0 0,0958 0,1942 0,2900 0,2908 0,27 268,0 0,1028 0,1895 0,2922 0,2930 0,26 267,0 0,1106 0,1841 0,2947 0,2953 0,22 266,0 0,1190 0,1780 0,2971 0,2977 0,21 265,0 0,1281 0,1713 0,2994 0,3003 0,29 264,0 0,1381 0,1642 0,3023 0,3033 0,33 263,0 0,1485 0,1566 0,3051 0,3066 0,48 262,0 0,1597 0,1489 0,3085 0,3100 0,50 261,0 0,1712 0,1409 0,3121 0,3139 0,57 260,0 0,1834 0,1329 0,3163 0,3180 0,56 259,0 0,1959 0,1250 0,3209 0,3226 0,53 258,0 0,2084 0,1172 0,3255 0,3273 0,53 257,0 0,2210 0,1096 0,3306 0,3322 0,50 256,0 0,2336 0,1023 0,3359 0,3372 0,41 255,0 0,2460 0,0952 0,3412 0,3425 0,36 254,0 0,2580 0,0886 0,3465 0,3476 0,32 253,0 0,2694 0,0822 0,3516 0,3526 0,29 252,0 0,2803 0,0764 0,3567 0,3575 0,21 251,0 0,2903 0,0712 0,3615 0,3619 0,12 250,0 0,2994 0,0666 0,3660 0,3662 0,04 249,0 0,3073 0,0627 0,3700 0,3699 -0,01 248,0 0,3140 0,0595 0,3735 0,3733 -0,07 247,0 0,3195 0,0571 0,3766 0,3763 -0,07 246,0 0,3237 0,0557 0,3793 0,3791 -0,06 245,0 0,3264 0,0550 0,3814 0,3815 0,01 244,0 0,3281 0,0554 0,3835 0,3836 0,04 243,0 0,3284 0,0568 0,3851 0,3855 0,08 242,0 0,3274 0,0588 0,3863 0,3868 0,14 P2 241,0 0,3253 0,0618 0,3870 0,3878 0,19 240,0 0,3222 0,0654 0,3876 0,3885 0,23 239,0 0,3181 0,0696 0,3877 0,3885 0,21 238,0 0,3131 0,0741 0,3872 0,3881 0,24 237,0 0,3073 0,0789 0,3862 0,3872 0,26 236,0 0,3008 0,0839 0,3847 0,3857 0,26 235,0 0,2937 0,0887 0,3824 0,3835 0,30 234,0 0,2862 0,0935 0,3796 0,3807 0,29 233,0 0,2782 0,0979 0,3760 0,3773 0,33 232,0 0,2700 0,1020 0,3720 0,3732 0,34 231,0 0,2615 0,1057 0,3672 0,3687 0,40 230,0 0,2529 0,1091 0,3620 0,3637 0,46 229,0 0,2443 0,1124 0,3566 0,3585 0,53 228,0 0,2355 0,1157 0,3512 0,3532 0,58 227,0 0,2266 0,1195 0,3460 0,3483 0,65 226,0 0,2176 0,1240 0,3416 0,3441 0,72 225,0 0,2086 0,1296 0,3382 0,3408 0,77 224,0 0,1995 0,1369 0,3364 0,3394 0,87 223,0 0,1906 0,1465 0,3370 0,3402 0,93 222,0 0,1820 0,1585 0,3405 0,3439 0,99 221,0 0,1739 0,1734 0,3473 0,3510 1,07 220,0 0,1667 0,1915 0,3582 0,3620 1,05 219,0 0,1605 0,2129 0,3734 0,3772 1,01 218,0 0,1560 0,2373 0,3933 0,3969 0,92 217,0 0,1538 0,2645 0,4183 0,4214 0,76 216,0 0,1542 0,2937 0,4479 0,4506 0,60 215,0 0,1583 0,3247 0,4830 0,4847 0,36 P3 Phụ lục 2: Giá trị phổ đạo hàm CAF 205,4 nm nồng độ khác CCAF (µg/mL) A’λ= 205,4 nm 2,5 -0,0005 5,0 0,0000 7,5 0,0009 10 0,0022 12,5 0,0048 15 0,0102 Phụ lục 3: Giá trị phổ đạo hàm mẫu tự pha tỉ lệ 5:5 Lần A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) 0,0350603 0,00272455 0,0349901 0,00279023 0,0349623 0,00276418 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0025x + 9.10-5 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,0069x + 0,0008 Phụ lục 4: Giá trị phổ đạo hàm mẫu tự pha tỉ lệ nồng độ khác Hỗn hợp A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) TL1 0,062672 -0,01508 TL2 0,055857 -0,01083 TL3 0,048801 -0,0061 TL4 0,042062 -0,00173 TL5 0,034962 0,002764 TL6 0,027945 0,007181 TL7 0,021009 0,01167 TL8 0,01448 0,016602 TL9 0,007541 0,020546 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0025x + 9.10-5 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,0069x + 0,0008 P4 Phụ lục 5: Phổ toàn phần dung dịch hỗn hợp tỉ lệ 100:13 (1) HH1 (2) HH2 (3) HH3 (4) HH4 (5) HH5 (6) HH6 (7) HH7 (8) HH8 (8) 3,5 3,0 2,5 (7) (6) A 2,0 (5) (4) (3) (2) (1) 1,5 1,0 0,5 0,0 200 220 240 260 280 300 nm) Phụ lục 6: Phổ đạo hàm dung dịch hỗn hợp tỉ lệ 100:13 (8) (7) (6) (5) (4) (3) 0,15 0,10 0,05 (1) HH1 (2 )HH2 (3) HH3 (4) HH4 (5) HH5 (6) HH6 (7) HH7 (8) HH8 A (2) 0,00 (1) -0,05 -0,10 -0,15 200 220 240 260 nm) P5 280 300 Phụ lục 7: Giá trị phổ đạo hàm mẫu tự pha tỉ lệ 100:13 Hỗn hợp A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) HH1 0,008510 0,018280 HH2 0,012665 0,027410 HH3 0,016897 0,036610 HH4 0,020825 0,046030 HH5 0,024965 0,055300 HH6 0,029776 0,065790 HH7 0,033644 0,077160 HH8 0,040498 0,088845 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0025x + 3.10-5 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,0079x + 0,0005 Phụ lục 8: Giá trị phổ đạo hàm mẫu thật Mẫu A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) m11 0,008556 0,018669 m12 0,008530 0,018543 m13 0,008449 0,018566 m21 0,008801 0,01824 m22 0,008795 0,018337 m23 0,009041 0,018189 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0026x + 0,0002 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,008x – 2.10-5 P6 Phụ lục 9: Giá trị phổ đạo hàm mẫu Panadol Extra tính độ thu hồi Mẫu A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) 4-1 lần 0,01672 0,027328 4-1 lần 0,017004 0,02736 4-1 lần 0,016748 0,027245 8-2 lần 0,024596 0,035921 8-2 lần 0,024648 0,036111 8-2 lần 0,024904 0,036131 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0026x + 0,0002 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,008x – 2.10-5 Phụ lục 10: Giá trị phổ đạo hàm mẫu Colocol Extra tính độ thu hồi Mẫu A’hh (216,4 nm) A’hh (260 nm) 4-0,5 lần 0,013169 0,027078 4-0,5 lần 0,013407 0,027298 4-0,5 lần 0,013306 0,027324 8-1 lần 0,017629 0,037684 8-1 lần 0,017856 0,037928 8-1 lần 0,017555 0,037441 PTĐC PAR 260 nm y = 0,0026x + 0,0002 PTĐC CAF 216,4 nm y = 0,008x – 2.10-5 P7 ... pháp định lƣợng đồng thời hỗn hợp hai thành phần có khả ứng dụng công tác kiểm nghiệm thuốc, tiến hành đề tài: ? ?Xác định đồng thời paracetamol cafein dược phẩm phương pháp quang phổ đạo hàm phương. .. hợp để xác định PAR CAF phƣơng pháp quang phổ đạo hàm - Khảo sát phổ đạo hàm PAR CAF Chọn bƣớc sóng thích hợp để xác định PAR dƣợc phẩm ứng với bậc phổ đạo hàm chọn; - Khảo sát phổ đạo hàm PAR... khác 0, cịn giá trị phổ đạo hàm chất khác điểm cắt zero phổ đạo hàm Vì vậy, để định lƣợng chất theo phƣơng pháp quang phổ đạo hàm cần tiến hành: - Quét phổ đạo hàm, tìm bƣớc sóng định lƣợng cho chất