thạc sĩ xác định đồng thời một số kháng sinh nhóm carbapenem bằng phương pháp điện di mao quản sử dụng detector đo độ dẫn không tiếp xúc (CE c4d)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Lê Đức Dũng XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH NHÓM CARBAPENEM BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI MAO QUẢN SỬ DỤNG DETECTOR ĐO ĐỘ DẪN KHÔNG TIẾP XÚC (CE-C4D) LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC I Hà Nội, năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Lê Đức Dũng XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH NHÓM CARBAPENEM BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI MAO QUẢN SỬ DỤNG DETECTOR ĐO ĐỘ DẪN KHƠNG TIẾP XÚC (CE-C4D) Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 8440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ: HĨA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hướng dẫn 1: PGS.TS Nguyễn Thị Ánh Hường Hướng dẫn 2: PGS.TS Phạm Thị Ngọc Mai Hà Nội, năm 2020 II LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2020 Tác giá luận văn Lê Đức Dũng III LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực đề tài, em tỏ lịng biết ơn chân thành tới người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ em thời gian qua Đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Thị Ánh Hường PGS.TS Phạm Thị Ngọc Mai giao để tài, nhiệt tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình thực nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn sâu sắc cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ, thầy cô giáo giảng dạy môn hóa phân tích, khoa hóa học Học viện Khoa học Công nghệ trường đại học Khoa học tự nhiên – Đại học quốc gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành khóa học có đóng góp quý báu cho em thời gian nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn NCS Lê Thái Bình mơn Hóa phân tích Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện, tư vấn phối hợp trình thực đề tài Luận văn thực với tài trợ kinh phí đề tài mã số 104.04-2018.305 quỹ phát triển khoa học công nghệ quốc gia (NAFOSTED) Cuối cùng, em xin cảm ơn công ty 3Sanalysis cung cấp thiết bị CEC4D để thực nghiên cứu này, cảm ơn anh chị nhóm nghiên cứu sử dụng thiết bị CE-C4D môn Hóa phân tích, Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, giúp đỡ, hướng dẫn tận tình thời gian qua Hà Nội, ngày 28 tháng 05 năm 2020 Học viên Lê Đức Dũng IV MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ii LỜI CẢM ƠN iv DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH xii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung nhóm carbapenem 1.1.1 Giới thiệu nhóm carbapenem 1.1.2 Cơ chế tác dụng đặc điểm dược động học 1.2 Các phương pháp xác định carbapenem 1.2.1 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử UV-Vis 1.2.2 Phương pháp điện hóa 10 1.2.3 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 11 1.3 Phương pháp điện di mao quản 19 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Mục tiêu nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2 Nội dung nghiên cứu 33 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1.Phương pháp phân tích CE-C4D 33 2.3.1.Thiết bị hóa chất 34 2.4 Phương pháp xử lý mẫu 36 V 2.4.1.Mẫu dược phẩm 36 2.4.2 Xử lý mẫu dược phẩm 36 2.5 Phương pháp đánh giá độ tin cậy phương pháp phân tích 37 2.5.1.Giới hạn phát giới hạn định lượng 37 2.5.2.Độ chụm (độ lặp lại phương pháp) 37 2.5.3.Độ đúng, độ thu hồi phương pháp 38 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Khảo sát điều kiện tối ưu việc tách xác định bốn kháng sinh nhóm carbapenem phương pháp CE-C4D 39 3.1.1 Khảo sát ảnh hưởng dung dịch đệm 39 3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian bơm mẫu 49 3.1.4 Khảo sát chiều cao bơm mẫu 51 3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng tách 53 3.2 Đánh giá phương pháp phân tích 55 3.2.1 Xây dựng đường chuẩn carbapenem 56 3.2.2 Giới hạn định lượng (LOD) giới hạn phát phương pháp (LOQ) 59 3.2.3 Độ chụm phương pháp 60 3.2.4 Độ phương pháp 61 3.3 Phân tích mẫu thực tế đối chứng phương pháp tiêu chuẩn HPLC 62 3.3.1 Phân tích số mẫu thuốc kháng sinh carbapenem 62 3.3.2 Phân tích đối chứnghàm lượng carbapenem mẫu dược phẩm với phân pháp tiêu chuẩn HPLC-PDA 65 VI CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 68 Danh mục báo công bố liên quan đến nội dung luận văn 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 PHỤ LỤC 76 VII DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Tên viết tắt Tên tiếng Anh Tên tiếng Việt Ace Acetic Acid Axit axetic Arg Arginine Arginin Capacitively coupled C4D contactless conductivity detector CE Capillary electrophoresis Detector độ dẫn không tiếp xúc Phương pháp điện di mao quản Capillary zone Phương pháp điện di mao electrophoresis quản vùng EOF Electro osmotic flow Dòng điện di thẩm thấu His Histidine Histidin CZE HPLC High performance liquid chromatography Sắc kí lỏng hiệu cao I.D Inner diameter Đường kính LOD limit of detection Giới hạn phát LOQ limit of quantitation Giới hạn định lượng MS mass spectrometry Khối phổ PDA Photo Diode Array Detector mảng diot quang RSD Relative standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối SD Standard deviation Độ lệch chuẩn VIII Micellar electrokinetic Điện di mao quản điện chromatography động học Mixen Tris (hydroxymethyl) Tris (hydroxymetyl) aminomethane aminometan UV-Vis Ultra violet - Visible Phổ phấp thụ phân tử SDS Sodium dodecyl sulfate Natri dodecyl sulfat MEKC Tris IX DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Một số nghiên cứu tách xác định carbapenem phương pháp quang phổ, điện hóa sắc ký 14 Bảng 1.2: Một số nghiên cứu tách xác định carbapenem điện di mao quản 29 Bảng 3.1: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng đệm Arg/Ace 41 Bảng 3.2: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng đệm Arg/Asc 41 Bảng 3.3: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng đệm Arg/Lactic 43 Bảng 3.4: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng đệm Tris/Lactic 44 Bảng 3.5: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng đệm Tris/Ace 46 Bảng 3.6: Độ phân giải cặp carbapenem nồng độ đệm khác 48 Bảng 3.7: Độ phân giải cặp carbapenem nồng độ đệm khác 50 Bảng 3.8: Độ phân giải cặp carbapenem thay đổi chiều cao bơm mẫu 52 Bảng 3.9: Độ phân giải cặp carbapenem sử dụng điện di khác 53 Bảng 3.10: Điều kiện tối ưu xác định bốn kháng sinh nhóm carbapenem 55 Bảng 3.11: Sự phụ thuộc diện tích pic vào nồng độ chất carbapenem 56 X (a) 77 (b) 78 (c) 79 (d) Hình PL2: Kết phân tích mẫu dược phẩm chứa Imipenem (a) Mẫu thuốc Lastinem (b) Mẫu thuốc Cepemid 500mg (c) Mẫu thuốc 750mg (d) Mẫu thuốc Mixipem 80 (a) 81 (b) 82 (c) 83 (d) 84 (e) Hình PL3: Kết phân tích mẫu dược phẩm chứa Meropenem (a) Mẫu thuốc Meropenem Kabi (b) Mẫu thuốc Pizulen (c) Mẫu thuốc Merugold I.V (d) Mẫu thuốc Meronem (e) Mẫu thuốc Medozopen 85 Phụ lục 2: Thông tin mẫu thuốc sử dụng nghiên cứu Bảng PL1: Thông tin mẫu thuốc sử dụng nghiên cứu STT Tên sản phẩm Đặc điểm Xuất xứ Hàm lượng Dạng bột pha dùng dịch để tiêm 1, Meronem meropenem truyền NSX: ACS DOBFAR SPA, Italya, số lô MX267, NSX 22/07/2016, HSD: 30/06/2020 Dạng bột pha dùng dịch để tiêm 3, Meropenem Kabi meropenem truyền Công ty cổ phần Fresenius Kabi Bidiphar, Số lô: MVM5027, HSD: 06/2020 Medozopen meropenem Chứa meropenem trihydrate tương đương với 500 1g meropenem khan Chứa meropenem trihydrate tương đương với 1g 500mg meropenem khan Dạng bột NSX Chứa pha dùng Medochemie meropenem 86 dịch để ltd – Factory trihydrate tiêm C, Số LOT: tương đương CK34AG, với 1g truyền NSX meropenem 10/2017, khan, 208mg HSD 10/2019 sodium carbonate Dạng bột pha dùng dịch để tiêm Tienam imipenem truyền Dạng bột pha dùng Tiepanem meropenem dịch để tiêm truyền 87 NSX: Merck Chứa bột vơ Sharp & trùng Dohme Corp, imipenem đóng gói tại: monohydrate Laboratoires tương đương Merck Sharp 500mg & Dohme- imipenem Chibret, số khan natri Lot R005318, cilastatin NSX: tương đương 05122017, 500mg HSD: cliastatin 04122019 khan NSX: ACS Chứa Dobfar.S.P.A, meropenem Ý, số Lot trihydrate C005340, tương đương NSX: với 1000mg 08092017, meropenem HSD: khan 08092020 NSX VENUS Lastinem imipenem Dạng bột REMEDIES pha dùng LIMITED, dịch để DNNK: cơng tiêm ty TNHH Bình Việt truyền Đức, Số Lot X8IB033A, ngày sản xuất 22/09/2018 HSD 21/03/2021 Chứa bột vô trùng imipenem monohydrate tương đương 500mg imipenem khan natri cilastatin tương đương 500mg cliastatin khan Chứa bột vô trùng Dạng bột NSX: công ty pha dùng cổ phần dược 9, 10 Cepemid imipenem dịch để phẩm Minh tiêm Dân, Việt Nam, số lô truyền 010917, ngày SX 22/09/17, HSD 22/09/2020 imipenem monohydrate tương đương 500mg 750mg imipenem khan natri cilastatin tương đương 750mg cliastatin khan 88 Chứa bột vô Dạng bột pha dùng dịch để tiêm 11 Mixipem imipenem truyền trùng NSX: imipenem FACTA monohydrate Farmaceutici tương đương S.P.A, Italy, 500mg số lô imipenem IVN1018, khan natri ngày sản xuất cilastatin 11/2017, tương đương HSD 11/2020 500mg cliastatin khan NSX: Laboratoires 12 Ivanz ertapenem Dạng bột Merck Sharp pha dùng & Dohme- dịch để Chibret, tiêm DNNK: Công ty cổ phần truyền dược liệu TW 2, số lô: R005269, NSX Chứa ertapenem natri tương đương 1g ertapenem dạng gốc acid tự 18/12/2017, HSD 17/12/2019 13 Pizulen meropenem Dạng bột 89 NSX: Demo Chứa pha dùng S.A meropenem dịch để Pharmaceutic trihydrate tiêm al Industry - tương đương HY LẠP, với 500 truyền NĐK: Demo meropenem S.A khan Pharmaceutic al Industry, số lô MX267, NSX 22/07/2018, HSD: 30/06/2021 Dạng bột NSX: Anfarm pha dùng Hellas S.A - 14 Nidimine imipenem dịch để HY LẠP, tiêm NĐK: Vipharco, số truyền lô 31817, NSX 05/2019, HSD: Chứa meropenem trihydrate tương đương với 500 imipenem khan 05/2020 15 Merugold meropenem Dạng bột NSX: Facta Chứa pha dùng Farmaceutici meropenem dịch để S.p.A, trihydrate tiêm Teramo Ý, số tương đương lô 0007D7, với 1000 90 truyền NSX meropenem 30/06/2017, khan HSD: 30/06/2020 91 ... Dũng XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH NHÓM CARBAPENEM BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI MAO QUẢN SỬ DỤNG DETECTOR ĐO ĐỘ DẪN KHƠNG TIẾP XÚC (CE- C4D) Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 8440118 LUẬN VĂN THẠC... cứu sử dụng phương pháp điện di chủ yếu sử dụng detector UV Qua cho thấy tiềm lớn phương pháp điện di mao quản sử dụng detector đo độ dẫn không tiếp xúc CE-C4D việc kiểm nghiệm, xác định bốn kháng. .. chất, thời gian phân tích phù hợp với điều kiện nghiên cứu Việt Nam Do vậy, đề tài ? ?Xác định đồng thời số kháng sinh nhóm carbapenem phương pháp điện di mao quản sử dụng detector đo độ dẫn không tiếp