Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm
Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmTrường Đại Học Bách Khoa Tp.HCMKhoa kỹ Thuật Hóa họcBộ môn công nghệ thực phẩmBÁO CÁO TIỂU LUẬNPHÂN TÍCH THỰC PHẨMCÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH LƯỢNG DƯ THUỐC KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨM GVHD : TS. Vũ Ngọc HòaSinh Viên:Vũ Minh Triết 60902903Bùi Thiên Duy 60900368Trần Tấn Lộc 60901467Trương Đờ Kháng 60901168 TP. HCM 12/20111 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm2 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmMục lụcMục lục hình ảnhHình 1.1: Penicillin GHình 1.2 Sơ đồ thể hiện cơ chế tác dụng của thuốc kháng sinh trên vi khuẩnHình 1.3 Cấu trúc cơ bản của nhóm QuinoloneHình 1.4 Cân bằng Acid Base của nhóm Acidic QuinoloneHình 1.5 Cân bằng acid base của nhóm Piperazinyl QuinoloneHình 1.6 Công thức cấu tạo của CiprofloxacinHình 1.7 Công thức cấu tạo của EnrofloxacinHình 1.8 Công thức phân tử chung của họ chloramphenicolHình 1.9 Sơ đồ tổng hợp chloramphenicol từ acid shikimicHình 1.10 Sản phẩm penicillin lên men tự nhiên nhờ P.chrysogenumHình 2.1 Hệ thống LC-MS/MSHình 2.4: Máy xay sinh tố Hình 2.5: Máy ly tâmHình 2.6: Bình định mức các loại Hình 2.7: Pipet các loạiHình 2.8: Phễu chiết cỡ 250 mlHình 2.9: Quy trình thực hiệnHình 2.10: Âm tính: Hai vạchHình 2.11: Dương tính: Hai vạchHình 2.12: Kết quả sai: khi vạch chuẩn không xuất hiện. Mục lục bảng số liệuBảng 1.1: Danh mục chất kháng sinh cấm sử dụng trong sản xuất, kinh doanh thủy sản3 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmBảng 1.2 Yêu cầu của các thị trường về giới hạn phát hiện củaphương pháp phân tích một số kháng sinh cấmBảng 2.1 Tổng hợp kết quả phân tích sàng lọc CAP trên ELISA và khẳng định trên LC-MS/MSBảng 2.2. Tương quan giữa nồng độ CAP xác định bằng ELISA và tỷ lệ dương giảBảng 2.3 Kết quả phân tích kiểm tra đường chuẩnĐồ thị 2.4 Đường chuẩn Bảng 2.5. Khả năng phát hiện của phương pháp ở nồng độ giới hạn phát hiện và giới hạn nồng độ tối đa cho phép theo Quyết định 2377/90 CE của Uỷ ban Châu Âu đối với một số Quinolone Bảng 2.6. Các tham số độ mạnh của phương pháp đối với các quinolone được thử tại ngưỡng phát hiện tối thiểuBảng 2.7: Chương trình pha độngLời nói đầuCùng với sự phát triển của công nghệ sinh học hiện đại, vi sinh vật học công nghiệp -một nhánh có vai trò hết sức trọng yếu trong ngành công nghệ sinh học đã thu được rất nhiều thành tựu to lớn trong sản xuất sinh khối, dược phẩm, các chất điều vị thực phẩm .sử dụng trong công nghiệp, y, dược học, nông nghiệp .nhờ vi sinh vật – bộ máy sản xuất sinh khối kì diệu. Hiện đã biết trên 8000 chất kháng sinh và mỗi năm có khoảng vài trăm chất kháng sinh mới được phát hiện. Trong tương lai chắc chắn còn có nhiều chất kháng sinh khác nữa cũng sẽ được tìm ra vì đa số các vi sinh vật có khả năng tạo thành chất kháng sinh đã được nghiên cứu cho tới nay đều chỉ thuộc về các chi Streptomyces và Bacillus. Nhiều nhà nghiên cứu về các chất kháng sinh tin rằng sẽ có nhiều chất kháng sinh mới được phát hiện nếu tìm thêm ở các nhóm vi sinh vật khác. Mặt khác các kỹ thuật của công nghệ di truyền sẽ cho phép thiết kế một cách nhân tạo các chất kháng sinh mới khi mà các chi tiết về bản đồ gen của các vi sinh vật sản sinh chất kháng sinh đã được biết rõ.Ngày nay, chất kháng sinh được sử dụng rộng rãi trong ngành nông nghiệp như chăn nuôi, trồng trọt, nuôi trồng thủy hải sản, có tác dụng rất lớn là giúp cho vật nuôi trồng chống lại bệnh tật từ vi sinh vật. Tuy vậy, chất kháng sinh như một con dao hai lưỡi. Một mặt giúp sinh vật chông lại bệnh tật, mặt khác, có thể làm cho sinh vật xuất hiện phản ứng phụ, và đặc biệt là lượng chất kháng sinh tồn dư sinh vật có thể ảnh hưởng đến chất lượng thực phẩm, nhất là sức khỏe người tiêu dùng.Với một lượng thực phẩm khổng lồ từ động vật đang được tiêu thụ trên thị trường, song ít ai nghĩ đến việc mỗi ngày trong cơ thể chúng ta đang phải tích lũy… dần dần dư lượng chất kích thích tăng trọng và thuốc kháng sinh trong từng miếng thịt động vật của các loại sản phẩm này. Bởi trong chăn nuôi gia súc, gia cầm hiện nay, người dân sử dụng rất tùy tiện các loại thức ăn tăng trọng và thuốc kháng sinh nhằm ngăn ngừa, trị bệnh và giúp vật nuôi mau ăn chóng lớn. 4 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmHậu quả là dư lượng chất kích thích và thuốc kháng sinh trong thịt gia súc, gia cầm vượt ngưỡng cho phép gấp nhiều lần, tuy không gây ngộ độc cấp tính tức thời, nhưng sẽ gây nguy hại về lâu dài cho sức khỏe của người tiêu dùng.I Tổng quan về chất kháng sinh1.1 Định nghĩa1.2 Khái niệm về chất kháng sinh [1]Kháng sinh còn được gọi là trụ sinh là những chất có khả năng tiêu diệt vi khuẩn hay kìm hãm sự phát triển của vi khuẩn một cách đặc hiệu. Nó có tác dụng lên vi khuẩn ở cấp độ phân tử, thường là một vị trí quan trọng của vi khuẩn hay một phản ứng trong quá trình phát triển của vi khuẩn. Từ "antibiotics" (kháng sinh) có nguồn gốc từ chữ "antibiosis" . "anti" có nghĩa là "chống lại" và "biosis" có nghĩa là "cuộc sống". Chất kháng sinh tác động, chống lại một số loại vi khuẩn. Thật vậy, chất kháng sinh là chất hoá học lấy từ cơ thể các vi sinh vật như vi khuẩn, nấm mốc, hoặc một vài thực vật.1.3.1 Tác dụng của chất kháng sinhThuốc kháng sinh là những chất có tác động chống lại sự sống của vi khuẩn, ngăn vi khuẩn nhân lên bằng cách tác động ở mức phân tử, hoặc tác động vào một hay nhiều giai đoạn chuyển hóa cần thiết của đời sống vi khuẩn hoặc tác động vào sự cân bằng lý hóa Thời đại chất kháng sinh bắt đầu vào khoảng năm 1928 cùng với việc khám phá các loại Penicillin của bác sĩ Alexandra Flemning. Flemning đã đặt tên cho chất Penicillin. Chất kháng sinh này rất hữu hiệu cho việc điều trị các bệnh như viêm phổi, họ , viêm cuống họng, mụn mũ, đau nhức, v.v . Streptomycin là một chất kháng sinh khác được dùng để điều trị bệnh lao phổi. Ngoài ra còn có những chất kháng sinh khác như ampicilin, tetracyclin, chloromycetin, v.v . được dùng để trị những căn bệnh khác. Một vài loại kháng sinh rất hữu hiệu trong việc chống lại một số vi sinh vật, vài loại khác hữu hiệu trong việc chống lại các vi sinh vật ở phạm vi lớn được gọi là chất kháng sinh phổ rộng [1].Hình 1.1: Penicillin GMỗi năm hàng triệu bệnh nhân trên thế giới được chữa trị nhờ chất kháng sinh. Năm 1930, 20% đến 85% tổng số tử vong ở Mỹ là do bệnh lao phổi. Năm 1960 con số này giảm xuống còn 5%. Tương tự, số tử vong do sốt thương hàn gây ra đã giảm từ 10% đến 2%. Các bệnh truyền nhiễm cũng đỡ đi nhiều nhờ chất kháng sinh. Chất kháng sinh cũng hữu dụng trong 5 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmviệc ngăn ngừa những căn bệnh như nhiễm trùng cuống họng, bệnh sốt gây đau nhức các khớp xương và các bệnh lây qua đường tình dục, v.v . [1].1.4 Cơ chế động của chất kháng sinh [3]. Khi một chất kháng sinh được đưa vào cơ thể, nó sẽ giết chết các vi khuẩn gây bệnh. Kháng sinh diệt trùng bằng nhiều cách:• Ức chế sự thành lập vách tế bào: Ngăn cản sự tổng hợp thành của tế bào vi trùng như penicillin, cephalosporin, vancomycin• Ức chế nhiệm vụ của màng tế bào• Ức chế sự chuyển hoá của vi trùng như sulfamides, trimethoprim,• Ức chế sự tổng hợp protein: Ức chế sự tổng hợp protein của vi trùng như tetracyclin, aminoglycosides, macrolides (erythromycin…),• Ức chế sự tổng hợp acid nucleic: Ức chế sự tổng hợp và hoạt động của acid nucleic như fluoroquinolones và rifampicin.6 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmHình 1.2 Sơ đồ thể hiện cơ chế tác dụng của thuốc kháng sinh trên vi khuẩn7 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmVí dụ về cơ chế của việc ức chế sự tổng hợp protein Aminoglycosides : Streptomycin• GĐ 1: Thuốc gắn vào thụ thể trên tiểu đơn vị 30S• GĐ 2 : Phong bế hoạt tính của phức hợp đầu tiên trong quá trình thành lập chuỗi peptid• GĐ 3 : Thông tin mRNA bị đọc sai à 1 acid amine không phù hợp• GĐ 4 : Làm vỡ các polysomes thành monosomes à không có chức năng tổng hợp proteinTetracyclines• Thuốc gắn vào tiểu đơn vị 30S / Ribo thể à ngăn chặn các amino acid mới gắn vào chuỗi peptid mới được thành lập• Chloramphenicol• Thuốc gắn vào tiểu đơn vị 50S / Ribo thể à ức chế peptidyltransferase à ngăn các amino acid mới gắn vào chuỗi peptid mới thành lập Các khoa học gia thật sự đã không biết toàn bộ cách thức mà chất kháng sinh giết được các vi khuẩn mầm bệnh. Một vài khoa học gia cho rằng chất kháng sinh ngăn chặn oxy không tới được các vi khuẩn mầm bệnh nên các vi khuẩn này chết vì thiếu oxy. Một vài khoa học gia khác cho rằng, chất kháng sinh ngăn chặn các vi khuẩn không lấy được thức ăn. Dù cho cách thức tác động của chất kháng sinh có như thế nào đi nữa, nó vẫn là loại thuốc hữu ích cho con người. Kháng sinh chống lại vi khuẩn bằng cách làm hư hại thành phần cấu tạo của chúng như lớp vỏ bảo vệ, màng trao đổi chất v.v . Tuy nhiên, trong phương diện điều trị, người ta quan tâm đến hai loại tác dụng: tác dụng diệt khuẩn và tác dụng kìm khuẩn (kìm khuẩn có khi còn được gọi là hãm khuẩn, trụ khuẩn, tĩnh khuẩn). Kháng sinh diệt khuẩn có tác dụng giết chết vi khuẩn, còn kháng sinh kìm khuẩn chỉ làm cho vi khuẩn ngưng phát triển, không sinh sản chứ không bị tiêu diệt. Kháng sinh kìm khuẩn được dùng khi cơ thể người bệnh còn sức đề kháng, hệ thống miễn dịch còn đủ mạnh để tiêu diệt vi khuẩn đã bị thuốc làm cho yếu đi. Nếu cơ thể người bệnh quá yếu, bắt buộc phải dùng các loại kháng sinh diệt khuẩn.1.5 Phân loại thuốc kháng sinh [4].• Nhóm β lactam các penicilin: Penicilin, Methicilin, Ampicilline, Amoxicilline, Cloxacilline, Sultamicillin, Piperacilline, Imipenem• Nhóm β lactam các cephalosporin:- Thế hệ 1: Cefadroxil, Cephalexin, Cefalothin, Cephazolin - Thế hệ 2: Cefaclor - Thế hệ 3: Cefixime, Ceftriaxone, Cefuroxime, Cefixime, Ceftazidime, Cefotaxime, Cefpodoxime• Nhóm tetracyline: Tetracycline, Doxycyline, Clotetracyclin, Oxytetracyclin, Minocyclin, hexacyclin • Nhóm aminosid: Amikacin, Tobramycin, Neomycin, Gentamycin, Kanamycin, Streptomycin• Nhóm macrolid: Azithromycin, Roxithromycin, Erythromycin, rovamycin, Clarithromycin, Spiramycin• Nhóm licosamid: Lincomycin, Clindamycin• Nhóm quinolon: Acid nalidixic, lomefloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin, levofloxacin, Gatifloxacin, Moxifloxacin, Pefloxacin, Sparfloxacin• Nhóm 5-nitro-imidazol: Clotrimazole, Metronidazole, Tinidazole, Secnidazole, Miconazole, ornidazole• Nhóm Sulfamid: Sulfaguanidin, Sulfamethoxazol, Sulfadiazin, Sulfasalazin8 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm1.6 Sản xuất thuốc kháng sinhHầu hết các kháng sinh đều được làm từ vi khuẩn và nấm.• Penicillin được sản xuất từ nấm mốc, vi sinh vật• Kháng sinh vancomycin từ xạ khuẩn Streptomyces orientalis • Cloramphenicol ban đầu được phân lập từ Streptomyces venezuaelae, nay được sản xuất bằng phương pháp tổng hợp.• … 1.7 Mặt trái của thuốc kháng sinhVới nhiều tác dụng có ý nghĩa thực tiễn như thế vậy phải chăng việc sử dụng càng nhiều thuốc kháng sinh sẽ càng đem lại nhiều tác dụng tích cực? Cơ thể người thường bị dư thuốc kháng sinh khi sử dụng không đúng thuốc hoặc do lượng kháng sinh còn tồn dư trong thực phẩm. Để điều trị bệnh nhiễm trùng cần biết loại vi trùng gây bệnh để chọn kháng sinh thích hợp. Vì thiếu hiểu biết và vì tin tưởng sai lầm, nên ở khắp nơi trên thế giới, nhất là ở các nước đang phát triển, người ta đã dùng kháng sinh quá nhiều, cả khi không cần thiết, không đúng chỉ định và không đúng cách. Lạm dụng hoặc chưa hợp lý, dẫn đến những hậu quả khôn lường. Không những chi phí tiền thuốc tăng do sử dụng nhiều loại kháng sinh đắt tiền mà còn làm nhiều loại kháng sinh mới dần dần bị vô hiệu hóa.Chất kháng sinh cũng có những phản ứng phụ, tạo ra phản ứng của cơ thể đối với chất kháng sinh chẳng hạn như chứng ban đỏ và các triệu chứng khác có thể gây ra những căn bệnh khác. Phản ứng trầm trọng nhất là dẫn tới tử vong. Đôi khi, chất kháng sinh không có hữu hiệu đối với một số vi khuẩn mầm bệnh. Phó khoa Vệ sinh Trung tâm Y tế dự phòng TPHCM, khẳng định kháng sinh thuộc dạng hóa chất nên phần lớn không phân hủy được trong môi trường nhiệt độ như nấu nướngTheo một tài liệu của Bộ môn Công nghệ thực phẩm, Đại Học Bách Khoa TP HCM, lượng kháng sinh tồn dư trong gia súc, gia cầm cao sẽ chuyển hóa protein thành các histamins gây chứng nhức đầu cho người sử dụng. Người thường xuyên sử dụng gia súc, gia cầm nhiễm kháng sinh sẽ rất dễ bị “nhờn” thuốc, khi bị bệnh khó chữa trị do lượng kháng sinh này sẽ tích tụ trong cơ thể gây nên hiện tượng vi khuẩn thích ứng với kháng sinh Các loại kháng sinh này thường không bị phân huỷ và tồn lưu trong môi trường nuôi trồng thuỷ sản trong thời gian dài, khiến các loại vi khuẩn thích nghi với môi trường có kháng sinh. Kết quả là các loại vi khuẩn gây bệnh trong thuỷ sản lại có khả năng kháng thuốc kháng sinhNếu kháng sinh được trộn lẫn vào thức ăn nuôi thuỷ sản, có thể tìm thấy dư lượng kháng sinh trong thịt thuỷ sản và các sản phẩm chế biến. Những người ăn thuỷ sản chứa dư lượng kháng sinh sẽ vô tình hấp thụ kháng sinh vào cơ thể, dẫn đến những thay đổi trong môi trường vi khuẩn bình thường, khiến họ trở nên dễ bị nhiễm khuẩn hơn Đặc biệt việc lạm dụng chất kháng sinh sẽ gây lờn thuốc, dẫn đên sự phát triển của các loại vi khuẩn có khả năng kháng thuốc trong cơ thể động vật cũng như trong thủy sản Khoa chăn nuôi Thú y ĐH Nông Lâm TP HCM mới đây đã tiến hành khảo sát tình hình sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi và dư lượng kháng sinh trong thịt ở các quầy kinh doanh gia 9 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩmsúc, gia cầm. Đa số người chăn nuôi sử dụng kháng sinh không hợp lý như liều lượng cao, sử dụng liên tục để phòng ngừa bệnh cho gia súc đến khi nào bán được. Xét nghiệm các mẫu thịt được lấy trực tiếp tại các chợ cho thấy có 26 loại kháng sinh được phát hiện. Trong đó loại được sử dụng nhiều nhất là chloramphenicol (chiếm 15,35%), tylosin (15%), colistin (13,24%), norfloxacin (10%), gentamycin (8,35%), nhóm tetracylin (7,95%), ampicillin (7,24%) . Trong đó, chloramphenicol là kháng sinh hiện đã bị cấm sử dụng trên nhiều quốc gia [14].Trong 149 mẫu thịt gà được kiểm tra, phân tích có đến 44,96% số mẫu có dư kháng sinh vượt quá mức quy định cho phép từ 2,5 đến 1.100 lần so với tiêu chuẩn ngành. Trong đó, loại kháng sinh chloramphenicol chiếm tỷ lệ cao nhất đến 87,50%, flumequin chiếm 83,33%, chlortetracyline chiếm 62,50%, amoxillin chiếm 60% .[14]Do đó cần phải biết được phương pháp xác định dư lượng thuốc trong tực phẩm để hạn chế được những tác dụng nguy hại từ những thực phẩm chứa dư lượng thuốc kháng sinh quá tiêu chuẩn cho phép TT Tên hoá chất, kháng sinh Đối tượng áp dụng1 Aristolochia spp và các chế phẩm từ chúngThức ăn, thuốc thú y, hoá chất, chất xử lý môi trường, chất tẩy rửa khử trùng, chất bảo quản, kem bôi da tay trong tất cả các khâu sản xuất giống, nuôi trồng động thực vật dưới nước và lưỡng cư, dịch vụ nghề cá và bảo quản, chế biến.2 Chloramphenicol3 Chloroform4 Chlorpromazine5 Colchicine6 Dapsone7 Dimetridazole8 Metronidazole9 Nitrofuran (bao gồm cả Furazolidone)10 Ronidazole11 Green Malachite (Xanh Malachite)12 Ipronidazole13 Các Nitroimidazole khác14 Clenbuterol15 Diethylstilbestrol (DES)16 Glycopeptides17 Trichlorfon (Dipterex)18 Gentian Violet (Crystal violet)19 Nhóm Fluoroquinolones (cấm sử dụng trong sản xuất, kinh doanh thuỷ sản xuất khẩu vào thị trường Mỹ và Bắc Mỹ)Bảng 1.1: Danh mục chất kháng sinh cấm sử dụng trong sản xuất, kinh doanh thủy sản [11]TT Kháng sinh cấm Chỉ tiêu kiểm traGiới hạn phát hiện tối thiểuEU Mỹ Nhật10 [...]... với viêm thận kẽ Được sử dụng đúng, các penicillin là những thuốc cực kỳ an toàn và hiệu quả II Các phương pháp xác định hàm lượng chất kháng sinh trong thực phẩm 20 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm 2.1 2.1.1 Dư lượng Chloramphenicol trong thủy sản bằng kít elisa thông qua phân tích khẳng định bằng LC – MS/MS [5] Giới thiệu Các phương pháp phân tích sử dụng sắc ký có... cụ, thiết bị và hoá chất Dụng cụ, thiết bị 25 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm Hình 2.2 Máy trắc quang UV-VIS Hình 2.4: Máy xay sinh tố Hình 2.6: Bình định mức các loại Hình 2.3: Cuvét thủy tinh có chiều dày 2 cm Hình 2.5: Máy ly tâm Hình 2.7: Pipet các loại 26 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm Hình 2.8: Phễu chiết cỡ 250 ml Và một số... S.venezuelae, trong sơ đồ tổng hợp các acid amin vòng có đường rẽ nhánh sinh tổng hợp chloramphenicol tại vị trí acid shikimic COOH COOH OH O C CH2 CH2 H2N-CH NH2 COOH HC-OH H2N-CH 16 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm NH2 COOH COOH CHCl2 HC-OH NH2 O=C HN CH CH2OH CHCl2 HC-OH NH2 O=C HN CH CH2OH CHCl2 HC-OH NO2 O=C HN CH 17 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong. .. ciprofloxacin được phát hiện với độ xác thực, độ nhạy thấp nhất và tương ứng là 97,5 % và 95 % Bảng 2.6 Các tham số độ mạnh của phương pháp đối với các quinolone được thử tại ngưỡng phát hiện tối thiểu 32 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm Đặc biệt, phương pháp có khả năng phát hiện các quinolone trong tôm với độ đặc hiệu là 100% Hay nói cách khác nếu mẫu thực sự âm tính thì 100%... bột (302 mẫu) • Thủy sản khô các loại (242 mẫu) • Chả giò, há cảo (125 mẫu) • Mắm hải sản các loại (35 mẫu) 2.1.3 a Phương pháp phân tích Tóm tắt qui trình thử nghiệm Elisa sử dụng trong thực nghiệm • Kít thử Elisa: Kit thử của các hãng R-Biopharm và TAPB 21 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm • • • b Qui trình chuẩn bị mẫu: Dư lượng CAP trong 3g mẫu đuợc ly trích bằng... giải diễn ra qua trung gian là các enzym tự ly giải thành tế bào vi khuẩn (ví dụ: các autolysin) 19 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm Còn chưa rõ mối liên quan giữa các PBP và các autolysin, nhưng có lẽ kháng sinh beta – lactam gây cản trở bằng một chất ức chế autolysin e Cơ chế kháng Tính kháng với các penicillin có được phần lớn là nhờ sản sinh beta – lactam Để khắc phục... nhiều nhà khoa học đã tập trung nghiên cứu sản xuất các chất kháng sinh này Nhờ vậy chỉ trong vòng hai năm người ta đã xác định được cấu trúc phân tử và triển khai thành công nghệ sản xuất ra loại thuốc kháng sinh này Hình 1.8 Công thức phân tử chung của họ chloramphenicol Trong đó : 14 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm • • • • • Chloramphenicol có góc R: Cl2CHO – Nitrophenylseriol... 0 0.00 Thủy sản khô các loại Chả giò, há cảo 242 13 7.18 11 6.08 8 4.42 125 4 4.26 3 3.19 1 1.06 24 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm Mắm hải sản các loại 35 4 13.33 1 3.33 0 0.00 Bảng 2.2 Tương quan giữa nồng độ CAP xác định bằng ELISA và tỷ lệ dư ng giả Với hàm lượng CAP có giá trị từ 0.3ppb trở lên (tương đương mức qui định của EU), thì tỉ lệ dư ng giả giảm mạnh,... ELISA và khẳng định trên LC-MS/MS Trong tổng số 13.418 mẫu thuỷ sản các loại đã qua phân tích sàng lọc bằng ELISA thì có 167 mẫu là dư ng tính giả, chiếm 1.3% tổng số mẫu đã phân tích Điều này cho thấy, ELISA là 23 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm một công cụ hữu hiệu cho việc sàng lọc các mẫu thủy sản đối với chỉ tiêu CAP Như thống kê trong bảng 2, tỷ lệ dư ng tính giả... nguyên sử dụng để kích thích sản xuất kháng thể thì khả năng phát hiện của kít càng cao Theo thông tin ghi trong kít thì kháng nguyên sử dụng để sản xuất kháng thể là dẫn xuất của sarafloxacine, do đó kết quả này hoàn toàn phù hợp Như vậy, có thể kết luận kít có khả năng phát hiện tốt các kháng sinh 31 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm thuộc nhóm quinolone được thử ở . Đờ Kháng 60901168 TP. HCM 12/20111 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực phẩm2 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh. dụng kháng sinh trong chăn nuôi và dư lượng kháng sinh trong thịt ở các quầy kinh doanh gia 9 Các phương pháp xác định lượng dư thuốc kháng sinh trong thực