Nghiên cứu qui trình phân lập và khảo sát hoạt tính sinh học của các hợp chất terpenoit và flavonoit từ cây thuốc việt nam

DAI HOC QC GIÀ HA NỊ! TRLTỊNG DAI HOC KHOA HOC TL/ NHIÈN DE CLPaNG DE TÀI NGHIÉN GÙU DAC BIÉT GAP DAI HOG QUOG GIÀ HA NÓI TÉN DE TÀI NGHIÉN CLfU QUI TRÌNH PHÀN LÀP VA KHÀO S À I HOAT T Ì N H SINH HOC CÙA GAG HpP CHAT TERPENOIT VA FLAVONOIT Tir GAY THUÓG VIÉT NAM MA SO: QG.06-07 CHU TRI DE TAI: POS TS NGUYÉNVÀNDÀU ÙAI HOC Q U O C GIÀ HA NOI TRUNG TÀM THÓNG TlN THLf VIÉN HA NOI - 2006 DE CirONG DE TÀI NGHIÉN CÙtJ KHOA HOC DAC BIÉT CAP DHQGHN Tén de tal Tié'ng Viét Nghién cufu qui trình phàn làp va khào sàt hoat tinh sinh hoc cùa càc hcfp chat terpenoit va flavonoit tir cày thuoc Vìet Nam Tié'ng Anh Study on the isolation procedure and examination on biological activlties of terpenoids and flavonoids from Vietnamese medicinal plants Thòi gian thiTc hien: 24thàng Bàt dau tCrthàng nàm 2006 dén thàng nàm 2008 De tài thuoc ITnh virc un tièn Nghién cùu ed bàn két hdp vdi phàt trién còng nghé Lfng dung De tài co trùng vói mot de tài dà hoac dang tien hành khòng? Khòng Chù tri de tài - Ht^i va tén: - Nàm sinh: Nguyen Vàn Dau Nam S 12-9-1951 - Chuyén tao: Hoà HCiu ed, chuyén ngành Hoà hoc càc hdp chat thién nhién - Hoc hàm, hoc vi: Phd giào s u , Tien sT - Chirc vu: Phd chù nhiem Bo Hồ hUu ed - Dan vi còng tàc: Khoa Hoà hoc, trUdng DH Khoa hoc Tu nhién - Dia chìiién he: 19 Le Thành Tòng, Q Hồn Kiém, Ha Noi - Sódièn thoai: 091 2437851 / 04-8213732 (NR); 04-8261853 (CQ) - Email: ngvandau2003@yahoo.com Fax.-(04)-8241140 Tom tat hoat dóng nghién curu cùa chù tri de tài {Càc chuang trình, de tài nghién cùu khoa hoc dà tham già, càc cóng trình dà còng bólién quan tcfi phuang hng cùa de tài nàm gàn day) Thòi gian Tén de tài/cóng trình Tifcàch tham già Gap qn li/ Noi cóng bo DHQGHN (DT 0012) Gdp phan nghién ciru hồ hoc càc hdp chat phenol \ù mot so cày thuoc Viét Nam (nu boa hoè, Sophora japonica L.) Chù tri 2003-2004 Nghién cufu hoà thuc vat cày chd de qua tròn (Phyllanthus niruri L.) Lfng dung cho diéu trj bénh gan B Chù tri 2003-2004 Nghién cùU phàn lap càc hdp chat phenol va flavonoit ed tàc dung phòng bénh tU cày thuoc Viét Nam, Chù tri 2005 Nghién cifu hoà thUc vàt mot cày thuoc Viét Nam ed hoat tinh chó'ng ung thu, chò'ng HIV va bào ve gan Chù tri NCKHCB (cà'p NN) Ma so: 510105 2001 Ddng gdp vào viéc nghién cùu càc flavonoid nu hoa hòe {Sophora japonica L.) Tàc già Dt/dc/7pc(2001), 8, 13-14 Phàn lap va xàc djnh rutin tU cày hy thiém {Siegesbeckia orientalis L, Asteraceae) cùa Viét Nam Tàc già TC Duachoc, No7, Tr 11-13, Ha Nói Nghién cùU hoat chat sinh hoc tU cày chd de thàn xanh {Phyllanthus nirurì L., Euphorbiaceae) Tàc già Duac hoc 2003, No 9, 12-14 Tàc già Hoà hoc, T 42, No 4, tr 512-51 2000-2001 2002 2003 2004 2004 2005 2005 2005 Flavonoids from Polygonum hydropiper L., (Polygonaceae) Nghién cùD phàn lap càc Flavonoit tU chi Polygonum, ho Rau ràm (Polygonaceae) Ddng gdp vào viéc nghién culi hồ thuc vat cày thóm ióm {Polygonum chinensis L., Polygonaceae) Ddng gdp vào viéc nghién cùu hoà thUc vàt cày che dang (//ex kaushue S.Y.Hu, Aquifoliaceae) DHQGHN (QT-03-11) Tàc già Tàc già Tàc già Phàn làp va xàc dinh cà'u trùc cùa hai hdp chat terpen tU xuyén tàm lién Tàc già {Andrographis paniculata Nees) d Viét nam TT ho trd NC Chàu (DHQG HN) ( DT 02/2003) K/?oa/?oc, DHQGHN, T.XX, N o i , Ap, 2004, tr 65-69 Duce hoc, (dà nhan dang) TC Khoa hoc, DHQG HN, (dà nhan dang) HN Hoà hùu co va cóng nghé Hồ HC lan thù3 Ha Nói 11/2005 2005 Nghién ctjfu phàn làp càc hdp chat phenol tu gò cày doc {Garcinia multiflora Champ ExBenth) 2005 Dóng góp vào viéc nghién cùU thành phàn hồ hoc actisó {Cynara scolymus L.) ò Sapa Tàc già HN Hồ hùu co va cóng nghé Hồ HC lan thù Ha Nói 11/2005 Tàc già HN Hồ hùu co va cóng nghé Hồ HC lan thù Ha Nói 11/2005 Tom tat hoat dòng tao sau dai hoc cùa chù tri de tài nàm lai trd lai day Thòi gian Tén nghién cùu sinh Tén hoc vièn cao hoc Le thj Kiéu Nhi 2001 2004 Nguyén Ngpc Thanh, K-13 2005 Nguyén thj Viét Thanh, K-14 Cd quan phoi hdp va cóng tàc vièn chinh cuà de tài TT Co quan phói hap Gong tàc vièn Ho va tén Chuyén ngành Khoa Sinh hoc TrUdng DHKHTN Nguyén Nghla Thìn ThUc vàt hoc Trung tàm sinh hoc phàn tùf, DHKHTN Ha Viét Sdn Hoat tinh sinh hoc Vién Khoa hoc va cóng nghé Q'e già Nguyén T Mai HUdng Hoat tinh sinh hoc Vien Khoa hoc va cóng nghé Qc già Ngun Dình LUdng Phòng NC Cà'u trùc Khoa Hồ hoc, TrUdng DHKHTN Nguyén t Viét Thanh Hoc vién cao hoc, K-15 Nguyen Dình Chung Hồ hoc càc hdp chat Tran thi Hiéu thién nhién Dò thi Thanh Hoc vién cao hoc, K-16 Vù thj Viét Ha Khoa Hoà hoc TrUdng DHKHTN Le Duy Hiéu Hoà hoc càc hdp chat Sinh vién khóa luàn dai hoc, K-48 va K-49 Le Huyèn Trang thién nhién càc SV khàc Ly chon de tài Tinh thòi Si/ Càc hdp chat thién nhién dóng mot vai trò quan trong viéc phàt trien càc thuò'c chùa bénh Phàn Idn càc dUdc phàm déu dUdc phàt hién va phàt trién tU càc hdp chat phàn lap tu' càc dòng thUc vàt Nhiéu hdp chat thién nhién dUdc sCf dung trUc tiép nhu thành phàn boat chat chinh cùa thuoc, mot so khàc dUdc si!r dung làm chat dau hoac chat màu de tong hdp càc hdp chat co boat tinh hdn, hoac dUdc dùng làm "chat dò" sinh hóa de nghién cùu dUdc li va làm sàng tò Cd che tàc dung cùa thuoc, Viét nam co mot he thUc vàt rat da dang va phong phù vdi hdn 12.000 bài, 1200 chi thuoc hdn 300 ho thuc vat, dò co khoàng 3.200 cày dUdc sùf dung y hoc dàn toc [1] Chinh vi vày, viéc nghién cùu phàt hién va khai thàc tài nguyén vò già nhàm tìm càc hdp chà't ed hoat tinh sinh hoc cao mot cóng viéc ed y nghla khoa hoc va thUc tiin Trong so càc nhóm bénh bién va nguy hiém nén y hoc ln phài dò'i mat vói càc bénh de gay nguy ed bùng phàt thành dai dich, nhu lày nhiém virus (gan, HIV, cùm, ), càc dang ung thu, di Ung, NhUng chùìig bénh gay nén su tdn thàt nang né cho xà hòi, làm ành huòng tram dén nhàn lue san xuàt cùa nén kinh té, Do vày, viéc tìm kiém càc hoat chat tU càc dUdc liéu truyén thó'ng, va tiép theo phàt trién thành càc dUdc pham co ngn gò'c thién nhién vUa rè lai co hiéu qua va tinh an toàn cao mot nhiém vu chién ludc quan trong viéc phòng va chùa bénh ma càc nhà khoa hoc càn phài quan tàm va co tràch nhiém chia sé Tinh cà'p thiét una nhu cau phàt trién kinh té-xà hói càc bénh gay virus (càc dang viém gan virus A, B, C, E, HIV, cùm, ), càc dang ung thu, chiém mot ti le khà cao ed càu càc bénh bién trén toàn thè gidi Vi du, ò Viét Nam, riéng so nguòi bi nhiem virus gan chiém khoàng 20% dàn so; bénh vién U budu va bénh vién K ò Ha Noi va Ho Chi Minh ln trình trang qua tài bénh nhàn Xuàt phàt tU thue trang cùa xà hói, viéc phàt trién dUdc liéu trén ed so tài nguyén sin co cuà dàt nude mot nhu càu cà'p bàch va co tinh khà thi cao Trong nhùng nàm gàn day vdi su Idn manh cùa dói ngù càc nhà nghién cUu khoa hoc, su quan tàm cuà Nhà nude llnh vuc dóng dUdc dà dem lai nhùng thành tuu dàng ké DUa trén kinh nghièm làu dòi cùa nén y hoc co truyén ve viéc su dung càc dUdc liéu qui diéu trj càc bénh phd bién, de tài nghién cùU dUdc xày dung nhàm dóng góp vào chién lUdc phòng chóng va chùa tri càc bénh bién va hiém nghèo ò nc ta Su thành cóng cùa de àn chàc chàn sé làm phong phù thém nguón dUdc pham nhu làm giàm àp lUc ve tàm li va kinh té dò'i vdi còng dóng, dac bièt dói càc bénh nhàn nghèo Muc tièu cùa de tài De tal dUdc xày dung dUa trén su nghién cùu sàu hdn ve màt hoà hoc càc dUdc liéu dà dUdc y hoc co truyén àp dung chùa bénh it nhiéu co hiéu qua Do vày, muc tiéu chinh cùa de tài là: a- xày dung dUdc mot qui trinh thich hdp chiét tóng càc hoat chat chinh dùng de pha che càc che pham dUdc hoc b- tói uu hóa sd phàn tàch va tinh che de thu càc hoat chà't ò dang tinh khiét e- xàc dinh càu trùc cùa càc chat phàn làp d- khào sàt sd bò hoat tinh sinh hoc cuà can chiét tdng va cùa càc chat phàn lap e- dành già két qua nghién cùu va dua nhùng két luàn (hoac khuyén cào) hùu ich viéc su dung càc dUde liéu ma de tài dà nghién cùu 10 Tom tat noi dung nghién curu cùa de tài Càc hdp chat terpen co hoat tinh sinh hoc sé óMc khào sàt phàn làp tu càc dUdc liéu sau: Xuyén tàm lién {Andrographis paniculatai Nees.), ho Òro {Acanthaceae) Cày bóng ói (cày hoa cut Idn) {Lantana camara L.) Cày vói (Cleistocalyx operculatus Roxb.), ho Sim (Myrtaceae) Co nho nói {Eclipta alba Hassk., ho Cùc, Asteraceae ) hoac sài dàt (Wedelia calendulaceae, hp Cùc, Asteraceae) Cày xa den (Celastrus Hindsu Benth) Ma de {Plantagomajor L, Plantaginaceae) Trén ed so muc tiéu cùa de tài, noi dung nghién cùu bao góm càc phàn sau: a Xày dutiQ qui trình chiét tong càc hoat chat terpenoit Ò càc dUdc liéu néu trén co mat nhiéu lóp chat khàc Theo noi dung nghién cùu cùa de tài chùng tói chi tap trung vào viéc xày dUng qui trình diéu che can tdng càc terpenoit co boat tinh sinh hoc ma it bi càc nhóm chat khàc Nói dung nghién cùu nhàm tìm mot qui trình ddn giàn, it tón kinh té va co tinh khà thi néu dUdc thUc hién ò qui mó pilot Qua qui trinh chiét dành già duce hàm lUdng tUdng dói cùa can tdng so vdi dUdc liéu b Khào sàt thành phàn cùa càn chiét tona Phàn chiét thu dUde sé dUdc phàn tich bang phUdng phàp sac ki lóp mòng nham thóng tin ve sólUdng càc chat, hàm lUdng tUdng dói, nhudiéu kien phàn tàch sac ki chùng, e Phàn làp càc hap chat terpenoit va càc hoat chat khàc Su phàn làp càc chat tUdUde liéu giùp cho chùng ta phàt hién càc boat chat mdi, va hoàn thién qui trình phàn làp càc hdp chà't dà biét (co hoat tinh cao) Do vày, nói dung sé co y nghla thUc tiin nhu dóng góp nhiéu vào viéc nghién cùu ed bàn ngành hoà thUe vàt Ngoài nhùng chat chua dudồn dUdc trc càc hdp chat terpenoit sau day dU kién sé dUdc nghién cùu phàn tàch: Càc hdp chat sesquiterpen tu cày co nho nói Wedelolacton Desmetylwedelolacton Luteolin Càc hdp chat diterpentùcày xuyén tàm lièn Andrographolide Neoandrographolide 14-deoxyandrographolide (DA) va 14-deoxy-11,12-didehidroandrographolide Càc hdp chat triterpen tu cày khó thào, cày bóng ói, cày vói va cày xa den Axit ursolic Axit oleanolic Càc dan xuat triterpenic Càc hdp chat triterpen tu cày ma de Aucubin Flavonoit d Xàc dinh càu trùc càc chat phàn làp De nhàn dang càc hoat chat phàn làp, càu trùc cùa chùng càn phài khàng djnh thóng qua viéc phàn tich va dua càc dù liéu phd dae trung mot càch chinh xàc Càc phUdng phàp phd hién dai sau day sé dUde àp dung nhu phd khói lUdng (MS), phd tu ngoai (UV), phd bóng ngoai (IR), phd còng huòng tu hat nhàn (^H va ^^C-NMR) e Thùhoat tinh sinh hoc Mot so hdp chà't terpenoit sé dUdc khào sàt boat tinh sinh hoc thóng qua càc phép thù invitro nhU chóng òxi hồ, khàng vi sinh vàt gay càc bénh phd bién, gay dòc té bào ung thu Càc phép thù giùp cho chùng ta hình dung ed ehé tàc dung cùa càc hoat chat, nhu hoat dò cùa chùng ò mó hình thù Nói dung nghién cùu sé cho phép chùng ta dUa nhùng két luàn hùu ich viéc nén su dung chùng nhu the cho phù hdp (chàng han, su dung vói muc dich phòng chò'ng, bay ho trd hay diéu tri bénh) Dành già hoat tinh cuà càc chat sé óuac thUe hién cu the nhu sau: Khà nàng chóng oxi hồ * phàn ùng cùa indigocarmin vdi peroxidaza màu ngUdi; * phàn ùng vdi 2.2-diphenyl-1-pierylhydrazil (DPPH)) Khà nàng khàng mot so vi sinh vàt * vi khuan Gr(+) * vi khuan Gr(-) * nàm móc * nàm men) Khà nàng khàng té bào ung thu dòng ung thu té bào ngUòi 6\jgc su dung là: * KB: té bào ung thU biéu mó * FL: té bào ung thu màng tu cung * RD: té bào ung thu màng tim * Hep-2: té bào ung thu gan 11 Càc chuyén de nghién curu dir kién cùa de tài a Xày dùng qui trình chiét Nói dung thuc hién PhUdng phàp chiét ( trich li) chon loc dUa trén dò phàn cuc va tinh chat riéng cùa lòp chà't càn phàn lap Su dung càc dung mòi khàc de chiét chon loc càc boat chà't theo: (i)- phàn cuc, (ii)-trong lUdng phàn tu; b Phàn tich thành phan dich chiét tóng va phàn lap càc chat Nò! dung thuc hién PhUdng phàp phàn tàch dUa trén sUhàp phu chon loc cùa càc chà't trén silica gel, poliamit, Su phUdng phàp sac ki càc he dung mòi khàc de: (i)- xàc dinh so lUdng càc chat co hàm lUdng tUdng dói Idn va ed khà nàng phàn tàch dUdc (il)- phàn tàch càc chà't trén càc chat hap phu khàc nhu silica gel, poliamit va rùa giài nhd càc he dung mòi thich hdp (ili)- Tinh che bang phUdng phàp két tinh lai e Xàc djnh cà'u trùc cùa càc hoat chat phàn làp Noi dung thuc hién Nhàn dang càu trùc càc boat chà't dóng mot vai trò quan trong, giùp cho chùng ta khang djnh muc tiéu dà dat dUdc va làm ed sd cho viéc dành già hoat tinh sinh hoc cùa chà't Càu trùc cuà càc chà't phàn lap 6ugc xàc djnh dUa trén: (i)- càc phàn ùng djnh tinh (li)- àp dung phUdng phàp phàn tich vàt li hién dai nhu phd UV, IR, MS va NMR (ili)- so sành càc dù liéu phd dà cóng bó (néu co) (iv)- va so sành càc bang so vat li d Dành già sa bo hoat tinh sinh hoc Nói dung thuc hién Chuyén de cho chùng ta mot két qua nghién cùu tdng quàt cùa de tài ve mat ùng dung Nò sé mang lai két luàn ve viéc co càn phàt trien tiép tue de tài trién khai vào thUc tien hay khòng Càc chat phàn làp dUdc dành già boat tinh thóng qua càc phép thù sau: (i)- hoat tinh khàng khuan va khàng nàm (il)- boat tinh khàng mot so dòng ung thu (ili)- hoat tinh chóng òxi hoà bào ve gan 12 Càu trùc dir kién bào cào két qua cùa de tài Du kién bào cào két qua cuà de tài góm càc chUdng muc sau: t Mò dau Gidi thieu tinh thdi sU, tàm quang cùa de tài dói vdi nhu càu kinh té-xà hói Tóng quan nghién cùu Gidi thieu tinh hình nghién cùu va ngồi nude Phuang phàp nghién cùu Gidi thieu dói tUdng, thiét bi, phUdng phàp va muc dich nghién cùu Két qua va bàn ln Néu càc san phàm c de tài (còng trình, tao, khà nàng ùng dung) Két luàn Néu càc nhàn xét va dành già ve két qua dà dat dUde Tài liéu tham khào 13 Tinh da ngành va lién ngành cùa de tài De tài lièn quan dén ngành/chuyén ngành nào? * ThUe vàt hoc: phàn Ioaj thUe vat, xàc djnh tén khoa hoc, bào quàn tiéu bàn * Hoà hoc; chiét boat chà't, phàn tich va phàn tàch thành phàn hoà hoc * DUde hoc: dành già boat tinh sinh hoc * Y hoc: dành già khà nàng ùng dung diéu tri bénh (thù làm sàng) Tinh da/lièn ngành thè hién nhu thè nói dung va qua trinh trién khai cùa de tài? TrUdc hét, dói tUdng thuc vàt nghién cùu càn phài óugc xàc djnh tén khoa hoc (tén bài, chi, ho), vùng phàn bó va ndi va thdì gian thu thich hdp Diéu rat quan giùp cho viéc khào sàt hoà hoc tiép theo dUdc thuàn Idi phàn làp, nhàn dang boat chat; lap lai nghién cùu va xàc djnh dóng lUdng cuà boat chat theo chu trình phàt trién cùa thuc vàt Xàc dinh cà'u trùc giùp cho viéc nhàn dang boat chat va qua dò djnh hng ve càc boat tinh ed the ed, nhùng phép thù dUdc hoc càn phài làm Va cuòi càc thù nghiém boat tinh invitro nhàm dành già va djnh huóng trién khai càc ùng dung cuà san phàm 14 PhUdng phàp luàn va phUdng phàp khoa hoc de tài De tài khòng di qua sàu ve mat khoa hoc thuàn tùy ma chù dén y nghla thuc tién Dói tUdng lua chon de nghién cùu xuàt phàt tu kinh nghiém dàn gian, tu nhùng két qua dà dUdc kiém chùng càn phài cài thién dudi gdc dò khoa hoc hién dai De tài mang tinh lién tue, lién chuyén ngành nhàm dóng góp vào viéc giài quyét mot vàn de dóng bó va hiéu qua hdn Két qua cuà de tài hùu ich cho càc ITnh vuc lién quan mong muón khai thàc ùng dung chùng Càc phUdng phàp nghién cùu sau óMc àp dung de trién khai de tài: a PhUdng phàp tìm tài liéu chuyén ngành ve ITnh vuc càn quan tàm b PhUdng phàp chiét chon loc hoat chat e PhUdng phàp phàn tàch càc boat chat d PhUdng phàp xàc dinh càu trùc cùa càc boat chà't e PhUdng phàp dành già boat tinh 15 Khà nàng sur dung ed sd vat chat, trang thiét b| c DHQGHN * Phòng thi nghiém c Khoa Hồ hoc * Càc trang thiét bj nhu mày sac ky, mày sac ky khói phd (GC-MS), mày phd bóng ngoai, tu ngoai (TT Hồ dàu, khoa Hồ hoc) * Phòng thi nghiém thù hoat tinh cùa TT còng nghé sinh hoc (Khoa Sinh hoc) 18 Két qua dir kién 18.1 Két qua khoa hoc * Diéu che càc can chiét tdng càc hoat chat quan tàm * Phàn làp 6ugc 6-7 hdp chat tinh khiét vói lUdng dù de xàc djnh càu trùc hồ hoc va thù DAI HOC QC GIÀ HA NĨI TRNG KHOA HOC TU NHIÉN KHOA HĨA HOC * LE THIHUYÈN GOP PHÀN NGHIÉN CÙtJ HÓA THÙC VÀT CÀY BÒNG ÒI {LANTANA CAMARA L.) Ò VIÉT NAM Chuyén nghành: Hóa hùu co" KHOA LUÀN TOT NGHIÉP HE DAI HOC CHINH QUI Ngu'òi hng dàn: PGS TS NGUN VÀN DÀU HA NÓI- 2007 DAI HOC QUÓC GIÀ HA NÓI TRUÒNG DAI HOC KHOA HOC TUNHIÈN DO TRI THANH NGHIÉN CÙU THÀNH PHAN HOÀ HOC CÙA CÀY VOI CHUYÉN NGÀNH: HOÀ HÙU CO MA SO: 60.44.2701 LUÀN VÀN THAC SY KHOA HOC Ngit&i ìing ddn khoa hoc : PGS.TS NGUN VÀN DÀU HA NOI - 2006 DAI HOC QUÓC GIÀ HA NĨI TRNG DAI HOC KHOA HOC TUNHIÈN Ngun Dình Chung "NGHIÉN CUU THÀNH PHAN HOÀ HOC CÙA CÀY XA DEN {CELASTRUS HINDSII BENTH ET HOOK, CELASTRACEAE)" Chuyén ngành: Hoà Hùu Co Ma so: 60.44.27.01 LUÀN VÀN THAC SY KHOA HOC NGUÒI HUÒNG DÀN KHOA HOC PGS.TS Nguyén Vàn Dàu Ha Nói - 2007 DAI HOC QC GIÀ HA NĨI TRNG KHOA HOC TU NHIÉN KHOA HĨA HOC TRAN THI HIÉU NGHIÉN CÙU THÀNH PHÀN HÓA HOC CÀY MA DE {PLANTAGO MAJOR L.) Chuyén n ^ n h : Hóa hùu ce Ma so: 01-04-02 LN VÀN THAC SÌ KHOA HOC Ngu'òi hng dàn khoa hoc: PGS TS NGUN VÀN DÀU HA NĨI- 2006 DAI HOC QC GIÀ HA NOI TRUÒNG DAI HOC KHOA HOC TUNHIÈN C5SB0 TRAN THI VAN NGHIÉN CÙU HỒ THÙC VÀT CÀY NHOI • • • {Bischofia javanica Blume) Chuyén ngành: Hoà hùu co Ma so: 1.04.02 LUÀN VÀN THAC Si KHOA HOC • • • Ngi hng dàn khoa hoc: PGS.TS Ngun Vàn Dàu Ha Nói - 2007 SCIENTIFIC PROJECT BRANCH: CHEMÌSTRY PROJECT CATEGORY: VNU LEVEL ôle: f f Study on the isolation procedure and examination on biological activities OT terpenoids and flavonoids from Vietnamese medicinal plants Code: QG-06-07 Managing Institution: Viet nam National University (VNU) Implementing Institution: Ha Noi University of Science (HUS) Collaborating Institutions: National centre for Science and Engineering Faculty of Biology, HUS Co-operator: Nguyén NghTa Thìn Tran vàn On Le Mai Huang Dang Wù Luang Key implenientors: Tran thi Vàn Nguyen Dình Chung Do thi Thanh Tran thi Hiéu Hòang Nhu Trung Le Duy Hiéu Pham Huyén Trang Nguyen thi Bich Le thi huyèn Duration: From 2006 to 2007 Budget: 60.000.000 VND 10 Main results: \-Results in science and technology Isolation and idei ificat ion of terpenoids as bel ausi Sesquiterpenoids from Eclipta alba Hassk Wedelolactone Desmethylwedelolaetone b Diterpenoids from Andrographis paniculatai Nees Andrographolide 10.Neoandrographolide 11.14-deoxyandrographolide (DA) 12.14-deoxy-11,12-®idehidroandrographolide e Triterpenoids from Cleistocalyx operculatus Roxb and Celastrus Hindsu Benth Ursolic acid Oleanolic acid P-Amyrin (5a-olean-12-en-3P-ol) Isolation and Identification of flavonoids as below: a Flavonoid from Eclipta alba Hassk Luteolin b Flavonoit from Cleistocalyx operculatus Roxb 2,4-dihydroxy-6-methoxy-3,5-dÌ!netylchalcone 7-hidroxy-5-methoxy-6,8-dimethylflavanone 3,5,7,4'-tetrahydroxyflavone (kaempferol) Other eompounds from Celastrus Hindsu Benth 6-methoxy-2,2-dimethyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol P-Amyrin-3-O-succinate (prepared from P-Amyrin) Biological examinations Anti-bacterial activity has been examined with: a 2,4-dihydroxy-6-methoxi-3,5-dimethytchalcone b andrographolide e neoandrographolide Anti-oxidative activity has been tested with: a Wedelolactone b Desmethylwedelolaetone Anti-liver cancerous activity has been examined with: a Wedelolactone b Desmethylwedelolaetone e 5a-olean-12-en-3P-ol (P-Amyrin) d P-Amyrin-3-O-succinate e 6-methoxy-2,2-dimethyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol Anti-lung cancerous activity has been examined \v\ìh\ a 5a-olean-12-en-3p-ol (p-Amyrin) b p-Ainyrin-3-O-succinate e 6-methoxy-2,2-dimethyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol Educational Results Graduated Students (MS): Tran thi Vàn Nguyen Dình Chung Do thi Thanh 37 Tran thi Hiéu Undergraduated Students (BS): Hòang Nhu Trung Le Duy Hiéu Pham Huyèn Trang Nguyén thj Bich Le thj Huyén 3- Publications Articles: Reports: 11 Evaluation grade: excellent n Good D Fair a PHIÉU DÀNG KY KÉT QUA NGHIÉN CÙU KH-CN Tén de tài: Nghien cùu qui trình phàn làp khào sàt hoat tinh sinh hoc cùa càc hgp chat terpenoit flavonoit tu cày thuòe Viét Nam Ma so: QG-06-07 Caquan chù tri de tài: Khoa Hóa hoc Dia chi: 19 Le Thành Tòng Tel: (4)- 8253503 Ca quan quàn ly de tài: Truòng Dai hoc Khoa Hpc Tu nhién Dia chi: 334 Duòng Nguyén Trai Tel: (4)-8584615 Tòng kinh phi thuc chi: 60.000.000 VND Trong dò: - Tu ngàn sàch Nhà nc: - Kinh phi cùa trng: - Vay tin dung: - Vòn tu'co: - Thu hòi: Thòi gian nghién cùu: 02 nàm Thòi gian bàt dàu: 2006 Thòi gian két thùc: 2007 Tén càc càn bó phòi hop nghién cùu Tran thi Vàn Ngun Dình Chung Do thi Thanh Tran thj Hiéu Hòang Nhu Trung Le Duy Hiéu Pham Huyén Trang Nguyén thi Bich Le thi Huyén So dàng ky de tài | So chung nhàn dàng ky Bào mài: 39 Tom tàt két qua nghién cùu: a Phò bién ròng rài: b Phò bién han che: X e Bào mài: Muc dich de tài nghién cùu thành phàn hóa hpc cùa càc cày thuòe dà duac su dung làu dòi nèn y hpc co truyén Viét Nam Thóng qua càc chat phàn lap dugc dà khào sàt sa bp mot so hpat tinh sinh hpc nhàm dinh huóng cho viéc su dung hiéu qua càc dugc liéu phòng chùa mot so bénh phò bién a nuac ta Trong de tài này, chùng tói quan tàm khào sàt bòn cày thuòe là: 1) Xuyén tàm lién {Andrographis paniculatai Nees.), ho Orò (Acanthaceae), 2) Cày xa den (Celastrus Hindsu Benth), ho Day rói (Celastraceae), 3) Cày voi (Cleistocalyx operculatus Roxb.) ho Sim (Myrtaceae) 4) Co nho nói (Eclipta alba Hassk., ho Cùc, Asteraceae) Noi dung nghién cùu cùa de tài bao gòm càc muc sau: \-Xày dung qui trinh thich hop de chiét càc hoat chat chinh co cày thuoc Hai lap hoat chat ma chùng tòi quan tàm phàn làp càc hgp chat terpenoit flavonoit Day càc lóp chat co nhièu hpat tinh sinh hpc quy già dà dugc khao sàt kivé mat dugc li 2- Tói uv qui trinh phàn tàch tinh che càc hoat chat Su phàn làp càc hoat chat phài co tinh khà thi: chùng phài nhan dugc a dang tinh kliiét co hiéu suàt cao Ngòai ra, qui trình phàn lap phài don giàn, òn dinh (co thè lap lai), su dung càc hòa chat san co trén thi trng ré tién ì-Xàc dinh càu trùc cùa càc chat phàn làp Xàc djnh càu trùc phàn tu nhiem vu quan trpng cùa càc nhà hóa hpc Nói dung nàychinh su thiét làp mòi quan he giù'a càu trùc hpat tinh Nò co sa cho su phàt trién dùng huóng nghién cùu ùng dung sau 4- Khào sàt hoat tifih sinh hoc cua can chiét tóng cua càc chat phàn làp Càc hoat tinh sinh hpc sau dà dugc khào sàt: Khà nàng chóng oxi hồ * phàn ùng cùa indigocarmin vói peroxidaza màu ngu'òi; 41) * phàn ùng vói 2.2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH)) Khà nàng khàng mot so vi sinh vàt 1) vi khuan Gr(+) ; 2) vi khuan Gr(-) ; 3) nam moc; 4) nàm men Khà nàng khàng té bào ung thu ) KB: té bào ung thu bieu mò; 2) FL: té bào ung thu màng tu cung 3) RD: té bào ung thu màng tim 4) Hep-2: té bào ung thU gan S'Bàn luàn ve hiéu qua chùa bénh cùa cày thuoc nghién cùv Mac dù mùc dò pham vi nghién cùu cùa de tài phién dién, nhung qua càc két qua thu dugc co thè ggi cho chùng ta mot so suy nghT ve hiéu qua chùa bénh cùa cày thuòe dà dugc su dung bay làu Két qua nghién cùu co thè làm ca so cho viéc hình thành mot so thc dàn toc theo h'ng phòng chCra bénh De tài da thu dugc càc két qua sau: 1) Ve hóa hoc Dà phàn lap dugc càc terpenoit càc flavonoit sau: Wedelolacton (tu cày nho nói) Desmetylwedelolacton (tu cày nho nói) Andrographolide (tu cày xuyén tàm lién) Neoandrographolide (tu cày xuyén tàm lién) 14-deoxyandrographolide (DA) (tu cày xuyén tàm lién) 14-deoxy-l 1,12-didehidroandrographolide (tu cày xuyén tàm lién) Axit ursolic (tu cày vói) Axit oleanolic (tu cày vó/) P-Amyrin (5a-olean-12-en-3P-ol) (tu cày xg den) 10 6-metoxy-2,2-dimetyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol (tu cày xg den) 11 (3-Amyrin-3-0-sucxinat (dièu che tu |3-Amyrin) (tu cày xg den) 12 Luteolin (tu cày n/7p/7^/) 13 2,4-dihidroxi-6-metoxi-3,5-dimetylchalcon (tu cày vói) 14 7-hidroxi-5-inetoxi-6,8-dimetyltlavanon (tu cày voi) 41 15 3,5,7,4'-tetrahidroxiflavon (kaempferol) 2) Ve hoat tinh sinh hoc (tu cày vói) Hgat tinh sinh hpc dà khào sàt vói càc hgp chat sau: * Hoat tinh khàng vi ^inh v/at vói: a 2,4-dihidroxi-6-metoxi-3,5-dlmetylchalcon b andrographolide e neoandrographolide * Hoat tinh chonq oxi hna vói: a Wedelolacton b Desmetylwedelolacton * Hoat tinh chonq ung thu gan vói: a Wedelolacton b Desmetylwedelolacton e 5a-olean-12-en-3p-ol (p-Amyrin) d p-Amyrin-3-O-sucxinat e 6-metoxy-2,2-dimetyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol * Hoat tinh chóng ung thu phoi vói: a 5a-olean-12-en-3p-ol (p-Amyrin) b p-Amyrin-3-O-sucxlnat e 6-metoxy-2,2-dimetyl-5-nitro-2H-chromen-7-ol 3) Ve tao sinh vién cao hpc dà bào ve thành còng luàn àn thac sT: Tran thi Vàn Nguyén Dình Chung Do thi Thanh Tran thj Hiéu sinh vién dai hpc dà bào ve thành cóng khóa luàn tòt nghiép: Hòang Nhu Trung Le Duy Hiéu 42 O Ve còng trinh Càc két qua nghién cùu dà dugc còng bò : Bài bào bào cào khoa hoc Kién nghj ve quy mó dói tugng àp dung nghién cùu: Do viec ap dung trén co thè ngi di dang cùa mot duac phàm phai tuàn tlieo cac qui dinh ngat nghèo ve, thù nghiém dugc li, thù nghiém càn làm sang, nen cac khàm pha cua de tài chi mang tinh thòng ììnjKỊ de càc nhà duac hoc co ca sa dira vào dò phàt trién y tuang àp dung Tuy nhién, trén thi truòng co nhiéu dang bào che giàu hgat chat dugc nhièu nguòi su dung nhu càc che phàm ho trg chùc nàng Do vay, càc két qua nghién cuu theo huóng hóa hge càc cày thuóc chi co thè dugc àp dung theo hình thùc dòi tugng nhu vày Chù nhiém de tài Ho tén Thù truang CQ chù tri de tài Chù tich HD dành già chinh thuc Nguyén (.1(1/ l^r-ì l01 Vàn Dàu Hoc hàm hoc vi Thù trirong CQ quàn ly de tài TLCriAM DOG TìWỊNGBAN Phó giào su, ["(ri m len SI ''gU^ ìfRKJ.- Ki tén Dóng dà'u PGSJSKH /^;^ '^^^•^sM^M.j'à