NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ CÂY ALPINIA PINNANENSIS T. L. WU ET SENJEN (ZINGIBERACEAE)

NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ CÂY ALPINIA PINNANENSIS T. L. WU ET SENJEN (ZINGIBERACEAE)

Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 đại học quốc gia hà nội trờng đại học khoa học tự nhiªn KHOA HĨA HỌC ===  === CAO HỒNG NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ CÂY ALPINIA PINNANENSIS T L WU ET SENJEN (ZINGIBERACEAE) Chuyên ngành: Hoá học hữu Mã số: 60 44 27 luËn V¡N th¹c sÜ khoa häc Cán hướng dẫn: PGS TS Phan Minh Giang Hà Nội – 2009 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 đại học quốc gia hà nội trờng đại học khoa học tự nhiªn KHOA HĨA HỌC ===  === CAO HỒNG NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ CÂY ALPINIA PINNANENSIS T L WU ET SENJEN (ZINGIBERACEAE) luËn V¡N th¹c sÜ khoa häc Hà Nội – 2009 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 LỜI CẢM ƠN Luận văn tốt nghiệp hoàn thành Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên, Bộ mơn Hố hữu cơ, Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng lời cảm ơn chân thành đến: GS TSKH Phan Tống Sơn tạo điều kiện nghiên cứu thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành luận văn PGS TS Phan Minh Giang tin tưởng giao đề tài, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện nghiên cứu thuận lợi suốt thời gian thực luận văn Cử nhân khoa học Trần Thị Hiền cộng tác với việc tiến hành thí nghiệm thuộc đề tài luận văn Đồng thời gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô giáo, nghiên cứu sinh, bạn học viên cao học K18 em sinh viên Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên tạo môi trường nghiên cứu khoa học thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành tốt luận văn Hà Nội, tháng 12 năm 2009 Học viên Cao Hoàng Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU….…….…… ………………………………………………………….….1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN … 1.1 Khái quát chi Alpinia (Zingiberaceae)……….………………… …….2 1.1.1 Đặc điểm thực vật học …………………………………………………2 1.1.2 Chi Alpinia (Zingiberaceae) Việt Nam… …………………… …… 1.1.3 Alpinia pinnanensis T L Wu et Senjen (Zingiberaceae) ………….5 Các nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học hợp chất phenolic chi Alpinia (Zingiberaceae)……………………….… ……………6 1.3 Các nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học số hợp chất khác từ chi Alpinia (Zingiberaceae) ………………………………………………21 CHƯƠNG 2: NHIỆM VỤ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU………… … 25 2.1 Nhiệm vụ nghiên cứu ……………………………………………… …25 2.2 Phương pháp nghiên cứu …………………………….……………… 25 2.2.1 Các phương pháp xử lý mẫu chiết …… ……………………….… 25 2.2.2 Các phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất ………………………………………………………………… …… 26 2.2.3 Các phương pháp nghiên cứu cấu trúc … ………………… ………26 2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học chống oxi hóa …… …….…26 CHƯƠNG 3: PHẦN THỰC NGHIỆM …………………………… ………… ……28 3.1 Thiết bị hoá chất ……….………………….…………………………28 3.2 Nguyên liệu thực vật… ….……………………… .………………29 3.3 Điều chế phần chiết từ thân rễ Alpinia pinnanensis … … … 29 3.4 Phân tích thành phần phần chiết phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) …………… …………………………………………………………30 3.4.1 Phần chiết n-hexan (AP1)………………… … …………………….30 3.4.2 Phần chiết điclometan (AP2) ………………… …………… ………31 3.4.3 Phần chiết etyl axetat (AP3)…………………… ….… …………… 31 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 3.5 Phân tách sắc ký phần chiết phân lập hợp chất ………… 31 3.5.1 Phân tách phần chiết n-hexan (AP1) ………………… ………………31 3.5.2 Phân tách phần chiết điclometan (AP2) 32 3.5.3 Phân tách phần chiết etyl axetat (AP3) …….………………… … 33 3.6 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập…….… 34 3.7 Thử hoạt tính chống oxi hóa, hoạt tính qt gốc tự DPPH………… 36 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN …………… ……………………38 4.1 Đối tượng nghiên cứu … …… …………………………………… 38 4.2 Điều chế phần chiết từ thân rễ Alpinia pinnanensis …… ……38 4.3 Nghiên cứu thành phần hóa học phần chiết n-hexan (AP1)……… 40 4.3.1 Phân tích phần chiết n-hexan (AP1) .……… ……………………40 4.3.2 Phân tách phần chiết n-hexan (AP1) ……………… ……………….42 4.4 Nghiên cứu thành phần hóa học phần chiết điclometan (AP2)… …45 4.4.1 Phân tích phần chiết điclometan (AP2) …….…………………………45 4.4.2 Phân tách phần chiết điclometan (AP1)… ……… ………….… 46 4.5 Nghiên cứu thành phần hóa học phần chiết etyl axetat (AP3) … 48 4.5.1 Phân tích phần chiết etyl axetat (AP3)………… ……… ………… 48 4.5.2 Phân tách phần chiết etyl axetat (AP3)……….……… …………… 49 4.6 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập ………… ……51 4.7 Thử hoạt tính cống oxi hóa ……………… …………………………60 KẾT LUẬN……………… … ……………………………………………62 TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………… ……………………………….64 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 CÁC CHỮ VIẾT TẮT THƯỜNG DÙNG TRONG LUẬN VĂN TLC : (Thin layer Chromatography): Sắc ký lớp mỏng CC : (Column Chromatography): Sắc ký cột thường FC : (Flash Chromatography): Sắc ký cột nhanh Mini-C : (Minicolumn Chromatography): Sắc ký cột tinh chế IR : (Infrared Spectroscopy): Phổ hồng ngoại GC-MS : (Gas Chromatography - Mass Spectrometry): Sắc ký khí khối phổ EI-MS : (Electron Impact Mass Spectroscopy): Phổ khối lượng va chạm điện tử H-NMR : (Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy): Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 13 C-NMR : (Cacbon 13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy): Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 DEPT :(Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer): Phổ DEPT Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 MỤC LỤC CÁC BẢNG Bảng 1: Các loài Alpinia Việt Nam Bảng 2: Hiệu suất điều chế phần chiết từ thân rễ Alpinia pinnanensis Bảng 3: Phân tích TLC phần chiết n-hexan (AP1) Bảng 4: Phân tích TLC phần chiết điclometan (AP2) Bảng 5: Phân tích TLC phần chiết etyl axetat (AP3) Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 MỤC LỤC CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ Hình 1: Một số lồi Alpinia (Zingiberaceae) Việt Nam Hình 2: Alpinia pinnanensis T L Wu et Senjen (Zingiberaceae) Sơ đồ 1: Quy trình điều chế phần chiết n-hexan (AP1), điclometan (AP2) etyl axetat (AP3) Sơ đồ 2: Quá trình phân tách sắc ký phần chiết n-hexan (AP1) Sơ đồ 3: Quá trình phân tách sắc ký phần chiết điclometan (AP2) Sơ đồ 4: Quá trình phân tách sắc ký phần chiết etyl axetat (AP3) Sơ đồ 5: Sự phân mảnh EI-MS AP1.18 Sơ đồ 6: Sự phân mảnh EI-MS AP1.22 Sơ đồ 7: Sự phân mảnh EI-MS AP3.4 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 MỤC LỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục 1: Phổ IR AP1.11 Phụ lục 2: Phổ EI-MS AP1.15 Phụ lục 3: Phổ 1H-NMR AP1.15 Phụ lục 4: Phổ 13C-NMR DEPT AP1.15 Phụ lục 5: Phổ EI-MS AP1.18.3 Phụ lục 6: Phổ 1H-NMR AP1.18.3 Phụ lục 7: Phổ 13C-NMR DEPT AP1.18.3 Phụ lục 8: Phổ EI-MS AP1.22 Phụ lục 9: Phổ EI-MS AP1.20.3.2 (= AP3.4) Phụ lục 10: Phổ 1H-NMR AP3.4 Phụ lục 11: Phổ 13C-NMR DEPT AP3.4 Phụ lục 12: Phổ EI-MS AP2.18 Phụ lục 13: Phổ EI-MS AP2.11.3.3 Phụ lục 14: Phổ EI-MS AP2.16 Phụ lục 15: Phổ EI-MS AP3.4 Phụ lục 16: Phổ EI-MS AP3.13.3 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel (: 0918.775.368 LỜI MỞ ĐẦU Chi Riềng (Alpinia, Zingiberaceae) chi lớn, gồm khoảng 230 loài phổ biến khắp vùng Châu Á nhiệt đới cận nhiệt đới, tạo thành chi lớn nhất, phổ biến phức tạp thực vật họ Zingiberaceae Ở Việt Nam, nhiều loài thuộc chi thuốc cổ truyền Y học Việt Nam Alpinia galanga, Alpinia oxyphylla, Alpinia conchigera … Một số loài Alpinia phát gần Việt Nam đưa vào chương trình nghiên cứu hóa học lồi thực vật họ Zingiberaceae Alpinia gagnepainii, Alpinia naponensis, Alpinia maclurei, Alpinia pinnanensis… Nghiên cứu xác định thành phần hố học chi có ý nghĩa đóng góp vào hiểu biết phân loại thực vật theo hoá học chi Alpinia chức sinh học hợp chất phân lập Trong nghiên cứu trước cấu trúc tổng hợp (hybrid) thú vị chalcon điarylheptanoit với hợp chất phenolic (2′,4′dihydroxy-6′-methoxychalcon, 4′,6′-dimethylchalconavingenin, alpinentin, naringenin 5-0-methyl ether (3S,5S)-trans-3,5-dihydroxy-1,7-diphenyl-1hepten) phytosterol β-sitosterol, stigmasterol β-sitosterol-3-O-ββ-Dglucopyranosid phát từ loài Alpinia pinnanensis thu thập Vĩnh Phúc [24] Sau đó, cardamomin phát từ Alpinia conchigera tác nhân chống viêm đầy triển vọng qua nghiên cứu ngăn chặn hợp chất lên đường truyền tín hiệu yếu tố phiên mã NF-kappa B [14] Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học lồi Alpinia pinnanensis thu thập Lào Cai nghiên cứu Luận văn này, chúng tơi mong muốn đóng góp thêm hiểu biết hoá học 10 ... đại học quốc gia hà nội trờng đại học khoa học tự nhiªn KHOA HĨA HỌC ===  === CAO HỒNG NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ CÂY ALPINIA. .. ………….5 Các nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học hợp chất phenolic chi Alpinia (Zingiberaceae)? ??…………………….… ……………6 1.3 Các nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học số hợp chất khác từ chi Alpinia (Zingiberaceae). .. kết nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học chi Alpinia (Zingiberaceae) 10 năm gần (1999-2009) 1.2 Các nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học hợp chất phenolic từ chi Alpinia (Zingiberaceae) Bảy hợp