Nghiên cứu này xác định một số điều kiện nuôi cấy nhân giống cấp I (nồng độ CaCO3, thời gian và nhiệt độ nuôi cấy), môi trường bổ sung nhân giống cấp II (nồng độ CaCO3, MgSO4, hàm lượng cám và ngô) và giá thể nhân giống cấp III đến khả năng sinh trưởng, phát triển và chất lượng của nấm sò trắng (Pleurotus pulmonarius).
TẠP CHÍ KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ NƠNG NGHIỆP ISSN 2588-1256 Tập 3(3) – 2019:1477-1489 NGHIÊN CỨU ĐIỀU KIỆN NHÂN GIỐNG VÀ NUÔI CẤY ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN VÀ CHẤT LƯỢNG CỦA NẤM SÒ TRẮNG (Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quél 1872) Nguyễn Hiền Trang*, Trần Thị Thu Hà * TÓM TẮT Nguyễn Hiền Trang Nghiên cứu xác định số điều kiện nuôi cấy nhân giống cấp I (nồng độ CaCO3, thời gian nhiệt độ nuôi cấy), môi trường bổ sung nhân giống cấp II (nồng độ CaCO3, MgSO4, hàm lượng cám ngô) giá thể nhân giống cấp III đến khả sinh trưởng, phát triển chất lượng nấm sò trắng (Pleurotus pulmonarius) Ở môi trường nhân giống cấp I, với nồng độ CaCO3 bổ sung 0,5 g/ L, 28oC, sau ngày cho nấm phát triển tốt Khi nuôi cấy nhân giống cấp II, sử dụng công thức 25g cám + 25g bột ngô, với việc bổ sung 10 g CaCO3/kg 0,5g/kg MgSO4 điều kiện tốt cho nấm sò trắng phát triển Trong mơi trường nhân giống cấp III, sinh trưởng hệ sợi nấm công thức A1 cho thấy vượt trội, Trong số ngày phủ sợi đầy bịch ngắn động thái phủ sợi nhanh công thức A1 (10kg mùn cao su + 0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) tương ứng 29 ngày với 0,69cm/ngày, tỷ lệ nhiễm thấp 2,67%, trọng lượng đường kính nấm cao (697,33g/bịch, 15,5cm), hàm lượng nước thể nấm 89,17%, hàm lượng lipid 4,53%, hàm lượng protein 28,52%, hàm lượng đường 0,38% Tác giả liên hệ: Email: nguyenhientrang@huaf.edu.vn Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Huế Nhận bài: 25/02/2019 Chấp nhận bài: 12/04/2019 Từ khóa: Nấm sò trắng, Ni cấy nhân giống, Phủ sợi, Pleurotus pulmonarius MỞ ĐẦU Một đặc điểm quan trọng nấm hệ enzyme Nhờ enzyme cellulase số enzyme khác, nấm sò có khả chuyển hóa cellulose thành chất góp phần giải nạn ô nhiễm môi trường chất thải nông nghiệp tạo như: bã mía, rơm rạ Ngồi ra, nấm sò có khả phân hủy thuốc trừ cỏ Antrazin nhờ vào gia tăng enzyme P – 450 hệ Cytochoromeoxygenase peroxydase (Lê Duy Thắng, 2001) Nấm sò nghiên cứu trồng thử nghiệm nhiều loại chất khác như: mùn cưa, chuối, rơm lúa mì, xơ dừa…tại nhiều nước giới với quy mô khác Bhati cs (2007) thử nghiệm trồng nấm sò chất rơm, lúa mì, bã mía, lõ ngô, mạt cưa trồng đất Sản lượng đạt khoảng 18,50 http://tapchi.huaf.edu.vn/ ÷ 432,8g/2kg chất, chất rơm, lúa mì cho sản lượng cao sau bã mía, lõi ngơ cuối mạt cưa Năm 2009, Onuoha cs nghiên cứu môi trường như: mùn cưa, sợi cọ dừa vỏ sắn khơ để ni cấy nấm sò trắng, mùn cưa mơi trường tốt cho nấm sò trắng phát triển Thừa Thiên Huế tỉnh sản xuất tiêu thụ lượng nấm lớn Bên cạnh đó, thời tiết khí hậu thuận lợi cho nấm sinh trưởng, phát triển, điều kiện sản xuất phù hợp nguồn phụ phẩm dồi Trên sở chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu điều kiện nhân giống nuôi cấy đến khả sinh trưởng, phát triển chất lượng nấm sò trắng (Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quél 1872)” với mục đích tìm nguồn chất tỷ lệ ni cấy nấm sò trắng cho suất cao chất lượng tốt 1477 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Nấm sò trắng (P pulmanorius (Fr.) Quél 1872) - Mùn cao su, mùn tràm, cám, ngô thóc 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 2.2.1.1 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy nhân giống cấp I đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Sử dụng chủng nấm gốc sò trắng ni cấy ống nghiệm bảo quản lạnh Thí nghiệm tiến hành đĩa petri đường kính 20cm (mỗi đĩa đổ 20ml mơi trường PDA, pH=6,3), bố trí đĩa/ơ thí nghiệm sở với lần nhắc lại a Ảnh hưởng nồng độ CaCO3 bổ sung đến môi trường nhân giống cấp I Tiến hành nuôi cấy chủng nấm sò trắng (P pulmonairus) mơi trường thạch ISSN 2588-1256 Vol 3(3) – 2019:1467-1479 PDA với CaCO3 nồng độ 0,2g/L, 0,5g/L 1g/L sau ngày nuôi cấy Từ xác định đường kính sợi nấm chọn nồng độ thích hợp để tiến hành theo dõi nhiệt độ thời gian khác b Ảnh hưởng thời gian nhiệt độ nuôi cấy đến khả sinh trưởng phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Chọn công thức tốt thí nghiệm tiến hành ni cấy nhiệt độ (26oC, 27oC, 28oC 29oC) thời gian theo dõi (2, 4, ngày) Theo dõi đường kính phát triển hệ sợi nấm công thức với nhiệt độ thời gian tương ứng 2.2.1.2 Khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp II đến khả sinh trưởng phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Sử dụng giống nấm sò trắng cấp cấy đĩa petri - ngày tuổi Thí nghiệm bố trí chai thuỷ tinh 0,5 lít, chai/ơ thí nghiệm sở với lần lặp lại Bảng Bảng bố trí thí nghiệm môi trường nhân giống cấp II (môi trường hạt thóc xử lý) Thí nghiệm Chất bổ sung CaCO3 MgSO4 Cám ngô CT I1 I2 I3 II1 II2 II3 II4 III1 III2 III3 III4 IV(ĐC) a Ảnh hưởng hàm lượng CaCO3 vào môi trường nhân giống cấp II Tiến hành cấy chuyền từ đĩa thạch sang chai thóc với hàm lượng CaCO3 khác (Bảng 1), kết thu chọn công thức tốt để tiến hành cho bước b Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4 vào môi trường nhân giống cấp II Mục đích thí nghiệm khảo sát hàm lượng MgSO4 ảnh hưởng đến môi trường nhân giống cấp II (Bảng 1) Kết thúc q trình thí nghiệm chọn hàm 1478 Môi trường nuôi cấy 1kg thóc + 5g CaCO3 1kg thóc + 10g CaCO3 1kg thóc + 15g CaCO3 1kg thóc + 0,1g MgSO4 + 10g CaCO3 1kg thóc + 0,2g MgSO4 + 10g CaCO3 1kg thóc + 0,5g MgSO4 + 10g CaCO3 1kg thóc + 1g MgSO4 + 10g CaCO3 1kg thóc + 50g bột ngơ + 10g CaCO3 + 0,5g MgSO4 1kg thóc + 25g cám + 25g bột ngô + 0,5g MgSO4 1kg thóc + 50g bột ngơ + 0,5g MgSO4 1kg thóc + 25g cám + 25g ngơ + 0,5g MgSO4 1kg thóc lượng MgSO4 tốt để tiến hành thí nghiệm c Ảnh hưởng hàm lượng cám ngô vào môi trường nhân giống cấp II Tiến hành khảo sát cám ngô với hàm lượng khác nhau, nhằm mục đích đưa cơng thức tốt để chuẩn bị cho bước (Bảng 1) 2.2.1.3 Khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến sinh trưởng, phát triển chất lượng nấm sò trắng (P pulmanorius) Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP Sử dụng giống nấm cấp II chai 0,5lit nấm 15 ngày tuổi Thí nghiệm CT A1 A2 B1 B2 C1 C2 ISSN 2588-1256 Tập 3(3) – 2019:1477-1489 bố trí 15 bịch/ thí nghiệm sở với lần nhắc lại Bảng Bảng bố trí mơi trường nhân giống cấp III (mơi trường giá thể) Môi trường nuôi cấy 10kg mùn cưa cao su + 0,5kg Cám gạo + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4 10kg mùn cưa cao su + 0,3kg Cám gạo + 0,3kg bột ngô + 0,015kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4 10kg mùn cưa tràm + 0,5kg Cám gạo + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4 10kg mùn cưa tràm + 0,3kg Cám gạo+ 0,3kg bột ngô + 0,015kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4 10kg mùn cưa cao su 10kg mùn cưa tràm Sau chọn công thức tốt nhất, tiến hành cấy chuyền sang môi trường nhân giống cấp III công thức khác Sau đó, xác định động thái sinh trưởng số ngày sợi phủ kín bịch nguyên liệu nấm sò trắng mơi trường nhân giống cấp III (mơi trường giá thể) sau ÷ 40 ngày Từ kết thu đánh giá động thái phát triển hệ sợi nấm sò trắng cơng thức khác cân trọng lượng thể tươi/bịch giá thể 2.2.2 Phương pháp phân tích 2.2.2.1 Phương pháp xác định hàm lượng ẩm theo TCVN 9706:2013 2.2.2.4 Phương pháp xác định hàm lượng đường khử phương pháp axit dinitro - salicylic (DNS) Phương pháp dựa sơ phản ứng tạo màu đường khử với thuốc thử Dinitrosalisilic (DNS) Cường độ màu hỗn hợp phản ứng tỷ lệ thuận với nồng độ đường khử phạm vi định So màu bước sóng 540 nm Dựa vào đồ thị đường chuẩn glucose (phần phụ lục) tinh khiết với thuốc thử DNS tính hàm lượng đường khử mẫu nghiên cứu 2.2.3 Phương pháp toán học xử lý số liệu Dùng nhiệt độ cao để làm bay mẫu thử (khối lượng mẫu khơng thay đổi) Cân khối lượng mẫu trước sau sấy khơ, từ tìm hàm lượng nước có thực phẩm Kết thí nghiệm phân tích phương sai nhân tố ANOVA so sánh giá trị trung bình phương pháp DUCAN (Duncan’s Multiple Range Test) phần mềm thống kê SPSS, phiên 16.0 2.2.2.2 Phương pháp xác định hàm lượng chất béo tổng phương pháp soxhlet KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Hàm lượng chất béo tổng tính dựa vào hàm lượng dầu thu sau bay hết dung môi hay tính gián tiếp thơng qua lượng bã lại 3.1 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy nhân giống cấp I đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) 2.2.2.3 Phương pháp xác định hàm lượng protein phương pháp Kjeldahl 3.1.1 Ảnh hưởng nồng độ CaCO3 bổ sung đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Vơ hóa mẫu thực H2SO4 đậm đặc chất xúc tác, sản phẩm q trình vơ hóa protein NH3 http://tapchi.huaf.edu.vn/ Để khảo sát CaCO3 bổ sung đến môi trường nhân giống cấp I với nồng độ 0,1g/L, 0,5g/L, 1g/L, mẫu đối chứng 0g/L Tiến hành đo đường kính phát triển hệ sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) sau ngày ni cấy Kết trình bày Hình Hình 1479 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY 0,2g/l ISSN 2588-1256 1g/l 0,5g/l Vol 3(3) – 2019:1467-1479 ĐC (đối chứng) Hình Ảnh hưởng nồng độ CaCO3 đến đường kính nấm sau ngày ni cấy 3.1.2 Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian nuôi cấy nhân giống cấp đến khả sinh trưởng phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Chúng tơi tiến hành đo đường kính hệ sợi nấm mơi trường PDA có bổ Đường kính sợi nấm (cm) Ở nồng độ 0,5g/L, hệ sợi nấm có đường kính lớn 6,57cm Khi bổ sung CaCO3 với nồng độ khác làm thay đổi pH môi trường nhân giống cấp I, ảnh hưởng tới động thái phát triển hệ sợi nấm pH thích hợp cho hệ sợi nấm phát triển 6,27 với nồng độ CaCO3 bổ sung 0,5g/ l So sánh kết nghiên cứu Ha Thi Hoa Chun – Li Wang (2015), khảo sát đo đường kính nấm sò ni cấy mơi trường PDA, SPDA, MEA, YAD 2, 4, ngày sau nuôi cấy đĩa peptri nhiệt độ 28oC cho kết ngày thứ đường kính khuẩn ty tất môi trường 9cm phủ kín đĩa thạch Nghiên cứu cho kết tương tự Mshandeten cs (2009), Mansur cs (2012) Vì vậy, chọn CaCO3 nồng độ 0,5g/L để nuôi cấy nhiệt độ thời gian khác nhằm mục đích đưa nhiệt độ thời gian thích hợp cho nấm sinh trưởng phát triển mạnh 6,57a 4,33c 5,50b 3,23d 1g/l ĐC Công thức Hình Ảnh hưởng nồng độ CaCO3 bổ sung đến môi trường nhân giống cấp I 0,2g/l 0,5g/l sung CaCO3 nồng độ 0,5g/L nhiệt độ 26oC, 27oC, 28oC 29oC theo dõi đường kính khuẩn ty sau ngày/lần nuôi cấy Kết thể Hình Bảng Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Hình Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả sinh trưởng phát triển sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) sau nuôi cấy nhiệt độ 28oC Sau ngày ni cấy đường kính hệ sợi nấm sò trắng nhiệt độ 26oC, 27oC, 28oC 29oC tương ứng 2,10cm; 3,27cm; 4,50cm 3,70cm Đến ngày thứ đường kính phát triển sợi nấm tăng lên nhanh đạt cao nhiệt độ 28oC 6,47cm, thấp nhiệt độ 26oC với 1480 đường kính 2,77cm Ở ngày thứ sợi nấm không ngừng phát triển mạnh đường kính khuẩn ty đạt cao nhiệt độ 28oC 7,33cm Ở nhiệt độ 28oC tổ chức sợi nấm chặt chẽ sợi nấm đạt độ tuổi ngày phủ sợi bề mặt đường kính 9,00cm Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ NƠNG NGHIỆP Tập 3(3) – 2019:1477-1489 ISSN 2588-1256 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian nuôi cấy đến khả sinh trưởng phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Nhiệt độ Đường kính khuẩn ty (cm) Ngày 26oC 27oC 28oC 29oC Dd Cd Ad NT2 2,10 3,27±0,15 4,50±0,10 3,70±0,10Bd Dc Cb Ac NT4 2,77±0,06 4,30±0,10 6,47±0,15 4,57±0,06Bc NT6 3,50±0,10Db 5,10±0,10Cb 7,33±0,15Ab 6,87±0,06Bb NT8 4,57±0,06Da 6,57±0,06Ca 9,00Aa 8,03±0,15Ba - Các giá trị trung bình đường kính khuẩn ty sò trắng ngày theo hàng ngang có chữ in hoa không sai khác mức ý nghĩa 𝛼 = 0,05 - Theo cột có chữ in thường không sai khác mức ý nghĩa 𝛼 = 0,05 Chính vậy, chúng tơi chọn nhiệt độ 28oC nuôi cấy ngày thứ thích hợp cho nấm phát triển Qua đó, sử dụng nhân giống cấp I điều kiện để tiến hành nuôi cấy vào môi trường nhân giống cấp II 3.2 Khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp II đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) 3.2.1 Ảnh hưởng hàm lượng CaCO3 vào môi trường nhân giống cấp II NT3 NT6 NT9 Chiều dài sợi nấm (cm) 15 10 8,50c4 6,70b3 4,50c2 2,80b1 11,00a4 9,20a3 9,50b4 6,80a2 7,20b3 5,50b2 4,00a1 2,20c1 0 0.5 1.5 2.5 Cơng thức 3.5 Hình Biểu đồ ảnh hưởng hàm lượng CaCO3 đến khả sinh trưởng, phát triển hệ sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) Động thái tăng trưởng hệ sợi nấm công thức khác khác Ở công thức I2 động thái hệ sợi nấm lan nhanh so với công thức I1và I3 khoảng – 2,5cm (Hình Hình 5) Sau ngày nuôi cấy chiều dài hệ sợi nấm đạt giá trị cao công thức I2 (10g CaCO3/kg) 4,00cm thấp công thức I3 (15g CaCO3/kg) có chiều dài NT3 NT6 2,20cm Đến ngày thứ 12 công thức I2 phủ sợi hết chai thóc có chiều dài 11cm, bên cạnh cơng thức I3 9,50cm cơng thức I1 (5g CaCO3/kg) thấp có chiều dài 8,50cm Từ đó, chọn công thức I2 (10g CaCO3/kg) để tiến hành cho bước với mục đích khảo sát để đưa tỷ lệ phù hợp cho nấm sinh trưởng phát triển NT9 NT12 Hình Ảnh hưởng nồng độ CaCO3 đến khả đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò trắng (pleurotus pulmanorius) sau 3, 6, 9, 12 ngày nuôi cấy http://tapchi.huaf.edu.vn/ 1481 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY ISSN 2588-1256 Vol 3(3) – 2019:1467-1479 3.2.2 Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4 vào môi trường nhân giống cấp II Chiều dài sợi nấm (cm) 10 9,40a4 8,30b4 6,70c4 7,50a3 6,20b3 5,50c3 4,30b2 4,00c2 5,00a2 8,40b4 6,00b3 4,20b2 2,20a1 1,50d1 1,80c1 2,00b1 0 NT3 NT5 NT7 Công4 thức NT9 Hình Biểu đồ khảo sát MgSO4 đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng môi trường nhân giống cấp II Từ kết Hình Hình 7, chúng tơi nhận thấy ngày thứ công thức đồng loạt bung tơ Ở công thức II3 (2,20cm) cao so với công thức khác, thấp công thức II4 (1,50cm) Đến ngày thứ động thái phát triển sợi nấm nhanh, đạt giá trị cao công thức II3 (5,00cm), thấp công thức II1 (4,00cm) Ở công thức II3 động thái phủ sợi, mật độ hệ sợi nấm nhanh NT3 NT5 dày nhất, chậm thưa mơi trường II1 Từ cho thấy hàm lượng MgSO4 II3 (0,5g/kg thóc) thích hợp cho sợi sợi nấm phát triển, hàm lượng nằm khoảng cho phép để bổ sung vào môi trường trồng nấm (Mshandete AM, Mgonja, 2009), với hàm lượng 0,5g/kg thóc cần thiết cho hoạt động số loại enzyme nấm Như vậy, qua trình khảo sát chúng tơi chọn cơng thức II3 (0,5g/kg thóc) NT7 NT9 Hình Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4 đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng môi trường nhân giống cấp II sau 3, 5, 7, ngày nuôi cấy 3.2.3 Ảnh hưởng hàm lượng cám bột ngô vào môi trường nhân giống cấp I Các cơng thức III1 (50g bột ngơ/kg thóc), III2 (25g cám + 25g ngơ/kg thóc), III3 (50g cám/kg thóc) III4 (50g cám + 50g bột ngơ/kg thóc) bổ sung vào môi 1482 trường nhân giống cấp II Các công thức nuôi cấy điều kiện nhiệt độ thời gian đo chiều dài sợi nấm sau 1, 3, 5, ngày nuôi cấy Kết nghiên cứu đánh giá thể Hình Hình Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP Tập 3(3) – 2019:1477-1489 ISSN 2588-1256 Chiều dài sợi nấm (cm) 15 9,70a4 10 6,50c4 6,30c4 7,50b4 6,50b3 6,50c4 3,20d3 c3 4,00b2 4,50 3,00c2 2,00d2 1,80b1 1,80b1 0,77c1 Công thức NT5 NT7 7,40a3 4,30c3 5,20a2 3,20c2 2,20a1 2,20a1 NT3 NT1 Hình Ảnh hưởng cám ngơ đến khả Hình Biểu đồ khảo sát ảnh hưởng hàm lượng sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng môi cám ngô đến khả sinh trưởng, phát triển trường nhân giống cấp I sau ngày ni cấy nấm sò trắng mơi trường nhân giống cấp II 3.3 Khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến sinh trưởng, phát triển chất lượng nấm sò trắng (P pulmanorius) 3.3.1 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến động thái phủ sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) Trong đó, số ngày phủ sợi đầy bịch ngắn động thái phủ sợi nhanh công thức A1 (10kg mùn cao su + 0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) tương ứng 29 ngày với 0,69cm/ngày Kế đến công thức B1 (10kg mùn tràm + 0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) số ngày phủ sợi động thái 38 ngày với 0,52cm/ngày thấp công thức C2 (mẫu đối chứng mùn tràm) có số ngày phủ sợi 40 ngày động thái phủ sợi 0,34cm/ngày (Hình 10) Dựa vào Hình 9, dễ dàng nhận thấy bổ sung cám bột ngô với hàm lượng khác cho động thái sinh trưởng hệ sợi nấm khác Chiều dài hệ sợi nấm cao công thức III2 (25g cám + 25g bột ngô) 5,20cm thấp công thức III3 (50g cám) Công thức III1 (50g bột ngơ) III3 (50g cám) có sai khác Ở ngày thứ công thức III1 (bột ngô) động thái sợi nấm phát triển nhanh cơng thức III3 (cám) Bên cạnh đó, cơng thức lại có động thái phủ sợi chậm so với công thức III2 (25g cám + 25g bột ngô) III4 (50g cám + 50g bột ngô) Điều chứng tỏ kết hợp cám ngơ động thái phủ sợi lại nhanh nhiều so với cơng thức có cám ngơ riêng lẽ Mặt khác, cơng thức III2 có động thái sợi nấm lan nhanh so với công thức III4 Như vậy, chọn công thức III2 để tiến hành cho thí nghiệm 60 40 0.8 0,69A 61,00a 53,00b 0,54B 0,52C 38,00d 29,00f 36,00e 0,45D 0.6 0,38D 0,34E 0.4 42,67c 20 0.2 Tốc độ phủ sợi (cm/ngày) Số ngày phủ sợi đầy bịch (ngày) 80 A1 A2 B1 số ngày lan tơ đầy bịch B2 C1 tốc độ lan tơ C2 Cơng thức Hình 10 Biểu đồ khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến tốc độ phủ sợi nấm sò trắng (P pulmanorius) http://tapchi.huaf.edu.vn/ 1483 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY Tỷ lệ nhiễm (%) Công thức A1 công thức A2 (10kg mùn tràm + 0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) mùn cao su, cơng thức A1 có hàm lượng chất bổ sung (cám ngô) cao so với công thức A2 nên cơng thức A1 có động thái phủ sợi đầy bịch nhanh hơn, điều tương tự công thức B1 B2 Qua kết phân tích cho thấy: sinh trưởng hệ sợi nấm sò phụ thuộc vào thành phần nguyên liệu Như vậy, công thức 35 30 25 20 15 10 ISSN 2588-1256 Vol 3(3) – 2019:1467-1479 A1 công thức tốt cơng thức, từ đưa tỷ lệ phối trộn chất hàm lượng chất bổ sung sợi nấm phát triển tốt 3.3.2 Xác định tỷ lệ nhiễm hệ sợi nấm sò mơi trường nhân giống cấp III Tiến hành khảo sát tỷ lệ nhiễm công thức môi trường chất chất dinh dưỡng bổ sung khác Kết trình bày Hình 11 34,67a 30,67b 16,00c 2,67e A1 6,00ed A2 8,67d B1 B2 C1 C2 Cơng thức Hình 11 Biểu đồ khảo sát ảnh hưởng nhân giống cấp III đến tỷ lệ nhiễm giá thể Tỷ lệ nhiễm mơi trường C2 cao có tỷ lệ nhiễm trung bình 34,67%, mơi trường C1 30,67% Ngược lại tỷ lệ nhiễm thấp môi trường A1 2,67% A2 6,00% Bên cạnh đó, cơng thức C1 tỷ lệ nhiễm thấp C2, chứng tỏ mùn cao su tốt cho sợi nấm phát triển hạn chế tối đa tỷ lệ nhiễm Như vậy, qua tiến 3.3.3 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến suất thể nấm sò trắng (P pulmanorius) 20 15,55A 12,55B Đường kính nấm sò (cm) Trọng lượng nấm sò (g/bịch) 1000 hành khảo sát chọn công thức A1 (10kg mùn cao su + 0,5kg cám + 0,5kg ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) mang lại hiệu kinh tế cao 10,83C 10,55CD 9,78DE 9,22E 10 529,33d 240,00e 580,00c 212,33f 500 697,33a 619,67b A1 A2 B1 trọng lượng B2 C1 C2 đường kính Cơng thức Hình 12 Biểu đồ ảnh hưởng mơi trường nhân giống cấp III đến trọng lượng đường kính cụm nấm sò trắng 1484 Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP ISSN 2588-1256 Tập 3(3) – 2019:1477-1489 Theo dõi suất thu hoạch công thức chứa bịch chất 1,2kg, kết trình bày Hình 12 Từ kết ta thấy: trọng lượng đường kính nấm cơng thức có sai khác ý nghĩa thống kê Cao công thức A1 (697,33g/bịch, 15,5cm), cơng thức A2 (619,67g/bịch, 12,55cm) thấp công thức C2 (212,33g/bịch, 9,22cm) Công thức C1 lớn C2, kết chứng tỏ mùn cao su cho suất cao so với mùn tràm Mặt khác, bổ sung chất dinh dưỡng khác cho suất khác thể qua công thức A1 lớn A2 P sajor-caju mơi trường chất rơm lúa mì + 20% saponin với suât cao 1024g/kg Một nghiên cứu khác Soniya Sharma cs (2013), khảo sát môi trường chất khác để nuôi cấy nấm sò P ostreatus thu trọng lượng đường kính tương ứng thể chất rơm rạ (381,85g, 7,15cm), rơm gạo + rơm mì (309,29g, 6,63cm), bã mía (268,17g, 6,47cm), mùn cưa (247,87g, 6,51cm) Vì vậy, qua trình nghiên cứu để thu nấm sò suất cao chúng tơi chọn cơng thức A1 (10kg mùn cao su + 0,5kg cám + 0,5kg ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) Stanley cs (2012) nghiên cứu nấm sò P pumanorius chất hạt bắp bổ sung cám gạo nồng độ khác từ 0, 10, 20 30% có trọng lượng đường kính cao (53,2g/250g, 5,5cm) Aditi cs (2013) trồng nấm sò 3.3.4 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến chất lượng nấm sò trắng (P pulmanorius) 3.3.4.1 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng ẩm thể nấm sò trắng (P pulmanoriu) Hàm lượng ẩm (%) Kết thu thể Hình 13 91 90.5 90 89.5 89 88.5 88 87.5 90,59a 89,17b 89,43ab 88,94b 88,82b A1 A2 B1 B2 89,50ab C1 C2 Cơng thức Hình 13 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp đến hàm ẩm thể nấm sò trắng (P pulamanorius) Dựa vào Hình 13 cho thấy độ ẩm thể nấm cao cơng thức C1 (90,59%) khác biệt có ý nghĩa thống kê độ ẩm công thức B1 (88,94%), A1 (89,17%) B2 (88,82%) Qua kết cho thấy môi trường chất mà độ ẩm khác công thức A1 A2, B1 B2 Chính vậy, độ ẩm khơng bị ảnh http://tapchi.huaf.edu.vn/ hưởng chất mà bị ảnh hưởng chất dinh dưỡng bổ sung Ở cơng thức A1, B1 có hàm lượng chất dinh dưỡng bổ sung cao A2, B2 độ ẩm lại khơng có sai khác Mặt khác, độ ẩm thể công thức đối chứng C1 (mùn cao su), C2 (mùn tràm) so với A1, A2, B1, B2 lại có khác biệt Nuhu cs (2008) nghiên cứu 1485 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY ISSN 2588-1256 Vol 3(3) – 2019:1467-1479 độ ẩm thể lồi nấm sò: P ostreatus, P Sajor – caju, P florida có độ ẩm 86%, 87%, 87,5% 87,4 % Kết thấp so với nghiên cứu với Asaduzzaman cs (2008) phân tích hàm lượng ẩm nấm sò khoảng 85 – 88% (4,6%), P sajuor – caju (4,41%) , P florida (4,3%), C indica (4,95%) Nghiên cứu tương đồng so với nghiên cứu 3.3.4.2 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III khác đến hàm lượng Chúng tiến hành phân tích hàm lượng protein nấm mơi trường nuôi cấy khác Kết thu thể 3,53c 4,01b 3,36d 2,85e 2,41f A1 A2 B1 B2 C1 C2 Cơng thức Hình 14 Biểu đồ ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng chất béo thể nấm sò trắng (P pulmanorius) lipid thể nấm sò trắng (P pulmanorius) Dựa vào đồ thị Hình 14 cho ta thấy hàm lượng lipid cao nấm sò cơng thức A1 (4,53 %), khác biệt hàm lượng lipid công thức A2, B1, B2, C1, C2 Hàm lượng thấp mẫu đối chứng C1 C2 Bên cạnh đó, cơng thức A1 cao A2 công thức B1 cao B2 Điều chứng tỏ, chất dinh dưỡng bổ sung vào mơi trường chất ảnh hưởng tới hàm lượng lipid thể Asaduzzaman cs (2008) nghiên cứu hàm lượng lipid thể lồi nấm sò tính theo trọng lượng khơ nấm : P sajuor – caju (4%), P.ostreatus (2,6%), P florida (3,9%), P cysndiosus (5,5%), P high king (5,2%) Một số loài có hàm lượng lipid tương đồng so với nghiên cứu loài P cysndiosus P high king lại cao Nuhu cs (2008) nghiên cứu hàm lượng lipid thể loài nấm sò tính theo trọng lượng khơ nấm là: P ostreatus 1486 Hàm lượng protein (%) Hàm lượng chát béo (%) 4,53a 3.3.4.3 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng protein thể nấm sò trắng (P pulmanorius) 30 28,52a26,72c27,85b25,80d 23,80e 22,39f 25 20 15 10 A1 A2 B1 B2 C1 C2 Cơng thức Hình 15 Biểu đồ ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng protein thể nấm sò trắng (P pulmanorius) Hình 15 Kết cho thấy protein đạt cao cơng thức A1 có hàm lượng 28,52% Bên cạnh cơng thức B1 chứa hàm lượng protein cao 27,85% thấp cơng thức C2 có hàm lượng 22,39 Theo nghiên cứu Selima cs (2014), tiến hành phân tích loại nấm sò P florida, P citrinopileatus, P pulmanorius có hàm lượng protein tương ứng là: 22 – 25%, 20 – 22% 15 – 18% Kết thấp so với nghiên cứu Một nghiên cứu khác Soniya Sharmaa cs (2013) phân tích protein nấm sò P sajorcaju ni trồng mơi trường chất rơm lúa mì + 20% saponin có hàm lượng 27,4% – 34,8% 3.3.4.4 Ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng đường thể nấm sò trắng (P pulmanorius) Tiến hành phân tích lượng đường có nấm, với mơi trường khác Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ NƠNG NGHIỆP Kết trình thể Hình 16 Hàm lượng đường khử (%) Kết phân tích thống kê cho thấy có sai khác hàm lượng đường khử công thức đạt cao công thức A1 (0,38%) thấp công thức 0.4 Tập 3(3) – 2019:1477-1489 ISSN 2588-1256 đối chứng C2 (0,107%) Xét công thức đối chứng C1 (mùn cao su), C2 (mùn tràm) ta thấy có khác biệt, C1 có hàm lượng đường khử cao chứng tỏ mùn cao su môi trường cung cấp hàm lượng đường nhiều so với mùn tràm 0,38a hàm lượng đường khử 0,30b 0.3 0,20c 0,18d 0.2 0,14e 0,11f 0.1 A1 A2 B1 B2 C1 C2 Cơng thức Hình 16 Ảnh hưởng mơi trường nhân giống cấp III đến hàm lượng đường khử thể nấm sò trắng (P pulmanorius) Mặt khác, công thức A1, A2, B1, B2 bổ sung hàm lượng muối khoáng bổ sung chất dinh dưỡng cám ngô lại khác nên hàm lượng đường khử thể nấm khác Ở công thức A1 A2 môi trường chất mùn cao su công thức A1 có hàm lượng đường khử cao hơn, kết tương tự công thức B1 B2 Như vậy, chất dinh dưỡng cám ngô ảnh hưởng tới hàm lượng đường khử thể nấm sò Aditi cs (2013) phân tích đường nấm sò P sajorcaju ni trồng mơi trường chất rơm lúa mì + 20% saponin có hàm lượng 28,6 – 32,2% Theo nghiên cứu Soniya cs (2013) phân tích hàm lượng carbonhydrate nấm sò P ostreattus môi trường chất khác là: Rơm rạ (42,26%), rơm gạo + lúa mì (30,248%), rơm gạo + giấy (32,65%), bã mía (51,577%) mùn cưa (38,74%) Như vậy, qua kết nghiên cứu cho thấy công thức A1 (1kg mùn cao su + A1 (0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg http://tapchi.huaf.edu.vn/ CaCO3 + 0,01kg MgSO4) có hàm lượng đường khử cao KẾT LUẬN Ở môi trường nhân giống cấp I, với nồng độ CaCO3 bổ sung 0,5g/L, 28oC, sau ngày cho nấm phát triển tốt Khi nuôi cấy nhân giống cấp II, sử dụng công thức 25g cám + 25g bột ngô, với việc bổ sung 10g CaCO3/kg MgSO4 0,5g/kg thóc điều kiện tốt cho nấm sò trắng phát triển Trong mơi trường nhân giống cấp III, sinh trưởng hệ sợi nấm công thức A1 (10kg mùn cao su + 0,5kg cám + 0,5kg bột ngô + 0,15kg CaCO3 + 0,01kg MgSO4) cho kết tốt đồng thời nấm có chất lượng cao so với cơng thức khác TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trần Văn Mão Trần Tuấn Kha (2014) Kỹ thuật trồng nấm ăn nấm dược liệu Hà Nội: Nhà xuất Nông Nghiệp Lê Duy Thắng (2001) Kỹ thuật trồng nấm Hà Nội: Nhà xuất Nông nghiệp Lê Duy Thắng Trần Văn Minh (2000) Sổ tay hướng dẫn trồng nấm Hà Nội: Nhà xuất Nông Nghiệp 1487 HUAF JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY Bộ Khoa học Công nghệ (2013) Ngũ cốc sản phẩm ngũ cốc - Xác định độ ẩm (Phương pháp chuẩn bản) Khai thác từ https://vanbanphapluat.co/tcvn-9706-2013ngu-coc-san-pham-ngu-coc-xac-dinh-doam-phuong-phap-chuan-co-ban Tài liệu tiếng nước Guptaa, A., & Sharmaa, S., Saha, S., & Walia, S (2013) Yield and nutritional content of Pleurotus sajor caju on wheat straw supplemented with raw and detoxified mahua cake Food Chemistry, 141(4), 42314239 Asaduzzaman, K Md., Ruhul, A S M., Uddin, N., & Tania, M (2008) Comparative Study of the Nutritional Composition of Oyster Mushrooms Culticated in Bangladesh Bangladesh Journal of Mushroom, 2(1), 914 Onuoha, C I., Ukaulor, U., & Onuoha, B C (2009) Cultivation of Pleurotus Pulmonarius (Mushroom) Using Some Agrowaste Materials Agricultural Journal, 4(2),109-112 Ha, T H., & Chun, L W (2015) The Effects of Temperature and Nutritional Conditions on Mycelium Growth of Two Oyster Mushrooms (Pleurotus ostreatus and Pleurotus cystidiosus) Mycobiology, 43(1), 14–23 Bhati, M I., & Jiskani, M M (2007) Grow, development and yield of oyster mushroom, 1488 ISSN 2588-1256 Vol 3(3) – 2019:1467-1479 pleurotus ostreatus (Jacq.ex.fr.) kummer as affected by different spawn rates Pakistan Journal Botany, 39(7), 2685-2692 Mansur, M A., Miah, A., Rahman, M H., Rahman, M M., & Yahia, A S (2007) Effect of varieties and media on mycelial growth and substrate on spawn production of oyster mushoom Bangladesh Research Publications Journal, 7, 361–366 Mshandete, A M., & Mgonja, J R (2009) Submerged liquid fermentation of some mycelial biomass, exopolysaccharides and mycelium protein using wastes peels media Journal of Agricutural and Biologocal Science, 4(6), 1–13 Alam, N., & Amin, R (2008) Nutritional Analysis of Cultivated Mushrooms in Bangladesh - Pleurotus ostreatus, Pleurotus sajor-caju, Pleurotus florida and Calocybe indica Mycobiology, 36(4), 228-232 Sharma, S., & Ram, K (2013) Growth and Yield of Oyeter mushroom (pleurotus ostreatus) on different substrates Journal of New Biological Reports, 2(1), 03-08 Selima, K A I (2014) Nutritional qualities and antioxidant activity of three edible oyster mushrooms (Pleurotus spp.) NJAS Wageningen Journal of Life Sciences, 72-73, 1-5 Stanley, H., & Umolo, E (2011) Cultivation of oyster mushroom (Pleurotus pulmanorius) on amended corncob substrate Nguyễn Hiền Trang Trần Thị Thu Hà TẠP CHÍ KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP ISSN 2588-1256 Tập 3(3) – 2019:1477-1489 STUDY ON THE EFFECT OF PROPAGATED CONDITIONS TO THE GROWTH AND QUALITY OF OYSTER MUSHROOM (Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quél 1872) Nguyen Hien Trang*, Tran Thi Thu Ha * ABSTRACT Nguyen Hien Trang This study aimed to investigate the effects of the growth and quality of oyster mushroom (Pleurotus pulmonarius) in three phases of propagation In the first phase of propagation (PDA medium), the results of the study showed that the growth of oyster mushroom was the highest when supplemented by 0.5g/L CaCO3, the propagation time was days at temperature of 28°C When oyster mushroom was cultured in the second phase of propagation (grain medium), its growth was the highest with the treatment of III2 (25g rice bran + 25g corn powder + 10g CaCO3 + 0.5g MgSO4/1kg grain) In the third phase of propagation (substrates medium), the treatment of A1 (10kg rubber tree sawdust + 0.5kg bran + 0.5kg corn powder + 0.15kg CaCO3 + 0.01kg MgSO4) had a higher growth than other treatment The results indicated the highest mycelium ability of oyster mushroom reached 0.69cm after 29 days; the infection rate was the lowest with 2.67%; the weight and diameter of oyster mushroom were 697.33g/1bag and 15.5cm, respectively The quality of oyster mushroom produced by the treatment of A1 showed that 89.17% was for water content, 4.53% was for lipid, protein reached 28.52%, and sugars content was 0.38% Corresponding Author: Email: nguyenhientrang@huaf.edu.vn University of Agriculture and Forestry, Hue University Received: February 25th, 2019 Accepted: April 12th, 2019 Keywords: Mycelium, Oyster mushroom, Pleurotus pulmonarius, Propagated conditions http://tapchi.huaf.edu.vn/ 1489 ... cám ngơ đến khả Hình Biểu đồ khảo sát ảnh hưởng hàm lượng sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng mơi cám ngô đến khả sinh trưởng, phát triển trường nhân giống cấp I sau ngày nuôi cấy nấm sò trắng. .. trí thí nghiệm 2.2.1.1 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy nhân giống cấp I đến khả sinh trưởng, phát triển nấm sò trắng (P pulmanorius) Sử dụng chủng nấm gốc sò trắng ni cấy ống nghiệm bảo quản... cho nấm phát triển Qua đó, chúng tơi sử dụng nhân giống cấp I điều kiện để tiến hành nuôi cấy vào môi trường nhân giống cấp II 3.2 Khảo sát ảnh hưởng môi trường nhân giống cấp II đến khả sinh