Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8683-11:2011

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8683-11:2011. Tiêu chuẩn về Giống vi sinh vật thú y – Phần 11: Quy trình giữ giống vi khuẩn tụ huyết trùng lợn, chủng Ps1. Tiêu chuẩn này áp dụng cho việc giữ giống vi khuẩn Tụ huyết trùng lợn chủng Ps1 được dùng sản xuất và kiểm nghiệm vắc xin, kháng huyết thanh tụ huyết trùng lợn.

ung quang Fg Trên thạch máu cừu khuẩn lạc có dạng tương tự, không làm dung huyết 3.4 Kiểm tra tính độc 3.4.1 Chuẩn bị động vật – lợn mẫn cảm, khỏe mạnh, có khối lượng từ 20 kg đến 25 kg – thỏ mẫn cảm, khỏe mạnh, có khối lượng từ 1,8 kg đến 2,0 kg – chuột nhắt trắng khỏe mạnh, có khối lượng từ 18 g đến 20 g 3.4.2 Chuẩn bị giống vi khuẩn Giống đơng khơ hồn ngun nước thịt Ria lên thạch BAB có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Chọn khuẩn lạc, cấy vào mơi trường BHI có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Đếm số xác định mật độ vi khuẩn pha loãng đến nồng độ cần tiêm 3.4.3 Cách tiến hành Tiêm cho lợn, liều ml pha loãng nồng độ x 10 CFU/ml theo đường da, gây chết lợn (MLD: 5000 CFU/ml) Tiêm cho thỏ, liều ml pha loãng nồng độ 10 –9 theo đường da, gây chết thỏ (MLD: từ CFU/ml đến CFU/ml) Tiêm cho chuột nhắt trắng, liều 0,1 ml pha loãng nồng độ 10 –7 theo đường da, gây chết chuột (MLD: từ 10 CFU/ml đến 15 CFU/ml) 3.5 Kiểm tra tính gây miễn dịch 3.5.1 Chuẩn bị động vật Chuẩn bị thỏ mẫn cảm, khỏe mạnh, có khối lượng từ 1,8 kg đến 2,0 kg 3.5.2 Chuẩn bị canh khuẩn vô hoạt Chọn khuẩn lạc cấy vào môi trường BHI bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Đếm số xác định mật độ vi khuẩn cho canh khuẩn đạt từ x 109 CFU/ml đến x 109 CFU/ml Tiến hành vô hoạt canh khuẩn formol từ 0,2 % đến 0,4 % Để nhiệt độ phòng ngày đến ngày TCVN 8683-11:2011 3.5.3 Cách tiến hành Tiêm cho thỏ, liều x 10 CFU/ml đến x 10 CFU/ml theo đường da Thỏ sống 50 % so với thỏ đối chứng (không tiêm canh khuẩn vô hoạt) sau thử thách với 10 MLD chủng vi khuẩn cường độc tương ứng Phương pháp truyền giống 4.1 Chuẩn bị động vật Chuẩn bị lợn mẫn cảm, khỏe mạnh, có khối lượng từ 20 kg đến 25 kg 4.2 Chuẩn bị giống vi khuẩn Giống đông khơ hồn ngun nước thịt Ria lên thạch BAB có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Chọn khuẩn lạc, cấy vào mơi trường BHI có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h 4.3 Cách tiến hành 4.3.1 Ria canh khuẩn lên thạch BAB có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Làm tiêu nhuộm Gram để kiểm tra hình thái 4.3.2 Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 4.3.3 Tiêm cho đến lợn, liều 1ml canh khuẩn nguyên, theo đường da 4.3.4 Chọn mổ lợn hấp hối sau chết, khoảng 20 h đến 72 h sau tiêm Thu hoạch máu tim 4.3.5 Ria máu tim nên thạch BAB, ủ 37 0C 18 h đến 24 h Chọn khuẩn lạc điển hình cấy vào mơi trường BAB lặp lại bước từ 4.3.1 đến 4.3.5, thay đổi liều tiêm x 10 CFU/con 4.3.6 Cấy máu tim lên thạch BAB, ủ 37 0C 18 h đến 20 h 4.3.7 Chọn khuẩn lạc điển hình cấy lên thạch máu BAB có bổ sung % máu cừu, ủ 37 0C 24 h 4.3.8 Rửa mặt thạch huyết ngựa, thu huyễn dịch đông khô Kiểm tra giống sau đông khô 5.1 Tiêu chuẩn vật lý – Chế phẩm đóng thành bánh, xốp, màu đồng nhất, có chân không TCVN 8683-11:2011 – Độ ẩm: không lớn % – Độ hòa tan: lắc nhẹ nước sinh lý, chế phẩm tan trở lại dung dịch ban đầu vòng đến 5.2 Yêu cầu kỹ thuật Giống đông khô phải đạt yêu cầu Điều Bao gói, ghi nhãn bảo quản 6.1 Bao gói Giống sau đơng khơ bao gói giấy, để túi nhựa 6.2 Ghi nhãn - Nơi sản xuất - Tên giống - Số lô…ngày…tháng…năm… sản xuất - Người thực - Điều kiện bảo quản 6.3 Bảo quản Giống giữ nhiệt độ từ đến 0C năm TCVN 8683-11:2011 Thư mục tài liệu tham khảo OIE Manual 2008: Chapter 2.4.12: Haemorrhagic septicaemia (Immunological methods) 10 ... thu huyễn dịch đông khô Kiểm tra giống sau đông khô 5.1 Tiêu chuẩn vật lý – Chế phẩm đóng thành bánh, xốp, màu đồng nhất, có chân khơng TCVN 8683-11:2011 – Độ ẩm: không lớn % – Độ hòa tan: lắc nhẹ... khuẩn cường độc tương ứng Phương pháp truyền giống 4.1 Chuẩn bị động vật Chuẩn bị lợn mẫn cảm, khỏe mạnh, có khối lượng từ 20 kg đến 25 kg 4.2 Chuẩn bị giống vi khuẩn Giống đơng khơ hồn ngun nước... lên thạch BAB có bổ sung % huyết ngựa, ủ 37 0C 24 h Làm tiêu nhuộm Gram để kiểm tra hình thái 4.3.2 Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 4.3.3 Tiêm cho đến lợn, liều 1ml canh