Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8683-14:2011. Tiêu chuẩn về Giống vi sinh vật thú y – Phần 14: Quy trình giữ giống vi khuẩn ung khí thán, các chủng Cl.c1 và Cl.c2. Mời các bạn cùng tham khảo để nắm bắt nội dung của tiêu chuẩn.
TCVN TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8683-14:2011 Xuất lần GIỐNG VI SINH VẬT THÚ Y – PHẦN 14: QUY TRÌNH GIỮ GIỐNG VI KHUẨN UNG KHÍ THÁN, CÁC CHỦNG CL.C1 VÀ CL.C2 Master seed of microorganisms for veterinary use – Part 14: The procedure for preservation of Clostridium chauvoei, Cl.c1 and Cl.c2 strains HÀ NỘI 2011 TCVN 8683-14:2011 Lời nói đầu TCVN 8683-14:2011 chuyển đổi từ 10 TCN 270:1996 thành tiêu chuẩn quốc gia theo quy định khoản Điều 69 Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật điểm a khoản Điều Nghị định số 127/2007/NĐ-CP ngày 01/8/2007 Chính phủ quy định chi tiết thi hành số điều Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật; TCVN 8683-14:2011 Cục Thú y biên soạn, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố TCVN 8683-14:2011 TIỂU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8683-14:2011 Giống vi sinh vật thú y – Phần 14: Quy trình giữ giống vi khuẩn ung khí thán, chủng Cl.c1 Cl.c2 Master seed of microorganisms for veterinary use – Part 14: The procedure for preservation of Clostridium chauvoei, Cl.c1 and Cl.c2 strains CẢNH BÁO – Việc áp dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thiết bị thao tác gây nguy hiểm Tiêu chuẩn đưa hết tất vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn sức khỏe thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn quy định trước sử dụng tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn áp dụng cho việc giữ giống vi khuẩn ung khí thán dùng chế tạo kiểm nghiệm vắc xin Ung khí thán Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 8684:2011, Vắc xin chế phẩm sinh học dùng thú y – Phép thử độ khiết Yêu cầu giống vi sinh vật 3.1 Nhận dạng Vi khuẩn ung khí thán nhận dạng hình thái, phản ứng sinh hóa TCVN 8683-14:2011 3.2 Đặc tính ni cấy Mọc tốt mơi trường ni cấy vi khuẩn yếm khí 36 0C đến 37 0C, pH từ 7,2 đến 7,6, yếm khí bắt buộc, sinh nhiều bọt mơi trường lỏng 3.3 Hình thái vi khuẩn Vi khuẩn hình gậy mập, ngắn, đứng riêng lẻ chuỗi ngắn, Gram dương Trong canh khuẩn già hình thành nha bào (từ 10 % đến 20 %) có dạng vợt bóng bàn tròn Trên thạch máu thạch VF yếm khí, khuẩn lạc có dạng tròn, rìa gọn, đường kính từ mm đến mm, có núm lồi, màu trắng xám Trong thạch sâu VF khuẩn lạc nhỏ, để lâu ống thạch bị nứt làm nhiều đoạn, đoạn chứa đầy bọt khí 3.4 Kiểm tra tính độc 3.4.1 Chuẩn bị động vật – bê mẫn cảm, khỏe mạnh, từ tháng tuổi đến 12 tháng tuổi – chuột lang khỏe mạnh, có khối lượng từ 300 g đến 350 g 3.4.2 Chuẩn bị giống vi khuẩn Giống đơng khơ hồn ngun nước thịt Cấy vào mơi trường gan yếm khí, ủ 37 0C 48 h Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 3.4.3 Cách tiến hành Tiêm cho bê, liều từ ml/con đến ml/con canh khuẩn nguyên theo đường bắp thịt, gây chết bê vòng 60 h Tiêm cho chuột lang, liều 0,5 ml/con canh khuẩn nguyên theo đường bắp thịt, gây chết chuột vòng 48 h 3.5 Kiểm tra tính gây miễn dịch 3.5.1 Chuẩn bị động vật Chuẩn bị 10 chuột lang khỏe mạnh, có khối lượng từ 300 g đến 350 g TCVN 8683-14:2011 3.5.2 Chuẩn bị canh khuẩn vô hoạt Giống đơng khơ hồn ngun nước thịt Cấy vào mơi trường gan yếm khí, ủ 37 0C 10 ngày Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 Tiến hành vô hoạt canh khuẩn 0,5 % formol bổ sung 10 % phèn chua, ủ 37 0C ngày 3.5.3 Cách tiến hành Tiêm cho chuột lang, liều ml/con canh khuẩn vô hoạt theo đường bắp thịt Ba tuần sau mũi tiêm thứ nhất, chuột tiêm mũi thứ với liều tương tự lần 14 ngày sau miễn dịch lần 2, chuột miễn dịch chuột đối chứng (không tiêm canh khuẩn vô hoạt) thử thách với 10 LD50 hỗn hợp chủng Ung khí thán cường độc Clc.1 Clc.2 Kết chuột miễn sống 100 % chuột đối chứng chết 100 % Phương pháp truyền giống 4.1 Chuẩn bị động vật – bê nghé mẫn cảm, khỏe mạnh, từ tháng tuổi đến 12 tháng tuổi – 12 chuột lang khỏe mạnh, có khối lượng từ 300 g đến 350 g 4.2 Chuẩn bị giống vi khuẩn Giống đơng khơ hồn ngun nước thịt Cấy vào mơi trường gan yếm khí, ủ 37 0C 48 h Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 4.3 Cách tiến hành Làm tiêu phiết kính nhuộm Gram kiểm tra hình thái Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 Tiêm canh khuẩn nguyên bổ sung % canxi cacbonat ngậm hai phân tử nước (CaCl 2.2H2O) cho từ đến chuột lang, liều 0,5 ml/con theo đường bắp thịt tiêm canh khuẩn nguyên cho từ đến bê nghé, liều từ ml/con đến ml/con theo đường bắp thịt TCVN 8683-14:2011 Chọn mổ chuột lang bê (nghé) sau chết khoảng 48 h sau tiêm, thu hoạch máu tim Cấy máu tim vào mơi trường nước thịt gan yếm khí, ủ 37 0C 48 h Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn nấm mốc theo TCVN 8684:2011 Hút canh khuẩn khiết trộn với huyết ngựa theo tỷ lệ 1:1 đông khô Kiểm tra giống sau đông khô 5.1 Tiêu chuẩn vật lý – Chế phẩm đóng thành bánh, xốp, màu đồng nhất, có chân khơng – Độ ẩm: không lớn % – Độ hòa tan: lắc nhẹ nước sinh lý, chế phẩm tan trở lại dung dịch ban đầu vòng đến 5.2 Yêu cầu kỹ thuật Giống đông khô phải đạt yêu cầu Điều Bao gói, ghi nhãn bảo quản 6.1 Bao gói Giống sau đơng khơ bao gói giấy, để túi nhựa 6.2 Ghi nhãn - Nơi sản xuất - Tên giống - Số lô…ngày…tháng…năm… sản xuất - Người thực - Điều kiện bảo quản 6.3 Bảo quản Giống giữ nhiệt độ từ đến 0C năm TCVN 8683-14:2011 Thư mục tài liệu tham khảo FAO: Production of Backleg Vaccine _ .. .TCVN 8683-14:2011 Lời nói đầu TCVN 8683-14:2011 chuyển đổi từ 10 TCN 270:1996 thành tiêu chuẩn quốc gia theo quy định khoản Điều 69 Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật điểm... chi tiết thi hành số điều Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật; TCVN 8683-14:2011 Cục Thú y biên soạn, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm... cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố TCVN 8683-14:2011 TIỂU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8683-14:2011 Giống vi sinh vật thú y – Phần 14: Quy trình giữ giống vi khuẩn