Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu nhằm khảo sát giá trị xét nghiệm LDL-C bằng phương pháp mới định lượng trực tiếp trên hai hệ thống sử dụng so sánh với phương pháp tính toán theo công thức friedewald.
SO SÁNH HAI PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG LDL-C TRỰC TIẾP VÀ GIÁN TIẾP DS Nguyễn Thị Cẩm Châu (*), TS BS Vũ Quang Huy (*,**) (*)Bệnh viện Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh; (**)Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh Tóm tắt Mục tiêu: Khảo sát giá trị xét nghiệm LDL-C phương pháp ñịnh lượng trực tiếp hai hệ thống sử dụng so sánh với phương pháp tính tốn theo cơng thức Friedewald Vật liệu thiết bị: Hai hệ thống Máy sinh hóa tự ñộng: Hitachi 917 Olympus AU 2700 với thuốc thử tương ứng Invicon Diagnostics Olympus Diagnostics Phương pháp: định lượng LDL-C trực tiếp Denka Seiken, tính tốn theo cơng thức Friedewald, 913 mẫu bệnh phẩm chia nhóm theo nồng độ Triglycerid (mg/ dL): ≤ 300 (nhóm 1), 300 – 400 (nhóm 2) and > 400 (nhóm 3) Kết quả: khơng có khác biệt hai hệ thống sử dụng; Trên nhóm bệnh phẩm cho thấy khác biệt có ý nghĩa nhóm 2, tồn mẫu nói chung, khơng có khác biệt có ý nghĩa nhóm Kết luận: Phương pháp định lượng trực tiếp ưu so với phương pháp tính tốn vùng nồng độ Triglycerid thấp (≤300), có giá trị ưu việt so với phương pháp tính tốn nồng độ Triglycerid cao, đặc biệt với trường hợp khơng tính đuợc LDL-C cơng thức Summary: COMPARATIVELY THE NEW TECHNIQUE OF LDL-C DIRECT MEASUREMENT TO CALCULATION Objective: Comparitevely evaluate the new technique to direct measure LDL-cholesterol using two systems with the calculation one; Material and Instruments: two systems use reagents of Invicon Diagnostics and Olympus Diagnostics with automated chemistry instruments of Hitachi 917 and Olympus AU 2700 respectively; Methods: Liquid assay to direct measure LDL-cholesterol (LDL-C) applying the Denka-Seiken method comparing to indirect calculation using Friedewald formular Sera from 913 divided into groups depening on Triglycerid concentration (mg/dL): ≤ 300 (group 1), 300 – 400 (group 2) and > 400 (group 3); Results: No significant different between Olympus and Invicon reagent; Comparision between direct measument and calculation showing significant differences on overall samples, group and 3; no significant difirent at group Conclusion: the direct measument technique showed no advantage at the low Triglicerid concentration (≤ 300 mg/ dL}, but significant advantages to the calculation one at Triglycerid medium and high concentration, particularly >400 mg/ dL Key words: low density liopoprotein - Cholesterol (LDL-C); National Cholesterol Education Program – NCEP, direct measure LDL-C, Friedewald calculation ĐẶT VẤN ĐỀ LDL-Cholesterol (LDL-C) ñã ñược thừa nhận rộng rãi yếu tố nguy gây vữa xơ ñộng mạch bệnh tim mạch Xét nghiệm LDL-C giúp ñánh giá nguy bệnh mạch vành, xơ vữa ñộng mạch theo dõi ñiều trị hạ lipid máu ñã trở thành khuyến cáo Chương trình đào tạo quốc gia Cholesterol (NCEP - Hoa kỳ) (1,2) Xác ñịnh nồng ñộ LDL-C huyết cơng thức Friedewald đuợc sử dụng từ năm 70s, đến hầu hết phòng xét nghiệm sử dụng Phương pháp đòi hỏi phải thực xét nghiệm Cholesterol toàn phần, HDL-C Triglycerid, nên phụ thuộc lớn vào độ xác xét nghiệm đó, Triglycerid; giá trị ước tính nên khơng xác khơng tính đuợc số trường hợp như: có nhiều Chylomicron, tăng lipoprotein týp III Triglycerid máu > 400 mg/dl 163 Để góp phần phát triển kỹ thuật phục vụ lâm sàng, chúng tơi thực đề tài khoa Xét nghiệm, Bệnh viện Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, 215 Hồng Q.5 nhằm: Khảo sát giá trị xét nghiệm LDL-C phương pháp ñịnh lượng trực tiếp so sánh hai hệ thống sử dụng với phương pháp tính tốn theo công thức Friedewald 2.ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu: gồm 913 bệnh nhân chia thành nhóm: Nhóm 1: có Triglycerid ≤ 300 mg/dl gồm 226 người Nhóm 2: có Triglycerid > 300 mg/dl ≤ 400mg/dl gồm 224 người Nhóm 3: có Triglycerid > 400 mg/dl gồm 463 người 2.2 Vật liệu thiết bị nghiên cứu: Dùng hai hệ thống thiết bị thuốc thử : - Máy sinh hóa tự động Olympus AU 2700, thuốc thử Olympus Diagnostics LDL-C: code OSR 6283 ( hệ thống 1) - Máy sinh hóa tự ñộng Hitachi 917 với thuốc thử Invicon Diagnostics: LDL-C, code 217100 ( hệ thống 2) 2.3 Phương pháp nghiện cứu: 2.3.1.Định lượng LDL-C trực tiếp (tt) hệ thống: theo phương pháp Denka Seiken(5) Lấy ngẫu nhiên 65 mẫu huyết tương Định lượng LDL-C trực tiếp hai hệ thống thuốc thử thiết bị So sánh hai hệ thống sử dụng Xác ñịnh p r 2.3.2.So sánh hai phương pháp ñịnh lượng LDL-C trực tiếp gián Friedewald nhóm Xác định p r Công thức Friedewald : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết ñịnh lượng LDL-C trực tiếp hai hệ thống thiết bị thuốc thử : 3.1.1 So sánh kết ñịnh lượng: Bảng 3.1: Kết so sánh LDL-C hai hệ thống thuốc thử thiết bị Thông số Hệ thống Hệ thống N 65 65 130,23 ± 40,00 125,36 ± 40,72 Giá trị lớn 56,7 48 Giá trị nhỏ 220 216,3 ± SD (mg/dl) P 0,49 Kết ñịnh lượng hai hệ thống khác không ý nghĩa (p = 0,49, α = 0,05) 164 3.1.2 Sự tương quan hai hệ thống thuốc thử thiết bị : Bảng 3.2: Tương quan hai hệ thống r Phương trình hồi qui P = 0,974x+8,145 0,991 B : 0,974 (0,941 – 1,007) < 0,05 B0 : 8,145 ( 3,848 – 12,441) Hình 3.1: tương quan hai hệ thống Trắc nghiệm F t –test ñể ñánh giá tính tương thích phương trình hồi qui ý nghĩa hệ số Bi cho thấy: (hình 3.1): Hai hệ thống có tương quan thuận với chặt chẽ với r tương ứng 0,991 Do ñó ñịnh lượng LDL-C phương pháp trực tiếp hai hệ thống thiết bị với thuốc thử Olympus Invicon khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê: sử dụng tương ñương 3.2 Kết so sánh hai phương pháp ñịnh lượng LDL-C trực tiếp gián tiếp 3.2.1 So sánh hai phương pháp ñịnh lượng LDL-C trực tiếp (tt) LDL-C gián tiếp (gt) tồn mẫu: Trung bình LDL-C tính tốn theo cơng thức Friedewald 92,18mg/dl ñịnh lượng trực tiếp 127,9mg/dl, khác biệt có ý nghĩa (p 400 mg/dl): Kết ñịnh lượng LDL-C hai phương pháp khác biệt có ý nghĩa (p < 0,000): phuơng pháp dịnh lượng trực tiếp ưu việt rõ tính tốn Chia thành ba nhóm nhỏ theo Triglycerid: 401 – 440 mg/dl (nhóm C), 476 – 500 mg/dl (nhóm D) 501 – 530 mg/dl (nhóm E), kết quả: Bảng 3.10: Kết so sánh LDL-C gt, LDL-C tt LDL-C hc nhóm Thơng số Nhóm C (n=56) Nhóm D (n= 31) Nhóm E (n = 41) ± SD (mg/dl) ± SD(mg/dl) ± SD(mg/dl) LDL-C gt LDL tt LDL-C hc 107,86 ± 38,654 136,41 ± 39,712 121,97 ± 38,625 94,74 ± 50,474 134,45 ± 42,572 110,97 ± 50,533 86,66 ± 38,986 131,12 ± 33,689 103,91± 38,950 Trong nhóm C: - Khác biệt khơng có ý nghĩa LDL-C tt với LDL-C hc (p = 0,054) - Khác biệt ý nghĩa LDL-C gt với LDL-C hc (p = 0,056)) - Sự khác biệt LDL-C gt LDL-C tt có ý nghĩa thống kê ( p < 0,000) Trong nhóm D - Khác biệt khơng có ý nghĩa LDL-C tt với LDL-C hc (p = 0,052 - Khác biệt khơng có ý nghĩa LDL-C gt với LDL-C hc (p = 0,211) - Sự khác biệt LDL-C gt LDL-C tt có ý nghĩa thống kê ( p < 0,001) Trong nhóm E: Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ba phương pháp dịnh lượng LDL-C với p : - p= 0,001 ñối với cặp LDL-C tt với LDl-C hc - p = 0,048 ñối với cặp LDL-C gttt với LDl-C hc - p < 0,000 ñối với cặp LDL-C gttt với LDl-C gt Như xác định LDL-C cơng thức Friedewald hiệu chỉnh áp dụng trường hợp có Triglycerid nhỏ 500 mg/dl Hình 3.9: Kết so sánh LDL-C gt, LDL-C tt LDL-C hc nhóm Với trường hợp LDL-C tính tốn theo cơng thức có kết < (khơng tính được), việc thay phương pháp ñịnh lượng trực tiếp lựa chọn rõ rang tối ưu KẾT LUẬN 4.1 So sánh hai hệ thống thuốc thử - thiết bị ñang sử dụng: • Hai hệ thống đạt tiêu chuẩn NCEP sử dụng để ñịnh lượng LDLC trực tiếp • Hai hệ thống thử có mối tương quan với tốt ( r=0,991) khác khơng ý nghĩa • Có thể sử dụng ñể thực so sánh hai phương pháp trực tiếp gián tiếp 4.2 So sánh hai phương pháp định lượng: • Những mẫu huyết tương có Triglycerid ≤ 300mg/dl: khơng cần dùng phương pháp định lượng trực tiếp để xác định LDL-C • Những mẫu có Triglycerid từ 301 – 500 mg/dl: sử dụng cơng thức Friedewald có hiệu chỉnh để xác định LDL-C • Đối với mẫu có Triglycerid ≥ 500 mg/dl: dùng phương pháp định lượng trực tiếp có độ tin cậy tốt Lời cảm ơn: Chúng chân thành cám ơn tập thể Khoa Xét nghiệm, Bệnh viện Đại học Y dược Tp Hồ Chí Minh, đặc biệt nhóm Sinh hóa giúp đỡ chúng tơi thực ñề tài Tài liệu tham khảo American Academy of Pediatrics National Cholesterol Education Panel on Blood Levels in Children and Adolescents Pediatrics 1992; 89: 525-84 Executive Summary of The Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adult (Adult Treatment Panel III) JAMA 2001; 285: 2486-97 Friedewald WF, Levy RI, Frederickson DS - Estimation of LDL-Cholesterol Concentration without Use of the Preparative Ultracentrifuge Clin Chem 1972, 18: 499-502 Puavilai W, Laoragpongse D.( Jun ,2004)._” Is calculated LDL-C by using the new modified Friedewald equation better than the standard Friedewald equation?” _ J Med Assoc Thai PubMed, vol 87(6) pp 589-593 Sakaue T, Hirano T, Yoshino G, Sakai K, Takeuchi H, Adachi M Reactions of direct LDL-cholesterol assays with pure LDL fraction and IDL: comparison of three homogeneous methods Clin Chim Acta 2000;295: 97-106 172 ... lượng LDL-C trực tiếp gián tiếp 3.2.1 So sánh hai phương pháp ñịnh lượng LDL-C trực tiếp (tt) LDL-C gián tiếp (gt) toàn mẫu: Trung bình LDL-C tính tốn theo cơng thức Friedewald 92,18mg/dl ñịnh lượng. .. LDLC trực tiếp • Hai hệ thống thử có mối tương quan với tốt ( r=0,991) khác khơng ý nghĩa • Có thể sử dụng ñể thực so sánh hai phương pháp trực tiếp gián tiếp 4.2 So sánh hai phương pháp định lượng: ... lượng LDL-C trực tiếp hai hệ thống thuốc thử thiết bị So sánh hai hệ thống sử dụng Xác ñịnh p r 2.3.2 .So sánh hai phương pháp ñịnh lượng LDL-C trực tiếp gián Friedewald nhóm Xác định p r Công