Cuốn sách “Những xét nghiệm Hóa sinh hiện đại sử dụng trong lâm sàng” đề cập đến các xét nghiệm mới được phát hiện và ứng dụng vào chẩn đoán các bệnh lý nhiễm trùng và tim mạch. Phần 1 ebook gồm 4 chương: Procalacitonin, neopterin, adesine deaminase, natriuretic peptide. Các xét nghiệm này được xem là xét nghiệm thường quy ở các nước phát triển, nhưng một số xét nghiệm chưa được biết rõ và chưa được đưa vào ứng dụng rộng rãi tại Việt Nam.
Chu Wen: TS.BS LE XUAN TRtio'NG NHONG XET NGHIEM HOA SINH HIEN DAI SO' DUNG TRONG LAM SANG Chu bien: TS.BS LE XUAN TRUCiNG 7-Cilvet, 7t ;sy - e/t, ffe,a,s;9 ®8 ,22,-2.063 NOG XET NGIBEM HOA SINH HIEN DAI DUNG TRONG LAM SANG NHA XUAT BAN Y HOC 2013 646 olc'6 CHU BIEN: TS.BS Le Xuan Tnxeng THANH PHAN BIEN SOAN: TS.BS Le Xuan Truang TS BS Nguy'L Thi Bang Sung TS BS Ho Thi Thanh Thfly ThS.BS TrAn Thanh Vinh ii LOI MO DAU Y hoc cang tien b6 va xet nghiem }Ma sinh cling doi mai khong ngirng, c6 nhieu dau an sinh hoc mai dugc phat hien va in-1g dung Ong rai lam sang, mot so xet nghiem giup chan doan semi benh l5r va theo dOi tien trien dm qua trinh dieu tri M6t nhung van de nan giai cua cac bac si lam sang la chan doan som nguy co roi loan tim mach, vi'ec chan doan satin giup han ch6 dugc cac bien chung xo vix'a d6ng mach, suy tim, nhoi mau co tim, Ben canh cac benh nhiem trang la nh6m benh thuang gap Viet Nam, viec char' doan phan biet gifra nhiem vi khuAn hay nhigni virus, tinh trang nhiem khan Ong hay nhe, la van de cap thi'et de dua chi dinh clieu tri kip tiled va hieu qua Xet nghiem H6a sinh &rig mot vai tro rat quan d'6i vai lam sang Ben canh cac xet nghiem H6a sinh co ban dugc de cap cuOn sach Hoa sinh lam sang dm B6 mon Hoa sinh, Dai hoc Y Dugc TP Ho Chi Minh thi cuOn sach "Nhcrng xet nghi?m Hoa sinh hien dal sir clung lam sang" de cap den cac xet nghiem mai dugc phat hien va irng dung vao char' doan cac benh ly nhiem trang va tim mach Cac xet nghiem dugc xem la xet nghiem thuang quy a cac nuac phat trien, nhung mot so xet nghiem chua duoc biet r6 va chua dugc dua vao irng dung rOng raj tai Viet Nam VI vay chting toi bien soan cu6n sach nham cap nhat cac xet nghiem H6a sinh, clang thai phan tich uu nhugc diem ca tirng xet nghiem, nguyen tac va phuong phap dinh Wong Cuon sach se giup cho cac nha lam sang c6 them cong cu de chan doan va diet' tri benh 1T nhijrn trung va tim mach Do thai gian hien soan sachbi han che nen kh6 tranh kh6i sai sot RAt mong six thong cam dm Qu57 clang nghi'ep va chung t'Oi mong nhan dugc six dOng gap y kien cua cac ban de mon sach dirge hohn thien han dot tai ban lan sau Tran cam on! TP.Ha Chi Minh, ngety 10 tiding 01 neim 2013 TS.BS Le Xuan Tnxang iii DANH MUC CAC CHU' VIET TAT ACTH ADA ADM AdoHcy ANP BH4 BNP CAP CAT cGMP CMV CNP CRH CRLR CRP CS CTR EDHF ELISA eNOS GTP HDL HPLC hs-CRP IL LDL Lp-PLA2 MAPKs MPO MR-proADM : MSH NKH NO NP adrenocorticotropic hormone adenosine deaminase adrenomedullin S-adenosyl homocysteine hydrolase atrial natriuretic peptide 5,6,7,8-tetrahydrobiopterin brain natriuretic peptide community-acquired pneumonia chloramphenicol acetyl transferase cyclic guanosine monophosphate cytomegalovirus C-type natriuretic peptide corticotrophin releasing hormone calcitonin receptor-like receptor C-reactive protein Ong six calcitonin receptor endothelium-derived hyperpolarizing factor enzyme-linked immune sorbent assay endothelial nitric oxide synthase guanosine triphosphate high density lipoprotein high-performance liquid chromatography high sensitivity C-reactive protein interleukin low density lipoprotein lipoprotein-associated phospholipase A2 mitogen-activated protein kinase myeloperoxidase mid-regional proADM melanocyte stimulating hormone nhigm khuan huyet nitric oxide natriuretic peptide NH2TP PAF PCT RAMP RIA TNF 7, 8-dihydroneopterintriphosphate platelet-activating factor procalcitonin receptor activity-modifying protein radioimmunoassay tumor necrosis factors vi MUC LUC Procalcitonin , 1.T6ng quan ve procalcitonin 1.1 Nguon goc va cau trac caa phan tit' procalcitonin 1.2 Co' che tang tiet PCT nhiem khuan Chirc nang dm procalcitonin 2.1 Tac dOng in vitro cua PCT 2.2 Dieu hea PCT Y nghia lam sang dm xet nghiem procalcitonin 3.1 Chan doan phan biet viem vi khuan va khong vi khuan 3.2 Danh giadO Wang dia NKH va tinh trang viem toan than 3.3 Theo doi va tien hrong 3.4 Stir tao PCT cac kich thich khong phai NKH va nhiem khuan 3.5 Dac tinh thay doi dm PCT 3.6 Ung dung lam sang ve PCT , Ks% thuat dinh Wong procalcitonin 5.Cac nghien cat ye procalcitonin teen mot so benh 1 8 9 11 12 13 14 15 15 16 Neopterin 1.T6ng quan ye neopterin 1.1 Nguon goc 1.2 Qua trinh sinh tong hop Vai tre sinh lY dm neopterin Gia tri binh thtreng cila neopterin 3.1 Dinh Wang neopterin cac dich dm co the 3.2 Dinh ltrang neopterin nu& tieu 3.3 Gia tri bInh thtrang Y nghia lam sang dm xet nghiem neopterin 4.1 Nhiern trang 4.1.1 Nhiem virus 4.1.2 Nhiem14 sinh trang va vi khuan not bao 4.1.3 ChAn doan phan biet nhiem trang virus hay vi khuan 4.1.4 Da chAn thtrang va nhiem khuan huyet 4.1.5 Nhie'm trang nao 4.2 Cac benh ttr mien va berth viem khac 4.2.1 Viem kh6p dang thap 4.2.2 Lupus ban de he then 4.2.3 Benh tim mach 4.3 Benh dc tinh 4.4 Theo Mi benh nhan ghep tang Cac par.:mg phap dinh prong neopterin 5.1 Dinh ltrong bang HPLC vii 25 25 25 26 27 28 29 29 30 31 31 32 34 35 36 36 36 36 37 37 38 39 40 40 5.2 Dinh luting neopterin bang phuong phap RIA 5.3 Do bang phuung phap ELISA 41 41 Adenosine deaminase 1.Tong quan ye adenosine deaminase 1.1 Nguon goc va cau truc dm adenosine deaminase 1.2 Sr bieu hien dm ADA ca quan Chirc nang sinh ly cua ADA va adenosine 2.1 Hoat tinh enzym dm ADA — hoat dOng dm adenosine 2.2 Hoat tinh ngoai enzym cua Ecto — ADA Y nghia lam sang cua ADA 3.1 Vai tro dm ADA benh lao 3.2 Vai trO cua ADA benh nhi6'm khuan 3.3 Vai trO ADA chan doan benh lY gan met Phuang phap dinh luting ADA 4.1 Nguyen tac 4.2 Thu& thir 4.3 Benh pham 4.4 Icy thuet tien hanh 4.4.1 Cai det thong s6 4.4.1 Ti6n hanh 4.5 DO tuy6n tinh 4.6 Gia tri binh thuong 4.7 Dec tinh san pham 43 43 43 46 47 48 52 54 54 57 57 57 58 58 59 59 59 59 60 60 60 Natriuretic peptide 63 1.Tong quan ye natriuretic peptide (NP) 63 1.1 Lich sir phat hien va ngu6n goc dm cac NP 63 1.2 Qua trinh sinh tong hop 66 1.3 Cac receptor dia NP 67 1.3.1 Cac receptor guanylyl cyclase (GC) 67 1.3.2 Receptor thai NP (Natriuretic Peptide—Clearance Receptor: NPR-C), 69 1.4 Sudieu Ilea bai tiet 69 The dOng cua cac NP 70 2.1 Tac dOng tren he tim mach 70 2.2 Tac dOng tren then , s 71 2.3 Tac Ong tren he thong than kinh trung ucmg 72 Vai to cua NP chan doan va tien luting benh tim mach 73 3.1 ANP va pro-ANP 73 3.1.1 ANP va MR-proANP la xet nghiem gill') chan doan suy tim 74 3.1.2 MR-proANP va phan Ong ciia suy tim 74 3.1.3 MR-proANP la xet nghiem gulp tam soat r6i loan chirc nang that trai 75 viii 3.1.4 MR-proANP tnrang hop rung nhi , 76 3.1.6 Gia tri caa ANP va MR-proANP chan doan va dieu tri suy tim , 77 3.1.7 1.1.0 diem caa MR-proANP so vai nhang NP khac 78 3.2 BNP va pro-BNP 79 3.2.1 Ling dung chan doan va tien luong suy tim 79 3.2.2 Nhirng han the caa BNP va NT-proBNP 81 3.2.3 Sir dung BNP de theo doi dieu tri suy tim 82 3.2.4 Vai to caa BNP cac benh ca tim 83 3.2.5 Vai tro dia cac NP benh tim bam sinh 84 3.3 Vai trO dm CNP 85 KSi thuat dinh luting cac NP 86 4.1 Thu6c thir va chAt lieu 86 4.2 Nguyen tac dinh Wong 87 4.3 Cach lay va bao quail mau benh pham 87 4.4 Chuan bi thu6c thin 88 4.5 Tien hanh ky thuat 89 Adrenomedullin 93 1.T6ng quan ye adrenomedullin 93 1.1 Cau truc caa ADM 93 1.2 Qua trinh sinh tong hop, bais tiet va chuyen hOa 94 1.3 Receptor va cac ca che truyen tin hieu 97 Hoat tinh sinh hoc dm ADM 99 2.1 Tac dung tren he tim mach , 99 2.2 Tac dung tren than va can bang ntrac-dien giai 104 2.3 Tac &Ong teen he,than kinh trung umg 104 2.4 ADM va cac tuyen n6i tiet 105 2.5 Tac d6ng tren he mien dich va qua trinh viem 106 2.6 ADM va ung thu 107 Dinh luting adrenomedullin 109 3.1 Nguyen tac 109 3.2 Thu6c thin 110 3.3 Quy trinh dinh Wang ADM 110 hs-CRP 1.T6ng quan ve hs-CRP Cau truc phan to Chirc nang sinh hoc Sinh tong hop Cac ky thuat phan tich 5.1 Dinh tinh va ban dinh luting CRP 5.2 Dinh Wing CRP chuAn (standard CRP, traditional CRP) 5.3 hs-CRP (high sensitivity CRP) ix 115 115 115 116 118 120 120 121 121 NHU'NG XET NGHIEM HOA SINH HIEN DAI SU DUNG TRONG LAM SANG the tir vong de nhay 72,2%, dac hieu 75% va dien tich duai dung cong ROC den lugng tit vong cua MR-proADM 0,76 Gottlieb va CS da bac, cao ANP, MR-proANP c6 the tien lugng kha nang song va bat thuerng huyet deng hoc dm tim Sau do, nhieu tac gia dixa tren nghien cdu cila Gottlieb da tim hieu them ye gia tri cita MRproANP,, nhan thay day la xet nghiem co de nhay Ara de (lac hieu cao chan doan suy tim nguai len tuoi Nhieu tac gia chirng minh ANP co mei tuong quan chat the voi tSr le tir vong tim mach sau nhoi mau co tim Tuy nhien, MR-proANP vuet trihan so voi ANP viec du doan ket cuc tir vong va cac Nen chimg tim mach khac Trong me hinh phan tich da bien, MR-proANP cong veri phan suat, tong mau (EF) Ira cac tinh trang lam sang khac la nhan to du (loan cll.& nguyen nhan tim mach va suy tim manh hon so voi tuoi, tien sir nhoi mau co tim truOc 3.1.6.2 Theo doi dap trng di:du tri suy tim cac benh nhan nhap vien vi suy tim mat bit, thong thuerng trieu chOng duec cai thien bori nhieu phuong thirc dieu tri khac nhung hau nhu kh'Ong co bien phap nao tot de danh gia the dung lau dai cua viec dieu tri ngan han Nhcrng xet nghiem thueng quy de danh gia chic nang tim thuerng mat tiled gian va it c6 mei lien he mat thi'et vo7 su thay doi trieu chOng cua benh nh'n VI the, phan lon benh nhan xuat vien ho cam t ay khOe hon va dieu sau loai trO viec dinh nhom de dial tri them Nhieu nghien cdu da dua ,ra ket Juan fang neng dO MR-proANP met nhang yeu to chi diem su cong dm lieu phap tri lieu, bei vi nong de oh hormone mau c6 mei lien quan mat thiet voi de nang,cita suy tim Khi dieu tri suy tim veri thuoc lei fiat, *c che men chuyen, chen thu the AT1, spironolactone, nitrate him co nguai to nhan thay c6 giam prong MR-proANP mau cong veri su cai thien cac trieu chOng lam sang Tuy nhien, doi vo7 thuOc irc the beta, tac dung lam thay doi hormone tim chua ro rang 3.1.7 Cu di'Jnz cua MR-proANP so voi nhiing NP khac Tren benh nhan suy tim, co the thueng ti6t nhung loai phan tir protein c6 the Mang tac vo i nhieu loai NPs, do c6 the lam cho ket qua 78 Natriuretic peptide nOng d6 cua mot so loai hormone khong phil hop vai tinh trang lam sang Nhung vgi MR-proANP thi it bi anh huarng MR-proANP, 6n dinh nhiet d6 phOng tuong lau (khoang 72 gig) Tinh chat rat him ich nhfing,truimg hop tam soat nhung d6i tuong nguy co cao bi suy tim tai cong dun g Sau ngay, MR-proANP se bi phan huy, nhien so luting khong vugt qua 20% Benh nhan suy tim thuong kern theo nhung benh 1LT khac flint suy than, beo phi, dai thao throng, Nhfing y611 to It nhieu anh hugng den cac NPs Nhieu nghien c iru cho thay MR-proANP van c6 gia tri cao chan doan, lien Wong tir vong tren benh nhan suy tim ca bi suy than hay beo phi; do, cac NPs khac thi khong 3.2 BNP va pro-BNP 3.2.1 eng dung chilli doan va tien luimg suy tim 1\44c dir da co mot Mx& tien 136 16n dieu tri suy tim nhung tien luting benh van kha ngheo nan Viec chan doan semi va thichhop la rat quan trong, dac biet tai pheng cap dru That kh6ng may, cac clan hieu va trieu chtrng dia suy tim thugng khong dac hieu, dac biet la ngugi cao tuoi, benh nhan beo phi, cac benh dugng ho hap va nhung bien doi ve mat the chat Hon 10,nam qua, cac bang chtirng cho thay rang nong d6 cac NP tang cao clang ke cac benh nhan suy tim va co tuong quan chat the \Ted mirc d6 Ong cua benh, the hien qua sir phan loai cga Hiep h6i Tim Mach New York (hinh 4.10) Nhieu tac gia thiet lap gia tri b6 sung cila BNP ding NT-proBNP, tham kham lam sang va dig') X-quang , de tao thuan 16i cho chan doan suy tim nhung benh nhan co bieu hien kilo tho tai pheng cap, dru MOt nghien ciru tien hanh tren 1.586 benh nhan tai phOng cap ciru da cho thay vgi nhinig benh nhan kh6 dig cap tinh co nOng d6 BNP < 10Ong/m1 co the loai trir chart doan suy tim vgi dO nhay la 90% va ding \tot viec tham kham lam sang giup cho viec danh gia kh6 the( cap dirge chinh xac hon Nghien ctiru tuong tr vgi NT-proBNP ding dugc thgc hien Gia tri ngisOng la 300 pg/ml de loai trir suy tim cap dä dugc thie't lap (bang 4.1) 79 NHCYNG XET NGHIEM HOA SINH HIEN DAI SCY DUNG TRONG LAM SANG NYHA I NYHA II IYHA III NYHA IV Min suv tim Hinh 4.10 BNP va phan tic) suy tim theo NYHA Bang 4.1 BNP va NT- roBNP chan doan suy tim 20 phut Cac receptor NP 100pg/m1 NT-proBNP 120 phut Thanh thai cita than 300pg/m1 200pg/m1 1200pg/m1 BNP Thad gian ban hily Co ch6 thai chtl y6u Gia tri nguang chan doan suy tim Benh nhan vOi mac loc au than 238pg/ml) cna nang de BNP Ket qua nghien cdu da six dung NT-proBNP de dix doan tSf le tir vong cac benh nhan suy tim nang thiL mau cuc be hoac khong phai thieu mau cuc be Nang da duoi 199ng/m1 va tren 504pg/ml co tS, le tir vong met nem tuang di1 - g la 3,9% va 27,9% Bettencourt cho rang nhang benh nhan suy tim ma nong c10 NT-proBNP giam > 30% died gian nem vien se co tier' Wong tot hen nhirng benh nhan CO nong de NT-proBNP khong thay d6i hoac them chi tang len 3.2.2 Nhang horn ch'j tura BNP va NT-proBNP Ngoai rai loan chirc nang tim, nong de BNP va NT-proBNP huyet tuang bi anh huong bai nhieu ye'u to sink ly va sinh 13'7 benh, vay viec danh gia suy tim phu thuec vao nhieu yeu to lien quan 3.2.2.1 Tuai va gicji , Nang de cac NP CO xu twang cao hen phu nix va benh nhan cao tuai c6 hoac kh6ng c6 r6i loan chdc nang tim Su gia tang NP ngtrai gia c6 the giai thich la vi mat receptor thai lao hoa: Thuc to cho they viec sir dung lieu phap hormone thay the lam tang nong de BNP DiL chimg minh mai lien quan giaa tinh trang estrogen va nong de BNP VI, vey yeu to va giai tinh lam thay doi gia tri ngu'ang NP chan doan suy tim 3.2.2.2 Beo phi Beo phi la met y'L to nguy co quan cue benh mach vanh va suy tim Cac tac gia da tong ba mai tucmg quan, nghich giaa BNP, va chi so khoi co the' BMI (body mass index) Co che duct dua 1a su bieu hien phong phd ciia receptor thai tren cac to bao ma, cac receptor tham gia vao viec loci b6 cac NP kh6i he tuan hoan, clang thai lam gia lei muoi va nu6c 3.2.2.3 Suy chiec hang than Cac nghien tutu gen day chi rang BNP va NT-proBNP co lien quan den chdc nang than Giam mdc loc, can than anh huang rO ret den gia tri nguang cho chan doan suy tim De tri tinh nang tien doan suy tim 81 NHU'NG XET NGHIEM HOA SINH HIEN DAI SO' DUNG TRONG LAM SANG cua BNP, nguai to da de xuat gia tri nguang 200pg/m1 throng hop toc dO loc cau than < 60m1/pinit NT-proBNP chi dugc dao thai bai than nen no nhay cam vii roi loan chirc nang than hon so vii BNP Sir dung gia tri nguOng la 1.200pg/m1 tOc loc cAu than < 60m1/phut giup tri gia tri chin down cua NT-proBNP a benh nhan nghi ngo suy tim NOng dO NP ciing tang giai doan dAu cua thieu mau cuc bO co tim a hOi chimg mach vanh cap, dac biet khong c6 ST chenh len NP tang cao, huyet dp di kern vii phi dai that trai va rung nhi Tuy nhien, bai tiet NP nhung tinh hang It han so vii suy tim 3.2.3 Sir dung BNP de theo doi di'du tri suy tim Nhu da de cap tren, cac NP la yeti to quan giup tien luong benh ding nhu tY le tir vong cna benh 17 tim mach Nhieu nghien ciru da chimg minh cac thuoc dieu tri suy tim c6 kha ,nang lam giam Wong dO NP che men huyet Mang Tac dung c6 loi nay, c6 the thy cac thuoc thu the angiotensin, spironolactone va thutic chuyen (ACEi), chat irc lgi tieu Tac dOng cua thuoc irc che beta tren nOng (10 BNP rat phirc tap Khi thvc hien dial tri, cac thuOc irc the beta lam tang nhe nOng dO BNP bai no tirc the su kich thIch adrenergic Tuy nhien ,dieu tri keo dai, tong mau dm that nOng dO NP giam song song vii cai thien phan trai, dac biet quan sat ro.khi dung thuOc irc che beta c6 tic dung dan mach MOi tuang quan gifra six giam nOng dO BNP va viec cai thien cac trieu chung cua benh nhan qua trinh dieu tri ggi y nen dieu chinh lieu thuOc dieu tri suy tim d*a vao gia tri cua NP Murdoch va CS cho rang, lieu luting thuoc dan mach dieu tri cho cac benh nhan suy tim tir mirc dO nhe den trung binh &roc dieu chinh theo BNP c6 hieu qua han so vii dieu tri theo kinh nghiem trong, viec *c the he thong renin-angiotensinaldosterone va lam giam clang ke tan so tim cua benh nhan Ket qua cim nghien cuu da trung tam STARS-BNP da &roc bao cao gin day: 220 benh nhan bi suy tim man tinh c6 phan dO NYHA II-III da duoc chon ngau nhien de dieu tri theo huong dan cua BNP vii muc tieu giam mirc dO BNP huyet tuang duad 100pg/m1 (nhom BNP) Sau 15 thing diet' tri, so benh nhan tai nhap,vien suy tim hoc tit vong suy tim it hon so vii nhom chirng (dial tri dua vao tinh trang lam sang, khong dva vao BNP) 82 Natriuretic peptide Troughton nghien ciru ngdu nhien 69 berth nhan suy tim triVO chimg va c6 phan suat tong mau that trai < 40%, cac berth nhan dugc dieu tri dixa vao nOng NT-poBNP vgi muc tieu dat dugc gia tri < 200pg/ml, so vgi nhom di'eu tri chi dua vao triesu chimg lam sang Sir dung cac thuOc lgi tieu, thuoc irc che men chuyen kern hoc khong kern digoxin Neu gia tri muc tieu dia NT-proBNP khong dat dugc, se tien hanh tang lieu dieu tri Sau thang, cac benh nhan dugc dieu tri theo chi dan dm NTproBNP c6 'long dO NT-proBNP thap han, ding vgi vi c giam cac bien co tim mach (tir vong, tai nhap vien suy tim, cac triOu chimg mai cua suy timmat bii) Thir nghiern c6 khiem khuyet la han che sir dung thuoc irc che beta, irc che receptor dm angiotensin va spironolacton Tuy nhien ket qua da khuyen khich cac nha khoa hoc khac nen nghien ciru sau hem nira ye vai tro cua BNP va NT-proBNP huang dan dieu tri suy tim 3.2.4 Vai tro caa BNP cac b?nh co tim Dinh lugng BNP huye't tuang da tr.& mot chi die'rn sinh hoc htlu ich cua tinh trang suy tim a nhang benh nhan mac benh co tim Yong BNP tuang quan vgi nhtrng thong so danh gia mirc dO nang bang cac phuong phap khong xam nhap a tre em mac bOh co tim phi dai bao gOm cac chi so ve ap luc day that trai tang cao BNP ding la mot cong cu him ich danh gia mirc nang ram benh co tim dan no Nong BNP tang cao nhang tre em c6 red loan chirc nang that trai so vgi nhang tre chimg khoe manh (trung vi 78pg/ml so ,vai trung vi, 7pg/ml; p