Trong nghiên cứu này đánh giá tác dụng bảo vệ của thực phẩm chức năng bổ sung dinh dưỡng từ Cám lúa gạo, Ý dĩ, Đẳng sâm, Bạch Truật, Hoài Sơn trên mô hình thực nghiệm chuột cống bị gây tổn thương dạ dày do indomethacin và tá tràng do cysteamin.
Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Y Dược, Tập 34, Số (2018) 43-50 Nghiên cứu tác dụng bảo vệ dày, tá tràng bột dinh dưỡng sử dụng số dược liệu trồng vùng Tây Bắc Đặng Kim Thu1, Nguyễn Thanh Hải1, Lục Thị Thanh Hằng1, Nguyễn Thị Trang1, Bùi Thị Thanh Dun1, Hồng Đình Hòa2, Nguyễn Thị Minh Lý2, Bùi Thanh Tùng1,* Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, 144 Xuân Thủy, Cầu Giấy, Hà Nội, Việt Nam Viện Nghiên cứu Phát triển Y Dược cổ truyền Việt Nam, Số 11A, Tập thể Thủy sản, Lê Văn Thiêm, Nhân Chính, Thanh Xuân, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 08 tháng 11 năm 2018 Chỉnh sửa ngày 18 tháng 11 năm 2018; Chấp nhận đăng ngày 30 tháng 11 năm 2018 Tóm tắt: Loét dày, tá tràng rối loạn tiêu hóa phổ biến Dược liệu thường sử dụng dân gian để phòng ngừa điều trị triệu chứng viêm, viêm dày loét dày, tá tràng Trong nghiên cứu đánh giá tác dụng bảo vệ thực phẩm chức bổ sung dinh dưỡng từ Cám lúa gạo, Ý dĩ, Đẳng sâm, Bạch Truật, Hoài Sơn mơ hình thực nghiệm chuột cống bị gây tổn thương dày indomethacin tá tràng cysteamin Trên mơ hình tổn thương dày, chuột cống trắng chia thành nhóm, uống nước cất, ranitidin (50mg/kg) bột dinh dưỡng (liều 3,5 g/kg liều 7g/kg) vòng ngày Vào ngày thứ 7, chuột cho uống indomethacin (30 mg/kg) để gây loét dày Trên mơ hình tổn thương tá tràng, chuột cống trắng chia thành nhóm, uống nước cất, ranitidin bột dinh dưỡng vòng ngày Vào ngày thứ 7, chuột cho uống cysteamin (400 mg/kg) để gây loét tá tràng Kết cho thấy bột dinh dưỡng cho tác dụng bảo vệ dày nhờ làm giảm đáng kể điểm loét, số loét chuột Hơn nữa, kết nghiên cứu cho thấy bột dinh dưỡng cho tác dụng bảo vệ tá tràng nhờ làm giảm đáng kể điểm loét, số loét chuột Từ khóa: Bột dinh dưỡng, indomethacin, cysteamin, loét dày, loét tá tràng Đặt vấn đề thời dẫn tới chảy máu đường tiêu hóa [2] Nguyên nhân cân yếu tố công bảo vệ tiết acid-pepcin, tế bào niêm mạc, khả tiết chất nhầy, lưu lượng máu, tái tạo tế bào tác nhân bảo vệ nội sinh (prostaglandins yếu tố tăng trưởng biểu bì) [2] Các yếu tố, thói quen ăn uống, hút thuốc lá, sử dụng không hợp lý thuốc chống viêm không steroid, căng thẳng, di Loét dày, tà tràng vấn đề sức khỏe thường gặp có tỷ lệ tử vong cao [1] Khơng điều trị loét dày tá tràng kịp _ Tác giả liên hệ ĐT: 84-904429676 Email: tungasia82@yahoo.es https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4134 43 44 Đ.K Thu nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Y Dược, Tập 34, Số (2018) 43-50 truyền nhiễm trùng Helicobacter pylori, làm phát triển bệnh loét dày tá tràng [3] Các thuốc hóa học tổng hợp sử dụng để điều trị loét dày để làm giảm tỷ lệ tử vong tỷ lệ mắc bệnh, chúng lại khơng hồn tồn hiệu gây nhiều tác dụng phụ khác Indomenthacin thuốc chống viêm thuộc nhóm non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) có tác dụng giảm đau hạ sốt Indomenthacin có tác dụng ức chế mạnh trình tổng hợp prostaglandins, chất trung gian trình viêm [4] Tác dụng chống viêm indomethacin nhờ khả ức chế tổng hợp prostaglandin E2 prostaglandin I2 từ axit arachidonic qua đường cyclo-oxygenase Indomenthacin ức chế hai enzyme cyclo-oxygenase I (COX-I) cyclo-oxygenase-II (COX-II) Thiếu hụt enzyme COX-I gây số tác dụng phụ loét dày thuốc NSAID [5] Cysteamin (β-mercaptoethylamine) có cơng thức hóa học HSCH2CH2NH2, sản phẩm phân hủy amino acid cysteine Cysteamin sử dụng thể để tạo thành coenzyme A (CoA) nhờ kết hợp với pantothenate (vitamin B 5) adenosine triphosphate [6] Trên lâm sàng, cysteamine sử dụng để điều trị u xơ nang [7] Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu thực nghiệm cho thấy sử dụng cysteamin liều cao gây loét tá tràng [8, 9] Bệnh lý tá tràng cysteamin gây chưa hiểu rõ Các nghiên cứu cho thấy cysteamin làm tăng tiết dịch axit dày, tiết acid dày giảm trung hòa axit tá tràng Những tác dụng làm giảm somatostatin niêm mạc dày tăng nồng độ gastrin huyết [9] Trong nghiên cứu đánh giá tác dụng bảo vệ dày tá tràng thực phẩm chức bổ sung dinh dưỡng từ Cám lúa gạo, Ý dĩ, Đẳng sâm, Bạch Truật, Hồi Sơn mơ hình thực nghiệm chuột cống bị gây tổn thương dày indomethacin tá tràng cysteamin Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Nguyên liệu Thực phẩm chức bổ sung dinh dưỡng từ Cám lúa gạo, Ý dĩ, Đẳng sâm, Bạch Truật, Hoài Sơn bào chế Viện Nghiên cứu Phát triển Y Dược cổ truyền Việt Nam; Indomethacin (Trung Quốc); Cysteamin (Trung Quốc); Ranitidin (Việt Nam); Nước muối sinh lý; Formaldehyd đạt tiêu chuẩn phân tích theo chuẩn Dược điển Việt Nam IV; Máy ly tâm lạnh Universal 320R (Hettich – Đức); Máy chụp hình, kính hiển vi đọc giải phẫu bệnh; Lồng ni chuột, kim đầu tù; Chuột cống trắng, hai giống, khỏe mạnh, trọng lượng 150-180 g, Viện Vệ Sinh Dịch Tễ Trung Ương cung cấp Động vật thí nghiệm sau mua ni ngày trước thí nghiệm, ăn viên thức ăn chuẩn Viện Vệ Sinh Dịch Tễ Trung Ương cung cấp, uống nước tự 2.2 Phương pháp nghiên cứu Chuột cống trắng chia thành lô, lô 10 với tỉ lệ đực/cái lô Tiến hành nghiên cứu vòng ngày, ngày thứ nghiên cứu, chuột gây mơ hình indomethacin Mơ hình thực cách cho chuột uống indomethacin liều 30 mg/kg vào lúc sáng Chuột nhịn ăn ngày trước uống indomethacin - Lô chứng âm: uống nước cất - Lô chứng dương: Uống nước cất gây tổn thương dày indomethacin liều 30mg/kg vào ngày thứ - Lô uống bột dinh dưỡng liều 1: Uống liều 3.5g/kg thể trọng gây tổn thương dày indomethacin liều 30mg/kg vào ngày thứ - Lô uống bột dinh dưỡng liều 2: Uống liều 7g/kg thể trọng gây tổn thương dày indomethacin liều 30mg/kg vào ngày thứ - Lô chứng Ranitidin: Uống liều 50 mg/kg thể trọng gây tổn thương dày indomethacin liều 30mg/kg vào ngày thứ Đ.K Thu nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Y Dược, Tập 34, Số (2018) 43-50 Sau kể từ uống indomethacin, tất chuột chuột bị giết dày tách Lấy phần mô dày chuột gồm phần ống tiêu hóa từ thực quản (sát tâm vị) đến ruột non (cách môn vị cm) cắt riêng rẽ, mở tá tràng dày kéo theo đường bờ cong lớn Rửa nước muối sinh lý, thấm bề mặt vết loét formaldehyd %, cố định dày tá tràng xốp ghim Sau mở dày dọc theo bờ cong lớn, rửa dày nước ấm, kiểm tra mức độ tổn thương dày kính lúp kính hiển vi 2.2.1 Đánh giá mức độ tổn thương dày Đánh giá đại thể: tất dày chuột chụp ảnh để đánh giá hình ảnh - Quan sát kính lúp độ phóng đại 10 lần, đánh giá số sau: Chỉ số loét: số loét dày chuột tính tổng điểm tổn thương theo công thức: UI = 0,5*A + 1*B + 1,5*C + 2*D + 2,5*E [10] A: số đốm xuất huyết B: số vết loét có chiều dài L ≤ 1mm C: số vết loét có chiều dài 1mm < L ≤ 2mm D: số vết loét có chiều dài 2mm < L≤ 3mm E: số vết loét có chiều dài L ≥ 3mm Mức độ ức chế loét: Trong I: mức độ ức chế loét lô thử so với lô chứng Uc: số loét lô chứng Ut: số loét lô thử 2.2.2 Đánh giá tác dụng điều trị lt tá tràng mơ hình gây loét tá tràng cysteamin Chuột chia ngẫu nhiên thành lô, lô 10 với tỉ lệ đực/cái lô Tiến hành nghiên cứu vòng ngày, 45 ngày thứ nghiên cứu, chuột gây mơ hình cysteamin - Lô chứng âm: uống nước cất - Lô chứng dương: Uống nước cất gây tổn thương tá tràng cysteamin liều 400 mg/kg vào ngày thứ - Lô uống bột dinh dưỡng liều 1: Uống liều 3.5g/kg chuột thể trọng gây tổn thương d tá tràng cysteamin liều 400mg/kg vào ngày thứ - Lô uống bột dinh dưỡng liều 2: Uống liều 7g/kg chuột thể trọng gây tổn thương tá tràng cysteamin liều 400mg/kg vào ngày thứ - Lô chứng Ranitidin: Uống liều 50 mg/kg thể trọng gây tổn thương tá tràng cysteamin liều 400mg/kg vào ngày thứ Chuột ăn uống nước bình thường tiến hành thí nghiệm Sau 30-60 phút uống thuốc lần cuối cùng, gây loét cho chuột cách cho uống dung dịch cysteamin với liều 400 mg/kg, pha vào mL nước, uống 2- lần, lần cách Sau 12 kể từ bắt đầu uống cysteamin, giết chuột, mổ bụng, cắt lấy phần tá tràng Rửa tá tràng nước muối sinh lý Kiểm tra mức độ tổn thương dày kính lúp kính hiển vi Quan sát kính lúp có độ phóng đại 10 lần, đánh giá số sau: số ổ loét bề mặt tá tràng (N), độ sâu ổ loét (tính theo mm2), diện tích ổ lt Tính số lt theo cơng thức: I = N + S + A 10-1 Trong đó: I (Index): Chỉ số loét N (Number): Số ổ loét S (Score): Mức độ loét trung bình Mức độ loét trung bình tính theo Desai cs [11] Mức độ lt tính theo: Khơng lt = 0; lt bề mặt = 1; loét sâu = 2; thủng = 3; A (Area): Diện tích ổ lt trung bình So sánh số lt trung bình lơ chuột để đánh giá kết nghiên cứu 46 Đ.K Thu nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Y Dược, Tập 34, Số (2018) 43-50 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 25 Các số liệu phân tích thống kê phần mềm Sigma Plot 2010 Kết biểu diễn dạng X ± SD (X: giá trị trung bình lơ, SD: độ lệch chuẩn) So sánh giá trị trung bình nhóm one-way ANOVA Sự khác biệt nhóm coi có ý nghĩa thống kê p