Một số đa hình gen TP53 trong ung thư tế bào gan nguyên phát

Nghiên cứu này đã tiến hành phân tích một số đa hình kiểu gen TP53 (D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A và dup16) ở 280 bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát so với 267 người lành đối chứng. Kết quả cho thấy, không có sự liên quan có ý nghĩa giữa các đa hình kiểu gen D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A với ung thư tế bào gan nguyên phát. Kiểu gen A1A2 của dup16 gặp nhiều hơn ở nhóm bệnh nhân so với nhóm chứng (p = 0,02).

TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC MỘT SỐ ĐA HÌNH GEN TP53 TRONG UNG THƯ TẾ BÀO GAN NGUYÊN PHÁT Trịnh Quốc Đạt, Trần Huy Thịnh Trường Đại học Y Hà Nội Tính đa hình thái gen áp chế ung thư TP53 xem nhân tố quan trọng hình thành phát triển bệnh ung thư Nghiên cứu trước rằng, có nhiều đa hình kiểu gen phát vùng mã hóa khơng mã hóa TP53, đa hình tạo kiểu gen TP53 khác cộng đồng Một số nghiên cứu khác ghi nhận khác biệt khả mắc ung thư kiểu gen TP53 Nghiên cứu tiến hành phân tích số đa hình kiểu gen TP53 (D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A dup16) 280 bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát so với 267 người lành đối chứng Kết cho thấy, khơng có liên quan có ý nghĩa đa hình kiểu gen D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A với ung thư tế bào gan nguyên phát Kiểu gen A1A2 dup16 gặp nhiều nhóm bệnh nhân so với nhóm chứng (p = 0,02) Từ khóa: gen TP53, đa hình kiểu gen, ung thư gan tế bào gan nguyên phát I ĐẶT VẤN ĐỀ TP53 gen áp chế ung thư hoạt động SNPs có liên quan đến khả mắc số yếu tố phiên mã, đóng vai trò quan trọng loại hình ung thư Đây coi yếu đường chuyển hóa số tố nguy cần quan tâm Một số SNPs trình hoạt động tế bào sửa chữa TP53 thường nghiên cứu ung DNA, ức chế tăng sinh mạch, kìm hãm chu thư bao gồm: dup16, D21D, P34P, P36P, trình tế bào, tế bào chết theo chương trình [1; Pro47Ser, V217M, G360A [1] SNP dup16 2; 3] Khi có tổn thương DNA, TP53 tượng đa hình thái thêm 16 base dừng chu trình tế bào DNA pair (dup16) vùng khơng mã hóa thứ sửa chữa gây chết tế bào theo chương TP53 Những người mang kiểu gen dup16 có trình (apoptosis) khơng khả sửa biểu protein p53 tế bào mức chữa [2; 3] Chính đặc tính sinh học thấp Điều chứng tỏ rằng, dup16 có khả này, TP53 xem thay đổi q trình hồn thiện mRNA [4] gen ức chế khối u quan trọng Các SNPs D21D, P34P, P36P không Một số nghiên cứu rằng, đa hình gen (SNPs) vùng mã hóa khơng mã hóa gen TP53 tạo kiểu gen khác TP53 khác biệt làm thay đổi ba mã hóa làm giảm biểu protein p53 Nhiều nghiên cứu rằng, SNPs nằm vùng hoạt hoá, chép N-tận TP53 chứa đựng vị trí tương tác với MDM2 (yếu tố điều hồ âm tính TP53) nên Địa liên hệ: Trần Huy Thịnh, Bộ mơn Hóa sinh, Trường Đại học Y Hà Nội Email: huythinhda@yahoo.com Ngày nhận: 17/8/2016 Ngày chấp thuận: 08/12/2016 TCNCYH 102 (4) - 2016 làm giảm khả phiên mã dịch mã TP53 [1; 5] Tất suy giảm biểu TP53 tạo hội lớn cho dòng tế bào ác tính lựa chọn TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC P47S SNP có thay đổi trình tự II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP acid amin p53 Trong điều kiện bình thường, tác động protein p38 Đối tượng homeodomain - interacting protein kinase Nhóm bệnh: 280 mẫu máu bệnh (HIPK2) p53 phosphoryl hóa vị trí nhân ung thư tế bào gan nguyên phát S46 dẫn đến tăng cường chép gen chẩn đoán điều trị Khoa Nội tiêu liên quan đến kích hoạt appotosis Khi alen hoá Bệnh viện Bạch Mai Trung tâm Ung p53 - P47 thay alen p53 - S47 bướu Thanh Hoá từ tháng 12/2013 đến tháng phosphoryl hóa vị trí S46 bị giảm sút 12/2015 Hậu làm suy yếu tác động gen đích lên q trình kích hoạt apoptosis, dẫn đến tăng khả mắc ung thư [6; 7] Nhóm chứng: 267 mẫu máu lựa chọn ngẫu nhiên, người đến khám điều trị số bệnh mạn tính Bệnh viện V217M SNP nằm vùng gắn kết DNA Đa khoa tỉnh Thanh Hoá Những bệnh nhân p53 (DNA binding domain) Sự thay đổi khám kết luận không mắc ung trình tự acid amin làm giảm gắn kết thư tế bào gan nguyên phát hay p53 với gen đích Các gen bị ảnh hưởng loại hình ung thư khác trực tiếp gồm có CDKN1A, BAX PMAIP1 Đây gen liên quan đến chức kích hoạt apoptosis TP53 Nghiên cứu Nghiên cứu thực Trung tâm Nghiên cứu Gen - Protein, Trường Đại học Y Hà Nội mơ hình chuột cho thấy kiểu gen p53 M217 có biểu gen cao Phương pháp gấp nhiều lần biến thể p53 - V217 Như vậy, 2.1 Thu thập mẫu kiểu gen p53 - M217 có khả bảo vệ tế bào chống lại tác nhân gây ung thư tốt kiểu gen p53 - V217 Đa hình G360A nằm vùng nối p53 SNP tác động lên biểu BAX MDM2, gen quan trọng đường tín hiệu p53 [1] Đã có số nghiên cứu đa hình kiểu gen TP53 loại hình ung thư khác nhau, thực nhiều quốc gia, nhiều chủng tộc Thế giới Tại Việt Nam, chưa có nghiên cứu đánh giá cách tồn diện đa hình kiểu gen TP53 bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát Do đó, - Thu thập mẫu máu bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát mẫu chứng 2.2 Tách chiết DNA - DNA tách chiết theo phương pháp phenol/chloroform từ bạch cầu máu ngoại vi bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát người lành đối chứng - Kiểm tra độ tinh đo nồng độ DNA tách chiết phương pháp đo quang, dựa vào tỷ lệ A260nm/A280nm = 1,8 ÷ 2,0 2.3 Xác định kiểu gen TP53 kỹ thuật PCR giải trình tự gen nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Sử dụng cặp mồi đặc hiệu để khuếch Đánh giá liên quan kiểu gen D21D, đại vùng gen chứa SNPs gen P34P, P36P, P47S, V217M, G360A dup 16 P53, trình tự cặp mồi trình bày với ung thư tế bào gan nguyên phát bảng TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Bảng Trình tự mồi cho phản ứng PCR khuếch đại SNP SNPs Mồi xuôi 5’-3’ Mồi ngược 5’-3’ PCR Exon* D21D GAAGCAGCCATTCTTTTCCT GGTCCCCAGCCCAACCCTT 334 bp Exon P34P, P36P, P47S CAACGTTCTGGTAAGGACAA GCCAGGCATTGAAGTCTCAT 511bp Exon V217M AGCGCTGCTCAGATAGCGAT TAAGCAGCAGGAGAAAGCCC 181 bp Exon G360A GCTGTATAGGTACTTGAAGTGC CTGTCGATACACTGAGGCAAG 433 bp Exon 10 Dup 16 TGGGACTGACTTTCTGCTCTT TCAAATCATCCATTGCTTGG 119 bp Intron * Exon khuếch đại Phản ứng PCR tiến hành với thể tích để phân tích số liệu Dùng kiểm định χ2 để so 20μl gồm: 10 μl Taq polymerase, 1μl mồi xuôi, sánh tỷ lệ kiểu gen TP53 hai nhóm ung 1μl mồi ngược, 2μl DNA 6μl H2O Chu trình thư tế bào gan nguyên phát không bị ung o nhiệt phản ứng PCR: 94 C/5 phút, 33 chu o o thư tế bào gan nguyên phát Để ước tính mối o liên quan kiểu gen khả mắc 72 C/7 phút Bảo quản mẫu 15 C ung thư tế bào gan nguyên phát dùng tỷ suất kỳ [94 C/30 giây, 60 C/30 giây, 72 C/30 giây], o o Sản phẩm PCR điện di gel agarose 1,5% kiểm tra, sau tiến hành giải trình tự theo quy trình thường quy Kết so với trình tự Genebank OR với khoảng tin cậy 95% Các kiểm định có ý nghĩa, p < 0,05 Đạo đức nghiên cứu Đề tài Hội đồng đạo đức Riêng với SNP dup 16, nhóm nghiên cứu Trường Đại học Y Hà Nội thơng qua theo khơng tiến hành giải trình tự gen mà so sánh chấp thuận số 118/HĐĐĐ-ĐHYHN Bệnh nhân kích thước sản phẩm PCR, bình thường có hồn tồn tự nguyện tham gia vào nghiên cứu kích thước 119 bp, có thêm đoạn 16bp có quyền rút lui khỏi nghiên cứu bất ký thời sản phẩm PCR có trọng lượng phân tử 135 điểm Các thông tin cá nhân đảm bp Kiểu gen A1A1 có băng 119 bp, bảo bí mật kiểu gen A1A2 có hai băng 119 135 bp, kiểu gen A2A2 có băng với kích thước 135bp Phân tích số liệu Sử dụng phần mềm thống kê SPSS 16.0 TCNCYH 102 (4) - 2016 III KẾT QUẢ Đặc điểm nhóm nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu gồm 280 bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát (nhóm bệnh) TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC 267 người bình thường nhóm chứng Kết điều kiện tương đồng tuổi cho thấy khơng có khác biệt có ý nghĩa giới Tỷ lệ mắc bệnh nam cao nữ thống kê (p > 0,05) độ tuổi giới tính (p < 0,01) Tỷ lệ bệnh nhân ung thư tế bào gan hai nhóm bệnh nhóm chứng Điều đồng nguyên phát có HBV dương tính cao, nghĩa với việc nhóm bệnh nhóm chứng có chiếm 45,3% Bảng Đặc điểm nhóm đối tượng nghiên cứu Bệnh Chứng Đặc điểm p n % n % Nam 223 79,6 214 78 Nữ 57 20,4 53 22 Giới 0,16 Tuổi (năm) trung bình 56,2 ± 12,75 55,02 ± 11,97 0,24 Nghiện rượu 37 13,2 3,3 Nhiễm HBV 127 45,3 25 9,3 Xơ gan 33 11,8 2,2 Đánh giá mối liên quan đa hình dup 16 với ung thư tế bào gan nguyên phát Đây đa hình thái gen TP53 nhóm nghiên cứu phân tích DNA sau tách chiết khuếch đại đoạn gen vùng intron Đa hình kiểu gen có thêm đoạn hay khơng có, xác định hình ảnh điện di sản phẩm PCR gel agarose 1,5% K70 K79 K80 K82 K83 K84 C7 C8 C9 C10 M 135 bp 119 bp Hình Hình ảnh điện di sản phẩm PCR dup 16 M: Marker 100bp, K mẫu bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát, C: mẫu đối chứng K70: kiểu gen A2A2, K79: kiểu gen A2A1, K80-C10: kiểu gen A1A1 Hình ảnh điện di sản phẩm khuếch đại đoạn gen intron TP53 cho kết phù hợp với lý thuyết Mẫu K70 có vạch 135 bp kiểu gen đồng hợp A2A2 Mẫu 79 có hai vạch 135 bp TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC 119 bp tương ứng kiểu gen A2A1 Còn lại mẫu từ K80 - C10 kiểu gen A1A1 có vạch tương đương 119 bp Tiến hành tổng số 547 mẫu DNA nhóm đối tượng nghiên cứu thu kết bảng Bảng Kết phân tích đa hình kiểu gen dup 16 Nhóm bệnh (280) Nhóm chứng (267) Kiểu gen Alen A2 p n % 17 3,0 OR % 0,9 3,31 (1,22 - 8,67) 0,021 Alen A1 543 97,0 529 99,1 A2A2 0,3 0 A2A1 15 5,0 1,9 1,00 2,97 (1,07 - 8,31) 0,025 A1A1 264 94,7 262 98,1 1,00 Biến thể có thêm đoạn 16 bp (A2A2) gặp thấp nhóm đối tượng nghiên cứu Kiểu gen đồng hợp A2A2 gặp trường hợp nên khơng tính tỷ suất OR kiểm định χ2 khơng có giá trị Tuy nhiên, kiểu gen dị hợp A1A2 gặp nhiều nhóm bệnh nhân (p = 0,02) Kiểu gen A1A2 làm tăng khả mắc bệnh so với kiểu gen đột biến A1A1 Kết phân tích cho thấy alen A2 có nguy mắc bệnh cao alen A1 (p = 0,02) Đánh giá mối liên quan kiểu gen D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A với ung thư tế bào gan nguyên phát Sử dụng kỹ thuật giải trình tự trực tiếp phân tích kiểu gen SNPs D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A gen TP53 So sánh với trình tự Genebank TP53 Hình kết minh họa đại diện số kiểu gen Hình Kết giải trình tự xác định kiểu gen codon 36 codon 360 Hình cho thấy vị trí codon 36, gặp kiểu gen G/A (hình a) G/G (hình b), codon 360 gặp kiểu gen G/G (hình c) TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Tiến hành tổng số 547 mẫu DNA nhóm đối tượng nghiên cứu thu kết bảng Bảng Kết phân tích kiểu gen D21D, P34P, P36P, P47S, V217M Đồng hợp nguyên thuỷ n (%) Dị hợp n (%) Đồng hợp đột biến n (%) D21D (C > T) C/C 547 (100%) C/T (0%) T/T (0%) P34P (C > A) C/C 545 (99,6%) C/A (0,4%) A/A (0%) P36P (G > A) G/G 546 (99,8%) G/A (0,2%) A/A (0%) P47S (C > T) G/G 546 (99,8%) G/A (0,2%) A/A (0%) V217M (G > A) G/G 547 (100%) A/A (0%) M/M (0%) G360A (G > C) G/G 547 (100%) G/C (100%) C/C (0%) SNP Kết bảng cho thấy, tất SNPs xuất với tần suất thấp nhóm đối tượng nghiên cứu khơng có liên quan với ung thư tế bào gan nguyên phát IV BÀN LUẬN Gen TP53 đóng vai trò quan trọng loại ung thư khác Tuy nhiên, kết việc trì tính ổn định gen tác khơng qn, có nhiều nghiên cứu khẳng động yếu tố có hại thương tổn định có liên quan, có nghiên DNA, giảm oxy huyết, rối loạn chuyển hóa hay cứu đưa kết luận khơng có liên quan tăng cường hoạt động gen sinh ung đa hình gen TP53 nguy mắc thư [2; 3] Bất kỳ biến đổi TP53 ung thư Nghiên cứu lần đầu tìm hiểu tạo nên nguy hình thành dòng tế đa hình gen TP53 người Việt Nam bị bào ung thư Kể từ năm 1979, TP53 mắc ung thư tế bào gan nguyên phát phát có nhiều nghiên cứu tìm Năm 2002, nghiên cứu Châu Âu hiểu gen Gần hướng nghiên cứu ra, SNP 16 dup có liên quan đến ung thư đáng ý đa hình kiểu gen TP53 vú phụ nữ Đức [7] Đây gần SNP liên quan đến nguy mắc ung thư quan trọng biết đến gen Năm 2009, đa hình kiểu gen quan TP53 Kết nghiên cứu cho thấy người trọng gen TP53 hệ thống lại [1] mang kiểu gen nguyên thuỷ A1A1 có khả Hàng loạt nghiên cứu sau tìm mối liên mắc ung thư vú người mang kiểu quan đa hình gen TP53 gen A1A2 (OR = 1,3 ; 95%; CI = 1,0 - 1,7) TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC kiểu gen (A2A2 OR = 1,7; 95%; CI 0,8 - 3,4) amin Nghiên cứu tiến hành phân tích [7] Về lý thuyết người mang kiểu gen silent SNPs exon exon có thêm đoạn 16 bp (alen A2) biểu TP53 Đây ba SNPs không làm thay đổi protein p53 tế bào mức thấp có trình tự acid amin, có ba mã hóa 21 nguy cao mắc ung thư Điều chứng tỏ (GAC → GAT), 34 (CCC → CCA) 36 (CCG SNPs có khả thay đổi trình → CCT) Kết giải trình tự cho thấy, tỷ lệ hồn thiện mRNA [4] Tuy nhiên, số lưu hành kiểu gen đột biến thấp liệu thu từ nghiên cứu cho thấy tỷ lệ quần thể nghiên cứu Cụ thể, khơng gặp kiểu gen có thêm đoạn đồng hợp tử 16 bp kiểu gen mang alen đột biến (A2A2) thêm đoạn dị hợp tử 16 bp (A1A2) D21D, codon 34 kiểu gen dị hợp C/A gặp gặp nhóm đối tượng nghiên cứu Do hai trường hợp (0,4%), kiểu gen dị hợp G/C tần suất kiểu gen đột biến thấp nên khơng thể codon 36 có trường hợp (0,2%) đánh giá khả mắc ung thư tế bào Các trường hợp mang kiểu gen dị hợp gan ngun phát đa hình dup16 Tuy thuộc nhóm bệnh nhân ung thư gan Các nhiên, ghi nhận kiểu gen dị hợp tử silent SNPs lý thuyết không làm A1A2 gặp nhiều nhóm bệnh nhân ung thay đổi trình tự acid amin làm thư gan (p = 0,02) Một nghiên cứu năm 2013 giảm biểu protein p53 Nhiều tiến hành tổng kết 25 nghiên cứu đa nghiên cứu SNPs nằm hình dup 16, kết cho thấy người có kiểu vùng N-tận p53 chứa vị trí tương tác gen A2A2 tăng nguy mắc ung thư so với với MDM2 làm giảm khả dịch mã kiểu gen A1A1 OR = 1,45; 95%; CI (1,22 - TP53 mRNA [1; 5] Điều nói lên 1,74) [8] Tuy nhiên, nghiên cứu silent SNPs hồn tồn có ảnh hưởng đến khơng có giống chủng tộc đặc tính chức sinh học gen ức như: Không liên quan đến ung thư người Ấn chế ung thư TP53 Tuy nhiên, thực tế Độ, vùng Địa trung Hải bắc Âu lại có chưa có nghiên cứu đánh giá ý nghĩa người Mỹ gốc Caucasian Những số liên quan SNPs codon 21, 34, 36 liệu cho thấy đột biến thêm 16 bp không TP53 với nguy ung thư Với tỷ lệ giống loại hình ung thư Kiểu kiểu gen đột biến gặp thấp trên, để có gen A2A2 yếu tố nguy cho ung thư vú, thể phân tích liên quan codon ung thư đại tràng khơng có ý nghĩa 21, 34 36 với ung thư gan cần làm ung thư phổi [9 - 11] Kết nghiên lượng mẫu lớn cứu lại lần chứng minh yếu tố P47S SNP gặp, nằm đầu N-tận chủng tộc loại hình ung thư phải tính TP53 Khi trình tự nucleotid thay đổi C > đến nghiên cứu đa hình kiểu gen T lại làm Prolin chuyển thành Serin, dẫn TP53 đến thay đổi khả gắn kết Những nghiên cứu SNPs gen TP53 p53 với MDM2 Kết nghiên cứu gặp có đề cập đến khái niệm silent TP53 kiểu gen đột biến quần thể nhóm polymorphisms [1] Đây khái niệm cho tập nghiên cứu Kiểu gen nguyên thuỷ Pro/Pro có hợp SNPs nằm vùng mã hoá 546/547 trường hợp Kiểu gen dị hợp Pro/ TP53 khơng làm thay đổi trình tự acid Ser có có trường hợp khơng gặp TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC kiểu gen đồng hợp Ser/Ser nhóm đa hình kiểu gen D21D, P34P, P36P, nghiên cứu Trường hợp mang kiểu gen đồng Pro47Ser, V217M, G360A ung thư tế bào hợp Ser/Ser thuộc nhóm bệnh Trong thực tế gan nguyên phát Kiểu gen A1A2 dup 16 nghiên cứu P47S Thế giới gặp nhiều nhóm bệnh nhân so với không nhiều Đáng ý nghiên nhóm chứng cứu Hoa Kỳ cơng bố: tỷ lệ gặp kiểu gen Lời cảm ơn đột biến SNP P47S TP53 4,7% người Mỹ gốc Phi 0% người gốc Đề tài thực với hỗ trợ kinh Caucasian [6] Như vậy, kết nghiên cứu phí đề tài nhánh cấp nhà nước “Đánh giá giống với nghiên cứu phân bố kiểu gen số gen liên quan Hoa Kỳ, tần suất kiểu gen đột biến thấp Để đến ung thư phổi ung thư gan” thuộc đề tài phân tích nguy ung thư SNP nhiệm vụ Quỹ gen “Đánh giá đặc điểm di cần có số liệu nghiên cứu với truyền người Việt Nam” Nhóm nghiên cứu quy mô mẫu lớn nhiều trân trọng cảm ơn Khoa Nội Tiêu hoá - Bệnh V217M, G360A, thuộc exon exon 10, viện Bạch Mai, Trung tâm Ung bướu Bệnh gen TP53 Exon 6, vùng chức viện Đa khoa tỉnh Thanh Hoá, Trung tâm quan trọng, gắn kết DNA đích Protein Nghiên cứu Gen - Protein, Trường Đại học Y p53 thực chức sinh học Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ việc gắn kết vào loạt gen trình nghiên cứu đích tế bào, từ kích thích hay ức chế q trình chép chúng Việc có thay đổi vùng làm giảm khả gắn kết DNA, giảm chức ức chế ung TÀI LIỆU THAM KHẢO Whibley C., Pharoah PD., Hollstein M (2009) P53 polymorphisms: cancer implica- khu vực tiếp giáp với mối liên kết vùng C tions Nat Rev Cancer, 9(2), 95 - 107 Vousden KH & Lane DP (2007) P53 in health and disease Nature Rev Mol Cell Biol, 275 – 283 tận protein p53 Đây vùng có chức Prives C & Hall PA (1999) The p53 tạo cấu trúc bậc p53, pathway J Pathol, 187, 112 – 126 Candeias MM (2008) p53 mRNA controls p53 activity by managing Mdm2 func- thư p53 Đa hình nucleotid đơn quan trọng vùng gen V217M, G > A ba mã hố Codon 360 lại nằm đa hình gen codon ảnh hưởng tới chức tạo cấu trúc bậc protein p53 Gần đây, đa hình codon 360 quan tâm nghiên cứu, Gly360Ala (Glycin→Alanin) Kết nghiên cứu khơng phát khác biệt hai nhóm bệnh chứng, đa hình kiểu gen V217m G360A V KẾT LUẬN Khơng tìm thấy liên quan có ý nghĩa tions Nature Cell Biol, 10, 1098 – 1105 Lazar V (1993) Simple sequence repeat polymorphism within the p53 gene Oncogene, 8, 1703 – 1705 Felley-Bosco E (1993) Functional studies of a germ-line polymorphism at codon 47 within the p53 gene Am J Hum Genet, 53, 752 – 759 Wang-Gohrke, S (1993) Intron variants of the p53 gene are associated with increased TCNCYH 102 (4) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC risk for ovarian cancer but not in carriers of BRCA1or BRCA2germline mutations Br J Cancer, 81, 179 – 183 Costa S (2008) Importance of TP53 codon 72 and intron duplication 16bp polymorphisms in prediction of susceptibility on C Sagne, V Marcel, A Amadou, and J Hall (2013) A meta-analysis of cancer risk associated with the TP53 intron duplication polymorphism (rs17878362): geographic and breast cancer BMC Cancer, 8, 32 tumor-specific effects Cell Death and Dis- metastasis in breast cancer Oncol Rep, 22, 1205 - 1211 ease, (13), 2041 - 4889 10 Hrstka R., Beranek M., Klocova K., Nenutil R., Vojtesek B (2009) Intronic polymorphisms in TP53 indicate lymph node Summary TP53 POLYMORPHISMS AND RISK OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA Polymorphisms of the tumor suppressor gene TP53 are involved in cancer development and tumor onset Several polymorphism of TP53 were found, they were located in both coding and non-coding region of TP53 gene These polymorphisms created so many different available genotypes Each genotype contributes to cancer risk differently In this study, some of TP53 polymorphisms was analyzed in 280 hepatocellular carcinoma cases and 267 controls The results showed that, the mutant genotype of dup16, D21D, P34P, P36P, P47S, V217M, G360A were rarely frequent in research subjects A1A2 genotype of dup16 was more frequent in hepatocellular carcinoma group than in non- hepatocellular carcinoma (p = 0.02) More studies with large sample are needed to determine the relationship between dup16 with hepatocellular carcinoma Key words: geneTPp53, polymorphisms, hepatocellular carcinoma TCNCYH 102 (4) - 2016 ... biến đổi TP53 ung thư Nghiên cứu lần đầu tìm hiểu tạo nên nguy hình thành dòng tế đa hình gen TP53 người Việt Nam bị bào ung thư Kể từ năm 1979, TP53 mắc ung thư tế bào gan ngun phát phát có nhiều... nghiên cứu đánh giá cách tồn diện đa hình kiểu gen TP53 bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát Do đó, - Thu thập mẫu máu bệnh nhân ung thư tế bào gan nguyên phát mẫu chứng 2.2 Tách chiết DNA... không bị ung o nhiệt phản ứng PCR: 94 C/5 phút, 33 chu o o thư tế bào gan nguyên phát Để ước tính mối o liên quan kiểu gen khả mắc 72 C/7 phút Bảo quản mẫu 15 C ung thư tế bào gan nguyên phát dùng