Vô sinh nam giới chiếm khoảng 50%, do vậy, rất cần thiết phải có phương pháp điều trị thích hợp. Trong bối cảnh ấy, nuôi cấy tế bào dòng tinh đã mở ra một triển vọng trong điều trị vô sinh nam giới.
hời gian nuôi cấy: 24 giờ, 48 - Những trường hợp IVF/ICSI với tinh trùng nuôi cấy, BN chuẩn bị ni cấy trước 24 giờ, sau chọc noãn, tiến hành kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) với tinh trùng lựa chọn Đánh giá q trình thụ tinh nỗn qua hình thái hợp tử phôi thời điểm ngày thứ (N1), ngày thứ (N2) ngày thứ (N3) theo Lynette Scott (2000) Andres Salumet (2001) - Nhập xử lý số liệu nghiên cứu chương trình STATA 10.0 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Thể tích trung bình tinh hồn BN Bảng 1: Trung bình (X ± SD) Thể tích tinh hồn BN (ml) Thể tích tinh hồn bình thường (ml) 9,75 ± 3,14 15 - 20 p < 0,01 Giá trị min, max - 16 So với thể tích tinh hồn trung bình người Việt Nam điều tra Nguyễn Thành Như (2007) 15 - 20 ml, Tạp chí y - dợc học quân số 6-2016 tinh hồn nhóm BN vơ tinh nhỏ (p < 0,01) Điều cho thấy tế bào dòng tinh giảm sút nghiêm trọng Bất kể lý gì, số lượng tế bào dòng tinh giảm sút làm thể tích tinh hồn bé lại Nồng độ nội tiết tố BN Bảng 2: Nồng độ hormon BN Nồng độ Chỉ số BN Chỉ số bình thường FSH (mIU/ml) LH (mIU/ml) Testosteron (ng/ml) 9,58 ± 7,81 6,45 ± 2,71 4,45 ± 2,31 - 20 - 20 - 10 p > 0,05 Kết xét nghiệm nội tiết BN “dường như” giới hạn bình thường (FSH, LH: - 20 mIU/ml; testosteron 10 ng/ml [1]) Tuy nhiên, FSH cao, cho thấy tinh hoàn BN bị rối loạn sinh tinh, cụ thể suy giảm trình sinh tinh dẫn đến chế phản hồi ngược, tuyến yên tăng tiết FSH để thúc đẩy trình sinh tinh Như vậy, nồng độ hormon thay đổi BN nghiên cứu chưa rõ nét, đặc biệt testosteron LH Ngoại trừ FSH tăng có giá trị cho tiên lượng lâm sàng Kết nuôi cấy tế bào tinh tử * Thay đổi tỷ lệ tinh tử tròn: Bảng 3: Thay đổi tỷ lệ tinh tử tròn trước sau ni cấy Tinh tử tròn (X ± SD, %) p (1) 17,91 ± 4,42 p2.1 > 0,05 24 (2) 12,75 ± 4,18 48 (3) 9,23 ± 4,53 Thời điểm 10 p3.2 > 0,05 p3.1 > 0,05 Tại thời điểm nuôi cấy 24 48 giờ, số lượng tinh tử tròn giảm Mặc dù giảm chưa có ý nghĩa thống kê, nhiên, thời điểm 24 giờ, số lượng tinh tử tròn giảm 1,53 lần, thời điểm 48 giảm lần Số lượng tinh tử tròn giảm sau ni cấy phần hao hụt thối hóa hoại tử q trình xử lý mẫu thay mơi trường ni cấy Nhưng phần lớn tinh tử tròn bước vào q trình biệt hóa thành tinh tử kéo dài, q trình tự nhiên biệt hóa từ tinh tử tròn sang tinh tử kéo dài khơng đòi hỏi thời gian lâu Kết phù hợp với quan sát Movahedin (2004), Roulet (2006) [9]: thời điểm sớm nuôi cấy, số lượng tinh tử tròn giảm xuống * Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài: Bảng 4: Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài trước sau nuôi cấy Tinh tử kéo dài (X ± SD, %) p (1) 6,15 ± 4,19 p2.1 > 0,05 24 (2) 11,78 ± 4,67 48 (3) 13,12 ± 5,57 Thời điểm p3.2 > 0,05 p3.1 < 0,05 Sau 24 48 nuôi cấy, số lượng tinh tử kéo dài (Sb, Sc) tăng lên cách đáng kể, chưa có ý nghĩa thống kê với mức tăng 1,9 2,15 lần thành công mục tiêu nuôi cấy Kết phù hợp với quan sát Gerton (1984), Aslam (1998) [2] Movahedin (2004), cho thấy nuôi cấy thời điểm sớm, số lượng tinh tử ang kộo di tng lờn Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 6-2016 * Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài: Bảng 5: Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài trước sau nuôi cấy Thời điểm Tinh tử kéo dài (X ± SD, %) (1) 3,59 ± 0,71 24 (2) 6,49 ± 6,33 48 (3) 8,92 ± 7,45 p p2.1 > 0,05 p3.2 > 0,05 p3.1 < 0,05 Sau nuôi cấy 24 48 giờ, số lượng tinh tử kéo dài (Sd) tăng lên cách đáng kể, chưa có ý nghĩa thống kê tăng lên 1,8 2,4 lần Đây thành công mục tiêu nuôi cấy Kết phù hợp với quan sát Movahedin (2004): nuôi cấy thời điểm sớm, số lượng tinh tử kéo dài tăng lên * Thay đổi tỷ lệ tinh trùng: Bảng 6: Thay đổi tỷ lệ tinh trùng trước sau nuôi cấy Thời điểm Tinh trùng (X ± SD, %) p (1) 0,75 ± 0,26 p2.1 > 0,05 24 (2) 2,42 ± 0,51 p3.2 > 0,05 48 (3) 4,23 ± 0,71 bổ sung thêm nội tiết đầy đủ, nuôi cấy điều kiện thuận lợi Pha cuối trình biệt hóa từ tinh tử kéo dài thành tinh trùng không phức tạp * Khả thụ tinh tinh tử, tinh trùng thu sau nuôi cấy: Bảng 7: Khả thụ tinh tinh tử sau ni cấy Số nỗn thu Số nỗn thụ tinh (%) Số nỗn khơng thụ tinh (%) 428 256 (59,81%) 172 (40,19) Chúng ta thấy tỷ lệ thụ tinh tinh tử tinh trùng sau nuôi cấy không chênh lệch so với với tỷ lệ IVF/ICSI thông thường [8] Mặc dù tinh tử, tinh trùng nuôi cấy, mức độ biệt hóa, trưởng thành khả thụ tinh khơng tinh trùng có sẵn định IVF/ICSI khác * Tỷ lệ có thai: Có thai Khơng có thai 26.66 p3.1 < 0,05 Tại thời điểm nuôi cấy 24 48 giờ, tỷ lệ tinh trùng thu tăng lên đáng kể, gấp 3,15 lần lần so với thời điểm (p < 0,05) Đây thành cơng mục tiêu nuôi cấy Theo chúng tôi, tỷ lệ tinh trùng tăng lên q trình ni cấy q trình biệt hóa tinh tử kéo dài tiếp tục hồn thiện Q trình hồn thiện nhờ vào nuôi cấy tế bào Sertoli tốt hơn, môi trường giàu chất dinh dưỡng 73.34 Biểu đồ 1: Tỷ lệ có thai sau chuyển phơi số sau cùng, quan trọng để đánh giá tất biện pháp kỹ thuật trước Đặc biệt, nghiên cứu đánh giá kết nuôi cấy tinh tử Kết gần tương đương với tỷ lệ có thai IVF/ICSI Matyas (2000), Camus (2006) [5], Kupka (2010) [7] 11 Tạp chí y - dợc học qu©n sù sè 6-2016 KẾT LUẬN Cập nhật ni cấy tinh tử từ 2010 2015 với 60 ca nuôi cấy làm thụ tinh ống nghiệm, chúng tơi có số kết luận: - BN có tinh hồn bé bình thường (9,75 ml so với 15 - 20 ml), nội tiết tố chưa có thay đổi đáng kể (FSH: 9,58 mIU/ml so với - 20; LH: 6,45 mIU/ml so với - 20; testosteron: 4,45 ng/ml so với - 10) Tại thời điểm 24 48 sau nuôi cấy, tế bào tinh tử (tinh tử tròn, tinh tử kéo dài, tinh tử kéo dài tinh trùng) thay đổi đáng kể Đặc biệt, tinh tử kéo dài, tinh tử kéo dài tinh trùng tăng lên 1,8 - lần - Khả thụ tinh tinh tử tinh trùng sau ni cấy đạt 59,81% - Tỷ lệ có thai sau chuyển phôi 26,66% TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Quán Anh Bệnh học giới tính nam Nhà xuất Y học Hà Nội 2009 Aslam I and Fishel S Short-term in-vitro culture and cryopreservation of spermatogenic cells used for human in-vitro conception Human Reproduction 1998, 13 (3), pp.634-638 12 ASRM Sperm retrieval for obstructive azoospermia American Society for Reproductive Medicine 2008, 90, pp.213-218 Bart TP, K Gassei and Orwig EK Spermatogonial stem cell regulation and spermatogenesis Phil Trans R Soc B 2010, 365, pp.1663-1678 Camus CT et al Conventional in-vitro fertilization versus intracytoplasmic sperm injection in sibling oocytes from couples with tubal infertility and normozoospermic semen Fertil Steril 2006, pp.115-122 Jégou B, Pineau C, Toppari J Assisted reproductive technology Cambrdge University Press 2002 Kuppa M et al Impact of female and male obesity on IVF/ICSI: Result of 700.000 ART-cycles in Germany Gynecological Endocrinology Early Online 2010, pp.1-6 Lasienë K et al Morphological criteria of oocyte quality Medicina (Kaunas) 2009, (7), pp.509-515 Roulet V et al Human testis in organotypic culture: application for basic or clinical research Human Reproduction 2006, 21 (6), pp.1564-1575 10 Sa R et al Cytological and expression studies and quantitative analysis of the temporal and stage-specific effects of follicle-stimulating hormone and testosterone during cocultures of the normal human seminiferous epithelium Biology of Reproduction 2008, 79, pp.962-975 ... th y nuôi c y thời điểm sớm, số lượng tinh tử kộo di tng lờn Tạp chí y - dợc học qu©n sù sè 6-2016 * Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài: Bảng 5: Thay đổi tỷ lệ tinh tử kéo dài trước sau nuôi c y. .. biệt hóa từ tinh tử kéo dài thành tinh trùng không phức tạp * Khả thụ tinh tinh tử, tinh trùng thu sau nuôi c y: Bảng 7: Khả thụ tinh tinh tử sau nuôi c y Số noãn thu Số noãn thụ tinh (%) Số... (2010) [7] 11 Tạp chí y - dợc học quân sù sè 6-2016 KẾT LUẬN Cập nhật nuôi c y tinh tử từ 2010 2015 với 60 ca nuôi c y làm thụ tinh ống nghiệm, chúng tơi có số kết luận: - BN có tinh hồn bé bình thường