Xác định độc lực của rắn lục đuôi đỏ và tác động gây loét trên chuột

Đề tài này được tiến hành với mục tiêu nhằm xác định thành phần gây độc chính trong nọc rắn lục đuôi đỏ (trimeresurus albolabris) và các yếu tố ảnh hưởng. Độc lực, liều gây tổn thương được tiến hành khảo sát trên chuột và hiệu lực trung hòa hoạt tính enzyme trong nọc toàn phần của kháng huyết thanh kháng nọc.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Nghiên cứu Y học XÁC ĐỊNH ĐỘC LỰC CỦA RẮN LỤC ĐUÔI ĐỎ VÀ TÁC ĐỘNG GÂY LOÉT TRÊN CHUỘT Nguyễn Tấn Hiệp*, Nguyễn Thúy Hương**, Nguyễn Thị Nguyệt Thu***, Nguyễn Lê Trang TÓM TẮT Đặt vấn đề: Lở loét hoại tử mô chỗ vấn đề mà kháng huyết khơng đem lại hiệu lực tác dụng nào, đặc biệt với nhiễm độc nọc rắn lục đuôi đỏ Hiện nay, chưa có nghiên cứu Việt Nam báo cáo tác động gây loét bị rắn lục cắn Mục tiêu: Xác định thành phần gây độc nọc rắn lục đuôi đỏ (Trimeresurus albolabris) yếu tố ảnh hưởng Độc lực, liều gây tổn thương tiến hành khảo sát chuột hiệu lực trung hòa hoạt tính enzyme nọc tồn phần kháng huyết kháng nọc Phương pháp nghiên cứu: Thí nghiệm chuột thông qua đường tiêm i.v, s.c giải phẫu vùng da bị xuất huyết Kết quả: Nọc rắn lục gây xuất huyết chỗ chứng minh rõ ràng, độ trầm trọng lệ thuộc vào liều nọc Độc lực nọc rắn lục xác định qua đường tiêm tĩnh mạch đuôi chuột (20g ±2, N=5): LD50 = 9,27 µg nọc/chuột (0,464 µg/g) Liều nọc tối thiểu gây xuất huyết đường kính 10mm vùng da chuột MHD = µg/ chuột Hiệu lực trung hòa liều nọc MHD kháng huyết 1,175 µg (protein kháng huyết thanh) Enzyme serine protease nọc rắn lục tinh chế qua cột Benzamidine Sepharose 6B chiếm tỉ lệ 8,72% (g protein/100g nọc khô) Kết luận: Sự diện với tỷ lệ đáng kể serine proteinase nọc nguy tiềm hoạt hóa nhiều hệ thống tiền enzyme thể nạn nhân: hệ thống bổ thể, hệ thống cầm máu, gây hoại tử biến chứng Nghiên cứu bước đầu cho thấy tác động gây xuất huyết serine protease khả trung hòa hoạt tính enzyme nọc kháng huyết Từ khóa: Trimeresurus albolabris, nọc rắn lục, gây loét ABSTRACT TRIMERESURUS ALBOLABRIS VENOM’ TOXIN STRENGTH AND NECROTIZING ACTIVITY WAS DETERMINED IN MICE Nguyen Tan Hiep, Nguyen Thuy Huong, Nguyen Thi Nguyet Thu, Nguyen Le Trang * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - No - 2014: 43 - 49 Background: Local tissue necrosis is an important problem when patients was bite by Trimeresurus albolabris because treating with antiserum is not effected There hasn’t been any study of necrotizing activity with T albolabris bite in Vietnam Objective: Identification of serine protease activities in Trimeresurus albolabris venom and its affecting Venom’ toxin strength, minimum hemorrhagic dose were test of mice injected and neutralization of enzyme activities of Trimeresurus albolabris venom by antivenom Method: Testing on mice via i.v, s.c injection and haemorrhagic spot in mice local tissue necrosis Results: The venom obviously causes local haemorrhage The LD50 of the venom was determined by i.v injections of different doses into the caudal vein of mice (20±2, N=5): LD50 = 9.27 µg (0,464 µg/g) MHD is 2.0 µg/20g Neutralization of 3MHD (6.0 µg) needed 1,175 µg antivenom protein The yield of Serine protease occupied 8.72% of dry venom protein *Bệnh Viện Đại Học Y Dược CS1 Tác giả liên lạc: Nguyễn Tấn Hiệp ** Đại Học Bách Khoa Tp HCM ***Viện Pasteur Tp.HCM ĐT: 0909338254 Email: hiep.nt@umc.edu.vn 43 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Conclusion: The venom serine protease potentially activates hemostatic zymogen systems and causes local necrosis Preliminary results showed that haemorrhagic activity of serine protease and neutralization of enzyme activities of Trimeresurus albolabris venom by antivenom Key words: Trimeresurus albolabris, snake venom, snakebite ulcers ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam thuộc vùng có địa hình khí yếu tố cầm máu (đa số tiền serine proteinase) với hoạt hóa hệ kinin- hậu nhiệt đới thuận lợi cho sinh sống, phát kallikrein(5) triển lồi rắn nói chung rắn độc nói Mục tiêu nghiên cứu riêng Rắn độc Việt Nam chia làm hai Mục tiêu tổng quát loại: loài rắn thuộc họ nhỡn kính (elapidae) Khảo sát Proteinase nọc rắn lục đỏ có nọc gây độc thần kinh (neurotoxic) và tác động gây loét chuột loài rắn thuộc họ rắn lục (viperidae) có nọc gây Mục tiêu chuyên biệt độc hệ huyết mạch (hemotoxic) Huyết kháng nọc rắn lục (Trimeresurus albolabris) kháng số nọc rắn nhỡn kính sản xuất thử nghiệm thành công bệnh nhân nhiễm độc nọc rắn(7,10) Huyết kháng nọc rắn chứng tỏ có hiệu để điều trị nhiễm độc nọc rắn(1,3) Tuy nhiên, bệnh nhân thường điều trị sau thời gian trì hỗn (để đến trung tâm y tế) Thời gian trì hỗn ngun nhân làm tăng nguy gây tử vong làm tăng Xác định độc lực qua liều gây tử vong 50% số chuột thí nghiệm (LD50) nọc rắn lục đỏ Xác định thành phần gây độc rắn lục đuôi đỏ yếu tố ảnh hưởng Xác định liều gây tổn thương đường kính 10mm vùng da chuột (MHD) Xác định hiệu lực trung hòa hoạt tính enzyme nọc tồn phần kháng huyết kháng nọc nguy tạo biến chứng sinh lý bệnh gây PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH tàn phế, đặc biệt làm tăng độ trầm trọng Vật liệu gây hoại tử chỗ(2) Nguyên nhân lở loét quy cho proteins gây độc nọc lưu tụ chỗ cắn, protein chủ yếu Serine proteases, hoạt động với chế xúc tác Khi nhiễm độc nọc rắn lục, proteins phân hủy thành phần Nọc rắn lục khô Trung tâm Nuôi trồng Nghiên cứu Chế biến Dược liệu quân khu 9, Tiền Giang cung cấp Chuột nhắt trắng 18-20g cung cấp từ Viện Pasteur Tp.HCM Kháng huyết kháng nọc Viện Vắc mô, phá vỡ mô, gây tổn thương cho vành xin Nha Trang cung cấp mạch, làm tăng tuần hoàn máu tập trung vào vết Các bước tiến hành thương nguyên nhân gây sưng phù, xuất huyết chỗ(2) Rắn lục lồi có nanh nọc độc phát triển loài rắn Chấn thương nhiễm khuẩn nanh nọc độc gây nên không tạo đáp ứng tự bảo vệ thể nạn nhân, có khởi động 44 Xác định liều gây tử vong 50% số chuột thí nghiệm (LD50) nọc rắn lục Nguyên tắc Thử nghiệm độc tính cấp dựa phản ứng toàn ứng hay bất ứng (sống hay chết) Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Nghiên cứu Y học thuốc thử nghiệm vào vật với điều Tinh chế serine protease nọc rắn lục qua cột Bezamidine Sepharose 6B kiện ấn định, ghi phân suất tử vong Nguyên tắc Nguyên tắc thử nghiệm tiêm liều thời gian quy định Độc lực thường biểu Benzamidine SepharoseTM p- thị giá trị LD50 (lethal dose 50%) – liều tối aminobenzamidine cộng hóa trị với Sepharose thiểu gây chết 50% số động vật thí nghiệm Chất 6B phương pháp cộng hợp thơng qua có độc tính cao giá trị LD50 thấp nhóm epoxy (một nguyên tử oxy liên kết với hai Động vật thí nghiệm cơng trình nguyên tử carbon): p- aminobenzamidine (PAB) chuột nhắt trắng hoàn toàn khỏe mạnh, chất ức chế tổng hợp trypsin dạng serine giới tính, độ tuổi, dòng, không mang mầm protease Các Trypsin dạng serine protease bệnh không mang thai liên kết đặc hiệu với Benzamidine Sepharose 6B Gây nhiễm giữ lại cột Sau đó, đẩy Serine Protease + Lơ đối chứng: tiêm vào chuột 0.2 mL nước muối sinh lý 0,9% + Lô thử: tiêm vào chuột lượng nọc độc tố khác theo cấp số định cho chứa phân suất gây chết 0% 100% động vật thí nghiệm - Đọc kết 48 kế từ tiêm - Kết tính theo công thức Kaber- khỏi cột dung dịch đệm có tính acid mạnh Rửa cột bảo quản 4OC Xác định tỷ lệ protein thu hồi đánh giá kết tinh chế điện di thạch polyacrylamide 12% với Sodium dodecylsulfate (SDS-PAGE)(6), hoạt tính enzyme xác định qua điện di SDS-PAGE 12%-gelatine 0,1% Thực Cho 11 mL nọc qua cột Bezamidine Behrens: Sepharose 6B lần Rửa cột dung dịch đệm Σab LD50 = Df - n Tris-HCl 20 mM, NaCl 0,5 M, pH=7,4 dịch rửa khơng protein (OD280=0) Đẩy thành phần bám cột dung dịch glycine 50mM, pH=3.0 (đến dịch có OD280=0), Với Df: liều tối thiểu làm chết tất thú vật lô; a: trị số trung bình tổng số thú vật chết lô kế tiếp; b: hiệu số liều kế tiếp; n: số thú vật dùng liều Độc lực nọc xác định cách tiêm vào tĩnh mạch đuôi (I.V.) chuột nhắt trắng 18-20 g Xác định pH dung dịch đệm ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme trung hòa Tris M, pH=8 Thu enzyme cần tinh chế Cân cột với dung dịch Tris-HCl 10 mM, NaCl 0,5 M, pH=7,5 Bảo quản cột 40C để sử dụng cho lần tinh chế sau Xác định liều tối thiểu gây xuất huyết đường kính 10mm vùng da chuột (MHD) Nọc rắn pha loãng hàng loạt theo bậc Tiến hành cho 0,2 mg nọc rắn ủ với hai từ 4-0,5 µg Tiêm 0,1 ml vào vùng da casein 2% dung dịch đệm pH khác chuột (Sc) Các chuột chứng tiêm 37°C 10 phút Thêm TCA lượng nước muối sinh lý Sau giờ, giải phẫu (trichloroacetic acid) 5% vào, ly tâm thu nước chuột, xác định đường kính vùng xuất huyết xác định giá trị hấp phụ quang 280 nm 45 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Nghiên cứu Y học Xác định hiệu lực trung hòa hoạt tính enzyme Tinh chế enzyme serine protease nọc nọc toàn phần kháng huyết rắn lục qua cột Bezamidine-Sepharose 6B kháng nọc Dung dịch nọc rắn nạp vào cột pH = Dung dịch kháng huyết pha 7.4 với đệm Tris HCl 20mM, NaCl 0,5M; loãng hàng loạt theo bậc 2: 1/2-1/32 Ủ dung thành phần không bám khỏi cột serine dịch kháng huyết với nọc 3MHD protease giữ lại cột Đẩy serine 37°C 30 phút Tiêm 0,1 ml vào vùng protease khỏi cột glycine 0,1M, pH 2,5 da chuột (S.C) Các chuột chứng Xác định giá trị phân đoạn (1,5 mL) tiêm 3MHD pha nước muối sinh lý Sau hấp phụ quang 280 nm giờ, giải phẫu chuột, xác định đường kính Abs280 vùng xuất huyết KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Độc lực nọc rắn lục đuôi đỏ Kết cho thấy độc tính nọc rắn lục 1.2 0.9 0.6 0.3 0 Đoạn 10 đỏ Việt Nam LD50 = 9,27µg/chuột Hình 2: Phân đoạn serine protease giải hấp từ cột (chuột 18-20g) Khảo sát pH dung dịch đệm ảnh hưởng Đánh giá kết tinh chế điện di đến hoạt tính enzyme thạch polyacrylamide SDS-PAGE 12% hoạt Bảng 1: Các dung dịch đệm với pH khác tính enzyme xác định qua điện di SDS- Dung dịch đệm Phosphate 0,2 M Tris-HCl 0,2 M Glycine 0,2 M PAGE 12%-gelatine 0,1% pH 5,5 7,5 8,5 6,5 8,0 9,5 7,5 8,5 10 Phosphate Glycine 8,0 9,0 10,5 Tris-HCl Abs (280nm) 0.1 pH 10 12 Hình 1: Các dung dịch đệm ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme Trong dung dịch đệm khác nhau, enzyme hoạt động tối ưu khoảng pH = 8-8,5 Hình 3: Kiểm tra thành phần sau tinh chế SDSPAGE 12% Hàng 1, 2, 3: Serine protease sau tinh chế có xử lý DTT Hàng 4: Serine protease sau tinh chế không xử lý DTT Hàng 6, 7, 8: Nọc rắn lục có xử lý DTT Hàng 9, 10: Nọc rắn lục không xử lý DTT Mẫu enzyme tinh chế cho vạch ngang với vạch enzyme có nọc rắn lục, 46 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Nghiên cứu Y học nồng độ cao Hoạt tính enzyme cho protease sau tinh chế Hàng 4: Serine protease chuẩn Hàng 5, 6, 7: Nọc rắn lục kết tương tự Xác định liều tối thiểu gây xuất huyết đường chứng tỏ enzyme thu sau tinh chế tinh kính 10mm vùng da chuột (MHD) Liều tối thiểu gây xuất huyết đường kính 10mm vùng da chuột liều cho phép ta quan sát đường kính xuất huyết rõ da chuột, khơng có biểu xuất huyết da Trong nghiên cứu này, xác định MHD nọc rắn lục 2µg Tại nồng độ huyết pha lỗng 1/8 (0,5875 µg/µl) cho phép chứng minh khả trung hòa gần hồn tồn nồng độ huyết pha lỗng 1/4 (1,175 µg/µl) cho thấy kháng huyết hồn tồn trung hòa Hình 4: Kiểm tra hoạt tính enzyme sau tinh chế SDS-PAGE 12%-gelatine 0,1% Hàng 1, 2: Serine µg nọc rắn lục tồn phần Hàm lượng nọc / 0,1 ml / chuột µg µg 0,5 µg Mẫu chứng NaCl 0,9% Hình 5: Xác định MHD chuột Xác định hiệu lực trung hòa hoạt tính enzyme nọc tồn phần kháng huyết kháng nọc KHT 1/32 KHT 1/16 KHT 1/8 KHT ¼ KHT 1/2 3MHD Hình 6: Kháng huyết trung hòa nọc rắn lục tồn phần BÀN LUẬN Trên giới, lồi rắn thuộc họ rắn lục (µg/g) sau: T albolabris (0,60µg/g), T purpureomaculatus (1,27µg/g), T samatranus (viperidae) có nọc gây độc hệ huyết mạch (0,60µg/g), T popeorium (1,45µg/g), T flavoviridis (hemotoxic) thường có độc lực cao Theo tác (2,5µg/g), T muscrosquamatus (1,50µg/g), T giả Nget Hong Tan cộng sự(9) nghiên cứu erythrurus (2,10µg/g), T okinavensis (5,0µg/g), T độc lực nhiều lồi rắn Trimeresurus Đơng Nam stejnegeri (1,78µg/g), T elegans (5,00µg/g), T Á, Trung Quốc, Ấn Độ xác định giá trị LD50 macrops (10,00µg/g), T wagleri (1,05µg/g) Trong 47 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 Nghiên cứu Y học nghiên cứu này, xác định độc lực qua 10 mm loài rắn lục đuôi đỏ thấp, chứng liều gây tử vong 50% số chuột thí nghiệm (LD50) tỏ độc lực nọc gây loét cao so với rắn lục đuôi đỏ (T albolabris) Việt Nam lồi rắn họ 0.464 µg/g Theo Kaber-Behrens, chất có độc tính Theo tác giả Nget Hong Tan cộng sự(9) cao giá trị LD50 thấp(9), điều tiến hành trung hòa độc tính nọc T albolabris chứng tỏ độc lực rắn lục đuôi đỏ Việt Nam kháng huyết kháng nọc với nồng độ nghiên cứu cao trung hòa sau: kháng huyết p- kháng nọc Trimeresurus đa giá NIPM (National aminobenzamidine (PAB) chất ức chế tổng Institute of Preventive Medicine, Taiwan): 2,0 hợp trypsin dạng serine protease Các mg/mL (mg trung hòa/mL kháng huyết thanh), Trypsin dạng serine protease liên kết đặc kháng huyết đơn giá GPV (Thai Red Cross hiệu với Benzamidine Sepharose 6B giữ lại Society, Thailand): 1,9 mg/mL Kháng huyết cột Dung dịch nọc rắn lục nạp vào cột NIPM pha loãng (1:8) (0,25 mg/mL), pH = 7,4 với đệm Tris HCl 20mM, NaCl 0,5M; lượng nọc sử dụng T albolabris (3,5 µg) đủ để thành phần không bám khỏi cột gây tổn thương đường kính 11mm chuột serine protease giữ lại cột Đẩy serine Trong nghiên cứu này, thử nghiệm protease khỏi cột glycine 0,1M, pH 2,5 trung hòa nồng độ huyết pha loãng 1/8 Mẫu enzyme tinh chế cho vạch ngang (0,5875 mg/mL) cho phép chứng minh khả với vạch enzyme có nọc rắn lục, chứng tỏ trung hòa gần hồn toàn nồng enzyme thu sau tinh chế tinh độ huyết pha loãng 1/4 (1,175 mg/mL) cho nồng độ cao Theo tác giả Hoffmann cộng thấy kháng huyết hồn tồn trung hòa sự(4), tinh chế serine protease từ nọc rắn lục nọc rắn lục tồn phần 3MHD (6,0 µg) Như Bothrops atrox, nọc pha đệm sodium vậy, nồng độ huyết (0.392 mg/mL) phosphate (pH=7,5) để nạp vào cột Khoảng pH trung hòa hồn tồn lượng nọc T.albolabris (2,0 tối ưu loại đệm khảo sát giúp cho µg) liều tối thiểu gây xuất huyết đường kính lựa chọn pH cho loại đệm tương ứng 10mm So sánh với thí nghiệm trên, nồng độ tinh chế kháng huyết để trung hòa đường kính 11 Benzamidine Sepharose TM Trong nghiên cứu này, xác định mm tác giả Nget Hong Tan cộng (9) liều tối thiểu gây xuất huyết đường kính 0,25 mg/mL, so với thí nghiệm 0,392 10mm (MHD) vùng da chuột nọc rắn mg/mL Qua đó, chứng tỏ kháng huyết lục đỏ 2µg Khi so sánh với nồng độ khác kháng nọc Viện Vaccin Nha Trang có tác tìm thấy nghiên cứu Kabburalli dụng trung hòa thành phần gây xuất huyết Sunitha cộng sự(8), khảo sát loài rắn lục thử nghiệm chuột phổ biến vùng Trung Đông Trung Á với KẾT LUẬN 2MHD sau: Echis carinatus (1µg), Echis Qua nghiên cứu trên, chúng tơi xác định độc cariatus sochureki (10µg), Echis carinatus leakeyi lực qua liều gây tử vong 50% số chuột thí (5µg), Echis eceollatus (5µg), Crotalus atrox (5µg) nghiệm (LD50) rắn lục đỏ (Trimeresurus Qua đó, liều tối thiểu gây xuất huyết đường kính 48 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Số * 2014 albolabris) Việt Nam 0,464 µg/g, chiếm độc Nghiên cứu Y học lực cao so với rắn lục họ Nọc độc gây xuất huyết chỗ chứng minh rõ ràng Sử dụng sắc ký lực với benzamidine cho phép tinh chế serine protease để xác định tỷ lệ enzyme nọc xác định khoảng pH tối ưu cho hoạt tính enzyme 8-8,5 Do nọc rắn lục gây rối loạn đông cầm máu, xuất huyết chỗ nên bước đầu xác định giá trị MHD nọc 2µg, liều gây xuất huyết tối thiểu đường kính 10mm Để ngăn ngừa triệu chứng xuất huyết nhiễm độc nọc rắn lục, kháng huyết kháng nọc có khả trung hòa tác động xuất huyết 3MHD 1,175µg ĐỀ XUẤT Từ kết luận xin đưa số đề suất sau: Cần có nghiên cứu thêm phương pháp chống lại biến chứng bệnh lý nhiễm độc nọc rắn lục đuôi đỏ serine protease gây nên Cần sử dụng kháng huyết kháng nọc rắn lục tai nạn rắn cắn kết hợp với biện pháp chống gây loét từ đầu sớm tốt TÀI LIỆU THAM KHẢO Calmette A (1892), "Etude expérimentale du venin de Naja Tripudians ou Cobra Capel et exposé d'une méthode de neutralisation de ce venin dans l'organisme" VI (3), 160-183 10 Chotenimitkhun R and Rojnuckarin P (2008), "Systemic antivenom and skin necrosis after green pit viper bites" Clinical toxicology, 46, 122-125 Gutierrez J M, Theakston R D and Warrell D A (2006), "Confronting the neglected problem of snake bite envenoming: the need for a global partnership" PLoS medicine, 3, e150 Hofmann H and Bon C (1987), "Blood coagulation induced by the venom of Bothrops atrox Identification, purification, and properties of two factor X activators", Biochemistry, 26, 780-787 Kashuba E, Bailey J, Allsup D and Cawkwell L (2013), "The kinin-kallikrein system: physiological roles, pathophysiology and its relationship to cancer biomarkers" Biomarkers: biochemical indicators of exposure, response, and susceptibility to chemicals, 18, 279-296 Khow O, Chanhome L, Omori-Satoh T, Puempunpanich S and Sitprija V (2002), "A hemorrhagin as a metalloprotease in the venom of Trimeresurus purpureomaculatus: purification and characterization" Toxicon: official journal of the International Society on Toxinology, 40, 455-461 Lê Đức Tâm, Nguyễn Thi Kê, Lê Văn Bé, Lê Văn Hiệp CS (2003), "Nghiên cứu thử nghiệm người huyết kháng nọc rắn hổ đất (Naja kaouthia), huyết kháng nọc rắn lục tre (Trimeresurus albolabris)", Tạp chí Y học dự phòng, tập XIII, số (63) Sunitha K, Hemshekhar M, Gaonkar S L, Sebastin Santhosh M, Suresh Kumar M, Basappa, et al (2011), "Neutralization of haemorrhagic activity of viper venoms by 1-(3dimethylaminopropyl)-1-(4-fluorophenyl)-3-oxo-1,3dihydroisobenzofuran-5-car bonitrile " Basic & clinical pharmacology & toxicology, 109, 292-299 Tan Nget Hong, Choy Sow Kuen, Chin Khon Min and Ponnudurai Gnanajothy (1994), "Cross-reactivity of monovalent and polyvalent Trimeresurus antivenoms with venoms from various species of Trimeresurus (lance-headed pit viper) snake" Toxicon: official journal of the International Society on Toxinology, 32, 849-853 Trinh Xuan Kiem et al, (2008), 8th IST Asia Pacific meeting on animal, plant and microbial toxins, biotoxins from nature to human deseases Hanoi & Halong Bay - Vietnam, In, 31, 58, 165 Ngày nhận báo: Ngày phản biện đánh giá báo: Ngày báo đăng: 21/01/2014 11/03/2014 20/03/2014 49 ... nguy gây tử vong làm tăng Xác định độc lực qua liều gây tử vong 50% số chuột thí nghiệm (LD50) nọc rắn lục đuôi đỏ Xác định thành phần gây độc rắn lục đỏ yếu tố ảnh hưởng Xác định liều gây tổn... chuột, xác định đường kính Abs280 vùng xuất huyết KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Độc lực nọc rắn lục đuôi đỏ Kết cho thấy độc tính nọc rắn lục 1.2 0.9 0.6 0.3 0 Đoạn 10 đuôi đỏ Việt Nam LD50 = 9,27µg /chuột. .. nọc gây độc thần kinh (neurotoxic) và tác động gây loét chuột loài rắn thuộc họ rắn lục (viperidae) có nọc gây Mục tiêu chuyên biệt độc hệ huyết mạch (hemotoxic) Huyết kháng nọc rắn lục (Trimeresurus