Trong dân gian lấu đỏ được sử dụng phổ biến để điều trị cảm, bạch hầu, kiết lỵ, sốt thương hàn, viêm amydal, viêm họng, thấp khớp, đau nhức xương, đau lưng… Nhằm khẳng định về tác dụng kháng viêm của cây lấu đỏ tác giả đã tiến hành thực hiện đề tài “Khảo sát tác dụng kháng viêm của cây Lấu đỏ (Psychotria rubra (Lour.) Poir.)” trên thực nghiệm”.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học KHẢO SÁT TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM CỦA CÂY LẤU ĐỎ (PSYCHOTRIA RUBRA (LOUR.) POIR.) Phạm Thị Hóa* TĨM TẮT Mục tiêu: Trong dân gian Lấu đỏ sử dụng phổ biến để điều trị cảm, bạch hầu, kiết lỵ, sốt thương hàn, viêm amydal, viêm họng, thấp khớp, đau nhức xương, đau lưng… Nhằm khẳng định tác dụng kháng viêm Lấu đỏ tiến hành thực đề tài “Khảo sát tác dụng kháng viêm Lấu đỏ (Psychotria rubra (Lour.) Poir.)” thực nghiệm” Đối tượng phương pháp: Dược liệu thân Lấu đỏ thu hái Tây Ninh chiết nước ngấm kiệt cồn 70% Chuột nhắt chủng Swiss albino.Thực hai mơ hình gây viêm: gây u hạt thực nghiệm cách cấy amiant gây phù chân chuột carragenin Kết quả: Cao nước cao cồn chiết xuất từ thân Lấu đỏ có tác dụng kháng viêm tốt Cao nước liều 14,4 g/kg, cao cồn liều 7,2 g/kg cho tác dụng tốt nhất, tương đương với diclofenac liều 10 mg/kg Kết luận: Lấu đỏ có tác dụng kháng viêm thực nghiệm Từ khóa: Psychotria rubra (Lour.) Poir., amiant, carragenin ABSTRACT STUDY ANTI-INFLAMMATORY EFFECT OF PSYCHOTRIA RUBRA (LOUR.) POIR.) ON EXPERIMENTAL ANIMALS Pham Thi Hoa* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No – 2014: 145 - 149 Objective: Lau đo (Psychotria rubra (Lour.) Poir.) is used in folk medicine for such as treatment of flu, sore amydal, pharyngytis, diarrhea, bleeding, wounds, pyodermas….To clarify anti-inflammation effect of Lau đỏ, we “study anti-inflammation effect of (Psychotria rubra (Lour.) Poir.) by experimental studies” Materials and methods: Lau đo (Psychotria rubra (Lour.) Poir.) is collected at Tay ninh province Extraction with water and with 70% alcohol Swiss Albino mice Granuloma was inducted by amiant and edema was by carragenan Results: Water extract and alcohol extract from the stem have good anti-inflammation effect Water extract (14,4 g/kg) and 70% alcohol extract (7,2 g/kg) for the best effect, equivalent to diclofenac (10 mg/kg) Conclusion: Lau đo (Psychotria rubra (Lour.) Poir.) have anti-inflammation effect by experimental studies Keywords: Psychotria rubra (Lour.) Poir., amiant, carragenan nhiên từ hạt Trong Lấu đỏ có chứa tanin ĐẶT VẤN ĐỀ 14,9%, dẫn xuất anthraquinon Ở Việt Nam, Lấu đỏ phân bố phổ biến hầu psychorubrin sesquiterpen lactone helenalin hết tỉnh từ Bắc vào Nam Hòa Bình, Lạng Lấu đỏ sử dụng phổ biến dân Sơn, Tây Ninh Cây thường mọc rừng thứ gian để điều trị cảm, bạch hầu, kiết lỵ, sốt sinh, bờ nương rẫy Ở vùng đồng Bắc thương hàn, viêm amydal, viêm họng, thấp Lấu đỏ mọc lẫn bụi quanh khớp, đau nhức xương, đau lưng (1,4) … Nhằm làng Lấu đỏ chịu bóng mát, xanh tốt gần khẳng định tác dụng kháng viêm Lấu quanh năm, hoa nhiều, tái sinh tự đỏ tiến hành thực đề tài “Khảo ∗ Khoa Y học cổ truyền- Đại học Y Dược Tp HCM Tác giả liên lạc:YThS Thị Hóa ĐT: 01268108097 Chuyên Đề HọcPhạm Cổ Truyền Email: pthihoa48@gmail.com 145 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 sát tác dụng kháng viêm dịch chiết từ thân Lấu đỏ (Psychotria rubra (Lour.) Poir., Rubiaceace) thực nghiệm” Dựa theo mơ hình gây u hạt thực nghiệm theo phương pháp Ducrot, Julou cộng (1963) Mục tiêu nghiên cứu - Một mẫu sợi amiant đường kính mặt cắt khoảng mm, có trọng lượng 20 ± mg vê tròn sấy tiệt khuẩn nhiệt độ 120ºC tủ sấy Chuột gây mê ether, cạo lông vùng lưng phía trên, dùng kéo phẫu thuật mắt bấm lỗ chếch sang bên, luồn kéo vào hướng đầu, mở rộng mũi kéo để tách kỹ da lưng khỏi cơ, cấy viên amian da Khâu vô trùng để nối liền chỗ mổ lưng - Khảo sát tác dụng kháng viêm mơ hình gây viêm thực nghiệm amiant - Khảo sát tác dụng kháng viêm mơ hình gây viêm thực nghiệm carragenin NGUYÊNLIỆU -PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Nguyên liệu Thân Lấu đỏ thu hái Tây ninh Mẫu xác định TS Bùi Mỹ Linh, Khoa Y học cổ truyền - Đại học Y Dược Tp HCM Dược liệu sau thu hái Tây Ninh phơi khô xay thành bột thô Dược liệu chiết hai phương pháp: chiết nước ngấm kiệt cồn 70% Chiết nước: - Lượng dược liệu sử dụng kg, sắc lần, lần với lít nước Dịch chiết thu đem cách thủy thành cao 1/1 (khối lượng/thể tích), ta thu lít cao nước Ngấm kiệt cồn 70%: - Lượng dược liệu sử dụng kg, dung môi sử dụng tích gấp 10 lần so với khối lượng dược liệu (10 lít) Dịch chiết cách thủy thành cao 1/1 (khối lượng/thể tích), ta thu lít cao cồn Động vật thí nghiệm: Chuột nhắt trắng phái (đực), nặng 18-22 g, chủng Swiss albino Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh cung cấp Amian, Carragenin (Sigma Ltd Co., USA) Dung dịch chống thấm Ornano imbidente (Ugo Basile, Italia) Diclofenac (Voltaren® 50 mg, Novartis Pharma) Phương pháp nghiên cứu Mơ hình gây u hạt thực nghiệm cách cấy amiant (3, 5) 146 - Mổ chuột dụng cụ tiệt khuẩn, trình mổ dụng cụ ngâm cồn 90% sát trùng vết mổ dung dịch cồn iod (Povidine) - Chuột chia ngẫu nhiên thành lô, lô - con: + Lô C (lô chứng): Không điều trị, cho uống nước cất + Lô ĐC (lô đối chứng): Uống diclofenac với liều 10 mg/kg trọng lượng chuột + Lô N1: Uống cao nước với liều 7,2 g/kg trọng lượng chuột + Lô N2: Uống cao nước với liều 14,4 g/kg trọng lượng chuột + Lô C1: Uống cao cồn với liều 7,2 g/kg trọng lượng chuột + Lô C2: Uống cao cồn với liều 14,4 g/kg trọng lượng chuột - Cho chuột uống 10 ngày, ngày lần vào định với thể tích 0,2 ml/10 g trọng lượng chuột Đến ngày thứ 11, giết chết chuột, bóc tách u hạt, cân tươi u hạt Sau cho u hạt vào tủ sấy 60 ºC 18 giờ, cân u hạt khô - Tác dụng ức chế tạo thành u hạt biểu thị tỉ lệ % giảm trọng lượng trung bình u hạt (đã trừ trọng lượng viên amiant) lơ uống thuốc so với lơ chứng Mơ hình gây viêm carragenin (5, 6) Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Thực theo mơ hình gây phù chân chuột carragenin Winter cộng (1962) - Đo thể tích chân chuột bình thường (V0) máy Plethysmometer Nhúng chân phải chuột vào dung dịch chống thấm đến khuỷu chân, nhấn giữ bàn đạp để cố định, ghi nhận thể tích máy, tiến hành đo lần lấy kết trung bình - Chuột gây viêm cách tiêm da gan bàn chân phải 0,025 ml hỗn dịch carragenin 1% (hỗn dịch carragenin 1% pha dung dịch nước muối sinh lý 0,9% chuẩn bị trước thử nghiệm để carragenin trương nở) Chuột sau gây viêm cho vào lồng có giá đỡ để tránh nhiễm trùng chân - Sau tiêm giờ, đo thể tích chân chuột (V3h) máy Plethysmometer Các chuột có chân sưng phù 50% so với bình thường chọn cho thí nghiệm chia ngẫu nhiên vào lô, chuột chia lô, lô 6-8 con: + Lô C (lô chứng): Không điều trị, cho uống nước cất + Lô ĐC (lô đối chứng): Uống diclofenac với liều 10 mg/kg trọng lượng chuột + Lô N1: Uống cao nước với liều 7,2 g/kg trọng lượng chuột + Lô N2: Uống cao nước với liều 14,4 g/kg trọng lượng chuột + Lô C1: Uống cao cồn với liều 7,2 g/kg trọng lượng chuột + Lô C2: Uống cao cồn với liều 14,4 g/kg trọng lượng chuột - Cho chuột uống ngày tiếp theo, ngày lần vào định với thể tích 0,2 ml/10 g trọng lượng chuột - Đo thể tích chân chuột ngày thử nghiệm (V1, V2, V3, V4, V5, V6) Đánh giá kết Độ tăng thể tích chân ∆V (%) chuột, gọi độ sưng phù, tính theo Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Nghiên cứu Y học công thức: ∆V = V t - V0 × 100 V0 Trong đó: V0: thể tích chân chuột trước gây viêm (đơn vị đo ml) Vt: thể tích chân chuột thời điểm sau gây viêm (đơn vị đo ml) Tác dụng kháng viêm thuốc đánh giá khả ức chế phản ứng phù (I%) biểu thị tỷ lệ % giảm mức độ tăng thể tích bàn chân chuột lô đối chứng lô thử so với mức độ tăng lơ carragenin, tính theo công thức: I% = ∆ V C % − ∆V t % ∆V C % Trong đó: + ∆Vc%: Trung bình độ tăng thể tích chân chuột lơ khơng điều trị + ∆Vt%: Trung bình độ tăng thể tích chân chuột lô uống thuốc Xử lý kết Dữ liệu trình bày dạng số trung bình ± SEM (standard error of mean – sai số chuẩn số trung bình) Sự khác biệt lơ phân tích phương pháp Kruskal – Wallis, sau Mann – Whitney – U test với phần mềm vi tính Minitab 16.1 P < 0,05 cho có ý nghĩa thống kê Biểu đồ SigmaPlot 11.0 vẽ phần mềm KẾT QUẢ Kết gây u hạt thực nghiệm cách cấy amian Kết so sánh khối lượng u hạt tươi lô trình bày Bảng Bảng Khối lượng u hạt tươi lô Lô n Lô C Mức giảm khối Khối lượng u hạt lượng u hạt tươi so tươi (mg) với lô chứng (%) 59,720 ± 3,560 147 Nghiên cứu Y học Lô n Lô ĐC Lô N1 Lô N2 Lô C1 Lô C2 8 7 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Mức giảm khối Khối lượng u hạt lượng u hạt tươi so tươi (mg) với lô chứng (%) 46,260 ± 3,280* 22,54* 46,690 ± 4,180* 21,82* 42,740 ± 5,300* 28,43* 42,800 ± 0,626* 28,33* 44,260 ± 0,473* 25,89* (*) P