Nghiên cứu bào chế và đánh giá độ hòa tan viên nén atorvastatin 10 mg

Đề tài được thực hiện với mục tiêu nghiên cứu công thức và quy trình bào chế viên nén atorvastatin 10 mg có độ giải phóng hoạt chất tương đương in vitro với viên đối chiếu. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ HÒA TAN VIÊN NÉN ATORVASTATIN 10 MG Võ Lê Ngọc Châu*, Nguyễn Thiện Hải* TĨM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu cơng thức quy trình bào chế viên nén atorvastatin 10 mg có độ giải phóng hoạt chất tương đương in vitro với viên đối chiếu Phương pháp nghiên cứu: Khảo sát tiêu lý độ giải phóng hoạt chất (GPHC) mẫu viên nén atorvastatin 10 mg thị trường làm tiêu chuẩn cho viên nghiên cứu Nghiên cứu cơng thức quy trình bào chế viên nén atorvastatin 10 mg phương pháp dập trực tiếp xát hạt ướt có độ GPHC tương đương in vitro với viên đối chiếu cách thay đổi loại, tỷ lệ, cách phối hợp tá dược siêu rã chất trợ tan Lượng atorvastatin chế phẩm môi trường thử nghiệm xác định quang phổ UV Kết quả: viên nén atorvastatin 10 mg điều chế phương pháp xát hạt ướt sử dụng crospovidon natri starch glycolat làm tá dược rã TT2 làm chất trợ tan có độ GPHC tương đương in vitro với viên đối chiếu Kết luận: Các kết thực nghiệm cho thấy điều chế viên nén atorvastatin 10 mg tương đương độ GPHC in vitro với viên đối chiếu, thuốc giảm lipid huyết sử dụng rộng rãi Từ khóa: atorvastatin, tương đương in vitro ABSTRACT FORMULATION AND EVALUATION OF DISSOLUTION PROFILE OF ATORVASTATIN 10 MG TABLETS Vo Le Ngoc Chau, Nguyen Thien Hai * Y Hoc TP Ho Chi Minh* Vol 15 - Supplement of No - 2011: 329 - 333 Objectives: The aim of present study was to prepare atorvastatin 10 mg tablets which is in vitro equivalent in dissolution profile to the reference drug Method: Evaluating the physical and chemical properties of marketed tablets to get standard for investigated tablets Direct compression or wet granulation was used to formulate and develop the tablet formulations with change in superdisintegrants and solubility agents Atorvastatin was measured by UV- spectrophotometry Results: Drug released from the formulation prepared by wet granulation using crospovidone, sodium starch glycolate as disintegrants and TT2 as solubility agent fitted to reference drug Conclusion: The present results provided evidence that atorvastatin 10 mg tablets which fitted to reference drug can be prepared and be used as effective lowering-lipid drug Keywords: atorvastatin, in vitro dissolution ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh lý tim mạch nguyên nhân gây tử vong hàng đầu giới Có nhiều yếu tố nguy dẫn đến bệnh tim mạch rối loạn lipid huyết, đặc biệt cholesterol máu cao coi yếu tố nguy quan trọng Trong nhóm thuốc điều trị rối loạn lipid huyết nhóm statin mà đặc biệt atorvastatin cho thấy nhiều ưu điểm việc phòng ngừa đột qụy nhồi máu tim nhờ * Bộ môn Công Nghiệp Dược, Khoa Dược – Đại học Y Dược TP.HCM Tác giả liên lạc: PGS TS Nguyễn Thiện Hải ĐT: 0905352679 Email: thienhai2002@yahoo.com Chuyên Đề Dược Khoa 329 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 khả làm giảm đáng kể cholesterol toàn phần LDL-cholesterol Tuy nhiên atorvastatin hoạt chất không tan nước, dễ bị phân hủy ánh sáng, ẩm, nhiệt độ, oxy khơng khí pH thấp, việc bào chế viên nén atorvastatin đạt độ ổn định khả giải phóng hoạt chất cao vấn đề khó khăn(1,3) Hiện nhu cầu sử dụng viên nén atorvastatin Việt Nam ngày cao giá thành chế phẩm nguyên gốc đắt, Dược Điển nước lại chưa có chuyên luận viên nén atorvastatin nên thiếu sở để đánh giá chế phẩm gốc (generic) sử dụng thị trường Mục tiêu đề tài đánh giá độ GPHC chế phẩm chứa atorvastatin 10 mg có thị trường nghiên cứu bào chế viên nén atorvastatin với giá thành thấp, đảm bảo chất lượng có độ GPHC tương đương với chế phẩm đối chiếu NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên vật liệu Năm mẫu viên nén atorvastatin 10 mg thu thập thị trường Atorvastatin calci (Ấn Độ), calci carbonat (Trung Quốc), avicel PH101, PH102 (Đài Loan), hóa chất cần thiết khác đạt tiêu chuẩn nhà sản xuất Trang thiết bị Máy trộn lập phương (Erweka Type KB 20 S – Germany), máy trộn chữ Z (Erweka Type LK5 – Germany), máy dập viên xoay tròn (Sunita Impex TMD-GSTD - India), máy đo độ hòa tan (Pharmatest PTW S3C – Germany), máy quang phổ UV-Vis (SHIMADZU UV 1061 – Japan) thiết bị cần thiết khác Khảo sát độ GPHC chế phẩm chứa atorvastatin 10 mg Thu thập mẫu, khảo sát tính chất lý độ GPHC Điều kiện tiến hành đo độ GPHC bao gồm: sử dụng cánh khuấy với tốc độ: 50 vòng/phút, thể tích mơi trường 500 900 ml, lấy mẫu thời điểm 5, 10, 20, 30, 45, 60 phút Định lượng đo UV Xây dựng tiêu chuẩn thử nghiệm độ hòa tan Xây dựng cơng thức quy trình bào chế viên atorvastatin 10 mg Xây dựng sàng lọc công thức dựa tiêu lý độ GPHC chế phẩm đối chiếu thu thập Phương pháp bào chế: dập trực tiếp xát hạt ướt Lựa chọn cơng thức quy trình có tiềm năng, có độ GPHC tương đương in vitro so với chế phẩm đối chiếu Nâng cấp cỡ lô Trên sở công thức nghiên cứu, tiến hành nâng cấp cỡ lô đánh giá kết dựa tiêu chuẩn độ hòa tan khảo sát KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Ảnh hưởng pH lên độ tan atorvastatin Dung dịch atorvastatin 20 µg/ml pH 1,2; 4,5 6,8 có đỉnh hấp thu bước sóng 241 nm, có tương quan tuyến tính nồng độ độ hấp thu atorvastatin khoảng nồng độ 0,625 – 20 µg/ml mơi trường pH 1,2; 4,5 6,8 Nồng độ bão hòa dung dịch atorvastatin pH 1,2; 4,5; 6,8 26,21; 109,05 662,62 µg/ml Như độ tan atorvastatin tăng dần theo pH Kết khảo chế phẩm chứa atorvastatin 10 mg thu thị trường Bảng Kết khảo sát tính chất lý mẫu thu thập Phương pháp nghiên cứu Chế Khối lượng TB phẩm (mg) (n=20) Khảo sát độ tan atorvastatin pH 1,2; 4,5 6,8 A-01 A-02 A-03 A-04 A-05 Tạo dung dịch atorvastatin bão hòa pH 1,2; 4,5; 6,8 Định lượng đo UV(4) 330 155,0 158,7 164,1 140,3 152,0 Độ cứng TB Độ rã TB (giây) (N) (n=10) (n=6) 55,5 46,2 73,4 42,3 78,8 80 180 200 50 380 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Thu thập mẫu atorvastatin 10 mg thị trường TP.HCM tiến hành mã hóa từ A-01 đến A-05 Kết khảo sát tính chất lý (Bảng 1) cho thấy có khác biệt mẫu thu thập khối lượng viên, độ cứng, thời gian rã Kết khảo sát độ GPHC (bảng bảng 3) chế phẩm cho thấy có khác biệt khả GPHC chế phẩm theo thời gian Độ GPHC tăng pH môi trường tăng, thể tốc độ mức độ phóng thích độ tan hoạt chất tăng dần theo pH Mẫu A-01 có tốc độ mức độ GPHC cao Trên thực tế chế phẩm thuốc gốc Sự khác biệt độ GPHC A-01 Nghiên cứu Y học mẫu khác thể rõ nét pH 1,2 thời điểm đầu (5, 10, 20, 30 phút); pH 4,5 6,8 khác biệt khơng lớn Vì chế phẩm viên nén khơng có bao tan ruột khác biệt độ GPHC pH 1,2 dẫn đến khác biệt sinh khả dụng hiệu điều trị Trên sở đó, chế phẩm A-01 lựa chọn làm chế phẩm đối chiếu để nghiên cứu công thức Điều kiện thử nghiệm độ GPHC lựa chọn để thiết lập sàng lọc công thức cho chế phẩm nghiên cứu sau: môi trường pH 1,2 thể tích 900 ml; tốc độ khuấy 50 vòng/phút Bảng Kết khảo sát độ GPHC chế phẩm tốc độ 50 vòng/phút, thể tích 500 ml mơi trường pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8 Thời gian (phút) 10 20 30 45 60 1,2 42,3 52,5 69,8 82,9 85,5 87,3 A-01 4,5 57,7 63,6 72,8 80,6 83,2 87,6 6,8 63,5 71,6 75,7 79,2 84,3 87,9 1,2 32,9 33,8 54,1 60,7 67,8 78,1 A-02 4,5 32,5 57,9 78,9 84 84,8 87,1 6,8 72,3 88,7 91,1 91,5 92,3 94,8 Độ GPHC (%) A-03 1,2 4,5 6,8 15,4 14,7 70,7 45,1 39,8 79,3 60,9 55,8 82,2 68,4 84 85,1 76,2 92,2 87,7 44,7 95,8 87,4 1,2 21,0 32,7 51,2 55,9 62,3 63,3 A-04 4,5 46,3 57,6 65,0 67,8 66,5 69,1 6,8 53,4 70,5 73,6 76,6 78,0 79,2 1,2 6,5 19,2 33,5 41,5 50,9 58,1 A-05 4,5 23,6 39,2 56,0 65,0 75,5 79,1 6,8 33,3 66,5 84,0 89,4 94,1 96,1 Bảng Kết khảo sát độ GPHC chế phẩm tốc độ 50 vòng/phút, thể tích 900 ml môi trường pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8 Thời gian (Phút) 10 20 30 45 60 1,2 59,9 75,9 87,4 90,8 93,7 94,5 A-01 4,5 70,6 87,4 94,3 94,8 95,0 96,2 6,8 87,9 97,4 98,7 100 100 102 1,2 28,5 49,5 67,5 77,9 86,6 90,6 A-02 4,5 49,1 87,0 100 102 102 102 6,8 85,0 98,0 99,9 100 100 101 Độ GPHC (%) A-03 1,2 4,5 6,8 21,6 65,6 78,4 36,8 89,0 95,3 66,2 94,7 97,5 81,1 96,0 98,4 86,2 97,8 99,5 91,4 98,2 99,4 Xây dựng cơng thức viên nén atorvastatin 10 mg quy trình điều chế Phương pháp điều chế: xát hạt ướt, dập trực tiếp Yêu cầu độ GPHC viên nghiên cứu tương đương in vitro với A-01 thông qua hệ số f2 (bảng bảng 6) Chuyên Đề Dược Khoa 1,2 39,9 53,8 64,6 62,0 67,5 71,0 A-04 4,5 65,6 89,0 94,7 96,0 97,8 98,2 6,8 70,3 83,2 90,0 90,8 91,8 91,8 1,2 15,4 19,9 39,9 49,3 58,5 67,2 A-05 4,5 29,6 53,4 75,9 86,3 93,6 96,8 6,8 44,2 77,8 91,7 95,5 97,7 97,1 Bảng Thành phần kết kiểm nghiệm CTA, CTB, CTC, CTD, CTE Thành phần CTA CTB CTC CTD CTE (mg) (mg) (mg) (mg) (mg) Atorvastatin Ca.3H2O 11 11 11 11 11 Calci carbonat 36 36 36 36 36 Lactose 65 64,6 63,6 62,6 62,6 Avicel PH 101/102 30 30 30 30 30 Povidon K30 (PVP) 3 3 TT1(*) 0,4 0,4 0,4 0,4 TT2 0,4 331 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Thành phần CTA CTB CTC CTD CTE (mg) (mg) (mg) (mg) (mg) 4 Natri croscarmellose Natri starch glycolat (DST) Crosspovidon Aerosil 0,4 Magnesi stearat 0,6 0,6 Nước cất vừa đủ Khối lượng viên 150 150 Thời gian rã (s) 145 30 f2 (900 ml) 34,75 0,4 0,4 0,4 0,6 0,6 0,6 vđ vđ vđ 150 150 150 125 80 60 29,90 41,71 36,04 Lơ 1000 viên Dập viên chày tròn, đường kính mm, độ cứng 50 – 70 N (*)TT: Chất trợ tan Do atorvastatin hoạt chất không bền dễ chuyển đổi thành dạng lacton khơng có hoạt tính pH thấp, cơng thức sử dụng CaCO3 làm chất ổn định tạo vi môi trường trung tính đến kiềm(2,5) CTA CTB công thức thực đầu tiên, sử dụng phương pháp xát hạt ướt CTA dập trực tiếp CTB CTB khó dập viên, tính chất lý viên không đạt yêu cầu Nghiên cứu cải thiện thêm khơng đạt u cầu phương pháp dập trực tiếp không phù hợp CTA đạt tiêu lý độ cứng, độ mài mòn, độ đồng khối lượng nên tiếp tục cải thiện qua công thức C, D E CTA có số f2 chưa đạt yêu cầu độ hòa tan thấp đáng kể so với viên đối chiếu thời điểm đầu Để cải thiện độ hòa tan giảm thời gian rã cách tăng lượng tá dược rã natri crosscarmellose CTA lên mg chia thành hai phần rã ngoại (3 mg) rã nội (2 mg) – CTC CTD CTE sử dụng tá dược rã DST Crospovidon Kết cho thấy CTD CTE có thời gian rã giảm số f2 tăng đáng kể so với CTA, CTD có số f2 lớn nên tiếp tục lựa chọn để cải thiện CT1, CT2, CT3, CT4, CT5 Ở CT1, CT2 CT3 tiếp tục sử dụng tá dược DST làm tá dược rã ngoại (trên sở CTD) sử dụng thêm crosspovidon làm tá dược rã nội thay đổi chất trợ tan sử dụng Kết từ bảng cho thấy thời gian rã viên tăng số f2 cho thấy cải thiện đáng kể độ hòa tan CT2 có số f2 lớn 332 so với viên đối chiếu, CT2 có độ hòa tan thấp thời điểm đầu để cải thiện độ hòa tan cần làm giảm thời gian rã viên cách sử dụng avicel pH102 tá dược rã ngoại CT4 CT5 tiếp tục sử dụng chất TT2 thêm avicel PH 102 sau sửa hạt Bảng Thành phần kết kiểm nghiệm CT1, CT2, CT3, CT4, CT5 Thành phần CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 (mg) (mg) (mg) (mg) (mg) 11 11 11 11 11 36 36 36 30 30 59,6 57 57 56 56 30 30 30 28 28 3 3 3 3 3 0,4 3 1,5 6 6 10,5 Atorvastatin Ca.3H2O Calci carbonat Lactose Avicel PH 101/102 Crosspovidon Povidon K30 (PVP) TT1 TT2 TT3 Natri starch glycolat Avicel PH 102 (trộn sau xát hạt) Aerosil 0,4 0,4 0,4 Magnesi stearat 0,6 0,6 0,6 Nước cất vđ vđ vđ Khối lượng viên 150 150 150 Thời gian rã (s) 172 263 271 f2 (900 ml) 46,88 54,09 37,69 0,4 0,6 vđ 150 182 77,58 0,4 0,6 Vđ 150 98 89,07 Lơ 1000 viên Dập viên chày tròn, đường kính mm, độ cứng 50 – 70 N (*)TT: Chất trợ tan Kết cho thấy thời gian rã viên giảm số f2 tăng đáng kể so với CT2 CT5 có số f2 lớn nhất, lớn 80 tiếp tục thử nghiệm điều kiện thử độ hòa tan mơi trường pH khác để đánh giá tương đương in vitro với viên đối chiếu Bảng Hệ số tương đồng f2 CT5 viên đối chiếu pH 1,2; 4,5; 6,8; thể tích 900 ml 500 ml, tốc độ khuấy 50 vòng/phút pH Thể tích (ml) f2 1,2 4,5 900 500 900 500 89,07 53,79 * 60,79 6,8 900 500 * 71,72 (*): điều kiện viên đối chiếu viên thử nghiệm có độ GPHC sau 15 phút lớn 85% không cần phải xét hệ số tương đồng f2 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Ở tất điều kiện số f2 lớn 50 độ lệch chuẩn thời điểm đáp ứng yêu cầu kết luận CT5 chế phẩm đối chiếu tương đương độ GPHC in vitro Vậy CT5 công thức phù hợp để thực nâng cấp cỡ lô Nghiên cứu Y học Nâng cấp cỡ lô nghiên cứu từ 1000 viên lên 6000 viên dựa CT5 tiến hành lô (C1, C2, C3) Kết GPHC (bảng 8) cho thấy lô đạt tiêu chuẩn sở tương đương độ GPHC với chế phẩm đối chiếu Vậy trình nâng cấp cỡ lơ thành cơng, có triển vọng áp dụng quy mô lớn sau Nâng cấp cỡ lô Bảng Kết GPHC lô nâng cấp ba môi trường pH 1,2; 4,5 6,8, thể tích 900 ml, tốc độ 50 vòng/ phút hệ số tương đồng f2 so với viên A-01 Thời gian (phút) 10 20 30 45 60 f2 C1 0,00 50,13 73,28 85,60 89,90 91,41 91,07 66,66 pH 1,2 C2 0,00 47,53 71,72 84,39 87,34 90,73 91,08 60,99 C3 0,00 53,26 75,09 88,72 90,23 92,96 93,25 75,96 C1 0,00 62,25 82,28 91,63 94,17 95,29 96,18 * % GPHC (n = 6) pH 4,5 C2 0,00 64,71 84,15 92,65 94,59 95,12 95,18 * C3 0,00 63,28 86,24 94,85 96,75 97,08 97,74 * C1 0,00 80,78 88,19 94,36 95,19 96,25 96,36 * (*): điều kiện viên đối chiếu viên thử nghiệm có độ GPHC sau 15 phút lớn 85% không cần phải xét hệ số tương đồng f2 TÀI LIỆU THAM KHẢO KẾT LUẬN Viên nén atorvastatin 10 mg điều chế thành cơng có độ GPHC tương đương in vitro với viên đối chiếu Kết cho thấy bào chế viên nén atorvasatatin 10 mg với giá thành thấp điều kiện Việt Nam để áp dụng điều trị rối loạn lipid huyết phòng ngừa bệnh tim mạch Chuyên Đề Dược Khoa pH 6,8 C2 0,00 79,87 86,33 93,67 94,57 95,35 95,16 * C3 0,00 81,42 89,52 95,85 97,55 97,19 97,54 * Dlugatch, Dafna; Doani, Zvika (2007), Atorvastatin formulation, United States Patent Application, 20070116758 Holm, Per (Vanlose, DK) (2007), Stabilized Atorvastatin, United States Patent Application, 20070190138 Huang, Cai Gu; Huang, Hui Min He (2008), Stable pharmaceutical formulation comprising atorvastatin calcium, United States Patent Application, 20080038332 Nagaraju P., Pasumarthy, Gopal NV, Srinivas VDN and Padma SVN (2008), Spectrophotometric Methods for the Determination of Atorvastatin Calcium in Pure and It’s Pharmaceutical Dosage Forms, Asian J Research Chem 1(2), pp.64-66 Penhasi, Adel; Attali, Yaakov Stephane (2009), Stable Atorvastatin formulations, United States Patent Application, 20090208539 333 ... giá độ GPHC chế phẩm chứa atorvastatin 10 mg có thị trường nghiên cứu bào chế viên nén atorvastatin với giá thành thấp, đảm bảo chất lượng có độ GPHC tương đương với chế phẩm đối chiếu NGUYÊN... lô Trên sở công thức nghiên cứu, tiến hành nâng cấp cỡ lô đánh giá kết dựa tiêu chuẩn độ hòa tan khảo sát KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Ảnh hưởng pH lên độ tan atorvastatin Dung dịch atorvastatin 20 µg/ml... nhiệt độ, oxy khơng khí pH thấp, việc bào chế viên nén atorvastatin đạt độ ổn định khả giải phóng hoạt chất cao vấn đề khó khăn(1,3) Hiện nhu cầu sử dụng viên nén atorvastatin Việt Nam ngày cao giá