Mục tiêu nghiên cứu cả bài viết nhằm xác định giá trị của xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết thanh trong chẩn đoán nhược cơ. Kết quả nghiên cứu cho thấy xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết thanh có giá trị cao trong chẩn đoán xác định bệnh nhược cơ.
Trang 1ĐÁNH GIÁ VAI TRÒ CỦA XÉT NGHIỆM NỒNG ĐỘ
TỰ KHÁNG THỂ KHÁNG THỤ CẢM THỂ ACETYLCHOLIN
TRONG CHẨN ĐOÁN NHƯỢC CƠ
Phan Thanh Hiếu*; Phan Việt Nga*; Nhữ Đình Sơn*
Nguyễn Giang Nam*; Đỗ Khắc Đại**
TÓM TẮT
Mục tiêu: xác định giá trị của xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin
huyết thanh trong chẩn đoán nhược cơ (NC) Đối tượng và phương pháp: 92 bệnh nhân (BN)
NC (61 nữ và 31 nam, tuổi trung bình 44,96 ± 15,74) và 30 đối tượng làm nhóm chứng Thực
hiện xét nghiệm tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR Ab) bằng phương pháp
ELISA Kết quả: nồng độ trung bình AChR Ab huyết thanh 32,67 nmol/l và dương tính ở 91,3%
BN (nhóm chứng: 0,37 nmol/l) Xét nghiệm có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu và giá trị tiên đoán
dương 100%, giá trị tiên đoán âm 78,94% Không có mối liên hệ giữa nồng độ AChR Ab huyết
thanh với tuổi và giới ở nhóm nghiên cứu Kết luận: xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết thanh
có giá trị cao trong chẩn đoán xác định bệnh NC
* Từ khóa: Nhược cơ; Kháng thể kháng thụ thể acetylcholin; ELISA.
Assessing the Role of Concentration of Acetylcholine Receptor
Autoantibodies Testing in Diagnosis of Myasthenia Gravis
Summary
Objectives: Determine the value of tested concentrations of the serum antibodies to acetylcholine
receptors in diagnosis of myasthenia gravis Subjects and methods: 92 patients with myasthenia
gravis (61 females and 31 males) with a mean age of 44.96 ± 15.74 and 30 subjects as
controls Antibody acetylcholine receptor (AChR Ab) testing is performed by ELISA method
Results: The concentration of the serum AChR Ab average value of 32.67 nmol/l and positive in
91.3% of patients (control group: 0.37 nmol/l) The test had a sensitivity of 91.30%, specificity
and positive predictive value of 100%, negative predictive value was 78.94% No association
between serum concentrations of ACHR Ab with age and gender in the study group Conclusion:
AChR Ab test concentration had a high value in the determined diagnosis of myasthenia
* Key words: Myasthenia gravis; Acetylcholine receptor antibody; ELISA
ĐẶT VẤN ĐỀ
Nhược cơ (Myasthenia gravis) là bệnh
tự miễn mắc phải liên quan đến tổn
thương thụ cảm thể acetylcholin ở
synap thần kinh - cơ Trước đây, chẩn đoán NC chủ yếu dựa vào lâm sàng, test điện thần kinh và test điều trị thử Cùng với sự phát triển của kỹ thuật miễn dịch,
* Bệnh viện Quân y 103
Người phản hồi (Corresponding): Phan Thanh Hiếu (drphan660@gmail.com)
Ngày nhận bài: 30/01/2015; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 05/02/2015
Ngày bài báo được đăng: 26/02/2015
Trang 2nhiều tác giả trên thế giới đã tìm ra kháng
thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR
Ab) có vai trò quan trọng trong bệnh sinh
bệnh NC Nhiều tác giả coi xét nghiệm
định lượng AChR Ab là “tiêu chuẩn vàng”
để chẩn đoán xác định bệnh NC Ở Việt
Nam, chưa có nhiều báo cáo về kỹ thuật
này Vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên
cứu này nhằm: Xác định giá trị của xét
nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm
thể acetylcholin huyết thanh trong chẩn
đoán NC
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU
1 Đối tượng nghiên cứu
- Nhóm bệnh: 92 BN được chẩn đoán
NC điều trị tại Khoa Nội Thần kinh, Bệnh
viện Quân y 103 từ tháng 10 - 2010 đến
04 - 2014 theo tiêu chuẩn chẩn đoán của
Klaus V Toyka, Ralf Gold (2004) [3] Loại
trừ:
+ Bệnh NC kết hợp với tổn thương dây
thần kinh
+ Các hội chứng NC khác
- Nhóm chứng: 30 người khỏe mạnh,
là những người tình nguyện hiến máu
nhân đạo, tự nguyện cho máu làm xét
nghiệm định lượng nồng độ AChR Ab
2 Phương pháp nghiên cứu
Tiến cứu, cắt ngang, mô tả có đối
chứng
- Khám, chọn BN theo tiêu chuẩn
nghiên cứu BN nghiên cứu được khám
lâm sàng và làm các test chẩn đoán,
thống kê theo mẫu bệnh án nghiên cứu
thống nhất
- Xét nghiệm định lượng nồng độ AChR
Ab theo phương pháp xét nghiệm miễn
dịch liên kết enzym (Enzyme-linked immunosorbent assays - ELISA) biến thể cạnh tranh [4]
- Lấy 3 ml máu của BN cho vào ống xét nghiệm không có chất chống đông, chuyển đến Khoa Huyết học, Bệnh viện Quân y 103 để tách huyết thanh Bảo quản mẫu và xét nghiệm xác định nồng
độ AChR Ab tại Labo Miễn dịch, Học viện Quân y Đọc kết quả bằng máy đo mật độ quang DTX 880 ở bước sóng 450 nm Tính toán kết quả của các mẫu xét nghiệm theo đường chuẩn xây dựng dựa trên 5 điểm chuẩn là 0,2; 0,5; 1; 6,5 và 20 nmol/l
- Phân tích kết quả:
+ Kết quả dương tính khi nồng độ AChAb ≥ X chứng âm ± 2 SD (chứng âm lấy theo khuyến cáo của nhà sản xuất bộ kít: < 0,45 nmol)
+ So sánh kết quả xét nghiệm và nồng
độ trung bình của AChR Ab giữa nhóm bệnh và nhóm chứng
* Hóa chất, vật liệu:
- Bộ kít ELISA định lượng AChR Ab (Hãng DRG, Mỹ) (02 bộ)
- Bảo quản mẫu huyết thanh của BN
NC và người khỏe mạnh ở nhiệt độ -800C đến ngày xét nghiệm
- Máy đo mật độ quang (đọc ELISA) DTX 880 (Hãng BCE, Mỹ)
- Hóa chất, dụng cụ, vật tư tiêu hao đạt tiêu chuẩn phân tích do Labo Xét nghiệm Miễn dịch, Học viện Quân y cung cấp
* Xử lý số liệu: dựa vào bảng 2x2, tính
độ nhạy, độ đặc hiệu, giá trị tiên đoán dương, giá trị tiên đoán âm trong chẩn đoán NC
Trang 3KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
1 Đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu
Nhóm bệnh gồm 61 nữ và 31 nam (tỷ lệ nữ/nam = 1,96/1), tuổi trung bình 44,96 ± 15,74, trong đó tuổi trung bình của nam 47,74 ± 20,48, của nữ 43,54 ± 12,29
Nhóm chứng gồm 18 nữ và 12 nam (tỷ lệ nữ/nam = 1,5/1), tuổi trung bình 20,53 ± 1,04
2 Nồng độ AChR Ab của nhóm bệnh và nhóm chứng
Bảng 1: Đặc điểm nồng độ AChR Ab huyết thanh nhóm bệnh và nhóm chứng
Nồng độ trung bình của nhóm bệnh cao hơn nhóm chứng rất nhiều, sự khác biệt có
ý nghĩa thống kê (p < 0,001) Ngưỡng chẩn đoán ≥ 0,52 nmol/l
Bảng 2: Phân bố nồng độ AChR Ab theo giới của nhóm bệnh (n = 92)
KẾT QUẢ
GIỚI
NỒNG ĐỘ TRUNG BÌNH
(nmol/l)
p
> 0,05
Nồng độ trung bình và tỷ lệ dương tính của 2 giới gần tương đương, sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05)
Bảng 3: Phân bố nồng độ AChR Ab theo nhóm tuổi của nhóm bệnh (n = 92)
(nmol/l)
XÉT NGHIỆM DƯƠNG TÍNH
p
> 0,05
Sự khác biệt về nồng độ tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết thanh giữa các nhóm tuổi không có ý nghĩa thống kê
Trang 4Bảng 4: Giá trị chẩn đoán của xét nghiệm AchR Ab huyết thanh của nhóm nghiên
cứu (bảng 2x2)
ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
KẾT QUẢ
Qua bảng 2x2, tính được giá trị của xét nghiệm nồng độ AChR Ab trong chẩn đoán
NC có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu 100%, giá trị tiên đoán dương 100%, giá trị tiên đoán âm 78,94%, không có trường hợp nào dương tính giả
BµN LU ẬN
1 Đặc điểm chung của nhóm nghiên
cứu
Nhóm nghiên cứu có tỷ lệ nữ nhiều
hơn nam, trong khi tuổi mắc bệnh trung
bình của nam cao hơn nữ, điều này phù
hợp với y văn và các nghiên cứu trong và
ngoài nước về đặc điểm của bệnh NC
Ngoài tiêu chuẩn chọn như trên, chúng tôi
còn loại trừ BN bị kết hợp các bệnh tự
miễn khác như viêm khớp dạng thấp,
bệnh hệ thống Chọn nhóm chứng là
những người hiến máu tình nguyện, đã
được xét nghiệm sàng lọc đảm bảo đủ
tiêu chuẩn hiến máu và tương đồng về giới
BN ở nhóm chứng có tuổi đời thấp hơn
nhóm bệnh Tuy nhiên, nồng độ AChR Ab
không liên quan tới tuổi nên mặc dù 2
nhóm có độ tuổi không tương đồng vẫn cho
kết quả khách quan (bảng 3) Lindstrom JM
(1976) cho rằng nồng độ AChR Ab không
liên quan đến tuổi và giới [4]
2 Nồng độ AChR Ab huyết thanh ở
nhóm nghiên cứu
Nhược cơ là bệnh tự miễn, việc xuất
hiện một tự kháng thể đã được nhiều tác
giả khẳng định, đó là kháng thể kháng thụ
cảm thể acetylcholin (AChR Ab) Nhiều
nghiên cứu trong và ngoài nước xác định nồng độ kháng thể này tăng cao có ý nghĩa
so với nhóm chứng Nồng độ AChR Ab trung bình trong nghiên cứu của chúng tôi
là 32,67 nmol/l, tỷ lệ dương tính 91,3% so với nhóm chứng, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê Kết quả này tương đương với nhiều nghiên cứu trên thế giới
Về giá trị của xét nghiệm AChR Ab trong chẩn đoán NC: hầu hết các tác giả đều cho rằng đây là một xét nghiệm có giá trị chẩn đoán xác định NC với tỷ lệ dương tính cao Angela Vincen và CS (2003) nghiên cứu 153 BN thấy tỷ lệ xét nghiệm dương tính là 85% [2] Sidra Auragzeb và
CS (2009) gặp 100% BN dương tính và cho rằng đây là tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán NC [5] Chúng tôi tính được giá trị của xét nghiệm nồng độ AChR Ab trong chẩn đoán NC, không có trường hợp nào
dương tính giả (bảng 4) Annapurni
Jayam và CS (2012) cho rằng xét nghiệm AChR Ab có vai trò chẩn đoán hữu hiệu, tỷ
lệ dương tính giả rất thấp [3]
Trang 5Tóm lại, xét nghiệm nồng độ AChR Ab
huyết thanh là một xét nghiệm có giá trị
chẩn đoán NC với độ nhạy và độ đặc hiệu
cao Cần có nghiên cứu tiếp theo với số
lượng lớn để khẳng định vai trò của phương
pháp trong chẩn đoán xác định NC
KÕt luËn
Nghiên cứu nồng độ AChR Ab của 92
BN NC có tuổi trung bình 44,96 ± 15,74
và 30 đối tượng làm nhóm chứng, chúng
tôi rút ra một số kết luận:
- Nồng độ trung bình AChR Ab của
nhóm bệnh: 32,67 ± 20,18 nmol/l (ngưỡng
chẩn đoán dương tính ≥ 0,52 nmol/l) với
tỷ lệ dương tính 91,30% Nồng độ trung
bình của nhóm chứng 0,37 ± 0,075
nmol/l, không có trường hợp nào dương
tính Không có mối liên hệ giữa nồng độ
AChR Ab huyết thanh với tuổi và giới
- Xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết
thanh có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu và
giá trị tiên đoán dương: 100%, giá trị tiên
đoán âm: 78,94%, không có trường hợp nào dương tính giả
Tµi liÖu tham kh¶o
1 Klaus V Toyka, Ralf Gold Bệnh NC Thần kinh học lâm sàng (Chủ biên: Daniel D Trương, Lê Đức Hinh, Nguyễn Thi Hùng, Trần Công Thắng dịch) Nhà xuất bản Y học TP HCM 2004, tr.614-629
2 Angela Vincent, Mc Convill J et al
Antibodies in myasthenia gravis and related disorder Ann N Y Acad Sci 2003,
pp.998-1324
3 Annapurni Jayam Trouth et al Myasthenia
gravis: A review autoimmune disease 2012 http:dx.doi.org/10.1155/2012/874680
4 Lindstrom JM et al Antibody to
acetylcholine receptor in myasthenia gravis prevalen, clinical correlates and diagnosis value Neurology 1976, pp.1054-1059.
5 Sidra Auragzeb Relationship between
anti - acetylcholine receptor antibody titres and severty of myasthenia gravis 2009 www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19438131.