Đánh giá vai trò của xét nghiệm nồng độ tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin trong chẩn đoán nhược cơ

Mục tiêu nghiên cứu cả bài viết nhằm xác định giá trị của xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết thanh trong chẩn đoán nhược cơ. Kết quả nghiên cứu cho thấy xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết thanh có giá trị cao trong chẩn đoán xác định bệnh nhược cơ.

TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 ĐÁNH GIÁ VAI TRÒ CỦA XÉT NGHIỆM NỒNG ĐỘ TỰ KHÁNG THỂ KHÁNG THỤ CẢM THỂ ACETYLCHOLIN TRONG CHẨN ĐOÁN NHƢỢC CƠ Phan Thanh Hiếu*; Phan Việt Nga*; Nhữ Đình Sơn* Nguyễn Giang Nam*; Đỗ Khắc Đại** TÓM TẮT Mục tiêu: xác định giá trị xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết chẩn đoán nhƣợc (NC) Đối tượng phương pháp: 92 bệnh nhân (BN) NC (61 nữ 31 nam, tuổi trung bình 44,96 ± 15,74) 30 đối tƣợng làm nhóm chứng Thực xét nghiệm tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR Ab) phƣơng pháp ELISA Kết quả: nồng độ trung bình AChR Ab huyết 32,67 nmol/l dƣơng tính 91,3% BN (nhóm chứng: 0,37 nmol/l) Xét nghiệm có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu giá trị tiên đoán dƣơng 100%, giá trị tiên đốn âm 78,94% Khơng có mối liên hệ nồng độ AChR Ab huyết với tuổi giới nhóm nghiên cứu Kết luận: xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết có giá trị cao chẩn đốn xác định bệnh NC * Từ khóa: Nhƣợc cơ; Kháng thể kháng thụ thể acetylcholin; ELISA Assessing the Role of Concentration of Acetylcholine Receptor Autoantibodies Testing in Diagnosis of Myasthenia Gravis Summary Objectives: Determine the value of tested concentrations of the serum antibodies to acetylcholine receptors in diagnosis of myasthenia gravis Subjects and methods: 92 patients with myasthenia gravis (61 females and 31 males) with a mean age of 44.96 ± 15.74 and 30 subjects as controls Antibody acetylcholine receptor (AChR Ab) testing is performed by ELISA method Results: The concentration of the serum AChR Ab average value of 32.67 nmol/l and positive in 91.3% of patients (control group: 0.37 nmol/l) The test had a sensitivity of 91.30%, specificity and positive predictive value of 100%, negative predictive value was 78.94% No association between serum concentrations of ACHR Ab with age and gender in the study group Conclusion: AChR Ab test concentration had a high value in the determined diagnosis of myasthenia * Key words: Myasthenia gravis; Acetylcholine receptor antibody; ELISA ĐẶT VẤN ĐỀ Nhƣợc (Myasthenia gravis) bệnh tự miễn mắc phải liên quan đến tổn t hƣ ơng t hụ cảm t hể acet ylc hol in synap thần kinh - Trƣớc đây, chẩn đoán NC chủ yếu dựa vào lâm sàng, test điện thần kinh test điều trị thử Cùng với phát triển kỹ thuật miễn dịch, * Bệnh viện Quân y 103 Người phản hồi (Corresponding): Phan Thanh Hiếu (drphan660@gmail.com) Ngày nhận bài: 30/01/2015; Ngày phản biện đánh giá báo: 05/02/2015 Ngày báo đăng: 26/02/2015 109 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 nhiều tác giả giới tìm kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR Ab) có vai trò quan trọng bệnh sinh bệnh NC Nhiều tác giả coi xét nghiệm định lƣợng AChR Ab “tiêu chuẩn vàng” để chẩn đoán xác định bệnh NC Ở Việt Nam, chƣa có nhiều báo cáo kỹ thuật Vì vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu nhằm: Xác định giá trị xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết chẩn đoán NC ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu - Nhóm bệnh: 92 BN đƣợc chẩn đoán NC điều trị Khoa Nội Thần kinh, Bệnh viện Quân y 103 từ tháng 10 - 2010 đến 04 - 2014 theo tiêu chuẩn chẩn đoán Klaus V Toyka, Ralf Gold (2004) [3] Loại trừ: + Bệnh NC kết hợp với tổn thƣơng dây thần kinh + Các hội chứng NC khác dịch liên kết enzym (Enzyme-linked immunosorbent assays - ELISA) biến thể cạnh tranh [4] - Lấy ml máu BN cho vào ống xét nghiệm khơng có chất chống đơng, chuyển đến Khoa Huyết học, Bệnh viện Quân y 103 để tách huyết Bảo quản mẫu xét nghiệm xác định nồng độ AChR Ab Labo Miễn dịch, Học viện Quân y Đọc kết máy đo mật độ quang DTX 880 bƣớc sóng 450 nm Tính tốn kết mẫu xét nghiệm theo đƣờng chuẩn xây dựng dựa điểm chuẩn 0,2; 0,5; 1; 6,5 20 nmol/l - Phân tích kết quả: + Kết dƣơng tính nồng độ AChAb ≥ X chứng âm ± SD (chứng âm lấy theo khuyến cáo nhà sản xuất kít: < 0,45 nmol) + So sánh kết xét nghiệm nồng độ trung bình AChR Ab nhóm bệnh nhóm chứng * Hóa chất, vật liệu: - Nhóm chứng: 30 ngƣời khỏe mạnh, ngƣời tình nguyện hiến máu nhân đạo, tự nguyện cho máu làm xét nghiệm định lƣợng nồng độ AChR Ab Phƣơng pháp nghiên cứu - Bộ kít ELISA định lƣợng AChR Ab (Hãng DRG, Mỹ) (02 bộ) - Bảo quản mẫu huyết BN NC ngƣời khỏe mạnh nhiệt độ -800C đến ngày xét nghiệm Tiến cứu, cắt ngang, mô tả có đối chứng - Máy đo mật độ quang (đọc ELISA) DTX 880 (Hãng BCE, Mỹ) - Khám, chọn BN theo nghiên cứu BN nghiên cứu lâm sàng làm test thống kê theo mẫu bệnh án thống - Hóa chất, dụng cụ, vật tƣ tiêu hao đạt tiêu chuẩn phân tích Labo Xét nghiệm Miễn dịch, Học viện Quân y cung cấp tiêu chuẩn đƣợc khám chẩn đoán, nghiên cứu - Xét nghiệm định lƣợng nồng độ AChR Ab theo phƣơng pháp xét nghiệm miễn 110 * Xử lý số liệu: dựa vào bảng 2x2, tính độ nhạy, độ đặc hiệu, giá trị tiên đốn dƣơng, giá trị tiên đoán âm chẩn đoán NC TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặc điểm chung đối tƣợng nghiên cứu Nhóm bệnh gồm 61 nữ 31 nam (tỷ lệ nữ/nam = 1,96/1), tuổi trung bình 44,96 ± 15,74, tuổi trung bình nam 47,74 ± 20,48, nữ 43,54 ± 12,29 Nhóm chứng gồm 18 nữ 12 nam (tỷ lệ nữ/nam = 1,5/1), tuổi trung bình 20,53 ± 1,04 Nồng độ AChR Ab nhóm bệnh nhóm chứng Bảng 1: Đặc điểm nồng độ AChR Ab huyết nhóm bệnh nhóm chứng DANH MỤC NHĨM BỆNH NHĨM CHỨNG Nồng độ trung bình (nmol/l) 32,67 0,37 Độ lệch chuẩn 20,18 0,075 92 30 Số quan sát p < 0,001 Nồng độ trung bình nhóm bệnh cao nhóm chứng nhiều, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,001) Ngƣỡng chẩn đoán ≥ 0,52 nmol/l Bảng 2: Phân bố nồng độ AChR Ab theo giới nhóm bệnh (n = 92) KẾT QUẢ NỒNG ĐỘ TRUNG BÌNH DƢƠNG TÍNH ÂM TÍNH (nmol/l) n % n % Nam (n = 31) 29,26 29 93,54 6,45 Nữ (n = 61 ) 34,39 55 90,16 9,83 Tổng 32,67 84 91,30 8,7 GIỚI p > 0,05 Nồng độ trung bình tỷ lệ dƣơng tính giới gần tƣơng đƣơng, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Bảng 3: Phân bố nồng độ AChR Ab theo nhóm tuổi nhóm bệnh (n = 92) NHĨM TUỔI NỒNG ĐỘ TRUNG BÌNH (nmol/l) XÉT NGHIỆM DƢƠNG TÍNH n % < 20 (n = 5) 21,23 60,00 20 - 29 (n = 8) 40,03 87,50 30 - 39 (n = 26) 40,66 26 100 40 - 49 (n = 21) 32,58 19 90,47 50 - 59 (n = 11) 27,14 11 100 60 - 69 (n = 11) 24,14 10 90,9 ≥ 70 (n = 10) 27,30 80,00 Tổng số 32,67 84 91,30 p > 0,05 Sự khác biệt nồng độ tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết nhóm tuổi khơng có ý nghĩa thống kê 111 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 Bảng 4: Giá trị chẩn đoán xét nghiệm AchR Ab huyết nhóm nghiên cứu (bảng 2x2) ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ NHÓM BỆNH (n = 92) NHÓM CHỨNG (n = 30) n % n % Dƣơng tính 84 91,30 0 Âm tính 8,70 30 100 Tổng 92 100 30 100 Qua bảng 2x2, tính đƣợc giá trị xét nghiệm nồng độ AChR Ab chẩn đốn NC có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu 100%, giá trị tiên đoán dƣơng 100%, giá trị tiên đốn âm 78,94%, khơng có trƣờng hợp dƣơng tính giả BµN LUẬN Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu Nhóm nghiên cứu có tỷ lệ nữ nhiều nam, tuổi mắc bệnh trung bình nam cao nữ, điều phù hợp với y văn nghiên cứu nƣớc đặc điểm bệnh NC Ngoài tiêu chuẩn chọn nhƣ trên, chúng tơi loại trừ BN bị kết hợp bệnh tự miễn khác nhƣ viêm khớp dạng thấp, bệnh hệ thống Chọn nhóm chứng ngƣời hiến máu tình nguyện, đƣợc xét nghiệm sàng lọc đảm bảo đủ tiêu chuẩn hiến máu tƣơng đồng giới BN nhóm chứng có tuổi đời thấp nhóm bệnh Tuy nhiên, nồng độ AChR Ab khơng liên quan tới tuổi nên nhóm có độ tuổi khơng tƣơng đồng cho kết khách quan (bảng 3) Lindstrom JM (1976) cho nồng độ AChR Ab không liên quan đến tuổi giới [4] Nồng độ AChR Ab huyết nhóm nghiên cứu Nhƣợc bệnh tự miễn, việc xuất tự kháng thể đƣợc nhiều tác 112 giả khẳng định, kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR Ab) Nhiều nghiên cứu nƣớc xác định nồng độ kháng thể tăng cao có ý nghĩa so với nhóm chứng Nồng độ AChR Ab trung bình nghiên cứu chúng tơi 32,67 nmol/l, tỷ lệ dƣơng tính 91,3% so với nhóm chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê Kết tƣơng đƣơng với nhiều nghiên cứu giới Về giá trị xét nghiệm AChR Ab chẩn đoán NC: hầu hết tác giả cho xét nghiệm có giá trị chẩn đốn xác định NC với tỷ lệ dƣơng tính cao Angela Vincen CS (2003) nghiên cứu 153 BN thấy tỷ lệ xét nghiệm dƣơng tính 85% [2] Sidra Auragzeb CS (2009) gặp 100% BN dƣơng tính cho tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán NC [5] Chúng tơi tính đƣợc giá trị xét nghiệm nồng độ AChR Ab chẩn đốn NC, khơng có trƣờng hợp dƣơng tính giả (bảng 4) Annapurni Jayam CS (2012) cho xét nghiệm AChR Ab có vai trò chẩn đốn hữu hiệu, tỷ lệ dƣơng tính giả thấp [3] TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 Tóm lại, xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết xét nghiệm có giá trị chẩn đoán NC với độ nhạy độ đặc hiệu cao Cần có nghiên cứu với số lƣợng lớn để khẳng định vai trò phƣơng pháp chẩn đoán xác định NC KÕt luËn Nghiên cứu nồng độ AChR Ab 92 BN NC có tuổi trung bình 44,96 ± 15,74 30 đối tƣợng làm nhóm chứng, chúng tơi rút số kết luận: - Nồng độ trung bình AChR Ab nhóm bệnh: 32,67 ± 20,18 nmol/l (ngƣỡng chẩn đốn dƣơng tính ≥ 0,52 nmol/l) với tỷ lệ dƣơng tính 91,30% Nồng độ trung bình nhóm chứng 0,37 ± 0,075 nmol/l, khơng có trƣờng hợp dƣơng tính Khơng có mối liên hệ nồng độ AChR Ab huyết với tuổi giới - Xét nghiệm nồng độ AChR Ab huyết có độ nhạy 91,30%, độ đặc hiệu giá trị tiên đoán dƣơng: 100%, giá trị tiên 112 đốn âm: 78,94%, khơng có trƣờng hợp dƣơng tính gi Tài liệu tham khảo Klaus V Toyka, Ralf Gold Bệnh NC Thần kinh học lâm sàng (Chủ biên: Daniel D Trƣơng, Lê Đức Hinh, Nguyễn Thi Hùng, Trần Công Thắng dịch) Nhà xuất Y học TP HCM 2004, tr.614-629 Angela Vincent, Mc Convill J et al Antibodies in myasthenia gravis and related disorder Ann N Y Acad Sci 2003, pp.9981324 Annapurni Jayam Trouth et al Myasthenia gravis: A review autoimmune disease 2012 http:dx.doi.org/10.1155/2012/874680 Lindstrom JM et al Antibody to acetylcholine receptor in myasthenia gravis prevalen, clinical correlates and diagnosis value Neurology 1976, pp.1054-1059 Sidra Auragzeb Relationship between anti - acetylcholine receptor antibody titres and severty of myasthenia gravis 2009 www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19438131 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 112 ... Xác định giá trị xét nghiệm nồng độ kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết chẩn đoán NC ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu - Nhóm bệnh: 92 BN đƣợc chẩn đoán NC điều... Sự khác biệt nồng độ tự kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin huyết nhóm tuổi khơng có ý nghĩa thống kê 111 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2015 Bảng 4: Giá trị chẩn đoán xét nghiệm AchR... cứu Nhƣợc bệnh tự miễn, việc xuất tự kháng thể đƣợc nhiều tác 112 giả khẳng định, kháng thể kháng thụ cảm thể acetylcholin (AChR Ab) Nhiều nghiên cứu nƣớc xác định nồng độ kháng thể tăng cao có