Đang tải... (xem toàn văn)
Luận văn nghiên cứu quy trình phân tích nhóm β-Lactam bằng phương pháp phổ hồng ngoại gần với kĩ thuật hồi qui đa biến để kiểm định nhanh chất lượng lượng thuốc trên thị trường hiện nay.
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ ÁNH TUYẾT NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHỔ HỒNG NGOẠI GẦN VÀ TRUNG BÌNH KẾT HƠP VỚI THUẬT TỐN HỒI QUY ĐA BIẾN ĐỂ XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ HOẠT CHẤT CĨ TRONG THUỐC KHÁNG SINH THUỘC HỌ β –LACTAM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ ÁNH TUYẾT NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHỔ HỒNG NGOẠI GẦN VÀ TRUNG BÌNH KẾT HƠP VỚI THUẬT TỐN HỒI QUY ĐA BIẾN ĐỂ XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ HOẠT CHẤT CĨ TRONG THUỐC KHÁNG SINH THUỘC HỌ β –LACTAM Chun ngành: Hóa phân tích Mã Số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Người Hướng Dẫn Khoa Học: TS. Phan Thị Tuyết Mai TS. Bùi Xn Thành Hà Nội – 2015 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn TS.Phan Thị Tuyết Mai, TS.Bùi Xn Thành đã tận tình hướng dẫn và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em hồn thành luận văn này Em cũng xin chân thành cảm ơn PGS.TS Tạ Thị Thảo cùng các thầy cơ giảng dạy tại Khoa Hóa phân tích đã hết lòng giúp đỡ em trong q trình học tập và nghiên cứu Em cũng xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc sự hộ trợ kinh phí và thiết bị máy móc từ đề tài nghị định thư với Cộng hòa Pháp Lotus 2014 2016, mã số 39/2014/HD NĐT Cuối cùng em xin gửu lời cảm ơn tới gia đình và các bạn học viên,sinh viên bộ mơn Hóa Phân tích đã giúp đỡ em trong thời gian làm luận văn Hà nội, ngày 19 tháng 7 năm 2015 H ọc viên Nguy ễn Th ị Ánh Tuyết MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG BẢNG KÍ HIỆU CHỮ VIẾT TẮT CLS Bình phương tối thiểu thơng thường (classical least square) ILS Bình phương tối thiểu nghịch đảo (inverse least square) PLS Bình phương tối thiểu từng phần (partial least square) PC Cấu tử chính (Principal component) UI EtOH Đơn vị quốc tế chuẩn hóa (international unit) Ethanol KLTB Khối lượng trung bình viên PCR Hồi qui cấu tử chính (principal component regression) PEN Penicillin AMO Amoxicillin CEP Cephalexin Tbot Tinh bột CLO Cloxacillin SPE Chiết pha rắn ACN axetonitril AMP Ampicillin Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học MỞ ĐẦU Hiện nay hoạt động sản xuất và bn bán kháng sinh nói riêng và tân dược nói chung đem đến nguồn lợi nhuận khổng lồ khiến một số tổ chức, cá nhân đã tung ra thị trường hàng triệu viên thuốc giả mỗi ngày. Thuốc giả khơng chỉ đánh lừa người tiêu dùng, còn vơ hiệu hóa các liệu pháp điều trị để cứu sống bệnh nhân và trong rất nhiều trường hợp thuốc giả gây ra tác hại to lớn như gây ra các phản ứng dị ứng, nhiễm độc kim loại nặng cũng như làm bệnh nhân dễ kháng thuốc. Đại diện tổ chức Y Tế Thế giới cảnh báo thuốc giả đang chiếm 7 15% tổng số thuốc ở các nước phát triển, 25% ở các nước đang phát triển, trong đó các nước khu vực Châu Á chiếm 50%. Các mẫu thuốc giả thường được phát hiện chủ yếu là các loại kháng sinh như Ampicillin, Penicillin…Điều khiến nhiều người quan tâm là tỉ lệ thuốc giả Việt Nam ngày càng một gia tăng và diễn biến trở nên phức tạp hơn dẫn đến cơng tác kiểm tra khó khăn hơn Vì vậy, vấn đề kiểm định thuốc đúng hoạt chất, và đúng hàm lượng hoạt chất trong thuốc là một vấn đề hết sức cấp thiết. Hiện nay có rất nhiều phương pháp xác định hàm lượng kháng sinh hiệu quả cao như phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC), huỳnh quang tia X, các phương pháp quang học hay các phương pháp điện hóa để phân tích kháng sinh được qui định trong dược điển. Tuy nhiên, hầu như các phương pháp trên đều được thực hiện trên các thiết bị đắt tiền, chi phí cho q trình phân tích tốn kém, quy trình xử lí mẫu và tách chất tốn dung mơi và mất nhiều thời gian khơng phải phòng thí nghiệm phân tích nào cũng thực hiện được Xuất phát từ thực tế này, chúng tơi lựa chọn đề tài: “Nghiên cứu xây dựng phương pháp phổ hồng ngoại gần và trung bình kết hợp với thuật tốn hồi quy đa biến để định lượng đồng thời một sốhoạt chất có trong thuốc kháng sinh thuộc họ βLactam”. Với mục tiêu là nghiên cứu quy trình phân tích nhóm β Chun ngành hóa phân tích 9 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Lactam bằng phương pháp phổ hồng ngoại gần với kĩ thuật hồi qui đa biến để kiểm định nhanh chất lượng lượng thuốc trên thị trường hiện nay CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan về nhóm kháng sinh β lactam 1.1.1 Khái niệm và phân loạinhóm β lactam Kháng sinh là những chất kháng khuẩn (antibacterial substances) được tạo ra bởi các chủng vi sinh vật (vi khuẩn, nấm, Actinomycetes), có tác dụng ức chế sự phát triển của các vi sinh vật khác [2] Nhóm βlactam là một họ kháng sinh rất lớn, bao gồm các kháng sinh có cấu trúc hóa học chứa vòng βlactam. Khi vòng này liên kết với một cấu trúc vòng khác sẽ hình thành các phân nhóm lớn tiếp theo Cáckháng sinh βlactam chia thành 4 nhóm gồm penicillin tự nhiên tổng hợp,cáccephalosporin bán tổng hợp,các chấtcarbapenem, monobactam.Trong đó có hai nhóm được sử dụng phổ biến nhất là nhóm các penicillin và cephalosporin Các penicillin và cephalosporin tự nhiên được chiết tách từ môi trường nuôi nấm penicilium notaum mà gọi penicillin chrysogenum cephalosporium aeremonium [2] 1.1.1.1. Nhóm penicillin Nguồn gốc: Lexander Fleming (1929) phát hiện mơi trường ni cấy penicillium notatum, P. chysogenum.Cơng thức cấu tạo của một số hoạt chất nhóm Penicillin được đưa ra trong bảng 1.1 Chun ngành hóa phân tích 10 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 1000000UI Các thuốc thu thập dưới dạng bột được đem trộn đều. Thuốc dưới dạng viên nén bao phim, mỗi hãng lấy 20 viên đem cân, tính khối lượng trung bình của 1 viên, đem nghiền, trộn đều. Sau đó mỗi loại thuốc cân lấy lượng thích hợp có hàm lượng nằm trong khoảng hàm lượng khảo sát, bổ sung thêm các thành phần tá dược tương ứng với các hoạt chất thu được các mẫu cần đo 3.4.5.2. Phân tích mẫu Mỗi mẫu thuốc lấy ở dạng bột mịn, cân lượng chính xác lượng mẫu bột cần phân tích, thêm lượng tá dược thì sẽ có được bảng số liệu bảng 3.17 và 3.18 dưới dạng ma trận (9x2). Sau đó tiến hành nghiền và trộn đồng nhất các mẫu khoảng 10 phút, lấy 3mg mỗi mẫu trên trộn với 97mg KBr trên cối mã não, lấy khoảng 15mg mẫu được đo trong vùng phổ hồng ngoại từ 40002800 cm1. Các kết quả thu được biểu diễn dưới dạng ma trận độ hấp thụ quang có kích thước (9x101) trong đó ma trận tín hiệu đo độ hấp thụ quang A được đo tại 101 số sóng, chuyển các ma trận này vào phần mềm matlab tính tốn Bảng 3.17.khối lượng mẫu bột thực tế cephalexin và tá dược được thêm vàohỗn hợp Khối lượng STT Số lần đo mbột viên (mg) mTá dược (mg) trung bình HL mẫu bột Tá dược thêm viên(mg) thực tế 32,2 35,9 42,7 45,6 49,1 50,3 55,4 48,7 57,1 vào 74,5 68,5 66,3 63,7 62,8 67,4 62,1 65,8 60,1 573,8 561,1 569,7 Lần 1 Lần 2 Lần 3 Lần 1 Lần 2 Lần 3 Lần 1 Lần 2 Lần 3 Chun ngành hóa phân tích 74 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Chun ngành hóa phân tích 75 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Bảng 3.18. Khối lượng mẫu bột thực tế penicillin và tá dược thêm vào hỗn hợp STT Khối lượng trung bình viên(mg) 715,2 723,3 718,5 m bột viên (mg) mTá dược (mg) Số lần đo HL mẫu bột thực tế Tá dược thêm vào Lần 1 61,5 38,5 Lần 2 53,4 46,6 Lần 3 58,7 41,3 Lần 1 55,9 35,8 Lần 2 44,7 55,3 Lần 3 66,8 33,2 Lần 1 53,6 46,4 Lần 2 47,9 52,1 Lần 3 45,6 54,4 Để xác định hàm lượng thuốc tìm thấy trên mẫu thật có đúng với hàm lượng mà nhà sản xuất đã cơng bố, chúng tơi đã tiến hành phân tích hai hoạt chất Penicillin và cephalexin các hãng sản xuất khác nhau theo phương pháp phổ hồng ngoại gần kết hợp với thuật tốn hồi qui đa biến, đã thu được bảng kết quả sau: Bảng 3.19. Hàm lượng hoạt chất CEP thực tế tìm thấy trong các mẫu thực tế Mẫu C1 C2 C3 PP hồng ngoại 446, 3± 0,9 478,2 ± 2,1 459,4 ± 2,2 Hàm lượng CEP (mg / viên) PP đối chứng (HPLC) HL trên bao bì 477,5 ± 0,4 473,9 ± 0,2 468,5 ± 0,5 500 500 500 Bảng 3.20. Hàm lượng hoạt chất PEN thực tế tìm thấy trong các mẫu thực tế Hàm lượng PEN (mg / viên) Chun ngành hóa phân tích 76 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Mẫu P1 P2 P3 PP hồng ngoại 576,4 ± 1,6 571,9 ± 1,1 596,3 ± 2,0 PP đối chứng (HPLC) 613,1 ± 0,9 610,0 ± 0,5 604,3 ± 0,4 HL trên bao bì 625 625 625 Từ kết quả ở bảng trên cho thấy độ chệnh của phương pháp nghiên cứu hoạt chất Penicillin theo phương pháp phổ hồng ngoại gần so với kết quả đối chiếu trên bao bì lần lượt: 7,7%; 8,4%; 4,5% và so với phương pháp đối chứng lần lượt là: 5,9%;6,24%;1,3% . Độ chệch của Cephalexin so với phương pháp phổ hồng ngoại gần là 10,7%;12,5%;8,7% và so với phương pháp đối chứng lần lượt là: 5,9%; 6,2%; 1,3%. Do đó độ chệch qua các mẫu là tương đối tốt và dao động trong vùng sai số cho phép của phép đo.Vì vậy, có thể sử dụng mơ hình PCR kết hợp phương pháp phổ hồng ngoại gần để định lượng các hoạt chất thuộc nhóm thuốc kháng sinh β – lactam. 1 Từ đó cho thấy nghiên cứu này chỉ ra rằng phương pháp này có ưu điểm hơn so với các phương pháp truyền thống khác như q trình xử lý mẫu nhanh, đơn giản, giảm được chi phí phân tích và sử dụng lượng nhỏ dung mơi đã giảm được tác động dung mơi đến mơi trường sống Chun ngành hóa phân tích 77 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học CHƯƠNG 4.KẾT LUẬN Với mục tiêu đặt ra đối với luận văn xác định mơ hình hóa tối ưu các điều kiện xác định đồng thời một số hoạt chất thuộc họ β – lac tam bằng phương pháp phổ hồng ngoại gần và trung kết hợp với kĩ thuật hồi quy đa biến, sau một thời gian nghiên cứu đã đạt được một số kết quả chính sau: Đã lựa chọn điều kiện tối ưu xác định đồng thời Penicillin và Cephalexin trong cùng một hỗn hợp: vùng số sóng khảo sát phổ 4000 – 2800 cm1. Tỷ lệ khối lượng mẫu/ KBr = 3: 97 Đã xây dựng được mơ hình hồi qui đa biến tuyến tính PCR xác định cho từng hoạt chất PEN,CEP dựa trên các mơ hình chuẩn và đã đánh giá được tính phù hợp cho từng mơ hình. Đã tiến hành xây dựng mơ hình hồi qui PCR xác định đồng thời các hoạt chất PEN và CEP trong cùng hỗn hợp khi có mặt các tá dược, các kết quả sai số thu được từ các mơ hình trên phần lớn có sai số ≤ 10% (có sai số nằm trong giới hạn cho phép). Do đó có thể dùng mơ hình này để định lượng nhanh các mẫu thuốc thực tế Giá trị LOD, LOQ cho xác định đồng thời các hoạt chất PEN và CEP là nhỏ , các giá trị LOD,LOQ thu được lần lượt đối PEN: 0,42 và 1,3 ; CEP: 0,13 và 0,44 Đã ứng dụng mơ hình hồi qui tuyến tính PCR kết hợp với phương pháp phổ hồng ngoại gần để xác định nhanh các mẫu thuốc thực tế đang lưu hành trên thị trường hiện nay. Qua phân tích mẫu thực tế cho ta thấy.Từ kết quả ở bảng trên cho thấy độ chệnh của phương pháp nghiên cứu hoạt chất Penicilli theo phương pháp phổ hồng ngoại gần so với kết quả đối chiếu trên bao bì lần lượt: 7,7%; 8,4%; 4,5% và so với phương pháp đối chứng lần lượt là: 5,9%;6,24%;1,3% , Độ chệch của Cephalexin so với phương pháp phổ hồng ngoại gần là 10,7%;12,5%;8,7% và so với phương pháp đối chứng lần lượt là: 5,9%; 6,2%; 1,3 Chun ngành hóa phân tích 78 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ Y Tế (2000), Dược điển Việt Nam, xuất bản lần thứ 3, Nhà xuất bản Y học, Đại học Quốc Gia Hà Nội Bộ Y Tế (1998), Hóa dược, tập 2, nhà xuất bản Y học Hà Nội, Hà nội Trần Anh Duy, Tống Quốc Huy, Từ Tơn Q, Tơn Thất Thắng, Lê Thị Tiễn,Trần Minh Hồng Vũ , Tơ Thị Xn (2011), Phương pháp phổ hồng ngoại và ứng dụng trong thực phẩm , Viện Cơng nghệ Sinh học Thực phẩm, Tp.Hồ Chí Minh Huỳnh Kim Diệu (2010), Thuốc kháng sinh thuộc Beta Lactam, Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Như Hoa (2012), Phân tích betalactam trong mẫu dược phẩm sinh học phương pháp HPLC, Luận văn thạc sĩ khoa học,Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc gia Hà nội Vũ Thị Huệ (2015), Nghiên cứu định lượng một số hoạt chất thuốc kháng sinh nhóm Sunfamid bằng phương pháp phổ kế hồng ngoại gần và trung bình, Luận văn thạc sĩ khoa học,Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc gia Hà nội Nguyễn Thị Liên (2010), Nghiên cứu điều kiện tách định lượng kháng sinh họ β lactam bằng kỹ thuật chiết pha rắn kết hợp với phương pháp trắc quang, Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Đại học Quốc gia Hà nội Bùi Thị Ngát ( 2011), Nghiên cứu các điều kiện tách một số kháng sinh họ β – lactam bằng kỹ thuật chiết pha rắn kết hợp với phương pháp đo phổ Chun ngành hóa phân tích 79 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học hấp thụ phân tử, Khóa luận tốt nghiệp,Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Đại học Quốc gia Hà nội Nguyễn Đình Luyện (1999), Hóa dược, Nhà xuất bản Đại học Dược Hà Nội 10 Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở các phương pháp phổ ứng dụng trong hóa học, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật 11 Tạ Thị Thảo, Phạm Hồng Qn, Nguyễn Xn Trung (2010), Ứng dụng phương pháp thống kê đa biến và hệ thống thơng tin địa lý để đánh giá ơ nhiễm kimloại nặng nước ngầm xã Nam Tân, Nam Sách, Hải Dương, 48(4), tr576582 12 Tạ Thị Thảo (2005), Bài giảng chun đề thống kê trong hóa phân tích, Đại học Quốc gia Hà Nội 13 Trần Quang Thủy (2009), Xác định lượng dư Penicillin G và V trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, nhà xuất bản Bộ Y Tế 14 Nguyễn Đình Luyện (1999), Hóa dược, Nhà xuất bản Đại học Dược Hà Nội 15 Tiêu chuẩn Việt Nam (1990), Thịt và sản phẩm của thịt – Phương pháp xác định hàm lượng Penicillin, Trung tâm kiểm dịch động vật xuất nhập khẩu Hà Nội 16 Phạm Thị Ngọc Yến, Ngơ Hữu tình, Lê Tần Hùng, Ngơ Thị Lan Hương (2007), Cơ sở Matlab và ứng dụng, Nhà xuất bản Khoa học kỹ thuật Chun ngành hóa phân tích 80 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Tiếng Anh 17 A.P.P. Cione, M.J. Liberale, P.M. Silva (2010), “Development and validation of analytical method for determination of an association of ampicillins in lyophilized powder for injectionby HPLC”,Qmica Nova, vol.33,pp.20327 18 A.H.Moreno, H.R.N Salgado (2012), “Development and Validation of the Quantitative Analysis of Ceftazidime in Powder for Injection by Infrared Spectroscopy”,Physical Chemistry , 2(1),pp. 611 19 A.F. S.Aliments(1999), “Multiresidue analytical method for the determination of eight penicillin antibiotics in muscle tissue by ionpair reversedphase HPLC after precolumn derivatization”, Fresenius J Anal Chem, 82(5),pp. 108395 20 D. Vieira, P.C Ricarte, H. R. N.Salgado (2012), “Development and Validation of the Quantitative Analysis of Cefuroxime Sodium in Powder for Injection by Infrared Spectroscopy”,Advances in Analytical Chemistry, 2(6), pp. 80 87 21 E.G.Tótoli, H Salgado (2012), “Development and Validation of the Quantitative Analysis of Ampicillin Sodium in Powder for Injection by Fouriertransform Infrared Spectroscopy (FTIR)”,Physical Chemistry, 2(6), pp. 103108 22 E.Benito – dena, A.I. Dar Ful – Rodera, M.E. Leon – Gonzalez, M.C.Mereno – Rondi (2005), “Evaluation of mixed mode solid phase extration cartridges for the preconcentration of beta lactam antibio in wastewater using liquid chromatography with UV – DAD detection”, Analytical chimica acta, 556 (2), pp. 415422 Chun ngành hóa phân tích 81 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 23 E.F.Holthoon.P J Mulder, E O van Bennekom, H Heskamp,T. Zuidema,H.A. Rhijn (2010), “Quantitative analysis of penicillins in porcine tissues.milk and animal feed using derivatisation with piperidine and stable isotope dilution liquid chromatography tandem mass spectrometry”, Anal Bioanal Chem,396(8), pp. 3027–3040 24 G.ParisottoI, M.F.FerrãoII, C. FurtadoII, R.F.MolzII (2007),“Determination of amoxicillin content in powdered pharmaceutical formulations using DRIFTS and PLS”, Origninal papers , vol.31, Brasil 25 H.A.MartinsJúniorI, T.A. KussumiI, A.Y. WangII (2007), “A rapid method to determine antibiotic residues in milk using liquid chromatography coupled to electrospray tandem mass spectrometry”, Online version ISSN 1678 4790 ,vol.18 no.2 São Paulo.Brazil 26 F. A. Iđóna, S. Garriguesb, M. Guardia (2006), “Combination of mid and nearinfrared spectroscopy for the determination of the quality properties of beers”,Analytica Chimica Acta, 57(2),pp. 167–174 27 J.M. Cha, S Yang, K.H. Carlson (2006), “trace determination of betalactam antibiotics in surface water and urban wastewater using liquid chromatography combined with electrospray tandem mass spectrometry”, J Chromatogr A, 1115(12), pp 4657 28 L.K. Hearn, P.P. Subedi (2009), “Determining levels of steviol glycosides in the leaves of Stevia rebaudiana by near infrared reflectance spectroscopy”, Journal of Food Composition and Analysis, 22, pp. 165–168 29 M.A.M. Silva, M. H. Ferreira, J. W.B. Braga, M. Sena (2012),“Development and analytical validation of a multivariate calibration method for determination of amoxicillin in suspension formulations by near infrared spectroscopy”, Talanta, 89 ,pp 342– 351 Chun ngành hóa phân tích 82 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 30 M.C. Sarraguc, S. O. Soares, J. A.Lopes (2011),“ Anearinfrared spectroscopy method to determine aminoglycosides in pharmaceutical formulations”.Vibrational Spectroscopy,56,pages 184–192 31 M.Dračková1,P.Navrátilová1,L.Hadra2,L.Vorlová1,L.Hudcová1(2009),“Deter mination Residues of Penicillin G and Cloxacillin in Raw Cow Milk Using Fourier Transform Near Infrared Spectroscopy ”,Acta Veterinaria Brno,78 ,pp 685690 32 Msagati, T.A.M Nindi (2007),“Determination of βlactam residues in foodstuffs of animal origin using supported liquid membrane extraction and liquid chromatographymass spectrometry”, Food Chemistry,100 (2),Pages 836–844 33 M.J. Abedin, J. Fedlmnn and A.A. Meharg (2002),“Uptake Kinetics of Arsenic Species in Rice Plants”, plan Physiology,Vol.128,1120 – 1128 34 S.T.H Sherazi, M Ali, S.A Mahesar (2011), “Application of Fourier transform infrared (FTIR) transmission spectroscopy for the estimation of roxithromycin in pharmaceutical formulations”,Vibrational Spectroscopy, 55, pages 115–118 35 S M.A ghannam (2008), “Spectrophotometric and Atomic Absorption Spectrometric Determination of Cephalexin and Cephradine in Dosage Forms ”,Journal of Food and Drug Analysis, Vol. 16. No. 2, Pages 1925 36 W. Liu, Z. Zang, Zouqiu (2007).“Dertermination of lactam antibiotics in milk using micro flow chemiluminiscence sytem with on – line solid phase extraction”,Analytical Chimica Acta, 592 (2), pp 187192 37 YanYun Li (2013), “spectral ranges of nearinfrared diffuse reflectance spectroscopy of cefazolin sodium and the construction of a quantitative Chun ngành hóa phân tích 83 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học model for the determination of cefazolin sodium content in different crystal forms”, Science China Chemistry, vol.56, pp. 789798 PHỤ LỤC 1 Chun ngành hóa phân tích 84 Trường ĐHKHTN Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 1.05 3050.343 3.521 3275.673 2.133 1:99 3215.078 2.220 2918.022 0.166 2883.074 0.704 1.00 3432.162 0.436 4.714 0.95 Absorbance 0.90 0.85 0.80 0.75 0.70 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 2950 2900 2850 2800 Hình 1: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu có tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 1:99 1.7 3048.260 8.371 3:97 3274.120 5.315 1.6 3214.056 5.320 2945.792 0.199 0.190 2914.809 2882.779 1.644 1.5 1.4 3421.558 38.518 Absorbance 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 2950 2900 2850 Hình 2: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu với tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 2:99 Chun ngành hóa phân tích 85 Trường ĐHKHTN 2800 Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 1.7 3048.260 8.371 3:97 3274.120 5.315 1.6 3214.056 5.320 2945.792 0.199 0.190 2914.809 2882.779 1.644 1.5 1.4 3421.558 38.518 1.3 Absorbance 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 2950 2900 2850 2800 Hình 3: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu với tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 3:99 1.9 3050.845 10.562 4:96 3274.689 6.530 3212.711 6.030 1.8 2882.711 1.721 1.7 1.6 3421.82813.743 0.900 3434.724 Absorbance 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 Chun ngành hóa phân tích 86 Trường ĐHKHTN 2950 2900 2850 2800 Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học Hình 4: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu với tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 4:99 2.6 3043.697 16.524 6:94 3273.461 10.108 3214.716 9.940 2.4 2882.084 3.271 2.2 2.0 3396.121 0.672 3418.942 30.457 Absorbance 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 2950 2900 2850 Hình 5: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu với tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 6:99 Chun ngành hóa phân tích 87 Trường ĐHKHTN 2800 Luận văn Thạc sỹ khoa học Nguyễn Thị Ánh Tuyết K23 Hóa Học 3044.138 9.669 8:92 3278.504 8.136 3213.304 0.823 0.794 3186.662 2.6 2957.648 0.530 2881.242 0.682 2861.852 1.611 2.4 3419.910 3396.101 34.0770.763 2.2 Absorbance 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 3950 3900 3850 3800 3750 3700 3650 3600 3550 3500 3450 3400 3350 Wavenumber 3300 3250 3200 3150 3100 3050 3000 2950 2900 2850 Hình 6: Phổ hấp thụ hồng ngoại gần của mẫu với tỉ lệ khối lượng mẫu/KBr = 8:99 Chun ngành hóa phân tích 88 Trường ĐHKHTN 2800 ... Xuất phát từ thực tế này, chúng tơi lựa chọn đề tài: Nghiên cứu xây dựng phương pháp phổ hồng ngoại gần và trung bình kết hợp với thuật tốn hồi quy đa biến để định lượng đồng thời một s hoạt chất có trong thuốc kháng sinh thuộc họ βLactam”. Với mục tiêu là nghiên cứu quy trình phân tích nhóm ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ ÁNH TUYẾT NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHỔ HỒNG NGOẠI GẦN VÀ TRUNG BÌNH KẾT HƠP VỚI THUẬT TỐN HỒI QUY ĐA BIẾN ĐỂ XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ HOẠT CHẤT CĨ TRONG ... dụng phương pháp LC/MS để xác định lượng dư kháng sinh có trong sữa. Mục đích của nghiên cứu này nhằm phát triển một phương pháp phân tích mới đơn giản và nhanh chóng để xác định và định lượng mười bốn kháng sinh từ các mẫu sữa khác nhau .Trong đó, có năm β