Nghiên cứu xác định các týp HPV thường gặp trong bệnh lý cổ tử cung. Phân loại mô bệnh học các trường hợp nhiễm HPV. Tìm hiểu sự phân bố các týp HPV và tần suất xuất hiện trong các týp mô bệnh học cổ tử cung.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Nghiên cứu Y học NHIỄM HPV VÀ TỔN THƯƠNG MÔ BỆNH HỌC CỔ TỬ CUNG TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG HUẾ TỪ 2010-2014 Nguyễn Phúc Duy Quang*, Nguyễn Văn Bằng*, Đoàn Phước Thi*, Nguyễn Thanh Tường, Phan Nữ Diệu Hồng**, Nguyễn Thị Nam Liên**, Nguyễn Thị Ti Na**, Lê Thị Thanh Lan**, Bạch Cẩm An***, Lê Sỹ Phương***, Trần Minh Thắng*** Nhiễm HPV bệnh nhiễm virus thường gặp quan sinh dục Với quan sinh dục ngồi, có khoảng 40 týp HPV gây bệnh cho tế bào biểu mô lát tầng Thường gặp týp 6, 11, 16, 18, 42, 43, 44, 31, 33, 35, 45, 51, 52, 56, týp liên quan nhiều tới ung thư 16,18,31,45 Mục đích: Nghiên cứu xác định týp HPV thường gặp bệnh lý cổ tử cung Phân loại mơ bệnh học trường hợp nhiễm HPV Tìm hiểu phân bố týp HPV tần suất xuất týp mô bệnh học cổ tử cung Đối tượng phương pháp: 309 bệnh nhân nhiễm HPV từ năm 2010 - 2014, làm sinh thiết, đọc phân loại mô học, định týp HPV kỹ thuật Realtime PCR RDB (reverse dot blot) với cặp mồi đặc hiệu HPV Kết luận: Nhóm mơ bình thường viêm chiếm tỷ lệ 79,3 % Nhóm biểu bệnh lý Polyp, CIN ung thư 20,7%, có 22 trường hợp ung thư chiếm 7,1% Số trường hợp nhiễm đơn týp 154 chiếm 49,9% Số trường hợp nhiễm đa týp 155 chiếm 50,1% Tần suất xuất cao týp 16 ung thư 83,6%, týp 11 tổn thương CIN 60%, týp 11 nhóm Polyp 48,1% Từ khóa: HPV, ung thư cổ tử cung ABSTRACT HPV INFECTION AND HISTOPATHOLOGICAL OF CERVIX IN HUE CENTRAL HOSPITAL FROM 2010 TO 2014 Nguyen Phuc Duy Quang, Nguyen Van Bang, Doan Phuoc Thi, Nguyen Thanh Tuong, Phan Nu Dieu Hong, Nguyen Thi Nam Lien, Nguyen Thi Ti Na, Le Thi Thanh Lan, Bach Cam An, Le Sy Phuong, Tran Minh Thang * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 19 - No - 2015: 263 - 268 HPV is the most common viral infections of the genitals With external genitalia, 40 type HPV infects squamous epithelial cells The most common is the type 6, 11, 16, 18, 42, 43, 44, 31, 33, 35, 45, 51, 52, 56, including main type associated with cancer much is 16.18, 31.45 Objective: The study identifies common HPV type in cervical pathology Histopathological classification of HPV infections Understanding the distribution of HPV types and frequency of appearance in the histopathological type of cervical Subjects and Methods: 309 patients with HPV infection in 2010-2014, the biopsy, histologic diagnosis classification, the types of HPV by Realtime PCR techniques RDB (reverse dot blot) with specific primers for HPV * Khoa Giải Phẫu bệnh – BVTW Huế ** Khoa Vi Sinh – BVTW Huế *** Khoa Sản – BVTW Huế Tác giả liên lạc: ThS Nguyễn Phúc Duy Quang ĐT: 0914065925 Email: npduyquang@gmail.com 263 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Conclusion: The group of normal tissue and inflammation 79.3% occupancy rate Pathological manifestations polyps group, CIN and cancer was 20.7%, including 22 cancer cases accounted for 7.1% Number of cases type was 154 (49.9%) Number of cases of multityp was 155 (50.1%) The highest frequency of the type 16 in cancer was 83.6%, type 11 in CIN lesions was 60%, type 11 was 48.1% in group Polype Key words: CIN, cervical cancer ĐẶT VẤN ĐỀ Năm 2007, Tạp chí Lancet quốc tế cơng bố kết nghiên cứu tỷ lệ mắc phân bố kiểu gen ADN vi rút gây u nhú (HPVHuman Papillomavirus) phụ nữ Tổng số có 78 nghiên cứu từ năm 1995 đến 2005 phù hợp với tiêu chí lựa chọn nghiên cứu với 157.879 phụ nữ toàn giới Tỷ lệ nhiễm HPV thơ ước lượng phụ nữ tồn giới với tế bào bình thường ước tính 10,0% Trong đó, Châu Phi, đặc biệt Đơng Phi, có tỷ lệ mắc cao (31,6%), Châu Âu với 6,8% Châu Á, đặc biệt Đông Nam Á, có tỷ lệ thấp nhất, với 6,2% Sơ đồ thể tỷ lệ mắc HPV khác theo khu vực giới Nhiễm virus HPV ngày phổ biến ảnh hưởng đến khoảng 24 triệu người Mỹ Đây bệnh lây truyền qua đường tình dục phổ biến đứng thứ hai sau virus suy giảm miễn dịch người (HIV) việc gây bệnh tật tử vong Năm 2010, tỉ lệ nhiễm HPV cộng đồng TP HCM 10,84 % (164/1.550) (khoảng tin cậy 95% 0,09-0,12), số nhiễm týp nguy cao 9,1% týp nguy thấp 1,74% Sự phân bố týp theo thứ tự sau týp 16 chiếm tỉ lệ cao 55,95% (94/168), týp 18 chiếm 38,1% (64/168), týp 58 11,13% (19/168), týp 11 ( 4,76%), týp (3,57%), týp khác tỷ lệ không cao Để xác định týp HPV thường gặp bệnh lý cổ tử cung Phân loại mô bệnh học trường hợp nhiễm HPV đồng thời tìm hiểu phân bố týp HPV tần suất xuất týp mô bệnh học cổ tử cung nhóm bệnh 264 nhân đến khám điều trị Bệnh viện T.Ư Huế, hai khoa Giải phẫu bệnh Vi Sinh phối hợp tiến hành nghiên cứu ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Đối tượng thời gian nghiên cứu Là phụ nữ độ tuổi đến khám điều trị Khoa Sản Bệnh viện TW Huế Bệnh nhân đủ điều kiện để bấm sinh thiết cổ tử cung (ctc) làm giải phẫu bệnh Tiêu chuẩn loại trừ Bệnh nhân có mắc kèm theo bệnh cấp tính khác + Bệnh nhân mang thai + Bệnh nhân không đủ điều kiện để lấy bệnh phẩm như: máu âm đạo, đặt thuốc, hóa - xạ trị * Thời gian nghiên cứu Từ tháng năm 2010 - tháng 06 năm 2014 Các bước tiến hành Các đối tượng đến khám phòng khám sản sau khai thác thơng tin hành chính, khám lâm sàng, lấy bệnh phẩm làm xét nghiệm Tế bào cổ tử cung (PAP), bấm sinh thiết cổ tử cung xét nghiệm PCR xác định định týp HPV Tiến hành xét nghiệm tế bào Lấy mẫu nghiệm dụng cụ phết qua lớp tế bào cổ cổ CTC cố định lên tiêu bản, để khô tự nhiên cố định cồn Sau chuyển khoa Giải Phẫu Bệnh tiến hành nhuộm tiêu PAP, đọc sàng lọc để có định hướng sinh thiết Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Xét nghiệm xác định định týp HPV Đồng thời lúc lấy mẫu nghiệm tế bào bệnh nhân lấy mẫu nghiệm làm xét nghiệm HPV tăm vô trùng chuyên dụng Mẫu nghiệm chuyển khoa Vi Sinh để xử lý cắt cho vào tube eppendorff có chứa dung dịch thu mẫu TE1X Sau mẫu tách chiết DNA theo phương pháp Chloroform, thực kỹ thuật Realtime PCR để phát mẫu dương tính có nhiễm HPV Tiếp sau chọn mẫu dương tính để định týp HPV kỹ thuật Realtime PCR RDB (reverse dot blot) Xét nghiệm mô bệnh học Dựa tổn thương lâm sàng kết phiến đồ âm đạo, BS Khoa Sản tiến hành bấm sinh thiết cổ tử cung làm xét nghiệm mô bệnh học khoa Giải phẫu bệnh Mẫu xử lý máy Lieca TP 1020, Nhuộm máy Thermo Variastan 24-4, hóa chất ThermoShandon Khoa Giải phẫu bệnh chẩn đốn mơ bệnh học theo hệ thống Bethesda 2001 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Số trường hợp xét nghiệm định týp HPV 1335 ca, có 315 trường hợp dương tính (chiếm 23,6%) Số mẫu sinh thiết cổ tử cung làm Giải phẫu bệnh 2731 mẫu, có 348 trường hợp ung thư (chiếm 12,7%) Số trường hợp nhiễm HPV định týp khoa vi sinh làm sinh thiết mô bệnh học khoa Giải phẫu bệnh là: 309 trường hợp Phân loại mô bệnh học 309 trường hợp nhiễm HPV Tỷ lệ % Phân loại Số lượng CIN 0,6% CIN CIN 10 1,0% Ung thư 22 Polyp 27 8,7% 52 193 309 16,8% 62,5% 100% Bình thường Viêm Tổng cộng 3,2% 7,1% Nghiên cứu Y học Nhóm mơ bình thường viêm chiếm tỷ lệ 79,3 % Nhóm biểu bệnh lý Polyp, CIN ung thư 20,7%, có 22 trường hợp ung thư chiếm 7,1% Trong 245 trường hợp lành tính viêm, có 52 trường hợp khơng có biểu lâm sàng phiến đồ hồn tồn bình thường Trong 193 trường hợp viêm cổ tử cung có 23 trường hợp nghi ngờ bấm sinh thiết cho kết viêm cấp mạn tính, 170 trường hợp lại ghi nhận viêm phiến đồ, mặt lâm sàng không cần thiết bấm sinh thiết cổ tử cung Phân bố kiểu nhiễm đơn týp đa týp HPV 309 trường hợp STT Đơn týp Số lượng % 16 57 37,0% 18 30 19,5% 11 29 18,8% 58 16 10,4% 10 81 52 45 70 68 Tổng cộng 10 2 154 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 týp Số lượng 6,5% 2,6% 1,9% 1,3% 1,3% 0,6% 100% % 16,18 11,16 11,18 16,58 11,81 6,11 11,58 11,51 16,81 18,58 6,58 16,45 33,35 6,16 6,53 11,39 11,43 11,53 11,59 16,33 21 14 6 3 3 2 2 1 1 20,0% 13,3% 7,6% 6,7% 5,7% 5,7% 4,8% 2,9% 2,9% 2,9% 2,9% 1,9% 1,9% 1,9% 1,9% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 265 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Nghiên cứu Y học STT 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 STT Đơn týp 16,52 16,59 16,70 18,33 18,35 18,39 18,71 33,81 35,58 52,59 56,58 58,70 6,81 týp trở lên 11,16,18 11,16,18,58 16,18,58 11,16,45 11,16,81 16,18,45 Số lượng % 1 1 1 1 1 1 Số lượng 4 3 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% 1,0% Số trường hợp nhiễm đơn týp 154/309 chiếm 49,9% Số trường hợp nhiễm týp 105/309 chiếm 34%, lại 50 trường hợp nhiễm týp trở lên chiếm 16,1% Số trường hợp nhiễm týp nguy cao (16,18) 199/309 (chiếm 64,4%) Tần suất xuất týp 31 45 < 10%, khơng có nhiễm đơn týp 31 Phân bố kiểu nhiễm HPV 22 trường hợp ung thư Týp 16 18 11 33,35 16,45 16,33 11,16,81 16,35,81 Tổng cộng Số lượng 15 1 1 1 22 Tỷ lệ % 68,2% 4,5% 4,5% 4,5% 4,5% 4,5% 4,5% 4,5% Có 68,2% trường hợp nhiễm đơn týp 16 có chẩn đốn mơ bệnh học ung thư Tỷ lệ nhiễm đơn týp nhóm bệnh nhân ung thư 77,3% 266 Đơn týp 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 8,0% 8,0% 8,0% 6,0% 6,0% 6,0% Có 23 týp HPV xuất nghiên cứu 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 42, 43, 44,45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 70, 71, 81 STT STT Số lượng % 3 2 2 1 1 1 1 1 1 6,0% 6,0% 4,0% 4,0% 4,0% 4,0% 4,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 2,0% 16,18,81 6,11,16 11,18,58 16,33,35 16,35,81 16,45,81 58,66,70 11,16,15,35 11,16,39 11,16,58,81 11,16,59 11,18,45 11,31,42,81 11,35,51 11,58,81 16,18,11 16,18,35,81 16,45,58 18,45,81 33,58,81 Tần suất xuất týp 16 22 trường hợp ung thư 19/22 chiếm 86,36% Phân bố kiểu nhiễm HPV 15 trường hợp tổn thương CIN 1-3 STT Týp Số Tỷ lệ % STT luợng Týp Số Tỷ lệ luợng % 6,7% 11,18 6,7% 11 20,0% 11,59 6,7% 16 6,7% 11,16 13,3% 18 6,7% 6,58 6,7% 16,18 13,3% 10 11,16,18 6,7% 11,16,58,8 1 6,7% 11 Tổng cộng 15 Tần suất xuất týp 11 nhóm 60%, týp 16 46,7%, týp 18 33,3% Phân bổ kiểu týp 27 trường hợp Polyp STT Týp Số luợ ng Tỷ lệ % STT Týp 11 14,8% 16,58 3,7% 18 22,2% 6,11 7,4% 52 7,4% 10 16,18 7,4% Số Tỷ lệ % luợng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 STT Týp Số luợ ng Tỷ lệ % 58 7,4% 11 11,18,58 3,7% 11,16 3,7% 12 11,58,81 3,7% 11,18 3,7% 13 11,16,39 3,7% 11,81 7,4% 14 16,33,35 3,7% STT Týp Tổng cộng Số Tỷ lệ % luợng 27 100,0% Tần suất xuất týp 11 nhóm bệnh nhân Polyp 48,1%; týp 18 33,3%; týp 16 25,9% Không có bệnh nhân nhiễm đơn týp 16 HPV 16 ung thư cổ tử cung Theo kết nghiên cứu Tổ chức nghiên cứu sinh học quốc tế ung thư cổ tử cung điều tra quốc tế ung thư cổ tử cung xâm nhập cho thấy HPV 16 týp chủ yếu ung thư cổ tử cung tất khu vực địa lí (từ 4365% trường hợp ung thư) HPV 18 phân týp liên quan HPV 45 thường gặp ung thư cổ tử cung khu vực châu Phi (30%), Bắc Mỹ(29,8%) Đông Nam Á (40%), gặp châu Âu (10,4%) Trung Nam Mỹ (16,8%) Mặc dù có phân bố giống khu vực có khác tỷ lệ phân týp vài quốc gia khác HPV 18 chiếm 50% trường hợp ung thư cổ tử cung Indonesia Sự khác biệt vùng địa lí tỷ lệ phân týp HPV tân sản cổ tử cung khác biệt phơi nhiễm, lấy mẫu khả sinh u phân týp HPV với quần thể khác Mặc dù 2/3 đến 3/4 trường hợp ung thư cổ tử cung có liên quan đến HPV 16 HPV 18 có đến 21 phân týp khác số biến thể xuất lần điều tra ung thư cổ tử cung HPV 16 nghiên cứu chúng tơi có tần suất xuất nhóm bệnh nhân ung thư chiếm 86,36% phù hợp với nghiên cứu tác giả nước Mối liên quan phân týp virus với phân týp mơ học ghi nhận từ trước, sở sinh học khác biệt chưa rõ Tuy nhiên chủng HPV có khả gây bệnh cao chúng có khả ghép Nghiên cứu Y học chất liệu di truyền virus với DNA tế bào chủ, gây đột biến gene có tiềm sinh ung Tân sinh biểu mơ cổ tử cung (Cervical intraepithelial neoplasia - CIN) Sau sống tiềm ẩn, tuỳ địa người bệnh, HPV kích thích tế bào cổ tử cung sinh sản nhanh mạnh Thông thường, HPV không xuyên xuống màng đáy biểu mô, xâm nhập vào tế bào nơng, nơi có phản ứng miễn dịch nên không bị hệ miễn dịch nhận diện tiêu diệt, tồn lâu dài, gây rối loạn sinh sản tế bào, tạo tổn thương từ dị sản nhẹ, đến dị sản vừa, dị sản nặng, ung thư cổ tử cung Theo tác giả Cecelia H Boardman (2014) viêm nhiễm sinh dục HPV (Human Papilloma Virus) yếu tố nguy Vai trò HPV gây tân sinh biểu mô cổ tử cung xác nhận Tuy nhiên nhiễm HPV hay gặp phụ nữ tuổi hoạt động tình dục, số bị tân sinh cổ tử cung hay ung thư cổ tử cung Điều chứng tỏ nhiều yếu tố ảnh hưởng đến nguy gây nghịch sản tế bào cổ tử cung Đầu tiên chủng HPV bị nhiễm Đã có 77 chủng HPV tìm ra, có nhóm gây bệnh người Các chủng HPV 6b 11 chủng gây condylôm sùi âm hộ, âm đạo, cổ tử cung, tìm thấy tổn thương nghịch sản nhẹ CIN I, diễn tiến lành tính (polyp) diễn tiến thành ung thư xâm lấn Trong chủng HPV 16, 18, 31, 33 chủng ác tính, chúng tìm thấy 50-80% trường hợp nghịch sản 90% trường hợp ung thư cổ tử cung xâm lấn Tần suất xuất týp 11 nhóm bệnh nhân 60%, týp 16 46,7%, týp 18 33,3% Đã phản ánh phù hợp với tác giả nhiên bỏ qua diện týp 16 18 nhóm này, đồng nhiễm týp 11 16, 18 dẫn đến trầm trọng bệnh 267 Nghiên cứu Y học Qua phản ánh rõ tần suất xuất týp 11 nhóm bệnh nhân Polyp 48,1%; týp 18 33,3%; týp 16 25,9% KẾT LUẬN Nhóm mơ bình thường viêm chiếm tỷ lệ 79,3% Nhóm biểu bệnh lý Polyp, CIN ung thư 20,7%, có 22 trường hợp ung thư chiếm 7,1% Số trường hợp nhiễm đơn týp 154/309 chiếm 49,9% Số trường hợp nhiễm týp 105/309 chiếm 34%, lại 50 trường hợp nhiễm týp trở lên chiếm 16,1% Số trường hợp nhiễm týp nguy cao(16,18) 199/309 (chiếm 64,4%) Tỷ lệ nhiễm đơn týp nhóm bệnh nhân ung thư 77,3% Tần suất xuất týp 16 22 trường hợp ung thư 19/22 chiếm 86,36% Tần suất xuất týp 11 nhóm CIN 13 60%, týp 16 46,7%, týp 18 33,3% Tần suất xuất týp 11 nhóm bệnh nhân Polyp 48,1%; týp 18 33,3%; týp 16 25,9% Khơng có bệnh nhân nhiễm đơn týp 16 NHỮNG HẠN CHẾ CỦA ĐỀ TÀI VÀ KIẾN NGHỊ Mặc dù tiến hành năm số lượng bệnh nhân định týp HPV so với số mẫu sinh thiết phẫu thuật có chênh lớn Còn bỏ sót lượng lớn bệnh nhân đến điều trị thương tổn nặng nên khơng làm HPV lượng bệnh nhân từ chối xét nghiệm Trong giới hạn báo, khảo sát số bệnh nhân dương tính HPV, khơng tiến hành bệnh nhân âm tính HPV 268 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 nên chưa đưa hệ số tương quan HPV mô học Thời gian theo dõi bệnh nhân từ phát nhiễm HPV đến biểu thương tổn lâm sàng nhiều tranh cãi nên chúng tơi sót số lượng bệnh nhân giai đoạn viêm Việc điều tra chủng ngừa vắc-xin HPV chưa làm Chúng đề xuất trường hợp bệnh nhân chưa định týp HPV phết tế bào âm đạo nên định týp mẫu mô sinh thiết cổ tử cung phương pháp Realtime PCR có khuếch đại DNA đích HPV nhuộm hóa mơ miễn dịch mẫu sinh thiết TÀI LIỆU THAM KHẢO Boardman CH, Huh WK (2014), “Cervical Cancer”, Medscape Medical News, Aug 15, 2014 Dillner J., Meijer C.J (2000) “Epidemiology of human papillomavirus infection” Scand J Urol Nephrol Suppl 205:194200 Evander M., Edlund K, Gustafsson A., Jonsson M, Karlsson R, Rylander E, Wadell GJ (1995) “Human papillomavirus infection is transient in young women: a population -based cohort study” Infect Dis Apr; 171(4):1026-30 Meisels A., et al (1989) “Human papilomavirus-related changes in the genital tract.In: Human papilomavirus and Cervical Cancer” Lyon, France, International Agency for Research on Cancer, IARC Scientific Pulication No 94, pp67-85 Nguyễn Phi Hùng, Nguyễn Thị Lan Anh, Tạ Văn Tờ, Nguyễn Văn Chủ (2011), “Nghiên cứu xác định týp HPV thường gặp ung thư cổ tử cung”, Y Học TP Hồ Chí Minh,Tập 15, Phụ Số Nguyễn Sào Trung (2007), ‘HPV Và Tổn Thương Cổ Tử Cung”, Y Học TP Hồ Chí Minh,Tập 11, Phụ Số Ngày nhận báo: 20/08/15 Ngày phản biện nhận xét báo: 01/06/2015 Ngày báo đăng: 05/09/2015 ... HPV thường gặp bệnh lý cổ tử cung Phân loại mô bệnh học trường hợp nhiễm HPV đồng thời tìm hiểu phân bố týp HPV tần suất xuất týp mô bệnh học cổ tử cung nhóm bệnh 264 nhân đến khám điều trị Bệnh. .. (2011), “Nghiên cứu xác định týp HPV thường gặp ung thư cổ tử cung , Y Học TP Hồ Chí Minh,Tập 15, Phụ Số Nguyễn Sào Trung (2007), HPV Và Tổn Thương Cổ Tử Cung , Y Học TP Hồ Chí Minh,Tập 11, Phụ... sinh cổ tử cung hay ung thư cổ tử cung Điều chứng tỏ nhiều yếu tố ảnh hưởng đến nguy gây nghịch sản tế bào cổ tử cung Đầu tiên chủng HPV bị nhiễm Đã có 77 chủng HPV tìm ra, có nhóm gây bệnh người