nh viện, được ghi nhận như là một tác nhân đề kháng điều trị và khó kiểm soát. A. baumannii là thành viên quan trọng nhất của nhóm vi khuẩn A. calcoaceticus- A. baumannii (nhóm ACB), nhóm này có đặc điểm di truyền rất gần nhau và không thể phân biệt được bằng các phương pháp định danh dựa vào tính chất sinh hóa. Mục tiêu: Định danh loài Acinetobacter sp. từ các chủng thuộc nhóm ACB đã được phân lập và kiểu gen của A. baumannii.
Trang 1- Địa chỉ liên hệ: Lê Thị Ánh Ngọc, email: thiensu21989@gmail.com
- Ngày nhận bài: 5/10/2017; Ngày đồng ý đăng: 9/11/2017; Ngày xuất bản: 16/11/2017
ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC PHÂN TỬ CủA CHủNG VI KHUẨN
ACINETOBACTER BAUMANII ĐƯỢC PHÂN LẬP TẠI BỆNH VIỆN
TRUNG ƯƠNG HUẾ VÀ BỆNH VIỆN ĐẠI HỌC Y DƯỢC HUẾ
Lê Thị Ánh Ngọc 1 , Lê Nữ Xuân Thanh 1 , Nguyễn Thị Nam Liên 3 , Ngô Viết Quỳnh Trâm 1 , Antonella Santon 2 , Pietro Cappuccinelli 2
(1) Trường Đại học Y Dược - Đại học Huế (2) Trường Đại học Sassari, Ý; (3) Bệnh viện Trung ương Huế
Tóm tắt
Đặt vấn đề: Acinetobacter baumannii đề kháng carbapenem là tác nhân phổ biến nhất gây nhiễm trùng bệnh viện, được ghi nhận như là một tác nhân đề kháng điều trị và khó kiểm soát A baumannii là thành viên quan trọng nhất của nhóm vi khuẩn A calcoaceticus- A baumannii (nhóm ACB), nhóm này có đặc điểm
di truyền rất gần nhau và không thể phân biệt được bằng các phương pháp định danh dựa vào tính chất sinh hóa. Mục tiêu: Định danh loài Acinetobacter sp từ các chủng thuộc nhóm ACB đã được phân lập và kiểu gen của A baumannii Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang Đối tượng nghiên cứu là 90
chủng vi khuẩn thuộc nhóm ACB được phân lập tại Bệnh viện Đại học Y Dược Huế và Bệnh viện Trung ương Huế Thực hiện kỹ thuật PCR đa mồi trên đoạn gen gyrB và giải trình tự đoạn gen rpoB để định danh loài Xác
định mức độ kháng kháng sinh bằng phương pháp Kirby- Bauer Thực hiện kĩ thuật Multi Locus Sequence
Type (MLST) cho 24 chủng A baumannii để xác định kiểu gen Kết quả: Các loài Acinetobacter sp được định
danh là: A.baumannii (85,6%), A nosocomialis (11,11%) và A pittii (3,33%) Tất cả v i khuẩn nhóm ACB nhạy
cảm với colistin và đề kháng với cefotaxim, amikacin Hơn 90% các chủng A.baumannii đề kháng với nhóm carbapenem Mười một kiểu gen của các chủng A.baumannii được xác định; trong số đó có hai kiểu gen mới (ST1463 và ST1464) và 7 kiểu gen thuộc phức hợp dòng vô tính 92 (Clonal Complex 92-CC92), đây là dòng được phân bố rộng rãi nhất trên thế giới; cả hai bệnh viện đang lưu hành các chủng có kiểu gen tương tự nhau (ST795, ST797 và ST1463) Kết luận: Phối hợp kỹ thuật PCR đa mồi trên gen gyrB và giải trình tự gen
rpoB cho phép xác định được các loài Acinetobacter sp Kỹ thuật MLST xác định được 11 kiểu gen từ 24 chủng A.baumannii ở hai bệnh viện ở Huế.
Từ khóa: nhóm ACB, Acinetobacter baumannii; MLST.
Abstract
MOLECULAR CHARACTERIZATION OF
ACINETOBACTER BAUMANNII ISOLATES
IN HUE CENTRAL HOSPITAL AND HUE UNIVERSITY HOSPITAL
Le Thi Anh Ngoc 1 , Le Nu Xuan Thanh 1 , Nguyen Thi Nam Lien 3 , Ngo Viet Quynh Tram 1 , Antonella Santon 2 , Pietro Cappuccinelli 2 (1) Hue University of Medicine and Pharmacy - Hue University (2) Unversity of Sassari, italia; (3) Hue Central Hospital
Introduction: Acinetobacter baumannii resistant to carbapenem is the most common cause of
nosoco-mial infection, they are recognized as one of the most difficult to control and treat resistant agents A
bau-mannii is the most important member of A calcoaceticus- A baubau-mannii complex (ACB complex), which are
closely related genetically then biochemical test systems are not able to identify unambiguously genomic
species Objective: To identify species of Acinetobacter sp strains of ACB complex and sequence types of A
baumannii strains Methods: Cross- sectional study The subjects were 90 strains of ACB complex isolated and
identified by biochemical methods at Hue University Hospital (UH) and Hue Central Hospital (CH)
Perform-ing the multiplex PCRs on the target gene gyrB and sequencPerform-ing rpoB gene to identify species DeterminPerform-ing of
antibiotic resistance by Kirby-Bauer method Multi Locus Sequence Type (MLST) method was performed for
24 strains of A baumannii to identify sequence types Results: Acinetobacter sp were identified as
Trang 2A.bau-mannii (85.6%), A nosocomialis (11.11%) and A pittii (3.33%) All strains of ACB complex were sensitive
to colistin and resistant to cefotaxime, amikacin More than 90% of A.baumannii strains were resistant to
carbapenem Eleven sequence types (STs) of A.baumannii strains were identified; two of them were news (ST1463 and ST1464) and seven STs belonged to the Clonal Complex 92 (CC92), the most globally distributed clones; the ST795, ST797 and ST1463 are circulating in both of hospitals Conclusion: Combining multiplex
PCRs on the target gene gyrB and sequencing rpoB gene have shown to be adequate for Acinetobacter sp
identification MLST identified 11 sequence types from 24 A.baumannii isolates at two hospital in Hue.
Key words: ACB complex, Acinetobacter baumannii; MLST.
1 ĐẶT VẤN ĐỀ
Trực khuẩn gram âm Acinetobacter baumannii
là tác nhân gây nhiễm trùng bệnh viện quan trọng
nhất hiện nay, thường được phân lập trên các bệnh
như viêm phổi, nhiễm trùng vết mổ và nhiễm trùng
máu từ những bệnh nhân nặng, suy giảm miễn dịch
nằm ở các khoa Chăm sóc đặc biệt (Intensive Care
Unit: ICU)[1] Vi khuẩn này được ghi nhận đề kháng
với hầu hết các nhóm kháng sinh, bao gồm cả kháng
sinh nhóm carbapenem, nhóm kháng sinh được sử
dụng rộng rãi để điều trị những bệnh nhiễm trùng
nghiêm trọng do các loại vi khuẩn Acinetobacter đa
kháng thuốc Trong đó A baumannii là thành viên
quan trọng nhất của nhóm vi khuẩn A calcoaceticus-
A baumannii (nhóm ACB) bao gồm: A baumannii,
A nosocomialis, A pittii và A calcoaceticus, nhóm
này có đặc điểm di truyền rất gần nhau và không thể
phân biệt được bằng các phương pháp định danh
dựa vào tính chất sinh hóa [2] Bên cạnh đó, nhiều
nghiên cứu đã cho thấy rằng dịch Acinetobacter liên
quan đến chủng đa kháng thuốc có thể gặp trên
toàn quốc và thế giới [3] Do đó xếp nhóm các loài
gần giống nhau thành một nhóm phức hợp có thể
gặp nhiều khó khăn và có thể gây nhầm lẫn vì chúng
có thể có ý nghĩa lâm sàng khác nhau.Vì vậy, việc
định danh loài và xác định kiểu gen được đặt ra để
phục vụ công tác nghiên cứu, kiểm soát nhiễm trùng
và điều trị
Để góp phần hiểu rõ hơn về dịch tễ học phân
tử của A baumannii của các nhiễm trùng do A
baumannii ở hai bệnh viện Trung ương Huế và bệnh
viện Trường Đại học Y Dược Huế chúng tôi thực hiện
đề tài này nhằm định danh loài Acinetobacter sp từ nhóm ACB đã được phân lập bằng nuôi cấy và xác định kiểu gen của các chủng A baumannii
2 ĐốI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHáP NGHIÊN CỨU 2.1 Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt
ngang
2.2 Đối tượng nghiên cứu: 90 chủng vi khuẩn
thuộc nhóm ACB được thu thập từ tháng 3-2016
đến tháng 9-2016 ở các đơn vị lâm sàng khác nhau, trong đó có 73 chủng từ 16 đơn vị tại Bệnh viện Trung ương Huế và 17 chủng từ 5 đơn vị tại bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế Những mẫu này
đã được phân lập, định danh là vi khuẩn nhóm A
baumannii bằng bộ sinh phẩm định danh vi khuẩn
API 20E (bioMérieux, Pháp)
2.3 Phương pháp nghiên cứu
- Định danh loài bằng kỹ thuật PCR đa mồi trên
gen gyrB và giải trình tự một phần gen rpoB theo
quy trình của Lee và cộng sự (hình 1)[4]
Hình 1 Các vị trí bắt cặp của các mồi được sử dụng trong kĩ thuật PCR đa mồi trên gen gyrB,
kích cỡ của sản phẩm PCR và các loài Acinetobacter sp được đặc trưng
(GS3 = A pittii; GS = A nosocomialis)
- Xác định mức độ kháng kháng sinh bằng
phương pháp Kirby- Bauer trên môi trường Mueller
Hinton (MH) và đọc kết quả theo tiêu chuẩn CLSI
(2015)
- Xác định kiểu gen bằng kỹ thuật MLST cho 24 chủng A baumannii được phân bố theo các khoa phòng bệnh viện (Bảng 1) Phân tích kết quả bằng
hệ thống dữ liệu thông tin của Oxford [15]
Trang 3Bảng 1 Sự phân bố 24 chủng vi khuẩn A.baumannii sử dụng MLST ở khoa phòng bệnh viện
597
Bệnh viện trung ương Huế
Khoa Ngoại lồng ngực
270
Trung tâm Hồi sức tích cực
S3
63
S2
789
616
502
340
S9
36
Bệnh viện trường ĐH Y Dược Huế
Khoa Hồi sức cấp cứu
34
S11
29
Chương trình eBURSTv3 (http://eburst.mlst.net/) được sử dụng để phân lập các phức hợp kiểu gen và để đánh giá các mối quan hệ di truyền
3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN
3.1 Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn nhóm ACB theo Khoa lâm sàng
Biểu đồ 1 Tỷ lệ phân bố vi khuẩn nhóm ACB theo khoa lâm sàng
Trang 4Nhiều nghiên cứu đã cho thấy A baumannii liên
quan nhiều nhất đến tình trạng nhiễm khuẩn bệnh
viện ở khắp nơi trên thế giới, chiếm khoảng 80% số
ca bệnh được báo cáo trong tài liệu [11]
Chúng phân bố chủ yếu ở khoa Chăm sóc đặc
biệt từ bệnh phẩm đàm và mủ [12] Ở Bệnh viện
Trung ương Huế, khoa lâm sàng có tỷ lệ nhiễm
Acinetobacter sp cao nhất là các khoa Chăm sóc đặc
biệt (60,3%), còn ở bệnh viện Trường Đại học Y Dược
Huế là ở các khoa Ngoại (70,6%) Acinetobacter sp
được xem như là một tác nhân thường trú trong bệnh viện và có khả năng phát tán và lây lan thành các vụ dịch, đặc biệt là ở khoa Chăm sóc đặc biệt,
ở những bệnh nhân nặng, nằm điều trị kéo dài, có thực hiện các thủ thuật xâm lấn giúp chẩn đoán, điều trị
3.2 Định danh loài bằng kĩ thuật PCR đa mồi trên gen gyrB và giải trình tự một phần gen rpoB
Bảng 2 Tỷ lệ phân bố 90 chủng vi khuẩn nhóm ACB API 20E Loài GyrB multiplex (N) sequencing (N) Partial rpoB Tổng %
ACB
Thực hiện hai kỹ thuật PCR đa mồi PCR1 và PCR2
cho tất cả 90 chủng Acinetobacter sp xác định được
77 chủng thuộc loài A baumannii (chiếm tỷ lệ cao
nhất 85,56%), 9 chủng thuộc loài A nosocomialis và
2 chủng thuộc loài A pittii Có hai chủng vi khuẩn âm
tính với cả PCR 1 và 2, được xác định bằng giải trình
tự một phần gen rpoB là A nosocomialis và A pittii
(Bảng 2) Kết quả của chúng tôi phù hợp với các báo cáo khác ở Bệnh Viện Chợ Rẫy, Viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh [7], [8] Bên cạnh đó, kết quả cho thấy kỹ thuật sinh học phân tử này là một công cụ có giá trị
để xác định loài A baumannii.
3.3 Tỉ lệ đề kháng kháng sinh của các chủng vi
khuẩn thuộc nhóm ACB
Bảng 3 phân bố 90 chủng vi khuẩn nhóm ACB đề kháng kháng sinh
A baumannii (n=77) A.nosocomialis A.pitii
β-lactam
Aminoglycoside
Amikacin 30 µg
Fluoroquinolone
Levofloxacin 5 µg
Kết quả kháng sinh đồ cho thấy vi khuẩn nhóm
ACB đề kháng với hầu hết kháng sinh nhóm β-lactam,
aminoglycoside, fluoroquinolone, sulfamide với tỷ
lệ đề kháng cao, cao nhất là cefotaxim, amikacin
(100%) Tỷ lệ đề kháng của A.baumannii với kháng
sinh nhóm carbapenem cũng rất cao trên 90%
(imipenem 73/77 và meropenem 71/77) Duy nhất
chỉ có kháng sinh colistin là còn nhạy cảm 100% với
tất cả các loài Kết quả này cũng tương tự như báo
cáo tại bệnh viện Bệnh viện Bệnh Nhiệt Đới Trung Ương, Hà Nội, hơn 90% số chủng vi khuẩn phân lập được là đề kháng với cacbapenem; 25,4% kháng với tất cả các kháng sinh thuộc nhóm β-lactam, quinolones và aminoglycosides; tất cả các chủng vi khuẩn đều còn nhạy cảm với colistin [5] Sự thường
gặp của chủng A baumannii kháng carbapenems
đã đạt đến mức báo động trong thập kỷ qua ở những vùng khác nhau trên thế giới trong đó có việt
Trang 5nam [9], tỷ lệ này đặc biệt cao ở các nước Đông
Nam Á như Thái Lan (76,3%), Việt Nam (89,5%) và
Singapore (90,5%) [10]
Ngoài ra, kết quả cũng cho thấy sự nổi lên của
các chủng thuộc hai loài còn lại A nosocomialis và A
pittii mặc dù ở mức độ thấp hơn A.nosocomialis và
A pittii là những mầm bệnh cơ hội quan trọng cũng
có liên quan đến sự bùng phát nhiễm trùng bệnh
viện [6]
Vi khuẩn ngày càng trở nên đề kháng kháng sinh
làm cho việc điều trị một số bệnh nhiễm trùng bị
thất bại Tần số cao bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch,
liên quan đến việc nằm điều trị lâu dài tại các đơn vị
ICU, cùng với các bề mặt của các dụng cụ can thiệp ở
bệnh nhân như catheter, shunts, ventilators và tiếp
xúc vật lý trong quá trình chăm sóc người bệnh làm
cho bệnh viện trở thành môi trường lý tưởng cho sự
phát triển và lan truyền của vi khuẩn A baumannii
gây bệnh cơ hội Kháng sinh được sử dụng một cách
rộng rãi để điều trị các bệnh nhiễm trùng, sự lạm
dụng kháng sinh quá mức đã tạo áp lực cho vi khuẩn
phát triển thành những dòng kháng thuốc
3.4 Multilocus Sequence Typing của A
baumannii và phân tích eBURST v3
A baumannii kháng carbapenem (CRAb) được
đánh giá là một trong những loại vi khuẩn khó điều
trị và kiểm soát, tạo ra mối quan tâm lớn của cộng
đồng Điều này tạo ra nhu cầu theo dõi liên tục sự
phát triển và lây lan của chúng thông qua các cuộc
điều tra dịch tễ học phân tử Kết quả phương pháp
phân tích kiểu chuỗi dựa vào bảy đoạn gen khác
nhau (MLST) để theo dõi nguồn lây truyền và bùng
phát các chủng A baumannii gây nhiễm trùng bệnh
viện, MLST là một công cụ hiệu quả giúp phân loại
kiểu gen, lưu trữ và tái sử dụng các dữ liệu gen
trên hệ thống Mười một kiểu gen (ST) khác nhau
đã được xác định trên 24 chủng A.baumannii; bao
gồm kiểu gen ST795 (8/24) và ST797 (4/24) , tiếp
theo là ST1463 (2/24), ST800 (2/24), ST451 (2/24) và
các kiểu gen ST195, ST738, ST801, ST848, ST860 và
ST1464 chỉ gặp ở một chủng
Biểu đồ 2 dưới đây thể hiện kết quả MLST Kết quả
MLST cho thấy sự lan truyền các chủng A.baumannii
trong bệnh viện và giữa các bệnh viện vì cả hai đều đang lưu hành các kiểu gen tương tự nhau (ST795, ST797 và ST1463) Nhóm kiểu gen ST195 kháng carbapenem, phân lập ở Bệnh viện Trung ương Huế,
đã được tìm thấy trước đây (từ tháng 8 năm 2010 đến tháng 12 năm 2014) ở Hà Nội (doi: 10.1007/ s10096-016-2784-8), trong khi ST795, ST797 hiện diện ở cả hai bệnh viện, và ST800 và ST801, hiện diện ở Bệnh viện Trung ương Huế, gần đây được tác giả Tatsuya Tada (Hồ Chí Minh) phân lập tại thành phố Hồ Chí Minh, nhưng số liệu vẫn chưa được công
bố [14] Một số chủng ở các khoa phòng thuộc nhiều bệnh viện ở Việt Nam, có kiểu gen tương đồng có thể giải thích do sự lây truyền giữa hai bệnh viện qua bệnh nhân và/hoặc nhân viên y tế, đặc biệt là các bác sĩ làm việc ở nhiều bệnh viện Vấn đề này
đòi hỏi việc giám sát lây lan A.baumannnii nên được
thực hiện bằng việc cải thiện các biện pháp vệ sinh, như rửa tay trước khi chăm sóc bệnh nhân và đảm bảo rằng các thiết bị y tế được sử dụng trên bệnh nhân được khử trùng một cách hiệu quả [13], đặc biệt trong các Khoa Ngoại của bệnh viện Đại học Y Dược Huế và trong Khoa Hồi sức tích cực của Bệnh
viện Trung ương Huế, nơi các chủng A baumannii
được phân lập chủ yếu, có thể hạn chế sự khuếch tán giữa các khoa và bệnh viện
Phân tích bằng chương trình eBurst cho thấy bảy trong số mười một kiểu gen xác định thuộc phức hợp dòng vô tính 92 (CC92) tương ứng với phức hợp CC2 thuộc hệ thống Pasteur, dòng này chiếm chủ yếu
và phân bố rộng khắp trên thế giới [15] Hai trong bốn kiểu gen không thuộc CC92 là các kiểu gen mới: ST1463 (2/24) và ST1464 (1/24) do bắt nguồn từ sự kết hợp mới của các allen đã có trong cơ sở dữ liệu
MLST của A.baumannii.
Trong hai chủng có kiểu gen ST1463, một chủng được phân lập ở bệnh viện ĐHY Dược Huế (Khoa ngoại lồng ngực) đề kháng carbapenem, chủng còn lại được phân lập từ đơn vị ICU ở Bệnh viện Trung ương Huế nhạy cảm với carbapenem và các kháng sinh khác Hai kiểu gen còn lại là ST738 thuộc CC109 (Pasteur CC1) và ST860 (Bảng 1)
Biểu đồ 2 Phân bố các kiễu chuỗi của A baumannii trong hai bệnh viện
Trang 6Hình 2 Kết quả phân tích eBURST 7 kiểu gen (STs) của A.baumannii thuộc CC92
(ST195, ST801, ST451, ST848, ST800, ST797, ST795)
CC92
Kết quả từ sơ đồ eBurst cũng cho thấy tại Bệnh viện Trung ương Huế, đang có sự tiến hóa của một chủng mang kiểu gen ST848 (chủng n ° 603) bắt nguồn từ ST451 (n ° 710), là biến thể locus duy nhất của nó trong
allele gyrB (Hình 2).
4 KẾT LUẬN
Phối hợp kỹ thuật PCR đa mồi trên gen gyrB và
giải trình tự gen rpoB cho phép xác định được các loài
Acinetobacter sp Các loài Acinetobacter sp được
định danh là: A.baumannii (85.6%), A nosocomialis
(11,11%) và A pittii (3,33%) Kỹ thuật MLST xác
định được 11 kiểu gen từ 24 chủng A.baumannii ở
hai bệnh viện ở Huế; trong số đó có hai kiểu gen mới (ST1463 và ST1464) và 7 kiểu gen thuộc phức hợp dòng vô tính 92 (Clonal Complex 92-CC92); cả hai bệnh viện đang lưu hành các chủng có kiểu gen tương tự nhau (ST795, ST797 và ST1463)
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Bernards A.T, Toorn J.Van Der, Van Boven C P A,
and Dijkshoorn L (1996) “Evaluation of the ability of a
commercial system to identify Acinetobacter genomic
species” Eur J Clin Microbiol infect Dis., vol 15, no 4,
pp 303–308.
2 H J Doughari, P A Ndakidemi, I S Human, and S
Benade(2011), “The ecology, biology and pathogenesis of
Acinetobacter spp.: an overview.,” Microbes Environ., vol
26, no 2, pp 101–112.
3 L L Maragakis and T M Perl (2008) “Antimicrobial
Resistance: Acinetobacter baumannii: Epidemiology,
Anti-microbial Resistance, and Treatment Options,” Clin infect
Dis., vol 46, no 8, pp 1254–1263.
4 M J Lee et al.(2014), “Comparison of rpoB gene
sequencing, 16S rRNA gene sequencing, gyrB multiplex
PCR, and the VITEK2 system for identification of Acineto-bacter clinical isolates,” Diagn Microbiol infect Dis., vol
78, no 1, pp 29–34, 2014.
5 N Suwantarat and K C Carroll (2016), “Epidemiol-ogy and molecular characterization of multidrug-resistant Gram-negative bacteria in Southeast Asia ,” Antimicrob Resist Infect Control, vol 5, no 1, p 15.
6 H Van Dessel et al.,(2002) “Outbreak of a suscep-tible strain of Acinetobacter species 13 (sensu Tjernberg
Trang 7and Ursing) in an adult neurosurgical intensive care unit,”
J Hosp infect., vol 51, no 2, pp 89–95,.
7 Dương Hoàng Lân, Trần Thị Thanh Nga, Mai
Ng-uyệt Thu Hồng, Lục Thị Vân Bích (2012).“Tình hình nhiễm
Acinetobacter spp nhập viện tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ
01-9-2010 đến 31-12-2010” Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh ,
16 (1), tr.104-109
8 Ngô Thị Hồng Phương, Nguyễn Quốc Hiệu, Cao Hữu
Nghĩa, Vũ Lê Ngọc Lan, Trần Thái Thanh (2013) “Tình hình
kháng kháng sinh của Acinetobacter baumannii phát hiện
được tại viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh” Tạp chí Khoa học
ĐHSP TPHCM 47, tr.112-118.
9 R Zarrilli, M Giannouli, F Tomasone, M Triassi,
and A Tsakris (2009), “Carbapenem resistance in
Acineto-bacter baumannii: The molecular epidemic features of an
emerging problem in health care facilities,” J infect Dev
Ctries., vol 3, no 5, pp 335–341.
10 P Kiratisin et al (2012), “Comparative in vitro
activity of carbapenems against major Gram-negative
pathogens: Results of Asia-Pacific surveillance from the
COMPACT II study,” Int J Antimicrob Agents, vol 39, no
4, pp 311–316.
11 Apic (2010), Guide to the Elimination of Acineto-bacter baumannii Transmission in Healthcare Settings
12 J Wang et al.(2014), “Species distribution of
clini-cal Acinetobacter isolates revealed by different
identifica-tion techniques,” PLoS one, vol 9, no 8, pp 1–7.
13 L Dijkshoorn, A Nemec, and H Seifert (2007), “An
increasing threat in hospitals: multidrug-resistant Acine-tobacter baumannii,” Nat Rev Microbiol, vol 5, no 12, pp
939–951.
14 A Hamouda, B A Evans, K J Towner, and S G
B Amyes (2010), “Characterization of epidemiologically
unrelated Acinetobacter baumannii isolates from four
continents by use of multilocus sequence typing, pulsed-field gel electrophoresis, and sequence-based typing of
blaOXA-51-like genes,” J Clin Microbiol., vol 48, no 7,
pp 2476–2483.
15 Acinetobacter baumannii MLST (Oxford)
https://pubmlst.org/bigsdb?db=pubmlst_abau-mannii_oxford_seqdef