Bài viết trình bày việc xác định tỉ lệ biểu hiện quá mức EGFR và tỉ lệ biểu hiện p16 trên bệnh nhân HNSCC bằng phương pháp hóa mô miễn dịch.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Nghiên cứu Y học BIỂU HIỆN EGFR VÀ P16 TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ TẾ BÀO GAI VÙNG ĐẦU CỔ Trần Ngọc Tường Linh*, Hứa Thị Ngọc Hà**, Trần Minh Trường*, Nguyễn Sào Trung** TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tỉ lệ biểu mức EGFR tỉ lệ biểu p16 bệnh nhân HNSCC phương pháp hóa mơ miễn dịch Phương pháp đối tượng nghiên cứu: Mô tả cắt ngang Đối tượng nghiên cứu gồm 72 trường hợp carcinôm tế bào gai vùng đầu cổ chẩn đoán phẫu thuật khoa Tai Mũi Họng – Bệnh viện Chợ Rẫy Bệnh viện Đại học Y dược từ tháng / 2014 đến tháng / 2015 Kết quả: Tỉ lệ biểu mức EGFR tỉ lệ có biểu p16 80,56% 15,28% Biểu EGFR khơng liên quan đến vị trí ung thư liên quan có ý nghĩa đến giai đoạn ung thư độ biệt hóa ung thư Biểu p16 khơng liên quan tới tuổi, vị trí ung thư, giai đoạn độ biệt hóa ung thư có liên quan đến thói quen quan hệ tình dục đường miệng Kết luận: Tỉ lệ biểu mức EGFR nghiên cứu chiếm tỉ lệ cao, có liên quan đến giai đoạn độ biệt hóa ung thư Trong tỉ lệ biểu p16 chiếm tỉ lệ thấp, có liên quan đến thói quen tình dục đường miệng Từ khóa: carcinơm tế bào gai vùng đầu cổ, biểu EGFR, biểu p16 ABSTRACT EXPRESSION OF EGFR AND P16 IN HEAD AND NECK SQUAMOUS CELL CARCINOMA Tran Ngoc Tuong Linh, Hua Thi Ngoc Ha, Tran Minh Truong, Nguyen Sao Trung, * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 19 - No - 2015: 45 - 52 Objective: To determine the rate of EGFR protein overexpression and p16 protein expression in head and neck squamous cell carcinoma by immunohistochemistry Methods: A cross- sectional study with 72 cases of head and neck squamous cell carcinoma diagnosed and operated at ENT department of Cho Ray Hospital and University Medical Center HCMC Results: The rate of EGFR overexpression and p16 expression in our study is 80.56% and 15.28% respectively In multivariate analysis, no correlation was found between EGFR expression and other characteristics such as age, tumor site but with tumor stage and tumor differentiation significantly Expression of p16 does not correlate with age, tumor site, and tumor stage and tumor differentiation P16 expression correlates with oral sex behavior Conclusion: The overexpression rate of EGFR is high in head and neck squamous cell carcinoma and correlates with tumor stage and tumor differentiation While the rate of p16 expression is low and correlates with oral sex behavior Keywords: head and neck squamous cell carcinoma, EGFR, p16 thường gặp đứng thứ tổng số loại ung MỞ ĐẦU thư, với khoảng 600000 trường hợp chẩn Ung thư vùng đầu cổ nhóm ung thư * Khoa Tai Mũi Họng BV Chợ Rẫy ** Bộ Môn Giải phẫu bệnh – Đại Học Y Dược TP HCM Tác giả liên lạc: ThS BS Trần Ngọc Tường Linh ĐT: 0989.047.099 Email: tranngoctuonglinh@gmail.com 45 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 đoán năm giới(8) Trên 85% ung thư vùng ung thư biểu mô, đặc biệt ung thư tế bào gai (ung thư tế bào gai vùng đầu cổ - head and neck squamous cell carcinoma - HNSCC) lọc, thuốc giảm tác dụng phụ mà thuốc hóa trị thường gặp(11) Về phương diện tiên lượng, biểu mức EGFR yếu tố tiên lượng xấu đến tỉ lệ sống chung, tỉ lệ tái phát chỗ tỉ lệ di xa(1,4) Thập niên vừa qua ghi nhận tiến nghiên cứu sở sinh học ung thư Và ngành sinh học phân tử đời đánh dấu bước tiến lớn nhiều phương diện ung thư học, đặc biệt phương diện: tiên lượng điều trị Các công trình nghiên cứu quốc tế ghi nhận tình trạng nhiễm vi-rút u nhú người (human papilloma virus status – HPV status) biểu thụ thể yếu tố tăng trưởng thượng bì (epidermal growth factor receptor expression – EGFR expression) có ảnh hưởng đến tỉ lệ sống chung, tỉ lệ sống khơng tiến triển khả đáp ứng với hóa/xạ trị ung thư Như vậy, việc nghiên cứu biểu EGFR tình trạng nhiễm HPV (qua đánh giá biểu p16) rõ ràng đem lại thơng tin hữu ích cho thầy thuốc bệnh nhân phương diện tiên lượng điều trị Giá trị tiên lượng dự hậu bệnh nhân qua biểu p16 biểu EGFR đặt vấn đề cho nhà ung thư học lựa chọn phác đồ điều trị phù hợp cho nhóm bệnh nhân Nhóm bệnh nhân đánh giá tiên lượng xấu điều trị với phác đồ điều trị tích cực hơn(3) Tình trạng nhiễm HPV chứng minh yếu tố nguy độc lập gây HNSCC, bên cạnh hút thuốc uống rượu bia Một phát thú vị năm qua là, bệnh nhân HPV (+) có tiên lượng tốt so với nhóm bệnh nhân HPV (-)(2) Có nhiều cách để đánh giá tình trạng nhiễm HPV, đánh giá biểu p16 qua hóa mơ miễn dịch chứng minh xét nghiệm đáng tin cậy có phần ưu so sánh với phương pháp khác (như PCR, miễn dịch huỳnh quang) để xác định tình trạng nhiễm HPV(10) Những ưu điểm đánh giá biểu p16 bao gồm: độ nhạy cao, liên quan đến đường HPV gây ung thư kĩ thuật thực không phức tạp Thụ thể yếu tố tăng trưởng thượng bì (EGFR) mắt xích quan trọng chuỗi đường tín hiệu hình thành phát triển ung thư tế bào gai vùng đầu cổ Hoạt hóa mức EGFR dẫn đến rối loạn tăng sinh tế bào, tăng sinh mạch máu, tăng xâm nhập di khối u Về phương diện điều trị, xuất phương pháp điều trị nhắm trúng đích vào đường hoạt hóa EGFR Do tác động có chọn 46 ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu 72 bệnh nhân chẩn đốn carcinơm tế bào gai vùng đầu cổ (khoang miệng, họng miệng, hạ họng, quản) nhập khoa Tai Mũi Họng – Bệnh Viện Chợ Rẫy Bệnh viện Đại học Y Dược từ tháng 9/2014- 5/2015 Phương pháp nghiên cứu Cắt ngang mô tả Các bước tiến hành - Chọn bệnh nhân thỏa tiêu chí chọn bệnh Ghi nhận phần hành chánh, yếu tố nguy cơ, triệu chứng lâm sàng, phân độ TNM, kết cận lâm sàng, kết giải phẫu bệnh Các mẫu bệnh phẩm sau phẫu thuật bệnh nhân cố định formol đệm trung tính 10% vòng 30 phút từ lúc lấy mẫu khỏi thể Bệnh phẩm cố định – 48 - Đọc kết tiêu nhuộm Hematoxylin- Eosin: Loại mô học: carcinôm tế bào gai Độ mô học: biệt hóa cao, biệt hóa trung bình, biệt hóa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Số * 2015 Đánh giá mức độ xâm lấn khối u - Khảo sát kết nhuộm hóa mơ miễn dịch EGFR, p16 kính hiển vi quang học với bác sĩ Giải phẫu bệnh có kinh nghiệm hóa mơ miễn dịch - Quy trình nhuộm đánh giá biểu EGFR, p16 hóa mơ miễn dịch Phương pháp nhuộm: nghiên cứu sử dụng phương pháp nhuộm máy Ventana Benchmark XT với ưu điểm: kết ổn định so với phương pháp nhuộm tay, dễ tính tốn hóa chất kháng thể(7) Kháng thể sử dụng: + Kháng thể EGFR L858R (clone SP125) Roche, kháng thể đơn dòng thỏ + Kháng thể CINtec® p16 Histology (clone E6H4) Roche, kháng thể đơn dòng chuột Chất tạo màu sử dụng: Ultraview Universal DAB (Diaminobenzidine) Detection Kit gồm: + DAB Inhibitor (3% H2O2) + HRP Multimer (