Bài viết xác định độ ổn định của mẫu huyết thanh đông khô trong quá trình lưu trữ ở nhiệt độ 2 - 8 độ C và khi vận chuyển đến các phòng xét nghiệm.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA MẪU HUYẾT THANH ĐÔNG KHƠ ỨNG DỤNG CHO NGOẠI KIỂM HĨA SINH Vũ Quang Huy*,**,***, Nguyễn Thị Thanh Ngân**** TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định độ ổn định mẫu huyết đông khô trình lưu trữ nhiệt độ - 8oC; vận chuyển đến phòng xét nghiệm Phương pháp: Nghiên cứu thực nghiệm Các lọ huyết đơng khơ kiểm tra âm tính với HIV, HBV, HCV trình sản xuất lưu trữ nhiệt độ - 8oC Sau mẫu hồn ngun với ml nước cất phân tích lặp lại lần sau 1, 2, 4, tháng cho mẫu lưu trữ nhiệt độ - 8oC Một số mẫu lưu trữ - 8oC gửi đến phòng xét nghiệm yêu cầu chuyển nguyên lại trung tâm mà không mở ra, sau hồn ngun phân tích độ ổn định vận chuyển Kết quả: Khi so sánh với nồng độ thời điểm ban đầu sau sản xuất, mẫu huyết đông khô cho xét nghiệm: Ure, Creatinin, AST, ALT, GGT, Glucose, Uric acid, Cholesterol, Triglycerid hầu hết có P-value < 0,05, khơng đạt độ ổn định Nhưng hầu hết xét nghiệm đạt độ ổn định với P-value > 0,05 thời điểm tháng so sánh với nhiệt độ thời điểm tháng - 8oC Các xét nghiệm có giá trị khoảng ± 2SD so với giá trị ban đầu trước vận chuyển nên đánh giá đạt độ ổn định vận chuyển Kết luận: Mẫu huyết đông khô cho xét nghiệm: Ure, Creatinin, AST, ALT, GGT, Glucose, Uric acid, Cholesterol, Triglycerid đạt độ ổn định tháng nhiệt độ - 8oC so sánh với nồng độ mẫu ban đầu lưu trữ nhiệt độ Mẫu huyết đông khô ổn định ngày vận chuyển Từ khóa: Huyết đơng khơ, ổn định lưu trữ, vận chuyển ABSTRACT THE STUDY OF STABILITY OF LYOPHILIZED SERUM FOR BIOCHEMICAL EXTERNAL QUALITY ASSESSMENT SCHEME Vu Quang Huy, Nguyen Thi Thanh Ngan * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 22 - No 5- 2018: 227- 232 Objectives: To determine the stability of lyophilized serum during storage at - 8oC; and during transportation to laboratories Methods: Experimental study Lyophilized serum vials were tested negative for hepatitis B and C and for HIV and while production process, then storage at - 8oC After they were reconstituted with ml distilled water and analyzed in duplicate after 1, 2, 4, months at - 8oC Others vials which storaged at - 8oC were posted to another laboratory and requesting that they be returned by post to the Organizer without opening, then reconstitute and analyzed in duplicate for studying stability during transportation Results: When compared with the initial concentrations which were after production process, the whole analytes: Ure, Creatinin, AST, ALT, GGT, Glucose, Uric acid, Cholesterol, Triglycerid had p-value ≤ 0.05, so they were instable But many analytes were stable with P-value > 0.05 at second month when compared with initial concentration at the first month at - 8oC Their result of transportation was within range of the target *Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, **Bệnh viện Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh ***Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm Y học - Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh **** Bệnh viện Ung Bướu thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS TS Vũ Quang Huy, ĐT: 0913586389, Email: drvuquanghuy@gmail.com Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học 227 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 value ± 2SD in about days, so they were stable during transportation Conclusions: The lyophilized serum for analytes: Ure, Creatinin, AST, ALT, GGT, Glucose, Uric acid, Cholesterol, Triglycerid were stable up to month at - 8oC when compared with the initial concentrations were also stored at the same temperature And they were stable during transportation in days Keywords: Lyophilized serum, stability during storage, transportation với số loại mẫu chuẩn(8) Tiêu chuẩn không ĐẶT VẤN ĐỀ cho phép bỏ qua tác động việc vận chuyển Ngoại kiểm tra chất lượng xét nghiệm vật liệu dù trì điều kiện vận chuyển công tác đánh giá việc thực xét nghiệm cho phép Vì vậy, để đưa khuyến cáo thích phòng xét nghiệm thơng qua so sánh hợp nhiệt độ thời gian bảo quản mẫu liên phòng xét nghiệm, giúp đảm bảo kết trình lưu trữ vận chuyển, đáp ứng đáng tin cậy cho phòng xét nghiệm, sở độ ổn định mẫu vòng khám chữa bệnh, bác sĩ lâm sàng, bệnh nhân, thử nghiệm thành thạo sau vận chuyển đến quan quản lý,… phòng xét nghiệm thuộc vùng miền Hiện nay, mẫu cung cấp cho chương nước, đề tài “Nghiên cứu độ ổn định trình EQA chủ yếu nhập từ nước mẫu huyết đơng khơ sử dụng cho ngoại ngồi với giá thành cao Một số nước kiểm Hóa sinh” thực giới Bhutan, Hàn Quốc,… tự sản Mục tiêu nghiên cứu xuất mẫu dùng cho chương trình ngoại kiểm Xác định độ ổn định mẫu huyết nước đông khô q trình lưu trữ - 8oC Do đó, Trung tâm kiểm chuấn chất lượng xét Xác định độ ổn định mẫu huyết nghiệm Y học thuộc Đại học Y dược thành phố đông khô trình vận chuyển mẫu đến Hồ Chí Minh đẩy mạnh quy mơ sản phòng xét nghiệm xuất chất lượng mẫu để đảm bảo mang đến PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU cho phòng xét nghiệm tham gia ngoại kiểm tra chất lượng thuộc khu vực khác Thiết kế nghiên cứu nước có mẫu ổn định, đồng Nghiên cứu thực nghiệm sau trình sản xuất vận chuyển Đối tượng nghiên cứu Theo Tổ chức Y tế giới, Các lọ huyết đơng khơ đóng gói cách, mẫu cho thử nghiệm thành Huyết đông khơ sản xuất thạo bị hư hỏng nhiệt độ thấp cách thu thập mẫu huyết không bị cao, thời gian vận chuyển kéo dài, tán huyết, khơng sử dụng để thực xét trình bốc xếp mạnh tay mức nghiệm cho bệnh nhân sau 48 Chiết tách Trong giai đoạn thử nghiệm mẫu mới, cần thực huyết 10 ống vào nghiên cứu đánh giá trình vận lọ, lắc trộn Các mẫu huyết chuyển để xác nhận mẫu có bị ảnh hưởng sàng lọc HIV, HBV, HCV; lọ dương q trình vận chuyển hay khơng tính với xét nghiệm loại Đối với chương trình ngoại kiểm tra hóa bỏ, lọ âm tính với xét sinh, Trung tâm áp dụng việc sản xuất mẫu nghiệm thu thập trữ tủ đông huyết đơng khơ quy mơ phòng thí -30oC đủ 200 ml huyết thanh, lấy ly nghiệm theo Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN tâm, rã đông phân phối vào lọ, mang 8245:2009 tương đương với tiêu chuẩn quốc tế đông khô để tạo lọ huyết đông ISO GUIDE 35:2006 Mẫu chuẩn – Nguyên tắc khô chung nguyên tắc thống kê chứng nhận, đối 228 Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Tiêu chuẩn chọn mẫu Các lọ nguyên vẹn, khô ráo, không bị nứt, mẻ nhãn không bị rách trị ban đầu xem đạt độ ổn định(10) Thu thập số liệu So với nồng độ ban đầu hầu hết xét nghiệm có P-value ≤ 0,05, nghĩa xét nghiệm khơng ổn định so với nồng độ ban đầu Tuy nhiên, xét nghiệm Creatinin sau tháng, tháng; xét nghiệm Glucose sau tháng; xét nghiệm Triglycerid sau tháng đạt độ ổn định so với nồng độ ban đầu (Bảng 1) Để thu thập số liệu cho nghiên cứu độ ổn định lưu trữ, lọ huyết đông khô sau sản xuất, lưu trữ nhiệt độ - 8oC nghiên cứu độ ổn định thời điểm 1, 2, 4, tháng Vào thời điểm nghiên cứu tương ứng cho mức nhiệt độ, lấy lọ mẫu ra, hoàn nguyên thực xét nghiệm: Ure, Creatinin (CRE), Aspartate Aminotransferase (AST), Alanin Aminotransferase (ALT), Gamma Glutamyl Transferase (GGT), Glucose, Uric acid (UA), Cholesterol (CHO), Triglycerid (TRI) hệ thống máy Beckman Coulter AU480 trung tâm kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học thuộc Đại học Y dược thành phố Hồ Chí Minh, xét nghiệm cho lọ thực lặp lại lần Để thu thập kết cho nghiên cứu độ ổn định vận chuyển, lấy 24 lọ huyết đông khô đóng gói, gửi đến 12 đơn vị thuộc khu vực khác (miền Đông Nam Bộ, Nam Trung Bộ, Tây Nguyên, miền Trung) sau chuyển nguyên lại trung tâm Sau nhận lại, mẫu hoàn nguyên thực xét nghiệm, xét nghiệm lặp lại lần hệ thống máy Beckman Coulter AU480 KẾTQUẢ Xác định độ ổn định lưu trữ Khi chọn mốc tháng - 8oC làm thời điểm ban đầu để so sánh, thời điểm tháng xét nghiệm Ure, AST, ALT, GGT, Glucose, Uric acid, Triglycerid đạt độ ổn định với Pvalue > 0,05; xét nghiệm Creatinin Cholesterol có P-value ≤ 0,05, nồng độ khác biệt so với thời điểm tháng 5,4% 2,6% Thời điểm tháng có xét nghiệm AST, ALT, UA; thời điểm tháng có xét nghiệm AST, ALT, GLU đạt độ ổn định (P-value > 0,05) so với thời điểm tháng (khi mẫu ban đầu lưu trữ - 8oC) (Bảng 2) Xác định độ ổn định vận chuyển Để đảm bảo tính bảo mật, đơn vị tham gia nghiên cứu độ ổn định mẫu vận chuyển mã hóa ký hiệu từ V1 đến V12 Dựa vào ngày (N) nhận lại mẫu từ ngày gần ngày xa để đánh giá Đánh giá độ ổn định lưu trữ dùng kiểm định t-test phần mềm STATA 13.0, mẫu đánh giá không ổn định P-value ≤ 0,05 Mẫu sau xác nhận gửi đến 12 đơn vị thuộc khu vực miền Đông Nam Bộ (V1, V2, V3), Nam Trung Bộ (V4, V5, V6), Tây Nguyên (V7, V8, V9), miền Trung (V10, V11, V12), nhân viên giao nhận hàng đơn vị vận chuyển nhận lại nguyên mẫu đóng gói chuyển lại trung tâm (TT) Tuy nhiên, trình vận chuyển ngược lại có thời gian khơng đảm bảo lúc chuyển mẫu có mẫu bị thất lạc hình thức vận chuyển đơn vị vận chuyển Đánh giá độ ổn định vận chuyển cách so sánh kết sau vận chuyển với giá trị ban đầu trước vận chuyển Nếu kết sau vận chuyển nằm giới hạn ± SD so với giá Khi đánh giá độ ổn định vận chuyển theo Tổ chức y tế giới, kết sau vận chuyển nằm giới hạn ± SD so với giá trị ban đầu xem ổn định độ ổn định Xử lý số liệu Số liệu thu thập xử lý Excel 2013 STATA 13.0 Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học 229 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 vận chuyển ngày(10) (Bảng 3) Bảng Đánh giá độ ổn định nhiệt độ 2-8oC thời điểm 1, 2, 4, tháng so với nồng độ ban đầu sau sản xuất Tên xét nghiệm Ure Cre AST ALT GGT GLU UA CHO TRI Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Nồng độ P-value Ban đầu Sau tháng Sau tháng Sau tháng Sau tháng 30,75 28,67