Sơ bộ nghiên cứu độ ổn định của viên nén amoxicilin và kali clavulanat

Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến độ ổn định của viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài.. Tuy nhiên, cả amoxicilin và kali clavulanat đều dễ bị phân

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia

Bộ môn Hóa vô cơ

HÀ NỘI - 2017

Em xin được gửi lời cảm ơn chân thành tới ban giám hiệu nhà trường, cùng toàn thể các thầy cô và cán bộ các phòng ban Trường Đại Học Dược Hà Nội đã dạy

dỗ, chỉ bảo, giúp đỡ em trong suốt thời gian học tập tại trường

Em gửi lời cảm ơn những người bạn ở Viện công nghệ, đặc biệt là các bạn Dương Thị Hương Mây, Nguyễn Văn Phương đã luôn ở bên giúp đỡ, động viên em trong suốt quá trình thực hiện khóa luận

Cuối cùng, em cũng xin cảm ơn tới gia đìnhđãkhích lệ, hỗ trợ em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này Vì thời gian thực hiện ngắn đồng thời kiến thức của bản thân còn nhiều hạn chế nên đề tài còn nhiều thiếu sót Do vậy, em rất mong có thêm

sự đóng góp của thầy cô và bạn đọc để khóa luận được hoàn thiện hơn

Em xin chân thành cảm ơn!

Hà Nội, ngày 12 tháng 5 năm 2017

Sinh viên

Vũ Thị Bích Ngọc

MỤC LỤC

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ THỊ

ĐẶT VẤN ĐỀ

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 2

1.1 Đại cương về amoxicilin 2

1.1.1 Công thức hóa học 2

1.1.2 Tính chất lý hóa 3

1.1.3 Dược động học 3

1.1.4 Cơ chế tác dụng 4

1.1.5 Phổ tác dụng 4

1.1.6 Chỉ định 4

1.1.7 Chống chỉ định 5

1.1.8 Tác dụng không mong muốn 5

1.1.9 Liều dùng, cách dùng 5

1.1.10 Thận trọng 6

1.1.11 Độ ổn định của amoxicilin Error! Bookmark not defined 1.2 Đại cương về kali clavulanat 6

1.2.1 Công thức hóa học 6

1.2.2 Tính chất lý hóa 7

1.2.3 Dược động học 7

1.2.4 Cơ chế tác dụng 7

1.2.5 Phổ tác dụng 7

1.2.6 Độ ổn định của kali clavulanat 8

1.2.7 Độ ổn định khi kết hợp amoxicilin và kali clavulanat 8

1.3 Đại cương độ ổn định Error! Bookmark not defined

1.3.1 Khái niệm 9

1.3.2 Chỉ tiêu đánh giá độ ổn định của thuốc 9

1.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định của thuốc 10

1.3.4 Các kiểu thử nghiệm độ ổn định của thuốc 11

1.4 Một số phương pháp định lượng amoxicilin và kali clavulanat 12

1.5 Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường Việt Nam 12

1.6 Một số nghiên cứu liên quan đến amoxicilin và kali clavulanat 13

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14

2.1 Nguyên liệu, thiết bị 14

2.1.1 Nguyên liệu 14

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 15

2.2 Nội dung 16

2.3 Đối lượng nghiên cứu: 16

2.4 Phương pháp nghiên cứu 16

2.4.1 Phương pháp đánh giá độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong các môi trường 16

2.4.2 Nghiên cứu sự ảnh hưởng của natri citrat tới độ ổn định của amoxicilin trihydrat 18

2.4.3 Phương pháp bào chế viên nén hai lớp amoxicilin và kali clavulanat 18

2.4.4 Khảo sát một số chỉ tiêu bán thành phẩm và thành phẩm của viên 20

2.4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến độ ổn định của viên 26 CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28

3.1 Đánh giá độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong các môi trường 28

3.1.1 Độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong môi trường

nước 28

3.1.2 Độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong môi trường pH 6,8 29

3.1.3 Độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong môi trường pH 4,5 31

3.1.4 Độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong môi trường pH 1,2 32

3.1.5 Ảnh hưởng của natri citrat tới độ ổn định của amoxicilin 33

3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến độ ổn định của viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài 35

3.2.1 Cảm quan 36

3.2.2 Định lượng 38

3.3 Khảo sát một số chỉ tiêu của bán thành phẩm và thành phẩm của viên nén 2 lớp amoxicilin trihydrat và kali clavulanat giải phóng kéo dài ở quy mô 1000 viên 42

3.3.1 Giai đoạn sấy tá dược 42

3.3.2 Khảo sát các chỉ tiêu của bột 43

3.3.3 Giai đoạn dậpviên 45

3.3.4 Giai đoạn baophim 47

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT……… 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO

MIC : Nồng độ ức chế tối thiểu

T : Thời gian nồng độ thuốc trong huyết tương

TB : Trung bình

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 1.1: Các kiểu thử nghiệm độ ổn định của thuốc 11

Bảng 1.2: Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường 12

Bảng 2.1: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong bào chế 14

Bảng 2.2: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong kiểm nghiệm 15

Bảng 2.3: Công thức bào chế viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat 18

Bảng 2.4: Thông số kĩ thuật bao 20

Bảng2.5: Vị trí và lượng mẫu lấy trong quy trình 20

Bảng 2.6: Điều kiện nghiên cứu độ ổn định của các mẫu viên 27

Bảng 3.1: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường nước 28

Bảng 3.2: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 6,8 30

Bảng 3.3: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 4,5 31

Bảng 3.4: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 1,2 32

Bảng 3.5: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 1,2 khi có thêm natri citrat 34

Bảng 3.6: Hàm ẩm của tá dược trước và sau khi sấy 35

Bảng 3.7: Mẫu nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến độ ổn định của viên 36

Bảng 3.8: Kết quả cảm quan về độ phồng vỉ của các mẫu trong điều kiện thường 37

Bảng 3.9: Kết quả cảm quan về màu sắc viên của các mẫu trong điều kiện thường 37 Bảng 3.10: Kết quả cảm quan mẫu nghiên cứu trong điều kiện lão hóa cấp tốc 38

Bảng 3.11: Kết quả định lượng amoxicilin sau 4,5 tháng ở điều kiện thường 39

Bảng 3.12: Kết quả định lượng kali clavulanat sau 4,5 tháng ở điều kiện thường 39

Bảng 3.13: Kết quả định lượng các mẫu sau 1,5 tháng ở điều kiện lão hóa cấp tốc 41 Bảng 3.14: Các nguyên liệu cho công thức 1000 viên nén 42

Bảng 3.15: Hàm ẩm của tá dược trước và sau sấy ở quy mô 1000 viên 43

Bảng 3.16: Kết quả độ trơn chảy của bột trong giai đoạn trộn tá dược trơn 43

Bảng 3.17: Kết quả tỷ trọng biểu kiến của bột trong giai đoạn trộn tá dược trơn 43

Bảng 3.18: Kết quả độ phân tán hàm lượng amoxicilin 44

Bảng 3.19: Kết quả độ phân tán hàm lượng của kali clavulanat 44

Bảng 3.20: Khối lượng trung bình viên trong quá trình dập 45

Bảng 3.21: Độ cứng của viên trong quá trình dập 46

Bảng 3.22: Kết quả khảo sát độ cứng của các viên sau khi bao 47

Bảng 3.23: Kết quả thử độ hòa tan của viên sau khi bao (n=6) 47

-

DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ THỊ

Hình 2.1: Sơ đồ lấy mẫu đo độ đồng đều hàm lượng 22

Hình 3.1: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường nước 29

Hình 3.2: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 6,8 30

Hình 3.3: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 4,5 31

Hình 3.4: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 1,2 33

Hình 3.5: Phần trăm amoxicilin còn lại trong môi trường pH 1,2 khi có thêm natri citrat 34

Hình 3.6: Hàm ẩm của các tá dược trước và sau sấy 35

Hình 3.7: Kết quả định lượng kali clavulanat sau 4,5 tháng ở điều kiện thường 40

Hình 3.8: Phần trăm giải phóng amoxicilin của viên mẫu so với viên đối chiếu 49

Hình 3.9: Phần trăm giải phóng của kali clavulanat của viên mẫu so với viên đối chiếu 49

1

ĐẶT VẤN ĐỀ

Amoxicilin là kháng sinh phổ rộng, có tác dụng trên nhiều chủng vi khuẩn khác nhau Tuy nhiên, hiện nay, do tình trạng sử dụng tràn lan, không hợp lý đã dẫn tới hiện tượng kháng amoxicilin ở một số chủng vi khuẩn, đặc biệt là nhóm vi khuẩn sinh β-lactamase, một loại enzym có khả năng phân hủy amoxicilin Một trong những biện pháp hay được sử dụng để khắc phục tình trạng trên, đồng thời mở rộng thêm phổ kháng khuẩn của kháng sinh là phối hợp amoxicilin với các chất ức chế β-lactamase ví dụ như kali clavulanat[5], [10]

Tại Việt Nam, đã có nhiều công ty đẩy mạnh nghiên cứu bào chế chế phẩm thuốc chứa đồng thời hai thành phần amoxicilin và kali clavulanat dưới dạng viên nén, bột pha hỗn dịch, thuốc tiêm theo các tỷ lệ khác nhau Tuy nhiên, do amoxicilin là một kháng sinh phụ thuộc thời gian và có thời gian bán thải ngắn nên đòi hỏi phải tăng số lần dùng thuốc trong ngày Điều này có thể làm cho bệnh nhân khó tuân thủ khi dùng thuốc, nồng độ thuốc trong huyết tương không đều và thường

có hiện tượng đáy đỉnh dẫn đến tình trạng kháng thuốc Một trong những giải pháp nhằm khắc phục vấn đề này là sử dụng dạng thuốc giải phóng kéo dài Tuy nhiên,

cả amoxicilin và kali clavulanat đều dễ bị phân hủy dưới sự tác động của nhiệt độ

và độ ẩm[3].Vì vậy, chúng tôi thực hiện đề tài“Sơ bộ nghiên cứu độ ổn định của viên nén amoxicilin và kali clavulanat” với mục tiêu như sau:

- Nghiên cứu được ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến độ ổn định của viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài

- Bào chế và đề xuất được một số chỉ tiêu bán thành phẩm và thành phẩm của viên nén 2 lớp amoxicilin trihydrat và kali clavulanat giải phóng kéo dài ở quy mô 1000 viên

1.1 Đại cương về amoxicilin

hydroxyphenyl) azabicyclo[3.2.0]heptane-2-

1.1.2 Tính chất lý hóa

1.1.2.1 Tính chất vật lý

Amoxicilin trihydrat

- Dạng bột tinh thể màu trắng hoặc gần như trắng, vị đắng

- Độ tan: Khó tan trong nước (1/370), alcol (1/2000); thực tế không tan trong ether, cloroform, dầu; tan trong dung dịch acid hoặc hydroxyd kiềm loãng[4]

- Tính chất của amino acid

- Tan được trong dung dịch acid hay kiềm loãng

- Phản ứng với thuốc thử Ninhydrin (hoặc thuốc thử Fehling)

- Bị phân hủy nhanh ở độ ẩm cao và nhiệt độ trên 37oC

- Amoxicilin có ba giá trị pKa: 2,63; 7,55 và 9,64 ở 23oC

- Dung dịch amoxicilin trihydrat 2mg/mL trong nước có pH từ 3,5-5,5 và dung dịch amoxicilin natri 10% trong nước có pH 8-10 [8]

1.1.4 Dược động học

- Bền vững với acid dịch vị, nên có thể dùng qua đường tiêu hóa

- Đạt nồng độ tối đa trong máu sau uống từ 1-2 giờ, sau khi tiêm bắp khoảng 1 giờ

- Phân bố nhanh vào các mô và dịch cơ thể

- Qua được nhau thai và sữa mẹ, vào dịch não tủy kém trừ khi màng não bị viêm

- Thải trừ chủ yếu qua thận [2], [5]

1.1.5 Cơ chế tác dụng

- Acyl hóa các D - alanin transpeptidase, làm cho quá trình tổng hợp peptidoglycan không được thực hiện, sinh tổng hợp vách tế bào bị ngừng lại

- Hoạt hóa enzym tự phân giải murein hydroxylase làm tăng phân hủy vách tế bào

vi khuẩn, làm vi khuẩn bị tiêu diệt

- Amoxicilin ưa nước nên có thể đi qua các kênh porin trên màng tế bào vi khuẩn gram âm [2]

- Vi khuẩn Gram âm: Các chủng ưa khí và kị khí gram âm như: Escherichia coli,

Enterrococci, Salmonella, Shigella…

- Các chủng vi khuẩn đã kháng amoxicilin: Pseudomonas, Klebsiella, Seratia,

Acinetobacter, Bacteroid và các Proteus indol[2]

1.1.7 Chỉ định

- Nhiễm khuẩn hô hấp trên do các vi khuẩn nhạy cảm: viêm xoang viêm tai giữa, viêm phế quản cấp và mạn, viêm nắp thanh quản, áp xe quanh ổ răng, viêm xương tủy…

- Nhiễm khuẩn đường tiết niệu không biến chứng do E coli, Enterobacter, nhiễm khuẩn phụ khoa, bệnh Lyme ở trẻ em

- Dự phòng viêm màng trong tim, dự phòng sau cắt bỏ lách

- Diệt Helicobacter pylori

- Các nhiễm khuẩn khác: nhiễm khuẩn tiêu hóa, nhiễm khuẩn huyết do vi khuẩn nhạy cảm với aminopenicillin [2]

1.1.8 Chống chỉ định

- Mẫn cảm với bất cứ loại penicillin nào

- Tiền sử vàng da hoặc rối loạn chức năng gan do dùng penicillin [2], [5]

1.1.9 Tác dụng không mong muốn

- Buồn nôn và nôn, ỉa chảy, phát ban

- Quá mẫn hoặc phản ứng nhiễm độc: có thể gặp phản ứng nghiêm trọng, ngưng điều trị

- Phản ứng dị ứng gồm mày đay, phù mạch, phản ứng phản vệ,phản ứng kiểu bệnh huyết thanh, thiếu máu tan huyết, viêm thận kẽ

- Hiếm gặp: Viêm ruột do kháng sinh, giảm bạch cầu hạt, giảm tiểu cầu, rối loạn đông máu

- Rối loạn hệ thần kinh trung ương gồm co giật do liều cao hoặc suy thận[5]

1.1.10 Liều dùng, cách dùng

- Nhiễm khuẩn do vi khuẩn nhạy cảm, người lớn và trẻ em trên 10 tuổi, dùng uống

250 ng mỗi 8 giờ, đối với nhiễm khuẩn nặng dùng liều gấp đôi; trẻ em tới 10 tuổi , dùng 125 ng mỗi 8 giờ, trong nhiễm khuẩn nặng dùng liều gấp đôi

- Nhiễm khuẩn đường hô hấp có mủ nặng hoặc tái phát, người lớn uống 3g/lần, cách

12 giờ/tuần

- Viêm phổi, uống, người lớn 0,5-1g/lần, cách 8 giờ/lần

- Áp xe ổ răng (liệu trình đợt ngắn), uống, người lớn uống 3g/lần, nhắc lại 1 lần sau

8 giờ

- Nhiễm khuẩn đường tiết niệu (liệu trình đợt ngắn), người lớn uống 3g/lần, nhắc lại

1 lần sau 10 - 12 giờ

- Nhiễm Chlamydia, uống 500mg/lần, cách 8 giờ/lần, trong 7 ngày

- Lậu (liệu trình ngắn), uống, người lớn 3g uống liều duy nhất (kèm probenecid 1g)

- Viêm tai giữa (liệu trình ngắn), trẻ em từ 3 – 10 tuổi, uống 750mg/lần, 2 lần/ngày trong 2 ngày [5]

1.1.11 Thận trọng

- Có tiền sử dị ứng với penicillin

- Suy thận, bệnh bạch cầu lym

- Phụ nữ trong thời kì mang thai và cho con bú

tính ổn định đáng kể so với natri amoxicilin

1.2 Đại cương về kali clavulanat

1.2.1 Công thức hóa học

- Công thức phân tử: C

ền sử dị ứng với penicillin

ệnh bạch cầu lympho mạn, nhiễm HIV, suy gan

ì mang thai và cho con bú [5], [2]

ộ ổn định của amoxicilin

ễ bị phân hủy ở độ ẩm cao và nhiệt độ 37oC [3]

Amoxicilin trihydrat ổn định nhất trong môi trường acid, ở khoảng pH 5,8

ộ ổn định của amoxicilin giảm đi Các muối trong môi trũng là chất xúc tác cho phản ứng phân hủy amoxicilin

Amoxicilin natri tan nhanh, có độ hòa tan cao và ổn định tốt trong môi tr

ưng kém ổn định dễ phân hủy trong trong môi trường dạ d

ời hạn sử dụng của amoxicilin trong chế phẩm dạng rắn Premix đ

[27]

Amoxicilin natri phân hủy nhanh gấp 1,5 lần so với amoxicilin trihydrat tại điều

ện độ ẩm không khí lớn hơn hoặc bằng 50% [28]

ứu ở dạng thuốc mỡ và thuốc đặt âm đạo cho thấy amoxicilin trihydrat

ơn so với amoxicilin natri [25]

Amoxicilin trihydrat, hiện nay được sử dụng trong các công thức d

ổn định đáng kể so với natri amoxicilin [19]

ộ ổn định của amoxicilin giảm đi Các muối trong môi trường đệm

ất xúc tác cho phản ứng phân hủy amoxicilin

ổn định tốt trong môi trường

ờng dạ dày pH 1,2

ời hạn sử dụng của amoxicilin trong chế phẩm dạng rắn Premix được ước tính

ủy nhanh gấp 1,5 lần so với amoxicilin trihydrat tại điều

ấy amoxicilin trihydrat

ợc sử dụng trong các công thức dược phẩm, có

- Thời gian bán thải của acid clavulanic là 1 giờ Khoảng 30 - 40% acid clavulanic được thải qua nước tiểu dưới dạng còn hoạt tính[5]

1.2.5 Phổ tác dụng

- Amoxicilin kết hợp với acid clavulanic theo tỷ lệ 4:1 (biệt dược Augmentin) Phổ tác dụng trên Staphylococci, H infleuenzae, Gonococci và E.coli tiết ra β-lactamase

- Ticarcillin 3g kết hợp với acid clavulanic 100 mg (biệt dược Timentin, Clamentin) Phổ tác dụng trên trực khuẩn gram âm ưa khí: Staph aureus, Bacteroides [2]

1.2.6 Độ ổn định của kali clavulanat

Kali clavulanat rất dễ bị phân hủy bởi nhiệt độ và độ ẩm [3]

Clavulanat bị phân hủy trong dung dịch nước và ổn định nhất ở khoảng pH trung tính được chứng minh là 6,39 và bị phân hủy mạnh ở vùng pH acid hoặc kiềm Vì vậy độ ổn định của 2 thành phần phụ thuộc vào clavulanat Các muối trong dung dịch đệm phosphat, acetat và borat đều xúc tác cho phản ứng phân hủy clavulanat

Sự phân hủy kali clavulanat là phản ứng bậc nhất tùy thuộc vào nồng độ chất nền tại không khí có độ ẩm tương đối (RH) và không khí khô Các mẫu kali clavulanat tiếp xúc với độ ẩm cao gây ra sự xuống cấp nhanh hơn so với khi tiếp xúc với không khí khô Tuy nhiên, cơ chế thoái hoá kali clavulanat theo hai điều kiện này không khác nhau, chứng tỏ rằng các sản phẩm phân huỷ được hình thành trong pha rắn không có tác động xúc tác nào tới phản ứng phân hủy [11]

Kali clavulanat phân hủy mạnh khi có mặt của stearyl fumarat, manitol, lactose hydrat [18]

1.2.7 Độ ổn định khi kết hợp amoxicilin và kali clavulanat

Độ ổn định của chế phẩm kết hợp amoxicilin- kali clavulanat phụ thuộc chủ yếu vào clavulanat Các ion kim loại làm tăng đáng kể tốc độ phân hủy của amoxicilin, làm amoxicilin giảm ổn định hơn so với clavulanat Amoxicilin và clavulanat đều rất dễ bị phân hủy khi độ cứng của nước tăng [26]

Độ ẩm nguyên liệu (nước dạng tự do) ảnh hưởng đến độ ổn định của amoxicilin

và kali clavulanat Tuy nhiên, nước ở dạng liên kết với amoxicilin không ảnh hưởng tới độ ổn định của hai chất này Mẫu có hàm lượng nước tự do thấp sẽ có độ ổn định cao hơn [14]

Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm đến lượng thuốc giải phóng khỏi viên nén cho thấy không có sự thay đổi đáng kể về tỷ lệ giải phóng thuốc sau thời gian 6 tháng [20]

1.3

1.3.1 Khái niệm

Độ ổn định của thuốc là khả năng của thuốc (nguyên liệu hoặc thành phần) bảo quản trong điều kiện xác định vẫn giữ được những đặc tính vốn có về vật lý, hóa học, vi sinh, tác dụng dược lý và độc tính trong giới hạn quy định của tiêu chuẩn chất lượng thuốc

Độ ổn định của thuốc ảnh hưởng bởi các yếu tố ban đầu trong quá trình sản xuất: thành phần công thức thuốc, tiêu chuẩn nguyên liệu gốc (dược chất, tá dược, chất phụ ), quy trình công nghệ, phương pháp sản xuất với các thông số và điều kiện kĩ thuật cụ thể Thay đổi các yếu tố này có thể làm thay đổi độ ổn định và tuổi thọ của thuốc

Độ ổn định là một yếu tố quan trọng của chất lượng, độ an toàn và hiệu lực của chế phẩm thuốc Một số chế phẩm thuốc không ổn định có thể gây ra các biến đổi

về mặt vật lý (như độ cứng, tốc độ hòa tan, sự tách pha, ) cũng như các biến đổi về mặt sinh học của chế phẩm thuốc vô khuẩn

Nghiên cứu độ ổn định bao gồm một loạt các thử nghiệm để đảm bảo độ ổn định của chế phẩm thuốc, đó là khả năng duy trì các chỉ tiêu chất lượng của chế phẩm thuốc được đóng gói trong bao bì phù hợp của chế phẩm đó và bảo quản ở điều kiện

đã thiết lập trong một khoảng thời gian xác định [7]

1.3.2 Chỉ tiêu đánh giá độ ổn định của thuốc

- Chỉ tiêu vật lý: Màu sắc, mùi vị, độ đồng đều, độ rã phải giữ được đặc tính ban đầu

- Chỉ tiêu hóa học: Mỗi thành phần hoạt chất phải giữ được trạng thái hóa học nguyên vẹn và hàm lượng trong khoảng giới hạn cho phép Sản phẩm phân hủy được quy định trong giới hạn nhất định

Đại cương độ ổn định

- Chỉ tiêu vi sinh vật: Độ nhiễm khuẩn, nấm mốc, chất gây sốt phải đạt mức chất lượng cho phép

- Chỉ tiêu về độc tính: Độc tính không tăng đáng kể

Khi nghiên cứu một chế phẩm thuốc mới hay hoàn thiện nâng cao chất lượng một thuốc đã được sử dụng trong lâm sàng phải nghiên cứu độ ổn định để từ đó quy định hạn dùng, điều kiện bảo quản [7]

1.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định của thuốc

Độ ổn định của thuốc bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố khác nhau, có thể chia thành hai loại sau:

 Loại yếu tố thuộc về thuốc (yếu tố nội tại) bao gồm:

- Thành phần của thuốc:dược chất, tá dược và chất phụ…

- Kỹ thuật bào chế

- Đồ bao gói: Ngoài tác dụng là vật đựng, đồ bao gói còn đóng vai trò bảo vệ thuốc: chống hút ẩm, chống nhiễm khuẩn, tránh ánh sáng, tránh tương tác thuốc… Vì vậy, đối với mỗi chế phẩm phải lựa chọn đồ bao gói thích hợp

Các vật liệu thủy tinh dùng làm đồ bao gói có ưu điểm chống ẩm tốt, không thấm oxy không khí, nhưng cần chú ý nghiên cứu độ thôi kiềm, sự nhả các ion kim loại vào dung dịch gây ra phản ứng phân hủy thuốc

Các chất dẻo dùng làm đồ bao gói có thể là polyethylen (PE), polypropylen (PP), polystyren (PS), polyvinylclorid (PVC) có nhược điểm dễ thấm ẩm, thấm oxy không khí với tùy từng loại, ngoài ra còn có thể hấp phụ, hấp thụ, tương tác với một

- Nhiệt độ: Quyết định tốc độ phản ứng gây phân hủy thuốc Ngoài ra nhiệt độ còn ảnh hưởng tới trạng thái bền vững của một số dạng thuốc như: hỗn dịch, nhũ tương, thuốc đạn, khí dung

- Ánh sáng: Một số hoạt chất bị phân hủy dưới tác động của ánh sáng

- Độ ẩm: Độ ẩm là tác nhân chính gây phân hủy thuốc ở các dạng bào chế rắn Độ

ẩm không khí cao tạo điều kiện cho nấm mốc phát triển, ngoài ra hơi nước phân hủy một số thuốc (phản ứng thủy phân) [7]

1.3.4 Các kiểu thử nghiệm độ ổn định của thuốc

Các kiểu thử nghiệm độ ổn đinh, đặc tính và mục đích thử nghiệm được nêu trong bảng 1.1

Bảng 1.1:Các kiểu thử nghiệm độ ổn định của thuốc

Kiểu loại Đặc điểm Mục đích

Nhanh Nhiệt độ cao trong 1-12 tuần Xác định nhanh các yếu tố ảnh hưởng

đến độ ổn định Từ đó, chọn công thức, quy trình bào chế

Đầy đủ Nhiệt độ, độ ẩm khác nhau

trong 5 năm

Tìm hạn dùng, tuổi thọ của thuốc

Ngắn hạn Trong điều kiện, thời gian

ngắn hạn

Xem xét khi có sự thay đổi sản xuất

Từng phần Đánh giá một số chỉ tiêu Xem xét một số ảnh hưởng đặc biệt Nghiên cứu độ ổn định do các cơ sở sản xuất hay nghiên cứu phát triển thực hiện

 Các điều kiện bảo quản trong nghiên cứu độ ổn định của thuốc:

- Nghiên cứu dài hạn (đối với bao bì thấm nước):30oC ± 2oC/ 75% RH ± 5% RH

- Nghiên cứu dài hạn (đối với bao bì không thấm nước): 30oC ± 2oC/ không quy định về độ ẩm

- Nghiên cứu lão hóa cấp tốc: 40oC ± 2oC/ 75% RH ± 5% RH[23]

1.4 Một số phương pháp định lượng amoxicilin và kali clavulanat

Amoxicilin có thể được định lượng bằng sắc khí lỏng hiệu năng cao với pha động gồm hỗn hợp gồm acetonitril và dung dịch đệm phosphat pH 5,0 hoặc pha động là hỗn hợp 5 thể tích methanol và 95 thể tích dung dịch kali dihydrophosphat monohydrat 0,78% (kl/tt) được điều chỉnh đến pH 4,4 [4], [6]

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao đơn giản và chính xác với detector ở bước sóng 220 nm đã được xác nhận có thể dùng để xác định đồng thời amoxicilin

và clavulanic acid trong huyết tương người [17]

Amoxicilin có thể được định lượng bằng phương pháp đo quang với độ tuyến tính, độ lặp lại độ đúng cao Tuy nhiên, phương pháp này không thể xác định được nồng độ amoxicilin trong môi trường pH 1,2 Độ ổn định của amoxicilin được nghiên cứu trong các điều kiện pH 1,2 ở nhiệt độ 37 độ C khi được xác định bằng phương pháp HPLC và chuẩn độ cho thấy sự suy giảm đáng kể hàm lượng amoxicilin Tuy nhiên, khi sử dụng phương pháp đo quang, độ hấp thụ tia cực tím của dung dịch lại tăng lên.[22],[1]

1.5 Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường Việt Nam

Bảng 1.2: Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường Việt

Nam

STT Tên biệt dược Nhà sản xuất

Hàm lượng

(Amoxicilin/acid Clavulanic)

Dạng bào chế

1 AmogenTine

1200mg

Công ty cổ phần dược phẩm TW1, Việt Nam 1000/200mg

Thuốc tiêm

Nam

875/125 mg Viên nén

4 Augbactam

500/125

Công ty Cổ Phần Hóa - Dược Phẩm MECOPHAR,

1.6 Một số nghiên cứu liên quan đến amoxicilin và kali clavulanat

Sanjoy Kumar Dey và cộng sự khảo sát các hạt amoxicilin trihydrat dạng nổi và kết dính niêm mạc với chất mang là natri alginat và hydroxypropyl methylcellulose Polyme và chitosan sử dụng để định vị kháng sinh ở vị trí dạ dày nhằm mục đích

chống lại vi khuẩn Helicobacter pylori Các hạt của tất cả các lô đều nổi > 24 giờ

với thời gian tiền nổi tối đa là 46,3 ± 3,2 giây.Hạt có khả năng kết dính niêm mạc tốt đạt 75,7 ± 3,0% đến 85,0 ± 5,5% Các lô tối ưu hóa cho thấy 100% vi khuẩn

Helicobacter pyloribị ức chế tăng trưởng trong 15 giờ khi nuôi cấy in vitro Nghiên

cứu tia X trong dạ dày thỏ xác nhận sự duytrì của amoxicilin trong dạ dày Các kết quả này cho thấy hạt nổi kết dính niêm mạc có thể được sử dụng để cố định kháng sinh ở vùng dạ dày nhằm nâng cao hiệu quả điều trị [15]

Jerzsele và cộng sự nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố môi trường đến độ ổn định của dung dịch amoxicilin-acid clavulanic trong sản phẩm bột hòa tan dành cho thú y Trong đó, dược chất bị phân hủy phụ thuộc vào một số yếu tố môi trường Tác giả nghiên cứu tỷ lệ phân hủy của dược chất trong dung dịch nước có độ cứng

khác nhau (độ cứng 2, 6 và 10) và các giá trị pH (3,0; 7,0 và 10,0), và các máng làm bằng các vật liệu khác nhau (kim loại hoặc nhựa) Khi tăng độ cứng của nước, độ ổn định của cả hai chất đều giảm, amoxicilin ổn định hơn clavulanat trong các dung dịch có độ cứng khác nhau [24]

Mehta, A C và cộng sự sử dụng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định

độ ổn định hóa học của amoxicilin và kali clavulanat tỷ lệ 250/62 trong dung dịch uống (Augmentin), được bảo quản ở nhiệt độ phòng và 8o C trong khoảng thời gian

11 ngày Kết quả cho thấyamoxicilin ổn định hơn clavulanat Amoxicilinổn định trong 7 ngày ở cả hai nhiệt độ Kali clavulanat duy trì 90% nồng độ ban đầu của nó trong 7 ngày ở 8oC nhưng giảm xuống hơn 40% trong cùng thời gian ở nhiệt độ phòng Thời gian để nồng độ kali clavulanat giảm xuống còn 90% nồng độ ban đầu (t90) tại nhiệt độ phòng là 2 ngày [26]

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Nguyên liệu, thiết bị

2.1.1 Nguyên liệu

Bảng 2.1: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong bào chế

STT Nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn

1 Amoxicilin trihydrat 88% (dạng Compact) Trung Quốc BP2013

2 Amoxicilin natri 95,1% Đức BP2015

3 Aerosil Trung Quốc USP32

4 Avicel PH102 Trung Quốc USP32

5 Ethanol Trung Quốc TCNSX

7 Kali clavulanat 41,9% (dạng Compact) Trung Quốc TCNSX

8 Magnesi stearat Trung Quốc USP32

9 Natri citrat Trung Quốc TCNSX

10 Opadry White Trung Quốc TCNSX

Bảng 2.2: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong kiểm nghiệm

STT Nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn

1 Acid clohydric Trung Quốc TCNSX

2 Kali dihydro phosphat Merck TCNSX

3 Kali hydroxid Trung Quốc TCNSX

4 Kali clorua Trung Quốc TCNSX

5 Kali dihydro phosphat Trung Quốc TCNSX

7 Natri hydroxid Trung Quốc TCNSX

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu

- Máy dập viên SHAKTI LP2 (Ấn Độ)

- Cân kĩ thuật Sartorius TE3102S (Đức)

- Cân phân tích Sartorius TE3120 (Đức)

- Máy đo độ cứng PTB – 511E (Đức)

- Hệ thống máy HPLC Agilen Technologies 1200 Infinitive (Mỹ)

- Máy thử độ hòa tan PHARMATEST (Đức)

-Máy đo pH Satorius TE 412 (Đức)

- Chậu siêu âm Ultrasonic LC 60H

- Máy bao phim mini Caleva (Anh)

- Máy đo độ mài mòn ERWEKA (Đức)

- Máy bao phim công nghiệpKBC – BP 05 (Việt Nam)

2.3 Đối lượng nghiên cứu:

- Nguyên liệu amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri

- Viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài

- Viên đối chiếu Augmentin SR 1000/62,5mg (Glaxo Smith Kline)

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp đánh giá độ ổn định của amoxicilin trihydrat và amoxicilin natri trong các môi trường

Các bước tiến hành :

- Pha các dung dịch đệm pH 1,2; 4,5; 6,8 theo dược điển USP 38[9]

- Với mỗi môi trường nước, đệm pH 1,2; 4,5; 6,8 chuẩn bị các mẫu sau:

+ Mẫu thử 1: Amoxicilin natri

Cân chính xác khoảng 1 g nguyên liệu amoxicilin natri cho vào bình định mức 200ml,siêu âm 20 phút Thêm dung dịch vừa đủ tới vạch để được dung dịch gốc 5mg/ml

+ Mẫu thử 2: Amoxicilin trihydrat

Cânchính xác khoảng 1 g nguyên liệu amoxicilin trihydrat cho vào bình định mức 200ml,siêu âm 20 phút Thêm dung dịch vừa đủ tới vạch để được dung dịch gốc 5mg/ml

+ Mẫu trắng: Nước cất

.- Để mẫu thử 1 và 2 ở nhiệt độ 37oC Tại các thời điểm 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 giờ hút 5ml mẫu thử 1 và 2 cho vào bình định mức 100ml, thêm nước vừa đủ tới vạch Lọc qua màng Đo quang ở bước sóng 272nm

- Riêng đối với môi trường pH 1,2 định lượng hàm lượng amoxicilin bằng phương pháp HPLC theo dược điển Việt Nam 4

An là độ hấp thụ của amoxicilin trong mẫu thử ở thời điểm n giờ

A0 là độ hấp thụ của amoxicilin trong mẫu thử ở thời điểm ban đầu

- Theo phương pháp HPLC, hàm lượng amoxicilin còn lại ở mỗi thời điểm được xác định theo công thức:

% Amoxicilin còn lại = 100%

Trong đó:

Sn là diện tích pic của amoxicilin trong mẫu thử ở thời điểm n giờ

S0 là diện tích pic của amoxicilin trong mẫu thử ở thời điểm ban đầu

2.4.2 Nghiên cứu sự ảnh hưởng của natri citrat tới độ ổn định của amoxicilin trihydrat

- Pha dung dịch đệm pH 1,2 theo dược điển Mỹ USP 38 [9]

- Chuẩn bị mẫu thử 3 gồm 1g amoxicilin trihydrat và 20mg natri citrat, mẫu thử 4 gồm 1g amoxicilin trihydrat và 40 mg natri citrat

- Tiến hành tương tự như đối với mẫu thử 1 và 2 trong mục 2.4.1

2.4.3 Phương pháp bào chế viên nén hai lớp amoxicilin và kali clavulanat 2.4.3.1 Phương pháp bào chế viên nhân

Các mẫu viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài từ A1 đến A5 được bào chế theo phương pháp dập thẳng có công thức được trình bày trong bảng 5

Bảng 2.3: Công thức bào chế viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat

M1, M2 : lần lượt là khối lượng lớp GPN, GPKD

M : khổi lượng viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat

 Phương pháp bào chế viên nhân

- Lớp giải phóng kéo dài (GPKD):

 Dược chất: amoxicilin trihydrat dạng compact, kali clavulanat; polyme: HPMC K100LV; tá dược trơn: Aerosil, magnesi stearat; tá dược độn: Avicel

PH 102

 Các tá dược độn, trơn, polyme được rây qua rây 0,18 mm

 Trộn đều theo thứ tự dược chất, tá dược độn, polyme và tá dược trơn

- Lớp giải phóng ngay (GPN):

 Dược chất: amoxicilin trihydrat dạng compact; tá dược trơn talc, magnesi stearat; tá dược độn: Avicel PH 102

 Các tá dược độn, trơn, acid được rây qua rây 0,18 mm

 Trộn đều theo thứ tự dược chất với tá dược độn, sau đó trộn tá dược trơn

- Dập viên trên máy dập 2 lớpvớikhối lượng lớp GPN là 823 mg với các mẫu viên sấy và không sấy tá dược ở những môi trường có độ ẩm thay đổi; khối lượng lớp GPKD thay đổi theo từng công thức; điều chỉnh độ cứng viên từ 15 -20 kP Mỗi

mẫu bào chế 300 viên

- Bảo quản viên trong lọ nhựa kín khí có chứa các gói hút ẩm ở điều kiện 2-8oC để viên ổn định 24 giờ trước khi tiến hành bao viên

2.4.3.2 Phương pháp bao viên

Tiến hành bao bảo vệ 3% cho mẻ 10 viên trên máy bao phim mini

Calevavớicácthànhphần là Opadry White với dung môi ethanol : nước = 80 : 20 Cácthôngsốnhưtrongbảng2.4

Bảng 2.4: Thông số kĩ thuật bao

Nhiệt độ bao 55oC

Tốc độ phun dịch 0,3ml/phút

Không khí thổi vào 100% dung tích của thiết bị

Tốc độ rung 25% khả năng của thiết bị

 Quy trình pha dịch bao

- Tuân theo quy trình của nhà sản xuất [12]

- Công thức cho 100ml dịch bao gồm 8g Opadry white trong 100ml dung môi (80ml ethanol : 20ml nước)

- Tiến hành bao đến khi viên đạt độ dày màng bao lý thuyết, sấy viên khoảng 10phút

 Qui mô bao mẻ 1000 viên:

Tiến hành bao bảo vệ trên máy bao phim công nghiệp với các thông số tốc độ quay nồi bao 10 vòng/phút, nhiệt độ khí vào 55oC, áp suất súng phun 1,5 bar, thay đổi nhiệt độ khí vào và tốc độ phun dịch để tìm các thông số phù hợp nhất

2.4.4 Khảo sát một số chỉ tiêu bán thành phẩm và thành phẩm của viên

Bảng 2.5: Vị trí và lượng mẫu lấy trong quy trình

Theo khảo sát Theo khảo sát

- Đo độ trơn chảy

- Đo tỷ trọng biểu kiến

- Viên nén tròn, màu trắng, cạnh và thành viên lành lặn

10 viên (ngẫu nhiên

ở cuối giai đoạn

bao)

Hình thức viên

Độ cứng

- Viên baobóng đẹp, màng bao lành lặn

- Độ cứng 20-27kP

Thử hòa tan

2.4.4.1 Phương pháp đánh giá chất lượng bột

 Xác định độ trơn chảy: Tốc độ chảy của hạt đã trộn tá dược trơn đo trên

máy đo độ trơn chảy ERWEKA GWF với đường kính lỗ phễu 20 mm Tốc độ trơn chảy được tính theo côngthức:

v =

Trong đó:

v là tốc độ chảy (g/s)

m là khối lượng bột (hạt) cho vào (g)

t là thời gian chảy của khối bột (hạt) (s)

 Xác định khối lượng riêng biểu kiến:

Cân m (g) bột (hạt) cho vào ống đong 50ml, đọc thể tích khối bột (Vt) Đặt ống đong lên máy đo tỷ trọng biểu kiến ERWEKA SVM với các thông số cài đặt: tần số