Đề tài Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của dịch tiêu chảy cấp trên lợn (Porcine Epidemic Diarrhoea – PED) tại tỉnh Thanh Hóa và giải pháp phòng trị với mục tiêu chính như: Chẩn đoán xác định virus gây bệnh và xác định một số vi khuẩn kế phát bằng PCR và Hóa mô miễn dịch, xác định rõ các đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc bệnh, thử nghiệm một số phác đồ và quy trình phòng, trị bệnh.
1. ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết của đề tài nghiên cứu Dịch tiêu chảy cấp lợn hay gọi PED (Porcine Epidemic Diarrhoea) thuộc nhóm Coronavirus gây ra. Hiện đang là một trong những vấn đề rất được quan tâm do lợn con khơng có kháng thể với bệnh này. Trên đàn lợn con dưới một tuần tuổi có những triệu chứng tiêu chảy gây chết nhanh và rất khó hồi phục, thiệt hại có thể đến 100% đàn. Bệnh đã gây thiệt hại lớn cho ngành chăn ni ở nhiều quốc gia trên thế giới Về lịch sử, bệnh được phát hiện lần đầu ở Anh. Năm 1976, một số nước Châu Âu khác cũng đã ghi nhận những ca bệnh này và đặt tên là “Epidemic viral diarrhea” (EVD). Năm 1978 đổi tên thành PED (Porcine Epidemic Diarrhoea) và được chính thức cơng nhận cho đến nay. Bệnh được ghi nhận ở nhiều nước như Anh, Bỉ, Nhật, Trung Quốc và nhiều nước Châu Âu. Hiện nay bệnh phân bố khắp nơi trên thế giới (Andreas Pospischil, Angela Stuedli, Matti Kiupel)[12] Trong năm 2008 2009, hầu hết các trại chăn ni lợn của Việt Nam đã bị thiệt hại nặng nề do dịch tiêu chảy cấp. Bệnh xảy ra rất nhanh, trên tồn đàn lợn và gây chết gần như 100% lợn con theo mẹ. Năm 2010 bệnh vẫn tiếp tục xảy ra ở một số trại, thậm chí tái phát ở những trại đã từng xảy ra dịch trong năm 2009 (Nguyễn Ngọc Hải, 2011)[4] Hiện nay, tình hình dịch bệnh lợn trở nên phức tạp và nguy hiểm hơn nhiều so với những năm trước đây. Mặc dù các chương trình phòng bệnh và các biện pháp hỗ trợ, trộn kháng sinh vào thức ăn… được áp dụng hầu hết ở các trại nhưng bệnh vẫn xảy ra liên tục và gây thiệt hại to lớn cho người chăn ni lợn Do vậy, việc cần thiết phải nghiên cứu, ứng dụng các phương pháp điều trị mới có hiệu quả cao hơn Trước thực trạng đó, nhằm hiểu rõ hơn về một số đặc điểm biến đổi bệnh lý của bệnh PED gây ra cho lợn con, đồng thời có thêm cơ sở khoa học cho việc xây dựng các biện pháp xử lý, giảm bớt thiệt hại do dịch bệnh gây ra trên đàn lợn Việt Nam nói chung và Thanh Hóa nói riêng, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của dịch tiêu chảy cấp trên lợn (Porcine Epidemic Diarrhoea – PED) tại tỉnh Thanh Hóa và giải pháp phòng trị”. 1.2. Mục tiêu nghiên cứu 1.2.1. Mục tiêu tổng qt Nghiên cứu sẽ đưa ra những hiểu biết đầy đủ về đặc điểm bệnh lý làm cơ sở cho việc chẩn đốn và phòng trị bệnh có hiệu quả 1.2.2. Mục tiêu cụ thể Chẩn đốn xác định virus gây bệnh và xác định một số vi khuẩn kế phát bằng PCR và Hóa mơ miễn dịch. Xác định rõ các đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc bệnh Thử nghiệm một số phác đồ và quy trình phòng, trị bệnh 1.3. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu Lợn ni tại tỉnh Thanh Hố Thời gian tiến hành đề tài từ năm 2013 2017 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. Sinh lý tiêu hố và hấp thu của lợn Tiêu hố và hấp thu là giai đoạn đầu của q trình trao đỏi chất. Nó thực hiện chức năng phân giải thành phần các chất có trong thức ăn thành những chất đơn giản mà cơ thể có thể hấp thu lợi dụng được; những chất đó được thu nhận vào máu và bạch huyết qua màng nhầy ống tiêu hố. Nhờ có q trình trên mà cơ thể nhận được tồn bộ chất dinh dưỡng cần thiết cho q trình sinh trưởng và các hoạt động khác trong cơ thể. Trong thức ăn của lợn có chứa các chất dinh dưỡng cần thiết như gluxit, protein, lipid, khóng, vitamin, Tiêu hố gluxit Gluxit chiếm tỷ lệ lớn trong khẩu phần thức ăn của lợn, nó có vai trò cung cấp năng lượng cho mọi hoạt động sống trong cơ thể và tham gia một phần vào cấu trúc hố học của cơ thể. Gluxit trong thức ăn của lợn gồm các dạng: tinh bột, đường, chất xơ. Q trình tiêu hố gluxit chủ yếu là nhờ các enzym có trong dịch tiêu hố và enzym của VSV α amilaza Tinh bột > mantoza, mantotrioza, các loại dextrin (Enzym α amilaza hoạt động trong mơi trường có độ axit biến động rộng từ 3,8 9,4 trong sự có mặt của ion Clo) Enzym lactaza Lactoza > galactoza + glucoza (Enzym lactaza do tuy ến ru ột ti ết ra phân giải đườ ng lactoza trong sữa. Enzym này có mức hoạt động cao lợn tu ần tu ổi thứ 2 và3 Sau có hướng giảm đần) Mantaza Mantoza > 2 α. glucoza Sacaraza Đường sacaroza > glucoza + fructoza Men VSV Chất x ơ > glucoza, axit béo bay hơi Q trình phân giải chất xơ xảy ra ở túi mù dạ dày và ruột già (chủ yếu ở manh tràng) nơi có sự tồn tại của VSV thơng qua sự lên men Sự lên men trong đườ ng tiêu hố của lợn: Sự lên men trong đường tiêu hóa của lợn có ý nghĩa quan trọng trong q trình tiêu hố gluxit. Sự lên men được thực hiện nhờ hệ VSV Qua q trình nghiên cứu hệ VSV trong đườ ng tiêu hố của lợn người ta thấy rằng ở túi mù dạ dày lợn có chứa lượ ng lớn các lồi VSV Lactobaccilus, Bifidobacterium và một lượng thấp hơn các lồi VSV khác Trong ruột già thì chứa hỗn hợp các VSV đa dạng hơn. Trong điều kiện bình thường 1g chất chứa manh tràng có từ 110 tỉ VSV. Trong đó có VK (cầu khuẩn háo iod) phân giải xenluloza. VSV phân giải tinh bột đườ ng trong ruột già chu yếu là Clostridium butyrium, trực khuẩn gram (+) háo iod yếm khí. Ngồi ra có VK lactic và Enterococus. Ru ột già lợn có hệ VSV phong phú là do nhiệt độ mơi trường ổn định và thích hợp (38,539 0C), mơi trường yếm khí và gần trung tính, pH = 5,87,5. Điều này có thể giải thích đượ c vấn đề là lợn có khả năng tiêu hố thức ăn thơ xanh khá tốt. Q trình lên men tiêu hố chất xơ của VSV trong ru ột già tạo ra axit béo bay hơi. Số năng lượng do axit béo cung cấp khoảng 525% nhu cầu năng lượng duy trì theo lượng chất xơ trong khẩu phần Tiêu hố protein Protein được tiêu hố là nhờ các enzym trong đườ ng tiêu hố Tại dạ dày tiêu hố protein chủ yếu nhờ có enzym pepsin và một số enzym khác như catepsin Pepsin trong d ạ dày hoạt động đượ c cần sự có mặt của HCl dạng tự do. Do đó lợn con mới sinh enzym pepsin ch ưa ho ạt động ở dạng pepsinogen. Protein trong d dày được phân cắt thành các đoạn peptid Khi xuống ruột non quá trình phân giải tiếp tục và triệt để tạo ra sản phẩm cuối cùng là các axit amin. Sự phân giải protein ở ruột non đượ c thực hiện nhờ các enzym tuyến tuỵ, ến ru ột nh trypsin, kimozin, elastaza, cacboxypeptidaza, dipeptidaza, nucleaza, Chỉ có protein chuyển xuống ruột già phân giải bởi VSV Tiêu hố Lipid Chất béo trong thức ăn của lợn thành phần chính là triglyxerit ngồi ra có phospholipid, sterol, esterol. Các thành phần này được tiêu hố do enzym dịch tuỵ, dịch ruột tiết nh Lipaza, phospholipaza, colesterolesteaza. Sản phẩm của q trình tiêu hố lipid là glyxerin và axit béo, cholesterol. Q trình tiêu hố lipid được thực hiện nhờ sự tác động của dịch mật Sự hấp thu các chất dinh dưỡng Q trình hấp thu xảy ra khác nhau ở từng vị trí của đườ ng tiêu hố + Tại xoang miệng hầu nh ư khơng có sự hấp thu vì thức ăn lưu lại ở đây thời gian ngắn và chưa đượ c phân giải đến dạng dễ hấp thu + Tại dạ dày có sự hấp thu nước, glucoza, axit amin, ch ất khống tuy nhiên chỉ hấp thu một lượng nhỏ + Tại ruột non nơi x ảy ra q trình hấp thu mạnh nhất vì trên niêm cạc ruột non có các vi nhung mao (200tri ệu/mm 2 bề mặt niêm mạc) vì vậy làm tăng diện tích bề mặt niêm mạc lên hàng trăm lần. Lượng đườ ng và protein được tiêu hố hấp thu tại ruột non tới 85 và 87% tươ ng ứng. Ruột non cũng là nơi hấp thu nước (7585% t ổng s ố) và muối khống chủ yếu + Tại ruột già q trình hấp thu tiếp tục nh ưng ít 2.2. Đặc điểm sinh lý của lợn con bú sữa Lợn con từ lúc sơ sinh đến lúc cai sữa (tách mẹ) có nhiều đặc điểm sinh lý đặc trưng và đòi hỏi phải có sự chăm sóc ni dưỡng tốt. Nếu khi chăn ni, người chăn ni khơng nắm vững các đặc điểm sinh lý của lợn con sẽ khơng ni dưỡng và chăm sóc hợp lý chúng, dẫn đến sinh trưởng chậm, lợn khơng khỏe và chất lượng con giống kém, bệnh tật dễ dàng xảy ra. 2.2.1. Lợn con có tốc độ sinh trưởng phát triển nhanh Trong giai đoạn này lợn con sinh trưởng rất nhanh, tầm vóc và thể trọng tăng dần theo tuổi. Từ lúc sơ sinh đến lúc cai sữa, trọng lượng của lợn con tăng từ 10 đến 12 lần. So với các gia súc khác thì tốc độ sinh trưởng của lợn con tăng nhanh hơn gấp nhiều lần. Các cơ quan trong cơ thể lợn con cũng thay đổi và tăng lên nhanh chóng. Hàm lượng nước giảm dần theo tuổi, vật chất khơ tăng dần, các thành phần hóa học trong cơ thể của lợn thay đổi nhanh chóng Hàm hàm lượng sắt trong cơ thể lợn con mới sinh ra là 187 g % nhưng đến ngày thứ 20 giảm xuống còn 40,58 g % sau đó tăng dần lên 60 ngày bằng lúc mới đẻ ra. Một đặc điểm quan trọng nhất của lợn con theo mẹ là: Sản lượng sữa mẹ tăng dần từ khi mới đẻ ra tới ngày thứ 15. Tại thời điểm này sản lượng sữa cao nhất và ổn định cho tới ngày thứ 20 và sau đó giảm dần cho tới ngày thứ 60 là mức thấp nhất. Nhu cầu dinh dưỡng của lợn con ngày càng tăng, trong khi đó sữa mẹ sau 3 tuần tuổi giảm đi rõ rệt, dẫn tới lợn con thiếu dinh dưỡng nếu như khơng có thức ăn bổ sung thêm Khả năng miễn dịch của lợn con trong giai đoạn này cũng có những đặc điểm đặc biệt. Lợn con mới đẻ trong máu khơng có gama Globulin nhưng sau khi bú sữa có chứa hàm lượng gama Globulin cao, khi đó hàm lượng kháng thể trong máu tăng lên một cách nhanh chóng. Sau 3 đến 4 tuần tuổi hàm lượng gama Globulin giảm xuống, đến 5 tháng nó tăng lên, trong 100 ml máu có 65 mg globulin. Ngồi ra, hệ vi sinh vật trong đường ruột của lợn con (microflora) cũng là hệ thống ngăn ngừa các nhân tố gây bệnh xâm nhập vào đường ruột 2.2.2. Bộ máy tiêu hóa của lợn con phát triển nhanh nhưng chưa hồn thiện về chức năng Trong thời gian bú sữa trọng lượng bộ máy tiêu hóa lợn con tăng lên từ 10 5 lần, chiều dài ruột non tăng lên gấp 5 lần, dung tích bộ máy tiêu hóa tăng lên 40 50 lần, chiều dài ruột già tăng lên 40 50 lần. Tuyến tụy ở 30 ngày tuổi tăng lên gấp 4 lần, trọng lượng của gan gấp 3 lần so với khi s ơ sinh. Lúc đầu dạ dày chỉ nặng 6 8 gam và chứa được 35 50 gam sữa, nhưng chỉ sau 3 tuần đã tăng gấp 4 lần và 60 ngày tuổi đã nặng 150 gam và chứa được 700 1000 gam sữa Khả năng tiêu hóa của lợn con rất hạn chế. Theo A.V. Kavasnhixki dịch vị của lợn con dưới một tháng tuổi hồn tồn khơng có a xít HCl dạng tự do, vì lượng axít này tiết ra ít và nó nhanh chóng liên kết với các niêm dịch. Ngồi sự thiếu HCl tự do còn có sự giảm axít trong dịch vị thức ăn liền với HCl làm cho hàm lượng HCl tự do rất ít hoặc hồn tồn khơng có trong dạ dày của lợn con bú sữa. Vì thiếu HCl tự do trong dạ dày nên hệ vi sinh vật dễ lên men gây nên hiện tượng ỉa chảy ở lợn con Trong dịch tụy của lợn lớn có tới 15 men để tiêu hóa các chất song ở lợn con chỉ có 2 men là Kimozin và Lipaza và sau một tuần tuổi lợn con có thêm một số men như Tripxin và Amilase, hoạt tính của các men cũng tăng dần theo tuổi, từ 1 28 ngày men Tripxin tăng gấp 20 lần, Amilasa gấp 30 lần, các men như Protease, Amilase, Elastase, Carbuaxipolypeptidasa, Kimotipxin tăng dần theo tuổi của lợn con. Hàm lượng vật chất khô trong dịch tụy cũng tăng dần lên theo tuổi của lợn con. Dịch ruột do 2 tuyến Bruner và Liberkun tiết ra chứa đầy đủ các men tiêu hóa nhưng ở lợn con chưa có men Lactose, các men tiêu hóa khác có hàm lượng rất thấp khơng đủ khả năng để tiêu hóa các thức ăn nhân tạo Dịch mật của lợn con trong các tuần tuổi đầu còn hạn chế, khả năng nhũ tương hóa mỡ của lợn con chưa có. Khả năng tiêu hóa các chất dinh dưỡng của lợn con: Lợn con trong 3 tuần tuổi đầu chỉ có khả năng tiêu hóa cazein, các đường, lipid của sữa, còn các chất khác từ các thức ăn nhân tạo thì chưa có Qua nghiên cứu chúng ta thấy khả năng tiêu hóa của lợn con ngày càng tăng rõ rệt. Khi có khả năng hoạt động của các men trong dịch tụy mà điều quyết định là HCL tự do hoặc hóa men Pepsinogen để tiêu hóa Protít 2.2.3. Khả năng điều hòa thân nhiệt kém Cơ thể lợn con thường sinh ra nhiệt năng, nhiệt năng có thể thải ra mơi trường xung quanh, ngược lại sự thay đổi nhiệt độ mơi trường lại ảnh hưởng trực tiếp hoặc gián tiếp tới sự sinh nhiệt và tỏa nhiệt của cơ thể, hiện tượng đó gọi là trao đổi nhiệt giữa cơ thể lợn con với mơi trường. Lợn con lúc mới sinh có khả năng điều hòa thân nhiệt kém, khi nhiệt độ ngoại cảnh là 55 75° F thì thân nhiệt của lợn con có thể bị giảm từ 312 0F sau 1 giờ và sau 1 giờ nữa thân nhiệt của chúng mới trở lại bình thường. Nếu nhiệt độ mơi trường