Xác định Riemerella anatipestifer và Escherichia coli nghi ngờ gây hội chứng co giật và tiêu chảy trên vịt ở các cơ sở chăn nuôi ở Long An

7 180 0
Xác định Riemerella anatipestifer và Escherichia coli nghi ngờ gây hội chứng co giật và tiêu chảy trên vịt ở các cơ sở chăn nuôi ở Long An

Đang tải... (xem toàn văn)

Thông tin tài liệu

Tại Long An và nhiều địa phương, vịt khoảng 3 đến 8 tuần tuổi thường mắc bệnh có biểu hiện tiêu chảy có hoặc không có màu xanh lá, chảy nước mắt và nước mũi, run đầu và cổ được cho là liên quan đến Riemerella anatipestifer và Escherichia coli. Nghiên cứu này được thực hiện như bước đầu tiên để tìm hiểu về nguyên nhân vi khuẩn có thể liên quan các triệu chứng bệnh kể trên. Các mẫu ngoáy hầu họng vịt khỏe và vịt có biểu hiện bệnh (70 mẫu) và 27 mẫu nước ao từ 27 trại vịt được thu thập để tìm vi khuẩn R. anatipestifer và E. coli bằng PCR. Hai quy trình PCR, 16S rDNA-PCR và gyrB-PCR, được dùng tìm R. anatipestifer, và PCR gene phoA dùng cho E. coli. Kết quả là R. anatipestifer đã được phát hiện trên cả vịt có và không có biểu hiện bệnh, và trong một số mẫu nước ao. Tuy nhiên, hai phản ứng PCR xác định R. anatipestifer cho kết quả khác nhau. Bên cạnh đó E.coli cũng phát hiện trên mẫu bệnh lẫn không bệnh và tất cả các nước ao. Các chủng này được lưu lại cho các bước tiếp theo trong việc xác định độc lực. Kết quả cho thấy tình trạng nhiễm trùng trên đàn vịt phức tạp, có vẻ còn có sự bội nhiễm nhiều vi khuẩn khác trên vịt, và chưa xác định được nguyên nhân nguyên phát.

53 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Determination of Riemerella anatipestifer and Escherichia coli suspected to cause a syndrome including shaking head and trembling, greenish diarrhea on duck farms in Long An Hien T Le1∗ , Quan N Kha1 , Khuong M Chu1 , Cuong V Nguyen2 , Ngoc H Le1 , & Hoa T K Ho1 Faculty of Animal Science and Veterinary Medicine, Nong Lam University, Ho Chi Minh City, Vietnam Long An Provincial Department of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Long An, Vietnam ARTICLE INFO ABSTRACT Research Paper In Long An province and other places, ducks at 3-8 weeks of age often experience a syndrome including greenish diarrhea, eye and nose discharge, shaking head and trembling which is considered to Received: August 16, 2017 be related to Riemerella anatipestifer and Escherichia coli There is Revised: October 24, 2017 not any research to prove this hypothesis For that reason, this study Accepted: November 10, 2017 was as the first step to explore the causes of this syndrome In total, 70 swab samples from disease and nondisease ducks and 27 pool Keywords water from 27 duck farms were collected to identify R anatipestifer and E coli using PCR There were PCR (16S rDNA-PCR and Diarrhea gyrB -PCR) used to detect R anatipestifer while one PCR for gene Riemerella anatipestifer phoA was used to detect E coli The result showed that R anatipesShaking head tifer was found on both disease and non-disease ducks However, the Trembling PCRs to detect R anatipestifer did not agree well The fact that these bacteria were found on 22% farms (disease and non-disease ones) means it is complicated to confirm them in causing the men∗ Corresponding author tioned disease In addition, E coli was also found in both types of duck and from all pool water These isolates were kept for further studies to identify their virulence The result reveals that there may Le Thanh Hien Email: hien.lethanh@hcmuaf.edu.vn be the cooperation between many factors in causing this disease Cited as: Le, H T., Kha, Q N., Chu, K M., Nguyen, C V., Le, N H., & Ho, H T K (2018) Determination of Riemerella anatipestifer and Escherichia coli suspected to cause a syndrome including shaking head and trembling, greenish diarrhea on duck farms in Long An The Journal of Agriculture and Development 17(5), 53-59 www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) 54 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Xác định Riemerella anatipestifer Escherichia coli nghi ngờ gây hội chứng co giật tiêu chảy vịt sở chăn nuôi Long An Lê Thanh Hiền1∗ , Kha Ngọc Quân1 , Chu Minh Khương1 , Nguyễn Văn Cường2 , Lê Hữu Ngọc1 & Hồ Thị Kim Hoa1 Khoa Chăn Nuôi Thú Y, Trường Đại Học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh Chi Cục Chăn Ni Thú Y Long An, Long An THÔNG TIN BÀI BÁO TÓM TẮT Bài báo khoa học Tại Long An nhiều địa phương, vịt khoảng đến tuần tuổi thường mắc bệnh có biểu tiêu chảy có khơng có màu xanh lá, chảy nước mắt nước mũi, run đầu cổ cho liên quan đến Riemerella anatipestifer Escherichia coli Nghiên cứu thực bước để tìm hiểu nguyên nhân vi khuẩn liên quan triệu chứng bệnh kể Các mẫu ngoáy hầu họng vịt khỏe vịt có biểu bệnh (70 mẫu) 27 mẫu nước ao từ 27 trại vịt thu thập để tìm vi khuẩn R anatipestifer E coli PCR Hai quy trình PCR, 16S rDNA-PCR gyrB -PCR, dùng tìm R anatipestifer, PCR gene phoA dùng cho E coli Kết R anatipestifer phát vịt có khơng có biểu bệnh, số mẫu nước ao Tuy nhiên, hai phản ứng PCR xác định R anatipestifer cho kết khác Bên cạnh E.coli phát mẫu bệnh lẫn không bệnh tất nước ao Các chủng lưu lại cho bước việc xác định độc lực Kết cho thấy tình trạng nhiễm trùng đàn vịt phức tạp, có bội nhiễm nhiều vi khuẩn khác vịt, chưa xác định nguyên nhân nguyên phát Ngày nhận: 16/08/2017 Ngày chỉnh sửa: 24/10/2017 Ngày chấp nhận: 10/11/2017 Từ khóa Co giật Riemerella anatipestifer Tiêu chảy Vịt ∗ Tác giả liên hệ Lê Thanh Hiền Email: hien.lethanh@hcmuaf.edu.vn Đặt Vấn Đề Tại đồng sông Cửu Long, nuôi vịt trên cạn kết hợp ao phương thức chăn nuôi phổ biến tỉnh đồng sông Cửu Long Điều dẫn đến khó khăn việc kiểm sốt dịch bệnh Trong nhiều năm gần đây, đàn vịt trại Long An tỉnh đồng sông Cửu Long thường bị bệnh với biểu tiêu chảy có khơng có màu xanh lá, chảy nước mắt nước mũi, run đầu cổ Trong nhiều trường hợp, vịt bệnh có biểu triệu chứng thần kinh, dễ lật ngửa, chân đạp mái chèo Một số đặc điểm bệnh kể đến gồm: bệnh thể vả vịt thịt vịt đẻ; thời điểm biểu khoảng 35-50 ngày (5-8 tuần) tuổi hậu bị (qua thời điểm này, biểu bệnh); gần 100% đàn vịt có bệnh; khoảng 20% số vịt đàn có triệu chứng kể trên; tỉ lệ chết Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) số có biểu rõ 80 – 100%; vịt khơng chết bị di chứng (còi, giảm suất thịt/trứng); phòng/ trị kháng sinh khơng hiệu Cho đến nay, nghiên cứu nguyên nhân gây bệnh Long An hạn chế Với triệu chứng hay biểu nói trên, nhiễm trùng Duck circovirus, R anatipestifer E coli nghi vấn trước tiên (Bui & ctv., 2016) Tuy nhiên, với đặc tính chăn ni vịt ao hồ đồng sơng Cửu Long, khơng loại trừ có nhiễm trùng ghép vi sinh vật gây bệnh hệ quan khác Mục tiêu nghiên cứu kiểm tra diện R anatipestifer E coli mẫu ngoáy hầu họng nước ao trại vịt có hay khơng có bệnh Long An kỹ thuật PCR để xem chúng diện trường hợp biểu hội chứng co giật tiêu chảy (trong co giật bao gồm đầu – cổ, chân, hay lật ngửa chân đạp mái chèo; tiêu chảy có phân www.jad.hcmuaf.edu.vn 55 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh xanh) sở chăn nuôi vịt Long An Vật Liệu Phương Pháp Nghiên Cứu 2.1 Mẫu phương pháp thu thập mẫu Các mẫu thu thập từ 27 trại nuôi vịt gia đình ba huyện: Cần Đước, Cần Giuộc, Tân Trụ - tỉnh Long An (Tân Trụ - trại; Cần Giuộc – 11 trại; Cần Đước - 10 trại) Tại thời điểm lấy mẫu, vịt trại có độ tuổi từ khoảng đến tuần tuổi Đàn vịt lúc có khơng có biểu lâm sàng bệnh Tại trại, hay mẫu tăm-bơng ngốy dịch hầu họng lấy từ vịt có hay khơng có biểu bệnh Mẫu tăm bảo quản ống nghiệm chứa mL Tryptone soya broth (TSB; Himedia, M011-500G) Một mẫu nước ao vịt trại thu thập Mẫu nước chứa bình 500 mL Tất mẫu bảo quản thùng đá trì nhiệt độ 2-80 C vận chuyển phòng thí nghiệm để xét nghiệm vòng < Tổng cộng có 70 mẫu dịch ngốy hầu họng (54 mẫu từ vịt khỏe mạnh 16 mẫu từ vịt có dấu hiệu bệnh), 27 mẫu nước ao thu thập Ngay vận chuyển đến phòng thí nghiệm, mL mẫu nước ao cho vào ống nghiệm chứa mL canh TSB Các ống canh chứa tăm bơng ngốy hầu họng nước ao ủ vòng 48 370 C bình đèn cầy (candle jar) Mẫu tăng sinh ly trích DNA để dùng cho phản ứng PCR 2.2 Kiểm tra lưu hành R anatipestifer E.coli trại quy trình PCR Việc phân lập định danh vi khuẩn R anatipestifer theo phương pháp truyền thống nhận định khó khăn (Kardos & ctv., 2007), đồng thời chưa có quy trình PCR chẩn đốn R anatipestifer cơng bố có tính đặc hiệu cao (Christensen, 2013) Với mong muốn xác định diện vi khuẩn đàn vịt nuôi Long An, cố gắng phân lập vi khuẩn từ vịt bệnh, hai quy trình PCR khác sử dụng để phát R anatipestifer mẫu canh tăng sinh mẫu ngoáy hầu họng nước ao trại vịt Một quy trình PCR có mục tiêu gene gyrB (Wang & ctv., 2012), quy trình PCR gene 16S rDNA Qu & ctv thiết kế sử dụng Wei & ctv (2013) Ngoài ra, để khảo sát khả diện E coli trại, quy www.jad.hcmuaf.edu.vn trình PCR gene alkaline phosphate (phoA) đặc hiệu cho E coli thực các mẫu canh tăng sinh mẫu ngốy hầu họng nước ao Trình tự nucleotide mồi PCR trình bày Bảng GoTaq@Green Master Mix (Promega, M1123) sử dụng cho tất phản ứng PCR Chu trình nhiệt ba PCR sau: tiền biến tính 940 C/5 phút; 35 chu kỳ gồm biến tính 940 C/1 phút, bắt cặp 550 C/1phút, kéo dài 720 C/60 giây; kéo dài cuối 720 C/10 phút Điện di sản phẩm PCR gel agarose 0,8% có chứa ethidium bromide, kiểm tra DNA gel đèn UV 2.3 Xử lý số liệu Kết tỉ lệ dương tính nhóm mẫu cho vi khuẩn tính Chỉ số chênh OR đánh giá mối liên hệ bệnh diện vi khuẩn Đối với hai phương pháp PCR dùng để xác định R anatipestifer, số kappa dùng để đánh giá mức tương đồng hai xét nghiệm mặt thống kê (Trần Thị Dân Lê Thanh Hiền, 2007) phần mềm MS Excel 2013 Kết Quả Thảo Luận 3.1 Sự thống kết phát R anatipestifer hai quy trình PCR Trong 27 trại khảo sát, trại có 20% vịt có biểu bệnh 19 trại vịt bình thường Tổng cộng mẫu bao gồm: 27 mẫu nước hồ thu thập (mỗi trại mẫu); 70 mẫu ngốy hầu họng, 16 mẫu lấy từ vịt có biểu bệnh 54 mẫu lấy từ vịt khỏe mạnh Kết xét nghiệm mẫu hai quy trình PCR phát R anatipestifer không giống (Bảng 2) Phương pháp gyrB -PCR cho kết dương tính với 24 mẫu ngốy hầu họng (8 mẫu từ vịt bệnh 16 mẫu từ vịt khỏe), mẫu nước ao Trong đó, 16S rDNAPCR cho kết 18 mẫu dương tính (5 mẫu từ vịt bệnh, 10 mẫu từ vịt khỏe) mẫu nước ao Chỉ có mẫu ngốy hầu họng dương tính với hai PCR Chỉ số kappa = 0,275 (95% độ tin cậy từ 0,055 đến 0,494), mức tương đồng dạng “vừa” Chẩn đoán R anatipestifer khó khăn dựa vào triệu chứng lâm sàng nhầm lẫn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh 56 Mẫu ngốy hầu họng Vịt có dấu hiệu Vịt khơng có dấu hiệu lâm sàng lâm sàng 16 54 16 (50,0%) (29,6%) 10 (31,3%) (18,5%) 70 24 (34,3%) 15 (21,4%) Tổng Bảng So sánh kết hai phản ứng PCR để phát R anatipestifer Mẫu Tổng Dương tính (GyrB -PCR) Dương tính (16S rDNA-PCR) PCR gene mục tiêu R anatipestifer, gene gyrB R anatipestifer, gene 16S rDNA E coli gene phoA M = C:A, Y = C:T; all 1:1 Mồi gyrBP1 gyrBP2 190F 843R Pho-F Pho-R Mẫu nước hồ trại Trại có dấu hiệu Trại khơng có dấu hiệu lâm sàng lâm sàng 19 (0%) (5,2%) (37,5%) (0%) Trình tự mồi (5 - ) AGAGCGAGAAGAAAAAACCT CTCCCATAAGCATAGAGAAGA GTATTGAAAGCTCTGGCGG TCGCTTAGTCTCTGAACCC GTGACAAAAGCCCGGACACCAGAAATGCCT TACACTGTCATTACGTTGCGGATTTGGCGT 903 654 Kích thước sản phẩm (bp) 194 Bảng PCR đoạn mồi dùng xác định diện R anatipestifer E coli nghiên cứu này1 www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh với bệnh khác có bệnh tích tương tự, ví dụ colibacillosis, salmonellosis, chlamydiosis (Christensen, 2013; Glisson & ctv., 2013) Sự phát triển chậm R anatipestifer và/hoặc đồng nhiễm với vi khuẩn khác thủy cầm nguyên nhân làm phân lập R anatipestifer bị thất bại Bên cạnh đó, xác định đặc điểm kiểu hình R anatipestifer thường cho kết trái (Christensen & Bisgaard, 2010), phương pháp phân lập, định danh khơng ưu tiên Vì vậy, nhiều nhà khoa học phát triển quy trình PCR gene mục tiêu khác nhằm phát vi khuẩn Tuy nhiên, kết dương tính giả nhiều quy trình đề cập (Christensen & Bisgaard, 2010; Wang & ctv., 2012; Rubbenstroth & ctv., 2013) Hơn nữa, PCR kèm với enzyme cắt giới hạn để xác định tính đặc hiệu cho vi khuẩn dường không khả quan (Rubbenstroth & ctv., 2013) 57 Nếu coi hai PCR dương tính mẫu trại có diện R anatipestifer số OR = 2,18 (0,28 - 26,89), điều cho thấy diện vi khuẩn R anatipestifer có liên quan đến bệnh khơng có ý nghĩa thống kê (P = 0,349) Vi khuẩn R anatipestifer tìm thấy mẫu nước ao Vi khuẩn phát mẫu nước với gyrB -PCR mẫu với 16S rDNA-PCR Điều cho thấy nước hồ môi trường quan trọng việc lây lan R anatipestifer mầm bệnh khác thủy cầm đàn đàn khác khu vực xung quanh Tỉ lệ phát R anatipestifer vịt ba huyện khảo sát trình bày Bảng Tại trại Tân Trụ, khơng phát vi khuẩn từ mẫu ngốy họng, có mẫu nước dương tính với gyrB -PCR Ở hai huyện Cần Giuộc Cần Đước, vi khuẩn tìm thấy từ vịt nước Do đó, với mong muốn có kết có mức ao Ba huyện nằm vùng thấp tập tin cậy cao việc xác định diện R trung nhiều vịt Năm 2015, số lượng trại nuôi vịt anatipestifer trại, quy trình PCR với Tân Trụ, Cần Giuộc, Cần Đước theo thứ tự gene mục tiêu sử dụng Kết cho 259, 128 217 trại, với số lượng vịt 473.128; thấy tỉ lệ phát R anatipestifer gyrB 119.222 11.4871 vịt (Chi cục thú y tỉnh Long PCR cao 16S rDNA-PCR Tuy nhiên, giai An, 2015, số liệu thu thập qua giao tiếp cá nhân) đoạn nghiên cứu, chưa thể so sánh mức độ tin cậy phản ứng diện R 3.2 Phát E coli mẫu ngoáy hầu anatipestifer trại vịt Mặc dù vậy, có họng nước ao mẫu ngoáy hầu họng cho kết dương tính với hai PCR, điều xác nhận có lưu hành Colibacillosis gây E coli bệnh vi khuẩn trại vịt báo cáo phổ biến gây thiệt hại kinh tế Để tiện cho việc đánh giá thảo luận, kết nghiêm trọng sản xuất gia cầm (Nolan & trại dương tính với R anatipestifer ctv., 2013) Để kiểm tra diện E coli, trình bày Bảng theo hai cách: trại canh tăng sinh mẫu ngoáy họng vịt xem dương tính với R anatipestifer nước ao phân tích quy trình PCR có mẫu (mẫu ngốy hầu họng gene mã hóa cho alkaline phosphate E coli (Wei mẫu nước) dương tính với hai PCR, & ctv., 2013) Một sản phẩm PCR giải trình dương tính với hai PCR tự nucleotide xác nhận tính đặc hiệu Trại nhiễm R anatipestifer phát BLAST E coli phát từ 64 số gyrB -PCR (51,9%) cao 16S rDNA- 70 mẫu ngoáy hầu họng (91,4%) Vi khuẩn PCR (37%) (Bảng 3) Kết tương tự với phát từ tất 27 mẫu nước ao Do kinh kết trình bày Bảng 2, tỉ lệ gyrB -PCR phí giới hạn, nghiên cứu dừng lại giai đoạn tìm phát vi khuẩn từ mẫu ngốy họng 34,3% hiểu diện E coli niêm mạc hầu (24 70 mẫu) 16S rDNA-PCR họng nước ao Tuy nhiên, mẫu canh phát vi khuẩn từ 21,4% mẫu (15 70 tăng sinh gốc vi khuẩn phân lập EMB mẫu) Nếu kết hợp kết hai PCR, vi khuẩn giữ lại (trong glycerin, -20 C) để sau tìm thấy số 27 trại (22,2%), nghiên cứu dạng độc lực xác định có (trong số 8) trại có vịt biểu triệu chủng chứng bệnh số 19 trại khơng có biểu bệnh Kết xác định có lưu hành vi khuẩn đàn vịt không thấy biểu bệnh www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh 58 12 15 (57,7%) 14 (43,8%) (7.7%) (21.8%) Mẫu ngoáy hầu họng (70) Dương tính Dương tính với PCR với hai PCR 10 11 Số trại Bảng Tỉ lệ phát R anatipestifer huyện quy trình PCR Tân Trụ (6) 26 Huyện (số trại) Cần Giuộc (11) 32 Số mẫu Cần Đước (10) (37.5%) (37,5%) Mẫu nước ao trại (27) Số mẫu dương tính (gyrB -PCR) (16,7%) 27 14 (51,9%) 10 (37,0%) 17 (63,0%) (22,2%) Tổng (16S rDNA-PCR) (30,0%) (5,3%) Nước ao trại Khơng có vịt Có vịt biểu bệnh biểu bệnh 19 (5,3%) Số trại (27) Dương tính Dương tính với PCR với hai PCR (16,6%) (81,8%) (18.2%) (70,0%) (40%) Số trại Khơng có vịt Có vịt biểu bệnh biểu bệnh 19 10 (50%) (52,6%) (50%) (31.6%) 11 (75%) (57,9%) (25%) (21,1%) Bảng Phát R anatipestifer 27 trại vịt Long An quy trình PCR Số trại Có mẫu dương tính với gyrB -PCR Có mẫu dương tính với 16S rDNA-PCR Có mẫu dương tính với PCR Có mẫu dương tính với hai RA PCRs www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Kết Luận Nghiên cứu bước đầu nổ lực tìm nguyên nhân gây bệnh phổ biến vịt trại với đặc điểm co giật kết hợp tiêu chảy Vi khuẩn R anatipestifer phát lưu hành đàn vịt bệnh nhiều Có thể khó khăn chẩn đoán, số lượng mẫu hạn chế, chưa thấy rõ mối liên quan vi khuẩn với bệnh Ngồi ra, với cách ni vịt trại, việc kiểm sốt vệ sinh an tồn sinh học môi trường chăn nuôi đặc biệt ao ni khó khăn Từ đó, khả bội nhiễm mầm bệnh khác đàn vịt điều khó tránh khỏi, làm khó khăn việc xác định nguyên nhân nhiễm trùng nguyên phát hay thứ phát Tài Liệu Tham Khảo (References) Bui, D H., Do, D T., Nguyen, T T., Nguyen, N T T., Le, H T., & Nguyen, N T P (2016) Determination of duck circovirus (DuCV) and Riemerella anatipestifer (RA) in several cases of septicemia disease from duck flocks by PCR technique Journal of Veterinary Science and Technology 6, 14-21 Christensen, H., & Bisgaard, M (2010) Phylogenetic relationships of Riemerella anatipestifer serovars and related taxa and an evaluation of specific PCR tests reported for R anatipestifer Journal of Applied Microbiology 108(5), 1612-1089 59 Glisson, J R., Charles, L H., & Jens, P C (2013) Fowl Cholera In Swayne, D E., Glisson, J R., McDougald, L R., Nolan, L K., Suarez, D L., & Nair, V L (Eds) Diseases of Poultry (13rd ed., 807-823) New Jersey, USA: Wiley-Blackwell Kardos, G., Nagy, J., Antal, M., Bistyák, A., Tenk, M., & Kiss, I (2007) Development of a novel PCR assay specific for Riemerella anatipestifer Letters in Applied Microbiology 44(2), 145-148 Nolan, L K., John, H B., Jean-Pierre, V., Tahseen, A., & Catherine, M L (2013) Colibacillosis In Swayne, D E., Glisson, J R., McDougald, L R., Nolan, L K., Suarez, D L., & Nair, V L (Eds) Diseases of Poultry (13nd ed., 751-805) New Jersey, USA: WileyBlackwell Rubbenstroth, D., Ryll, M., Knobloch, J K M., Kohler, B., & Rautenschlein, S (2013) Evaluation of different diagnostic tools for the detection and identification of Riemerella anatipestifer Avian Pathology 42(1), 1726 Wang, X P., Zhu, D K., Wang, M S., Cheng, A C., Jia, R Y., Chen, S., Chen, X Y., & Tang, T (2012) Development and application of specific polymerase chain reaction assay targeting the gyrB gene for rapid detection of Riemerella anatipestifer Poultry Science 91(10), 2450-2453 Wei, B., Cha, S Y., Kang, M., Park, I J., Moon, O K., Park, C K., & Jang, H K (2013) Development and application of a multiplex PCR assay for rapid detection of major bacterial pathogens in ducks Poultry Science 92(5), 1164-1170 Christensen, J P (2013) Overview of Riemerella anatipestifer infection in poultry Veterinary manual Retrieved July 12, 2013, from https://www.msdvetmanual.com/poultry/riemerellaanatipestifer-infection/overview-of-riemerellaanatipestifer-infection-in-poultry www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 17(5) ... Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Xác định Riemerella anatipestifer Escherichia coli nghi ngờ gây hội chứng co giật tiêu chảy vịt sở chăn nuôi Long An Lê Thanh Hiền1∗ , Kha Ngọc Quân1 , Chu Minh... khóa Co giật Riemerella anatipestifer Tiêu chảy Vịt ∗ Tác giả liên hệ Lê Thanh Hiền Email: hien.lethanh@hcmuaf.edu.vn Đặt Vấn Đề Tại đồng sông Cửu Long, nuôi vịt trên cạn kết hợp ao phương thức chăn. .. hội chứng co giật tiêu chảy (trong co giật bao gồm đầu – cổ, chân, hay lật ngửa chân đạp mái chèo; tiêu chảy có phân www.jad.hcmuaf.edu.vn 55 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh xanh) sở chăn

Ngày đăng: 09/01/2020, 19:57

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • Ðt Vn Ð

  • Vt Liu và Phng Pháp Nghiên Cu

    • C s lý thuyt

      • Mô hình nghiên cu

        • Phng pháp nghiên cu

          • Kt Qua và Thao Lun

            • Xây dng b tiêu chí o lng nang lc lao ng

              • S khác bit trong nhn thc v tm quan trong cua các tiêu chí nang lc

                • S t trang bi nang lc cua sinh viên theo yêu cu nhà tuyn dung

                • Kt Lun và Kin Nghi

                  • Kt Lun

                    • Kin Nghi

                    • Ðt Vn Ð

                    • Vt Liu và Phng Pháp Nghiên Cu

                      • Ðia bàn nghiên cu, chon mu, thu thp s liu

                        • Các nhóm nhân t và ánh giá mô hình

                          • Kt Qua và Thao Lun

                            • Kt Lun

                              • Ðt Vn Ð

                              • Vt Liu và Phng Pháp Nghiên Cu

                                • Kt Qua và Thao Lun

                                  • Kt qua

                                    • Anh hng cua bn lng nc ti và loai giá th n s sinh trng cây da leo trng vu Hè Thu 2016 tai Thu Ðc, thành ph H Chí Minh

                                    • Anh hng cua bn lng nc ti và giá th n kha nang phát duc cua cây da leo trng vu Hè Thu 2016 tai Thu Ðc, Thành ph H Chí Minh

                                    • Anh hng cua bn lng nc ti và giá th n nang sut qua da leo trng vu Hè Thu 2016 tai Thu Ðc, Thành ph H Chí Minh

                                    • Anh hng cua bn lng nc ti và giá th n hiu qua kinh t cây da leo trng vu Hè Thu 2016 tai Thu Ðc, thành ph H Chí Minh

                                    • Thao Lun

                                      • Kt Lun

                                        • Ðt Vn Ð

                                        • Vt Liu và Phng Pháp Nghiên Cu

                                          • Thi gian và ia im nghiên cu

                                            • Ðiu kin thí nghim

                                              • Phng pháp nghiên cu

                                                • Vt liu nghiên cu

                                                • B trí thí nghim

                                                • Kt Qua và Thao Lun

                                                  • Tính cht vt lý và hóa hoc cua các loai giá th trc khi trng cây rau qu vi

                                                    • Anh hng cua các loai giá th n s cành và chiu dài cành cây rau qu vi

                                                      • Anh hng cua các loai giá th n s cp lá trên cành và chi s dip luc t trong lá qu vi

                                                      • Anh hng cua các loai giá th n trong lng ti cây rau qu vi

                                                        • Anh hng cua các loai giá th n nang sut lý thuyt, nang sut thc thu và nang sut thng phm cây rau qu vi

                                                        • Kt Lun

                                                          • Ðt Vn Ð

                                                          • Vt Liu và Phng Pháp Nghiên Cu

                                                            • Thi gian và ia im

                                                              • Vt liu nghiên cu

                                                                • Ðiu kin nghiên cu

                                                                  • Phng pháp nghiên cu

                                                                    • Kt Qua và Thao Lun

                                                                      • Anh hng cua loai và ty l vt liu phi trn n quá trình u phân ym khí vo cà phê

                                                                        • Anh hng cua loai và ty l vt liu phi trn n nhit ng u

                                                                        • Anh hng cua loai và ty l vt liu phi trn n pH ng u

                                                                        • Anh hng cua vt liu, ty l phi trn n s sut giam th tích ng u

                                                                        • Hàm lng cht hu c, am tng s, ty l C/N cua san phm u sau 60 ngày u

                                                                        • Anh hng cua vt liu phi trn và nng EM n quá trình u phân ym khí vo cà phê

                                                                          • Anh hng cua vt liu phi trn và nng EM n nhit ng u

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan