Bài viết khảo sát đặc điểm hình thái và vi học của loài A. conyzoides và loài P. clematidea nhằm cung cấp cơ sở dữ liệu về thực vật học để giúp phân biệt 2 loài này.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học PHÂN BIỆT VỀ MẶT THỰC VẬT LOÀI AGERATUM CONYZOIDES L VÀ PRAXELIS CLEMATIDEA R M KING & H ROBINSON, HỌ CÚC (ASTERACEAE) Bùi Thị Quyên Quyên*, Hoàng Vân Nga*, Trương Thị Đẹp** TÓMTẮT Mở đầu: Ageratum conyzoides L Cỏ cứt lợn, thường dùng dân gian để chữa viêm xoang, viêm tai, phụ nữ bị rong kinh sau sinh Praxelis clematidea R M King & H Robinson loài thực vật ngoại lai xâm lấn chưa mô tả Việt Nam Đặc điểm loài giống nhau, dễ nhầm lẫn việc thu hái sử dụng Cỏ cứt lợn làm thuốc Đến chưa có tài liệu mơ tả đầy đủ đặc điểm hình thái, cấu tạo giải phẫu bột dược liệu để phân biệt loài Mục tiêu: Khảo sát đặc điểm hình thái vi học loài A conyzoides loài P clematidea nhằm cung cấp sở liệu thực vật học để giúp phân biệt loài Phương pháp nghiên cứu: Phân tích, mơ tả, chụp hình đặc điểm hình thái, cấu tạo giải phẫu bột dược liệu Các phận thân, cuống lá, phiến cắt ngang thành lát mỏng dao lam, nhuộm vi phẫu phẩm nhuộm son phèn lục iod Thực bột dược liệu cách cắt nhỏ phận mặt đất cây, sấy nhiệt độ 50-60oC, nghiền rây qua rây số 32 Xác định tên khoa học loài cách so sánh đặc điểm khảo sát với tài liệu Kết quả: Các đặc điểm để phân biệt A conyzoides P clematidea sau: A conyzoides mép có nhiều cưa (16-24 răng) gần toàn phiến lá; đế cụm hoa hình nón; đầu có 6070 hoa; bắc tổng bao xếp thành hàng, bắc dài gần tồn sau rụng; đài dạng vảy tam giác đầu kéo dài thành mũi nhọn; có cạnh, cạnh có gai thưa thớt, đỉnh có vảy nhọn; vi phẫu thân có mơ dày góc tập trung thành đám dài, biểu bì thân có lỗ khí; bột hoa có mảnh đài dạng vảy tam giác hay hình trụ có gai, mảnh biểu bì bắc tế bào có vách uốn lượn P clematidea: mép có cưa (6-12) 2/3 phía phiến lá; đế cụm hoa hình nón cao, đầu có 35-35 hoa; bắc tổng bao xếp thành 2-3 hàng, bắc có kích thước khơng rụng trước rụng; đài dạng mào lông; có cạnh, mặt ngồi có nhiều gai, đỉnh mào lơng; vi phẫu thân có nhiều cụm mơ dày, biểu bì thân có nhiều lỗ khí; bột hoa có mảnh đài dạng hình trụ có nhiều gai, mảnh biểu bì bắc tế bào có vách thẳng Ngồi ra, lồi có mùi khác Kết luận: Các đặc điểm khác biệt mùi; hình thái mép lá, đế cụm hoa, hình dạng đầu, bắc tổng bao, đài, ống tràng, quả; phân bố mô dày số lượng tế bào lỗ khí thân lá; đặc điểm mảnh bắc đài bột hoa giúp phân biệt lồi A conyzoides P clematidea Từ khóa: Ageratum conyzoides, Praxelis clematidea, Cỏ cứt lợn, đặc điểm hình thái, giải phẫu, bột dược liệu * Khoa Dược, Trường Đại Học Lạc Hồng Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS.TS Trương Thị Đẹp ĐT: 0909513419 ** Chuyên Đề Dược Email: trgdep@gmail.com 311 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 ABSTRACT DISCRIMINATING AGERATUM CONYZOIDES L AND PRAXELIS CLEMATIDEA R M KING & H ROBINSON, ASTERACEAE BASED ON THEIR BOTANICAL CHARACTERISTICS Bui Thi Quyen Quyen, Hoang Van Nga, Truong Thi Dep * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 - No 2- 2019: 311 – 318 Background: Ageratum conyzoides L is commonly used in folk medicine for the treatment of sinusitis, earache, postpartum bleeding Praxelis clematidea R M King & H Robinson is an invasive exotic plant that hasn’t been researched in Vietnam The characteristics of these two species are very similar so that it’s easy to make error when collecting A conyzoides for medicinal purposes However, there are no documents describing the morphological and anatomical characteristics and the composition of herbal powders of A conyzoides and P clematidea in detail Objectives: The aim of this study is to describe the morphological and anatomical characteristics and the composition of herbal powders of A conyzoides and P clematidea to distinguish the two species Methods: Morphological and anatomical characteristics and composition of herbal powders of A conyzoides and P clematidea were analysed, described and photographed The stems, petioles and leaves were made thin slices with razor blades, and then stained in carmine alum-iodine green dye The herbal powders were made by cutting the above-ground plant parts, drying at 50-60oC, grinding and sieving through a sieve Finally, the scientific names of these species were authenticated by comparing their morphological and anatomical characteristics with those written in the literature Results: A conyzoides: Morphology: Serrate leaf margins of 16-24 serrations Receptacle conical, florets 60-70, phyllaries 2-seriate (nearly equal phyllaries, remaining after fruits fall), calyx represented by long acute scales Achenes 5-angled, pappus scale 5, sparsely thorny edges Atanomy: long collenchyma clusters, some stomata on stem epidermis; some stomata on the adaxial leaf surface Herbal powder: pieces of calyx represented by triangular scales or bristles with thorns, pieces of phyllary epidermis with wavy cell walls P clematidea: Morphology: Serrate leaf margins of 6-12 serrations Receptacle conical and longer, florets 35-45, phyllaries 2-3 seriate (unequal phyllaries, and falling before fruits fall), calyx represented by bristles Achenes 4-angled, pappus present, densely thorny surfaces Anatomy: short collenchyma clusters, more stomata on stem epidermis, more stomata on the adaxial leaf surface Herbal powder: a lot of pieces of calyx represented by densly thorny bristles, pieces of phyllary epidermis with straight cell walls Conclusion: A conyzoides and P clematidea could be distinguished based on the differences in terms of leaf margins, receptacles, florets, phyllaries, calyces, fruits, collenchyma, numbers of stomata on stem and leaf epidermis, and flower powders Key words: Ageratum conyzoides, Praxelis clematidea, morphological, anatomy, herbal powder thu giống Cỏ cứt lợn ĐẶTVẤNĐỀ mùi khác Sau phân tích đặc Ageratum conyzoides L Cỏ cứt lợn, điểm thực vật xác định tên khoa học hay Hoa ngũ vị, Hoa ngũ sắc, Bù Praxelis clematidea R M King & H Robinson xích, Cỏ hơi, Cỏ cứt heo Cây mọc hoang họ Cúc (Asteraceae) với Cỏ cứt lợn dại khắp nơi dùng dân gian Lồi P clematidea chưa mơ tả tài để chữa viêm xoang, viêm tai, phụ nữ bị rong liệu thực vật Việt Nam, diện kinh sau sinh, mụn nhọt, ngứa lở, eczema(3-5,7,8) loài phổ biến khắp nơi phân Trong trình thu hái Cỏ cứt lợn chúng 312 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học bố xen lẫn với Cỏ cứt lợn P clematidea loài cỏ xâm lấn phát Florida (Mỹ) năm 2006(1) Trên giới, có nhiều tài liệu mơ tả đặc điểm hình thái lồi P clematidea(1,2,9) Lá lồi P clematidea vò có mùi nước tiểu mèo(1) Do vậy, tạm đặt tên “Cỏ hôi Praxelis” hay “Cỏ mèo” Hiện chưa có tài liệu mô tả cách chi tiết đặc điểm thực vật loài để phân biệt với loài Cỏ cứt lợn thuốc Bài báo so sánh đặc điểm hình thái vi học A conyzoides P clematidea nhằm cung cấp sở liệu thực vật học để giúp định danh kiểm nghiệm vi học loài nước Javel nhuộm son phèn lục iod Quan sát vi phẫu nước kính hiển vi quang học (Olympus, model CX23 LED) chụp ảnh mô tả cấu trúc Mỗi phận quan sát từ 5-10 lát VẬTLIỆU-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Ageratum conyzoides L Praxelis clematidea R M King & H Robinson có số đặc điểm hình thái giống (Hình 1): Cây bụi nhỏ Thân dạng hình trụ tròn, có nhiều lơng che chở Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, khơng có kèm Phiến màu xanh lục, bìa phiến có cưa, mặt có gân rõ, có lơng che chở Cuống hình lòng máng Cụm hoa đầu tụ thành xim cành, đế cụm hoa lồi mang nhiều hoa hình ống Hoa đều, lưỡng tính, mẫu 5, hữu thụ Tràng hoa dính ¾ bên thành ống loe đỉnh, phía chia thành thùy hình tam giác, tiền khai van Bộ nhị gồm nhị đều, chị rời dạng sợi, đính gốc ống tràng xen kẽ cánh hoa; bao phấn màu trắng, ô, nứt dọc, hướng trong, đính đáy, dính thành ống dài bao lấy vòi nhụy, gốc bao phấn khơng có tai, đỉnh có phiến mỏng; hạt phấn rời, hình cầu, có gai Bộ nhụy gồm nỗn, bầu ơ, nỗn đính đáy, có đĩa mật đỉnh bầu; vòi nhụy dạng sợi, màu tím, chia làm trước khỏi ống tràng; đầu nhụy dài màu tím Quả bế màu đen, chứa hạt Vật liệu nghiên cứu mẫu tươi A conyzoides P clematidea thu hái số nơi (Bảng 1) Bảng 1: Địa điểm, thời gian thu mẫu A conyzoides P clematidea Loài Ageratum conyzoides Praxelis clematidea Ngày lấy mẫu Huyện Đắc RLấp, DakNong 02/04/2018 Huyện Vĩnh Cửu, Đồng Nai 17/10/2018 TP Biên Hòa, Đồng Nai 10/05/2018 Huyện Vĩnh Cửu, Đồng Nai 12/10/2018 Nơi thu mẫu Phương pháp nghiên cứu - Khảo sát đặc điểm hình thái: Quan sát đặc điểm hình thái mắt thường, kính lúp, kính hiển vi quang học, kính soi nổi; mơ tả chụp hình đặc điểm khảo sát Xác định tên khoa học loài dựa vào đặc điểm hình thái phân tích so với tài liệu(10) - Khảo sát cấu tạo giải phẫu: Cắt ngang thân, cuống lá, phiến thành lát mỏng dao lam Đối với thân: Cắt ngang phần lóng cành có độ trưởng thành trung bình Đối với phiến lá: Cắt ngang đoạn 1/3 đáy phiến gồm gân hai bên phiến Đối với cuống lá: Cắt ngang đoạn 1/3 phía đáy cuống không sát đáy Vi phẫu tẩy trắng Chuyên Đề Dược - Khảo sát bột dược liệu: Bộ phận dùng cắt nhỏ, sấy nhiệt độ 6070o C đến khô, nghiền rây qua rây số 32 (đường kính lỗ rây 0,1 mm) Quan sát thành phần bột nước cất kính hiển vi quang học Mô tả chụp thành phần KẾTQUẢ Đặc điểm hình thái Tuy nhiên, hình thái phân biệt A conyzoides P clematidea đặc điểm mép lá, cụm hoa, tổng bao bắc, đài hoa, tràng hoa (Hình 2) trình bày bảng 313 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Hình 1: Tồn A conyzoides (A) P clematidea (B) Hình 2: Đặc điểm khác hình thái A conyzoides (A) P clematidea (B) 1: Mép lá; 2: Đầu; 3: Đế cụm hoa; 4: Lá bắc tổng bao; 5: Đài hoa; 6: Tràng hoa; 7: Tổng bao bắc rụng; 8: Quả 314 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Bảng 2: Đặc điểm khác hình thái A conyzoides P clematidea Praxelis clematidea Mép có 6-12 khía răng, tập trung 2/3 phía Mép có 16-24 khía gần tồn phiến Mép phiến (Hình 2.1A) (Hình 2.1B) Hình trứng nụ, bầu dục cắt ngang nở Hình trứng thn nụ, hình chng hẹp hoa nở Đầu (Hình 2.2A) (Hình 2.2B) Cuống cụm Có nhiều sợi màu xanh Khơng có hoa (Hình 2.2A) (Hình 2.2B) Đế cụm Hình nón, cao 0,9-1 mm, đường kính 1,25-1,5 mm Hình nón, cao 1,25-1,35 mm, đường kính 1,1-1,2 mm hoa (Hình 2.3A) (Hình 2.3B) Số hoa/đầu 60-70 35-45 Xếp hàng, bắc dài gần nhau, mép Xếp 2-3 hàng, bắc dài ngắn khác nhau, Tổng bao có lơng mép nhẵn bắc (Hình 2.4A) (Hình 2.4B) vảy dài nhọn Mào lơng (Hình 2.5B) Đài hoa (Hình 2.5A) Màu trắng hay tím nhạt mặt, mặt ngồi có Màu tím mặt trong, tím nhạt trắng mặt ngồi, tuyến lơng, ống tràng hẹp ½ phình to mặt ngồi nhẵn, ống tràng to dần lên phía Tràng hoa phía (Hình 2.6B) (Hình 2.6A) Tổng bao Tồn Rụng trước bắc (Hình 2.7A) (Hình 2.7B) rụng Có cạnh, cạnh có gai thưa thớt, đỉnh có vảy Có cạnh, bề mặt có nhiều gai, đỉnh mào lơng Quả (Hình 2.8A) (Hình 2.8B) Đặc điểm Ageratum conyzoides Hệ thống dẫn cấu tạo cấp gồm nhiều bó libe Cấu tạo giải phẫu Vi phẫu thân lồi có cấu trúc giống gỗ cách khoảng gian bó rộng hay như: Biểu bì có nhiều lơng che chở hẹp Mơ mềm tủy đạo (Hình 3) Tuy nhiên, lơng tiết Mô dày phiến bị gián đoạn mô phân bố mơ dày (Hình 3) số lượng lỗ khí mềm tế bào có lục lạp Mơ mềm vỏ đạo Nội bì (Hình 4) thân lồi khác biệt đai Caspary Ống tiết kiểu ly bào Trụ bì hóa trình bày bảng mơ cứng cụm úp lên đầu bó libe gỗ Bảng 3: Sự khác đặc điểm vi phẫu thân A conyzoides P clematidea Đặc điểm Mô dày Praxelis clematidea Ageratum conyzoides Mô dày gần liên tục, bị gián đoạn cụm mơ Mơ dày bị gián đoạn, tồn vi phẫu có khoảng 27-38 cụm mơ dày (Hình 3B2) mềm nhỏ, tồn vi phẫu có khoảng 3-8 đám mơ dày (Hình 3A2) Số lượng lỗ khí Ít (Hình 4A) Nhiều (Hình 4B) Hình 3: Đặc điểm vi phẫu thân A conyzoides (A) P.clematidea (B) (1 Toàn vi phẫu, Một phần vi phẫu) Chuyên Đề Dược 315 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Hình 4: Số lượng lỗ khí (dấu x) biểu bì thân A conyzoides (A) P clematidea (B) cắt xéo Cuống lá: Vi phẫu lõm hình chữ V Vi phẫu lá: Cấu trúc giải phẫu lồi Biểu bì có lỗ khí, nhiều lơng che chở đa bào, tương tự gồm: Gân giữa: Mặt lồi lông tiết Mô dày phiến hay góc Mơ mềm đạo nhiều mặt Biểu bì có nhiều lơng che Hệ thống dẫn gồm 3-5 bó khơng đều, bó chở đa bào, lơng tiết Mơ dày phiến hay góc giữa, bó nhỏ nằm phía Mơ mềm đạo Bó dẫn gồm bó lớn bên với gỗ libe (Hình 5) giữa, với gỗ libe xếp thành Tuy nhiên, số lượng lỗ khí biểu bì hình cung, có - bó nhỏ xếp hai bên lồi khác Biểu bì cạnh bó Ống tiết kiểu ly bào Phiến lá: P clematidea có nhiều lỗ khí Biểu bì có nhiều lơng che chở đa bào lơng so với A conyzoides (hình 6) tiết, biểu bì có nhiều lỗ khí Mơ mềm giậu lớp Mơ mềm khuyết Nhiều bó dẫn bị Hình 5: Đặc điểm vi phẫu A conyzoides (A) P clematidea (B) (1: Cuống lá, 2: Phiến lá) Hình Số lượng lỗ khí (dấu x) biểu bì A conyzoides (A) P clematidea (B) (1: Biểu bì trên, 2: Biểu bì dưới) Đặc điểm bột dược liệu biểu bì, lơng che chở đa bào thường bị gãy, Bột thân, bột bột hoa lồi lơng tiết đầu đa bào, mảnh mơ mềm, sợi mơ có cấu tử tương tự Bột thân: Mảnh cứng nằm riêng lẻ hay thành bó, mảnh mạch 316 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học mạng, mạch điểm, mạch vòng, mạch xoắn Bột mảnh đầu nhụy; mảnh vỏ màu nâu; mảnh lá: Biểu bì mang nhiều lỗ khí, lơng che chở đa mạch vạch bào thường bị gãy, lơng tiết đầu tròn, mảnh Tuy nhiên, bột bột hoa A mơ mềm có nhiều lục lạp, mảnh mạch vạch conyzoides P clematidea có số đặc điểm mạch vòng Bột hoa: Mảnh cánh hoa, lông che chở thường bị gãy; mảnh biểu bì tổng bao bắc dính với mảnh mơ mềm tổng bao bắc; hạt phấn hình cầu gai; mảnh bao phấn; phân biệt trình bày bảng Mùi bột P clematidea có mùi nước tiểu mèo, A conyzoides khơng Bột hoa khác biệt vách tế bào biểu bì tổng bao bắc hình dạng mảnh đài (Hình 7) Bảng 4: Sự khác đặc điểm bột dược liệu A conyzoides P clematidea Đặc điểm Mùi bột Lá bắc tổng bao Mảnh đài Praxelis clematidea Ageratum conyzoides Mùi hôi Mùi nước tiểu mèo Mảnh biểu bì ngồi bắc tổng Mảnh biểu bì ngồi bắc tổng bao có bao có vách uốn lượn (Hình 7A1) vách thẳng (Hình 7B1) Dạng mào lơng hình trụ dài mang nhiều gai nhọn, Dạng vảy tam giác hình trụ dài mang gai số lượng gai nhiều so với A conyzoides (Hình nhọn (Hình A2a, A2b) B2b) Hình 7: Đặc điểm khác bột hoa A conyzoides (A) P clematidea (B) (1: Mảnh bắc; 2a: Mảnh đài dạng vảy; 2b: Mảnh đài dạng hình trụ) nêu tài liệu(1,9) Tuy nhiên, dựa BÀNLUẬN kết phân tích so sánh cách chi tiết Đặc điểm hình thái lồi P clematidea phân biệt loài số đặc Việt Nam giống mô tả tài điểm trình bày bảng Đặc điểm liệu(1,2,9) Một số đặc điểm hình thái (đế cụm giải phẫu bột dược liệu loài chưa hoa, bắc tổng bao, rụng) để phân mô tả tài liệu Việt Nam biệt loài P clematidea A conyzoides giới Về giải phẫu, vi phẫu thân, Chuyên Đề Dược 317 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 cuống lá, phiến loài tương tự nhau, phân biệt mô dày gần liên tục A conyzoides, gián đoạn chia thành nhiều cụm ngắn P clematidea, số lượng lỗ khí biểu bì thân A conyzoides P clematidea (Bảng 3, hình 4, hình 6) Về bột dược liệu, phân biệt bột thân lồi Bột phân biệt qua mùi, A conyzoides có mùi hơi, P clematidea có mùi nước tiểu mèo Bột hoa phân biệt loài dựa bắc tổng bao mảnh đài (Bảng 4, hình 7) KẾTLUẬN Các đặc điểm hình thái, giải phẫu bột dược liệu loài A conyzoides P clematidea lần so sánh cách chi tiết Các đặc điểm khác biệt mùi; hình thái mép lá, đế cụm hoa, hình dạng đầu, bắc tổng bao, đài, ống tràng, quả; phân bố mơ dày số lượng tế bào lỗ khí thân lá; đặc điểm mảnh bắc đài bột hoa giúp phân biệt loài Batista MF, Souza LA (2017), “Flower structure in ten Asteraceae species: considerations about the importance of morpho-anatomical features at species and tribal level”, Brazilian Journal of Botany, 40(1), pp 265-279 Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong cs (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam (Tập 1), NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 375-377 Đỗ Tất Lợi (2009), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 43-44 Lê Kim Biên (2007), Thực vật chí Việt Nam (Tập 7), NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 108-109 Rafaela Fa Bárbara MN, Rafaela DSá, Luiz AL Soares, Karina P Randau (2016), “Morpho-anatomical study of Ageratum conyzoides”, Brazilian Journal of Pharmacognosy, 26(6), pp 1-9 Võ Văn Chi (2003), Từ điển thực vật thông dụng, Tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 208-209 Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, Tập (Bộ mới), NXB Y học, Hà Nội, tr 500-501 Weeds of Australia - Biosecurity Queensland Edition Fact Sheet, 15/10/2018.https://keyserver.lucidcentral.org/weeds/data/media /Html/praxelis_clematidea.htm 10 Zhu Shi, Yilin Chen, Yousheng Chen et al., Asteraceae, Flora of China, Vol.20-21, p 879 http://www.efloras.org Ngày nhận báo: 18/10/2018 Ngày phản biện nhận xét báo: 01/11/2018 Ngày báo đăng: 15/03/2019 TÀILIỆUTHAMKHẢO Amber GG and Kent Ail (2015), “Praxelis clematidea (Asteraceae): A New Plant Invader of Florida”, Southeastern Naturalist, 14(1), pp 21-27 318 Chuyên Đề Dược ... hôi Praxelis hay “Cỏ mèo” Hiện chưa có tài liệu mô tả cách chi tiết đặc điểm thực vật loài để phân biệt với loài Cỏ cứt lợn thuốc Bài báo so sánh đặc điểm hình thái vi học A conyzoides P clematidea. .. chứa hạt Vật liệu nghiên cứu mẫu tươi A conyzoides P clematidea thu hái số nơi (Bảng 1) Bảng 1: Địa điểm, thời gian thu mẫu A conyzoides P clematidea Loài Ageratum conyzoides Praxelis clematidea. .. (Bảng 3, hình 4, hình 6) Về bột dược liệu, phân biệt bột thân lồi Bột phân biệt qua mùi, A conyzoides có mùi hơi, P clematidea có mùi nước tiểu mèo Bột hoa phân biệt loài dựa bắc tổng bao mảnh