ĐÁNH GIÁ tác DỤNG của nấm HỒNG CHI đà lạt (GANODERMA LUCIDUM) TRONG điều TRỊ hội CHỨNG rối LOẠN LIPID máu

-1- ĐẶT VẤN ĐỀ Rối loạn lipid máu coi nguy quan trọng cho hình thành, phát triển bệnh xơ vữa động mạch (XVĐM) XVĐM gây nhiều biến chứng nghiêm trọng đe dọa đến tính mạng người như: nhồi máu tim, xuất huyết não [29], [48] Trên giới có 17 triệu người tử vong nguyên nhân tim mạch; dự báo tương lai (đến năm 2020) bệnh động mạch vành đột quỵ nguyên nhân gây tử vong tàn phế hàng đầu toàn giới tử vong tim mạch tăng lên 20 triệu người (trong có yếu tố ảnh hưởng đến tỉ lệ tử vong sớm như: tăng cholesterol tử vong 4,4 triệu, tăng huyết áp tử vong 7,1 triệu, hút thuốc tử vong 4,9 triệu người, ) [48] Ở Mỹ, hàng năm có khoảng triệu người chết bệnh lý tim mạch, XVĐM gây tử vong liên quan tới 42,6 % Ở Pháp, năm có khoảng 10.000 ca nhồi máu tim 50.000 ca tử vong liên quan đến XVĐM Ở Việt Nam, theo Phạm Khuê, Phạm Tử Dương (1986) tử vong XVĐM gây nên chủ yếu tai biến mạch máu não (85,1%) động mạch vành (14,86%) [14], [28] Hội chứng rối loạn lipid máu vấn đề thời nhà Y- Dược học giới nước quan tâm nghiên cứu Có nhiều loại thuốc tân dược dùng để điều trị hội chứng ngồi tác dụng điều trị có tác dụng phụ không mong muốn Ngay phát triển thuốc ức chế HMG-CoA reductase tiến lớn điều trị tăng cholesterol tăng lipoprotein máu - nhóm thuốc điều trị rối loạn lipid máu an toàn hiệu statin làm cho enzym gan tăng lên có tỉ lệ gây quái thai; hậu sau 20 đến 30 năm liên tục điều trị Statin chưa biết rõ; cụ thể như: sau sử dụng thuốc cerivastatin (Baycol) cơng ty Bayer có 31 người chết liên quan đến bệnh tiêu vân (thuốc khơng lưu hành thị trường nữa) [6], [23], [62], [122] Chính xu hướng chung -2- giới ngày nghiên cứu sử dụng thuốc có nguồn gốc tự nhiên đặc biệt dùng thảo mộc làm thuốc phòng chữa bệnh [33], [69] Ở Việt Nam, với truyền thống “Nam dược trị Nam nhân”, nhiều thuốc cổ phương, nghiệm phương, nhiều vị thuốc thảo mộc sử dụng rộng rãi nước để chữa chứng bệnh bài: Nhị trần thang, Bối mẫu qua lâu tán, Thanh khí hố đàm thang, Bán hạ bạch truật thiên ma thang, ”Giáng ẩm” viên ngưu tất, viên nghệ nén (choletan) [19], [20], [22] Nấm Linh chi (Ganoderma lucidum thuộc họ nấm gỗ Ganodermataceae) loại thuốc quí mọc nuôi trồng nhiều Lâm Đồng [40] Truyền thuyết xưa coi loại thuốc trường sinh bất lão tác dụng đa điều trị nhiều chứng bệnh Việc nghiên cứu sử dụng nấm Linh chi điều trị hội chứng rối loạn lipid máu Trung Quốc, Nhật Bản, Ấn Độ đánh giá có hiệu [41], [68], [96] Ở nước ta Bùi Chí Hiếu, Đào Văn Phan, Nguyễn Thị Mai Anh sơ nghiên cứu thực nghiệm cho thấy nấm Linh chi có tác dụng hạ lipid máu chuột [2], [21] Tại Đà Lạt Lâm Đồng nhà dược học sinh học tìm thấy nấm Linh chi mọc tự nhiên khu rừng, nhân dân nuôi trồng sử dụng rộng rãi, chưa nghiên cứu đầy đủ Trong phạm vi đề tài này, tiến hành nghiên cứu thuốc địa phương nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1 điều trị hội chứng rối loạn lipid máu với mục tiêu cụ thể sau: Xác định độc tính cấp (LD50) độc tính bán trường diễn nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1 Đánh giá tác dụng thuốc nghiên cứu mơ hình gây tăng cholesterol máu thực nghiệm Đánh giá tác dụng nấm Hồng chi Đà Lạt điều trị hội chứng rối loạn lipid máu thông qua số số lâm sàng cận lâm sàng -3- CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 LIPID MÁU, LIPOPROTEIN 1.1.1 Lipid máu: Lipid thành phần quan trọng màng tế bào Các lipid không tan nước nên để tuần hoàn huyết tương, chúng phải kết hợp với protein tạo thành phức hợp gọi lipoprotein (LP) [18] 1.1.2 Thành phần cấu trúc lipoprotein: Lipoprotein phân tử hình cầu gồm phần nhân phần vỏ [1], [18], [134], [141]: Apoprotein Phospholipid Cholesterol tự CE = Cholesterol este hóa TG = Triglycerid Hình 1.1: Cấu trúc lipoprotein (theo G Turpin, 1991) [134] - Phần nhân trung tâm, chứa triglycerid cholesterol este hố khơng phân cực [18], [141] - Phần lớp vỏ cấu tạo phân tử lipid phân cực gồm phospholipid, cholesterol tự apoprotein Phần vỏ đảm bảo tính tan LP huyết tương có tác dụng vận chuyển lipid không tan [18] 1.1.3 Phân loại lipoprotein: Bằng phương pháp siêu ly tâm lipoprotein huyết tương phân chia theo tỷ trọng Độ lắng loại LP siêu ly tâm tỷ lệ nghịch với trữ lượng lipid [1], [18], [141] Lipoprotein có dạng (bảng 1.1): -4- Bảng 1.1: Đặc điểm lipoprotein huyết tương [1], [18] Các LP Tỷ trọng g/ml Đường kính (nm) Tỉ lệ TG/ CT Nguồn gốc Chức Loại apo CM ≤ 0,960 500- 80 10: Ruột 0,96÷ 1,006 80- 30 5: Gan Vận chuyển TG ngoại sinh Vận chuyển TG nội sinh Tiền chất LDL-C Vận chuyển CT B48, E, A1, C B100, E, C Vận chuyển CT ngược A1, A2, E, C VLDL IDL- C 1,006- 1,019 LDL-C 1,006 ÷ 1,063 35- 25 NS 1,063÷ 1,210 12- NS HDL-C Sản phẩm chuyển hóa VLDL-C Sản phẩm chuyển hóa VLDL qua trung gian IDL Gan, ruột, sản phẩm chuyển hóa CM VLDL-C B100, E, C B 100 1.1.4 Các đường chuyển hóa lipoprotein: Chuyển hóa lipid máu gồm đường: ngoại sinh nội sinh [18], [85], [115] Hình 1.2: Các đường chuyển hố lipoprotein -5- 1.1.4.1 Chuyển hóa lipid máu ngoại sinh: Con đường liên quan đến lipid thức ăn, xảy sau bữa ăn có nhiều mỡ, đường vận chuyển triglycerid cholesterol thức ăn cung cấp đến mô khác thể [18], [115], [135], [141] Q trình tiêu hố lipid ruột tạo glycerol, acid béo, monoglycerid Sau hấp thu sản phẩm này, tế bào niêm mạc ruột tái tổng hợp triglycerid, đồng thời tổng hợp apoprotein để tạo chylomicron Chylomicron hấp thu qua màng đáy vào mạch bạch huyết, qua ống ngực vào hệ tuần hồn, theo dòng máu đến mơ khác [18], [115], [141] Trong máu tuần hồn, chylomicron có thời gian bán huỷ vài phút Quá trình lọc chylomicron khỏi máu tuần hoàn diễn qua nhiều giai đoạn: - Enzym LPL có bề mặt tế bào nội mô mao mạch mô mỡ, cơ, xương, tim, tuyến vú hoạt hoá apo CII thuỷ phân triglycerid, giải phóng acid béo tự cho tổ chức Acid béo sử dụng để sinh lượng lại este hoá thành triglycerid dự trữ [18], [115], [141] - Chylomicron bị rút dần triglycerid tạo thành chylomicron tàn dư Thành phần bề mặt chylomicron tàn dư có chứa cholesterol, phospholipid; apo A apo CII chuyển giao cho HDL-C đồng thời chylomicron tàn dư nhận cholesterol este từ HDL-C vận chuyển gan [18], [115], [141] - Tại gan, apoE chylomicron tàn dư gắn vào receptor E tế bào gan phân tử tàn dư vận chuyển vào tế bào đến tiêu thụ lysosom Một phần cholesterol sử dụng để tổng hợp acid mật, phần với triglycerid tạo thành VLDL [18], [115], [141] -6- 1.1.4.2 Chuyển hóa lipid máu nội sinh: Con đường liên quan đến lipid chủ yếu có nguồn gốc từ gan, đường vận chuyển triglycerid cholesterol từ gan đến mô khác thể ngược lại [18], [115], [141] VLDL-C giàu triglycerid tạo thành gan (90%) phần từ ruột (10%) chuyển đến mô ngoại vi Tại đây, VLDL-C có số phận giống CM, phần lớn triglycerid thuỷ phân enzym LPL giải phóng acid béo cho tổ chức Thành phần bề mặt lại VLDL-C có chứa cholesterol tự do, phospholipid, apo C phần apo E chuyển giao cho HDL-C, VLDL-C trở nên nhỏ tạo thành IDL-C Bên cạnh đó, cholesterol tự chuyển giao cho HDL-C este hoá đưa ngược trở lại IDL cách trao đổi với triglycerid IDL-C [18], [115], [141] IDL-C trở lại gan, phần nhỏ gắn vào receptor đặc hiệu LDL-C (receptor B E) tế bào gan, sau hấp thu vào tế bào tiêu thụ lysosom Trong đó, phần lớn IDL-C bị lấy triglycerid tác dụng lipase gan HTGL chuyển thành LDL-C LDL-C với thành phần chủ yếu cholesterol este apo B100, giữ vai trò vận chuyển cholesterol đến mô ngoại vi Tại đây, apo B100 nhận diện receptor B đặc hiệu màng tế bào gắn vào tế bào Tiếp theo đó, LDL-C đưa vào tế bào tượng thực bào bị thối hố lòng lysosom, giải phóng cholesterol tự Cholesterol tự tế bào có vai trò điều hồ số lượng repceptor LDL theo chế feedback âm, gây ức chế enzym HMG-CoA reductase ngăn cản trình tổng hợp cholesterol mơ ngoại vi, đồng thời kích thích enzym ACAT gây este hố thân Khi receptor LDL màng tế bào bị thiếu hụt số lượng bị biến đổi chất lượng, nồng độ LDL-C máu tăng cao bị biến đổi bị oxy hố glycosyl hố Khi đại thực bào bắt giữ LDL-C biến đổi thông qua receptor đặc hiệu Sự lấy LDL-C thành động mạch đại thực bào đóng vai trò quan trọng chế bệnh sinh xơ vữa động mạch Khi đại thực -7- bào chứa đầy cholesterol este, chúng trở thành "tế bào bọt" (foam cell) - thành phần mảng xơ vữa [18], [115], [141] HDL-C tổng hợp ban đầu gan phần nhỏ ruột dạng phân tử tiền chất, HDL-C có hai vai trò quan trọng: nguồn cung cấp apoprotein cho CM, VLDL-C tham gia vận chuyển cholesterol "trở về" gan (cholesterol revert) [18], [115], [141] Bình thường trình tổng hợp thối hóa lipoprotein cân nhau, có bất thường q trình tổng hợp thối hóa gây nên rối loạn lipid máu 1.2 RỐI LOẠN LIPID MÁU: 1.2.1 Tăng lipid máu tiên phát thứ phát: Tăng lipid máu chia làm hai loại tăng lipid máu tiên phát tăng lipid máu thứ phát Tăng lipid máu tiên phát thường gặp tăng lipid máu thứ phát [11], [18], [115], [141] 1.2.1.1 Rối loạn lipid máu thứ phát: Bảng 1.2: Rối loạn lipid máu thứ phát [11], [18] Bệnh lý Đái tháo đường Hội chứng thận hư Tăng urê máu Suy thận mạn Bệnh gan tắc nghẽn Tắc mật Suy giáp trạng Béo phì Chứng ăn vơ độ Nghiện thuốc Nghiện rượu Dùng thuốc tránh thai Thuốc ức chế bêta-giao cảm Isotretinion (13cisnicotinic acid) Rối loạn lipid huyết TG↑ CT ↑, TG↑ TG↑ TG↑ CT↑ CT↑ CT↑, TG↑ TG↑ TG↑ TG↑ CT ↑ TG↑ CT ↑ TG↑ TG↑ TG↑ Rối loạn lipoprotein huyết CM ↑, VLDL ↑, HDL-C ↓ LDL↑, VLDL-C↑ VLDL-C↑, HDL-C↓ LDL-C↑ BT, VLDL-C↑ LpX↑ LDL-C↑, VLDL-C↑ CM ↑, VLDL-C ↑ CM ↑, VLDL-C ↑ ↑ VLDL-C, ↓HDL-C ↑ VLDL-C, ↓HDL-C ↑ VLDL-C, ↑ chylomicron, ↓ HDL-C -8- Những yếu tố ảnh hưởng đến mức lipid gồm: béo phì; cách sống ảnh hưởng như: chế độ ăn (ăn nhiều mỡ động vật, ăn nhiều thức ăn có chứa nhiều cholesterol phủ tạng động vật, mỡ động vật, trứng, bơ, sữa toàn phần , lười vận động thể lực, hút thuốc, uống nhiều rượu; rối loạn nội tiết như: đái tháo đường, suy giáp; bệnh gan thận Những nguyên nhân quan trọng khác làm tăng lipid máu sử dụng thuốc kéo dài như: lợi tiểu, chẹn beta, glucocorticoid, gốc acid retinoic, [1], [65] 1.2.1.2 Tăng lipid máu tiên phát: Tăng lipid máu tiên phát có dấu hiệu triệu chứng lâm sàng ứ đọng lipid vị trí khác thể [1], [18] Bảng 1.3: Tăng lipid máu tiên phát [1] CT TG LDL-C (mg/ dl) (mg/ dl) (mg/dl) Tăng CT gia đình > 300 < 200 > 185 Rối loạn LP 300-800 300-800 ≤ 130 Thường Thường > 260 > 200 Tăng L máu hỗn hợp gia đình Hội chứng tăng CM < 260 Tăng TG gia đình Thường Tăng LP máu Tăng CT nhiều yếu tố > 260 > 260 Thay đổi thường > 260 Thường > 260 < 185 VLDL-C (mg/dl) IIa IIb III < 35 Thường VLDL ++ < 40 Thường Thường IIb,IIa ≥ 35 ≥ 35 IV < 40 IV V < 60 2001000 80-185 ≥ 35 Thay đổi Thay đổi > 185 Tần số Thay đổi < 140 Thay đổi (mg/dl) > 60 Thường Nguy Typ rối loạn LP < 35 ≥ 10.000 > 155 thường HDL-C ĐMV Viêm tụy 1/ 500 +++ + 1/ 5000 +++ 1/ 300 ++ 1/100.000(I) 1/ 5000 (V) < 40 IV V 1/ 300 Thay đổi > 90 Hypo LP > 1/1000 Thay đổi Thay đổi IIa IIb 20- 25 100 + + +++ -9- 1.2.2 Các rối loạn lipid máu khác: Tăng alpha-lipoprotein huyết tương (có thể tắc nghẽn q trình thối hóa HDL-C, gây tăng HDL-C huyết tương); giảm lipid huyết nguyên phát: hạ alphalipoprotein máu (FHA) gia đình, khơng có bêtalipoprotein huyết; giảm lipid huyết thứ phát [18], [141] 1.2.3 Rối loạn lipid máu theo phân loại Fredrickson: Năm 1965 Fredrickson vào kỹ thuật điện di siêu ly tâm thành phần lipoprotein xếp hội chứng rối loạn lipid máu thành typ týp II chia thành kiểu IIa IIb Từ năm 1970 cách phân loại trở thành phân loại quốc tế [11], [107], [139] Bảng 1.4: Phân loại rối loạn lipid lipoprotein máu theo Fredrickson [11], [139] Kiểu I IIa IIb III Rối loạn LP CM↑ LDL-C↑↑ VLDL-C↑, LDL-C↑↑ βVLDL IDL-C↑ Độ huyết tương Crem Trong Rất Thường gặp Mức độ nguy hiểm với XVĐM ± ++++ CT↑↑↑, TG↑↑ Đục Thường gặp ++++ CT↑, TG↑↑ Đục Ít gặp +++ Đục sữa Thường gặp +++ Đục sữa Hiếm gặp ++ Rối loạn lipid huyết TG↑ CT↑↑ IV VLDL-C↑ CT↑hoặc TG↑↑ V CM↑ VLDL-C↑ CT↑, TG↑↑↑ BT, Tần số xuất * Týp I: Tăng chylomicron máu * Týp II: Tăng lipoprotein beta máu, týp phân làm týp nhỏ là: IIa IIb -10- - Týp IIa: Tăng cholesterol máu nguyên phát (chỉ tăng cholesterol LDL), gồm có thể: thể đa gen thể đơn gen Thể đa gen: khuyết tật thụ thể LDL; có hình thái đồng hợp tử dị hợp tử Nguyên nhân bệnh đột biến gen mã hóa thụ thể LDL nằm nhiễm sắc thể số 19 [49], [144] Thể đơn gen: Tăng cholesterol máu đơn gen gồm tăng cholesterol máu thể gia đình di truyền trội nhiễm sắc thể thường, tăng cholesterol máu thể gia đình di truyền lặn [49], [141] - Tăng cholesterol máu týp IIb (Tăng lipid máu hỗn hợp gia đình): Tăng lipid máu hỗn hợp (cholesterol LDL-C tăng cao, triglycerid VLDL-C tăng ) [49] Thể thường kèm theo rối loạn chuyển hóa glucid, tăng acid uric máu, tăng huyết áp Đây di sản kép thể rối loạn lipid máu týp IIa týp IV, người bệnh có cha mẹ bị bệnh tăng cholesterol đơn týp IIa tăng triglycerid đơn Di truyền học tăng lipid máu hỗn hợp gia đình gần cho thấy đột biến đồng hợp tử (Q148X Q139X) gen apolipoprotein AV [49], [75], [141] - Tăng cholesterol máu týp III: Rối loạn lipoprotein máu (tăng IDL-C) Thể bệnh lý gặp (1/10.000 người); cholesterol toàn phần tăng, triglycerid máu tăng tăng IDL-C điểm đặc trưng cho týp III, bệnh thường phát sau tuổi 20, thể trẻ em nặng [49], [141] - Tăng triglycerid máu týp IV: thường khơng có triệu chứng lâm sàng, phát điều tra di truyền; nhạy cảm với rượu, loại glucid, chất béo tình trạng béo phì; mức tăng cholesterol thấp rõ rệt so với mức tăng triglycerid máu, IDL-C thấp tương ứng với mức tăng triglycerid máu Tăng triglycerid máu nội sinh týp IV có đặc tính sinh vữa xơ yếu Điều giải thích rằng, có phối hợp triglycerid máu tăng cao với HDL-C thấp (hướng sinh vữa xơ) LDL-C thấp (hướng bảo vệ chống vữa xơ) [49], [141] -118- - Tuy có khác biệt kết điều trị hai liều nấm Hồng chi; nhóm dùng Hồng chi Lipanthyl, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) So sánh với thuốc thang “Giáng ẩm” Nguyễn Nhược Kim Phan Việt Hà viên nang nấm Hồng chi Đà Lạt có hiệu tốt (bài thuốc thang “Giáng ẩm” Phan Việt Hà có kết tốt 31,25%, 40%, không hiệu 21,9% xấu 6,25%) [18] 4.3.7 Tác dụng không mong muốn thuốc: Mọi loại thuốc vào thể chuyển hố qua gan thận Chính để đánh giá tác dụng khơng mong muốn thuốc tiến hành làm xét nghiệm ALT, AST, ure, creatinin Gan: quan quan trọng, đảm nhận nhiều chức như: Chuyển hoá, tiết, khử độc Các thương tổn gan dẫn đến phân giải hoại tử tế bào gan làm giải phóng enzym Do vậy, đo hoạt độ enzym huyết tương sử dụng để đánh giá tổn hại tế bào gan để chẩn đoán phân biệt bệnh tế bào gan với bệnh tắc mật Các enzym phổ biến thường định lượng tổn thương tế bào gan như: Alanin transaminase (ALT), Aspartat transaminase (AST), Alkalin phosphatase (ALP), Ngồi có xét nghiệm tổng hợp, đào thải gan khảo sát như: albumin huyết thanh, bilirubin huyết Amino trasaferase: AST, ALT enzym sử dụng rộng rãi để đánh giá tổn thương tế bào gan Khi tế bào gan bị tổn thưong enzym tăng lên đáng kể; Vì vậy, xét nghiệm thường dùng thực tế để khảo sát tổn thương tế bào gan - Bảng 3.50, 3.51, 3.52 3.53 cho thấy: -119- + Sau 40 ngày uống viên nang nấm Hồng chi Đà Lạt có xu hướng giảm ure, creatinin ALT, AST (p > 0,05) Điều chứng tỏ nấm Hồng chi Đà Lạt không gây độc với gan thận + Nhóm dùng Lipanthyl sau 40 ngày có xu hướng làm tăng ure, creatinin, AST, ALT ( p > 0,05) Điều chứng tỏ Lipanthyl có ảnh hưởng đến chức gan, thận sau 40 ngày dùng thuốc Như vậy: Kết nghiên cứu chúng tơi cho thấy 100% bệnh nhân sau 40 ngày dùng viên nang nấm Hồng chi Đà Lạt không ảnh hưởng đến chức gan, thận, số bệnh nhân nhóm dùng viên Lipanthyl lại có ảnh hưởng đến chức gan thận 4.3.8 Chọn liều nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1: Trong sách “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam” dẫn liều thuốc Linh chi Việt Nam sử dụng lâm sàng, cụ thể: thuốc sắc dùng từ 3-10g/24 giờ; thuốc bột dùng từ 2-5g/24 [4] Nhưng với nhiều loại linh chi khác với chủng khác vậy, việc sử dụng liều cho nấm Hồng chi Đà Lạt chủng DL1 phương Lâm Đồng liệu có phải liều có hiệu điều trị rối loạn lipid máu chưa? vấn đề đặt nghiên cứu - Qua q trình: thử độc tính cấp, độc tính bán trường diễn, đánh giá ảnh hưởng thuốc nghiên cứu mơ hình gây tăng lipid máu chuột cống trắng; thực tế dân gian tự sử dụng với liều cao nhiều so với liều sách đưa (liều dân gian tự sử dụng: thuốc sắc 20-40g/24giờ; thuốc bột 10-20g/24 giờ); với nhiều lần thăm dò -120- thí nghiệm, lâm sàng chọn liều sử dụng điều trị 4g/24giờ 15g/24 (viên nang 1g/viên) Qua kết nghiên cứu 65 bệnh nhân rối loạn lipid máu (nhóm 1a 1b) xác định khoảng liều có tác dụng điều trị rối loạn lipid máu nấm Hồng chi Đà Lạt chủng DL1 từ 4g-12g/24 - Phạm vi sử dụng khoảng liều nấm Hồng chi Đà Lạt chủng DL1 nằm khoảng an toàn rộng tiến hành thử độc tính bán trường diễn thuốc nghiên cứu Nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu Trung Quốc đưa ra: liều nấm Linh chi Trung Quốc (Ganoderma lucidum) từ 3g - 15g [96] 4.3.9 Tính kinh tế ý nghĩa thực tiễn thuốc nghiên cứu: Kết nghiên cứu nhà khoa học nhiều nước giới dần làm sáng tỏ công dụng NLC Hàng trăm cơng trình nghiên cứu tiến hành (in vitro, in vivo, lâm sàng) cho thấy NLC dược liệu đa công dụng [9], [40], [96], [109] Nấm Linh chi coi biểu tượng hạnh phúc, tương lai tốt đẹp, sức khoẻ Nguồn tài nguyên nấm nhiên nhiên xếp vào nhóm "lâm sản gỗ"- phong phú đa dạng, đóng vai trò quan trọng bảo vệ sức khoẻ cộng đồng Theo thống kê Tổ chức lương thực giới (FAO) có 2.327 lồi nấm có ích phát thiên nhiên Trong có 2.166 loài nấm thực phẩm 470 loài nấm thuốc Các lồi nấm thu hái bn bán 80 nước giới Tổng sản lượng nấm hoang dại thu hái hàng năm giới ước khoảng vài triệu với -121- tổng giá trị tỷ USD [3], [78], [84] Những nguồn lợi lồi nấm là: Nguồn dinh dưỡng giá trị có ích cho sức khoẻ người, nguồn thu nhập quan trọng cộng đồng kinh tế quốc dân, giúp cho phát triển bền vững rừng rừng có giá trị nông dân nước phát triển [3], [9], [10], [76] Hiện nay, NLC sản xuất nhiều dạng sản phẩm khác nhau: loại trà (trà nhúng, trà tan, trà phối hợp với dược liệu khác); loại thực phẩm chức với lợi ích bảo vệ sức khoẻ phòng bệnh Đối tượng sử dụng sản phẩm từ NLC không bệnh nhân mà người bình thường thuộc nhiều lứa tuổi khác Vì sản xuất kinh doanh sản phẩm từ nấm, có NLC đem lại nguồn lợi nhuận cho nhiều công ty Tổng giá trị sản phẩm từ NLC năm 1995 215 triệu USD Đài Loan; 350 triệu USD Trung Quốc; 600 triệu USD Hàn Quốc Rõ ràng không ý đến số liệu thống kê Chắc chắn NLC phải có ích cho sức khoẻ người dân tin dùng Ở Việt Nam nói chung địa phương Lâm Đồng nói riêng: NLC sử dụng phổ biến, từ trồng NLC giá thể nhân tạo, phát triển nhiều sở sản xuất địa phương tổ chức khoa học, kinh tế nước nước tài trợ Hàng loạt sản phẩm từ NLC sản xuất bán rộng rãi nhà thuốc, cửa hàng dược liệu, siêu thị Một số thuốc từ NLC Việt nam thử nghiệm lĩnh vực: hóa dược, dược lí, labo miễn dịch, lâm sàng… [9], [40], [96], [109] xác định thành phần hóa học số -122- lồi NLC hiệu chúng tăng cường miễn dịch, điều trị hỗ trợ bệnh ung thư, chống lão hóa, bảo vệ gan, hạ mỡ máu… Các nghiên cứu nhiều nhà Y- Dược học nước giới tiếp tục quan tâm nghiên cứu Tại địa phưong Đà Lạt Lâm Đồng: nấm Linh chi (ganoderma lucidum loại thuốc quí mọc tự nhiên nuôi trồng nhiều, đặc biệt nấm Hồng chi chủng DL1 nuôi trồng sử dụng nhiều nhân dân địa phương; giá thành rẻ từ 200.000 – 300.000 đồng/kg (trong nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) Trung Quốc, Nhật Bản bán thị trường Việt Nam giá thành tới 1000.000-1.500.000 đồng/kg) Vì qua nghiên cứu này, chúng tơi khẳng định dược liệu q địa phương có tác dụng chữa bệnh -123- KẾT LUẬN Nghiên cứu xác định thành phần hóa học cúa nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1 có nhóm chất: Saponin, Sterol, Flavonoid, Acid amin, Polysaccharid, Alcaloid Từ kết nghiên cứu rút số kết luận sau: Độc tính cấp, độc tính bán trường diễn nấm Hồng chi Đà Lạt: - Nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) với liều tối đa chịu đựng 402g/kg thân trọng chuột (gấp 100 lần liều lâm sàng cho người) khơng thấy độc tính cấp, nên khơng xác định LD50 - Nghiên cứu độc tính bán trường diễn thỏ cho thấy: nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) với liều 2g/kg/24 10g/kg/24 (tương đương với liều cho người gấp lần liều thường dùng cho người) khơng gây thay đổi tình trạng chung, chức phận sinh hóa gan, thận chức phận tạo máu Tác dụng nấm Hồng chi Đà lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1 mơ hình tăng cholesterol máu thực nghiệm - Nấm Hồng chi Đà Lạt với liều 4g/kg/24 12g/kg/24 có tác dụng hạn chế rõ rệt rối loạn số lipid máu so với lô gây tăng lipid máu (p4-2 < 0,05 – 0,01) - Tác dụng hạ lipid máu chuột cống trắng hai liều tương đương tương đương với cholestyramin 1,6g/kg/24 (p> 0,05) -124- Tác dụng nấm Hồng chi Đà Lạt điều trị hội chứng rối loạn lipid máu: - Nấm Hồng chi Đà Lạt với liều 4g/24 15g/24 có tác dụng hạn chế rõ rệt rối loạn số lipid máu so với lô gây tăng lipid máu (pT-S < 0,05) - Viên nang nấm Hồng chi Đà Lạt có xu hướng làm giảm enzym gan thận, không gây độc với gan, thận (p > 0,05); Lipanthyl lại có xu hướng làm tăng enzym ALT, AST, ure, creatinin máu sau 40 ngày điều trị (p> 0,05) KIẾN NGHỊ VÀ ĐỀ XUẤT Kết trình bày luận án nghiên cứu bước đầu tác dụng chữa bệnh nấm Hồng chi Đà Lạt Để khẳng định thương hiệu nấm Hồng chi Đà Lạt nước nước ngồi cần phải có nghiên cứu Vì vậy, chúng tơi đưa số đề xuất, kiến nghị cụ thể sau: - Đề tài cần tiếp tục nghiên cứu khẳng định: thành phần hóa học phương pháp định lượng; chế tác dụng giảm lipid máu nấm Hồng chi đà Lạt; mở rộng phạm vi áp dụng lâm sàng với cỡ mẫu lớn - Đề nghị với lãnh đạo Tỉnh uỷ, Uỷ ban nhân dân Tỉnh Lâm Đồng: Cần có qui hoạch, kế hoạch phát triển việc ni trồng nấm Hồng chi Đà Lạt trở thành nghề để tạo thêm cơng ăn việc làm cho nhân dân góp phần vào an sinh xã hội nói chung góp phần vào việc xố đói giảm nghèo, ổn định an ninh trị địa phương Lâm Đồng nói riêng MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ TỔNG QUAN 1.1 LIPID MÁU, LIPOPROTEIN 1.1.2 Thành phần cấu trúc lipoprotein: .3 1.1.3 Phân loại lipoprotein: .3 1.1.4 Các đường chuyển hóa lipoprotein: 1.2 RỐI LOẠN LIPID MÁU: 1.2.1 Tăng lipid máu tiên phát thứ phát: 1.2.2 Các rối loạn lipid máu khác: 1.2.3 Rối loạn lipid máu theo phân loại Fredrickson: 1.2.4 Rối loạn lipid máu (RLLPM) bệnh tim mạch: 11 1.2.5 Điều trị hội chứng rối loạn lipid máu: 13 1.3 QUAN NIỆM CỦA Y HỌC CỔ TRUYỀN VỀ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN LIPID MÁU 24 1.3.1 Sự chuyển hóa tân dịch thể: 25 1.3.2 Nguyên nhân chế bệnh sinh chứng đàm : 25 1.3.3 Các bệnh đàm phương pháp điều trị: 27 1.3.4 Các nghiên cứu nước nước thuốc, vị thuốc có tác dụng điều trị rối loạn lipid máu: 29 1.4 TỔNG QUAN VỀ NẤM LINH CHI 30 1.4.1 Sơ nấm Linh chi 30 1.4.2 Thành phần hóa học nấm Linh chi: .32 1.4.3 Một số nghiên cứu Y học nấm Linh chi nước nước: .33 1.4.4 Tổng quan nấm Linh chi Đà Lạt: .34 CHƯƠNG 36 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .36 2.1 CHẤT LIỆU NGHIÊN CỨU 36 2.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 37 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu phòng thí nghiệm: 37 2.2.2 Đối tượng nghiên cứu lâm sàng: 38 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .41 2.3.1 Đối với nghiên phòng thí nghiệm: 41 2.3.2 Nghiên cứu lâm sàng: 46 2.4 TIÊU CHUẨN ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ .50 2.4.1 Đánh giá cận lâm sàng: 50 2.4.2 Đánh giá lâm sàng theo Y học cổ truyền: .51 2.5 XỬ LÝ SỐ LIỆU 52 2.6 VẤN ĐỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU 52 CHƯƠNG 53 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 53 3.1 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ THỬ ĐỘC TÍNH CẤP (LD50), ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA NẤM HỒNG CHI ĐÀ LẠT (Ganoderma lucidum) CHỦNG DL1 53 3.1.1 Nghiên cứu thành phần hoá học: 53 3.1.2 Kết nghiên cứu độc tính cấp chuột nhắt trắng 54 3.1.3 Kết nghiên cứu độc tính bán cấp 54 3.2 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ LIPID MÁU CỦA THUỐC NGHIÊN CỨU TRÊN MÔ HÌNH TĂNG LIPID MÁU THỰC NGHIỆM: 68 3.2.1 Nghiên cứu ổn định mơ hình gây tăng lipid máu chuột cống trắng: 68 3.2.2 Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng lipid huyết chuột cống trắng: 68 3.3 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA NẤM HỒNG CHI ĐÀ LẠT TRONG ĐIỀU TRỊ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN LIPID MÁU THÔNG QUA MỘT SỐ CHỈ SỐ LÂM SÀNG VÀ CẬN LÂM SÀNG: .72 3.3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu: 72 3.3.2 Đánh giá tác dụng nấm Hồng chi Đà Lạt điều trị hội chứng rối loạn lipid máu thông qua số số lâm sàng: 77 3.3.3 Kết điều trị tiêu cận lâm sàng: 83 3.3.4 Đánh giá kết điều trị theo tiêu chuẩn đưa ra: 91 3.3.5 Đánh giá tác dụng không mong muốn thuốc:.92 CHƯƠNG 95 BÀN LUẬN 95 4.1 ĐỘC TÍNH CẤP (LD50) VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA NẤM HỒNG CHI ĐÀ LẠT Ganoderma lucidum) CHỦNG DL1: 95 4.1.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp (LD 50) nấm Hồng chi Đà Lạt: 96 4.1.2 Kết nghiên cứu độc tính bán cấp: 96 4.2 TÁC DỤNG CỦA NẤM HỒNG CHI ĐÀ LẠT (Ganoderma lucidum) CHỦNG DL1 TRÊN MƠ HÌNH TĂNG CHOLESTEROL MÁU THỰC NGHIỆM 99 4.2.1 Nghiên cứu ổn định mơ hình gây tăng lipid máu chuột cống trắng: 99 4.2.2 Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng cholesterol huyết chuột cống trắng: 101 4.3 TÁC DỤNG CỦA NẤM HỒNG CHI ĐÀ LẠT TRONG ĐIỀU TRỊ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN LIPID MÁU THÔNG QUA MỘT SỐ CHỈ SỐ LÂM SÀNG VÀ CẬN LÂM SÀNG 103 4.3.1 Mối tương quan yếu tố tuổi, giới, chiều cao, cân nặng, số khối thể, thói quen sinh hoạt với số lipid bệnh nhân nghiên cứu: 103 4.3.2 Sự liên quan biến lipid huyết áp nhóm nghiên cứu: 104 4.3.3 Sự thay đổi triệu chứng theo tứ chẩn sau điều trị nhóm: 106 4.3.4 Tác dụng hạ lipid máu nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1: .108 4.3.5 Chọn thuốc nhóm đối chứng: 116 4.3.6 Kết điều trị theo tiêu chuẩn đưa ra: .117 4.3.7 Tác dụng không mong muốn thuốc: 118 4.3.8 Chọn liều nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1: 119 4.3.9 Tính kinh tế ý nghĩa thực tiễn thuốc nghiên cứu: 120 KẾT LUẬN 123 KIẾN NGHỊ VÀ ĐỀ XUẤT .124 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Đặc điểm lipoprotein huyết tương [1], [18] .4 Bảng 1.2: Rối loạn lipid máu thứ phát [11], [18] Bảng 1.3: Tăng lipid máu tiên phát [1] Bảng 1.4: Phân loại rối loạn lipid lipoprotein máu theo Fredrickson [11], [139] .9 Bảng 1.5: Phân loại nồng độ cholesterol máu [47], [115] 13 Bảng 1.6: Khuyến cáo ATP III-NCEP Hoa Kỳ năm 2004 (sửa đổi) mức LDL-C cần đạt [15], [16] .14 Bảng 1.7: Các khuyến cáo hội tim mạch Việt Nam 2006 mục tiêu LDL-C [15], [16] 15 Bảng 1.8 : Các yếu tố nguy bệnh mạch vành [15], [16], [47] 16 Bảng 1.9: Hiệu điều chỉnh rối loạn lipid máu số nhóm thuốc [91], [115], [136] 23 Bảng 1.10: Thành phần hoá học nấm Linh chi [9], [40]: 32 Bảng 3.1: Kết định tính nhóm chất nấm Hồng chi Đà Lạt 53 Bảng 3.2: Diến biến trọng lượng thỏ 30 ngày uống thuốc .54 Bảng 3.3: Diễn biến số lượng hồng cầu thỏ 30 ngày uống thuốc 55 Bảng 3.4: Diễn biến thể tích trung bình hồng cầu thỏ 55 Bảng 3.5: Diễn biến hàm lượng hemoglobin thỏ 55 Bảng 3.6: Diễn biến số lượng bạch cầu thỏ 30 ngày uống thuốc 56 Bảng 3.7 : Diễn biến công thức bạch cầu thỏ 56 Bảng 3.8 : Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến hematocrit thỏ 57 Bảng 3.9: Diễn biến số lượng tiểu cầu thỏ 30 ngày uống thuốc 58 Bảng 3.10 : Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến hoạt độ AST thỏ 58 Bảng 3.11: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến hoạt độ ALT thỏ 59 Bảng 3.12: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến albumin máu thỏ 59 Bảng 3.13: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến bilirubin toàn phần.60 Bảng 3.14: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến nồng độ ure huyết 60 Bảng 3.15: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến creatinin huyết 61 Bảng 3.16: Ảnh hưởng cholesterol qua số lipid máu chuột 68 Bảng 3.17: Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng cholesterol 68 Bảng 3.18: Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng triglycerid 69 Bảng 3.19: Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng LDL-C 70 Bảng 3.20: Ảnh hưởng nấm Hồng chi hàm lượng HDLC .71 Bảng 3.21: Chỉ số nhân trắc huyết áp trước lúc điều trị 72 Bảng 3.22: Phân bố bệnh nhân theo tuổi, giới: 73 Bảng 3.23: Nghề nghiệp bệnh nhân 73 Bảng 3.24: Một số thói quen sinh hoạt bệnh nhân 74 Bảng 3.25: Đặc điểm thành phần lipid máu 75 Bảng 3.26: Phân loại lipid máu 75 Bảng 3.27: Đặc điểm thành phần lipid máu 76 Bảng 3.28 : Đặc điểm mối liên quan biến lipid huyết áp 76 Bảng 3.29: Sự thay đổi triệu chứng theo Vọng chẩn trước sau điều trị .77 Bảng 3.30: Sự thay đổi triệu chứng theo Văn chẩn trước sau điều trị 78 Bảng 3.31: Sự thay đổi triệu chứng theo Vấn chẩn trước sau điều trị 79 Bảng 3.32: Sự thay đổi triệu chứng theo Thiết chẩn trước sau điều trị .80 Bảng 3.33: Đặc điểm thể bệnh theo YHCT .80 Bảng 3.34: Sự thay đổi số nhân trắc nhóm 81 Bảng 3.35: Sự thay đổi số nhân trắc nhóm 81 Bảng 3.36: Thay đổi HA bệnh nhân có tăng HA nhóm 82 Bảng 3.37: Thay đổi HA bệnh nhân có tăng HA nhóm 82 Bảng 3.38: Thay đổi HA bệnh nhân có HA bình thường nhóm 83 Bảng 3.39: Thay đổi HA bệnh nhân có HA bình thường nhóm 83 Bảng 3.40: Tác dụng nấm Hồng chi cholesterol 84 Bảng 3.41: Tác dụng nấm Hồng chi triglycerid 84 Bảng 3.42: Tác dụng nấm Hồng chi HDL-C 85 Bảng 3.43: Tác dụng nấm Hồng chi LDL-C 86 Bảng 3.44: Tác dụng nấm Hồng chi số CT/HDL-C 87 Bảng 3.45 : Tác dụng nấm Hồng chi số LDL-C/HDL-C bệnh nhân rối loạn lipid máu 88 Bảng 3.46: Diễn biến số lượng hồng cầu 89 Bảng 3.47: Diễn biến hàm lượng hemoglobin 89 Bảng 3.48: Diễn biến số lượng bạch cầu 90 Bảng 3.49: Diễn biến số lượng tiểu cầu 90 Bảng 3.50: Đánh giá kết điều trị theo tiêu chuẩn YHHĐ 91 p 91 Bảng 3.51: Đánh giá kết điều trị theo tiêu chuẩn YHCT 91 p 92 Bảng 3.52: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến hoạt độ AST 92 Bảng 3.53: Ảnh hưởng nấm Hồng chi đến hoạt độ ALT 93 Bảng 3.54: Ảnh hưởng nấm Hồng chi nồng độ ure huyết 93 Bảng 3.55: Ảnh hưởng nấm Hồng chi creatinin huyết 93 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1: Phân bố bệnh nhân theo giới 73 Biểu đồ 3.2: Đặc điểm số BMI trước lúc điều trị 74 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1: Phân loại thuốc điều trị rối loạn lipid máu .18 Sơ đồ 1.2: Cơ chế bệnh sinh hội chứng rối loạn lipid máu theo quan niệm YHCT 27 Sơ đồ 2.1: Sơ đồ bào chế .36 Sơ đồ 2.2: Mơ hình nghiên cứu tính an tồn nấm Hồng chi Đà Lạt 44 Sơ đồ 2.3: Đánh giá tác dụng nấm Hồng chi mơ hình tăng cholesterol máu chuột cống trắng 46 Sơ đồ 2.4: Quá trình nghiên cứu lâm sàng 49 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1: Cấu trúc lipoprotein (theo G Turpin, 1991) [134] Hình 1.2: Các đường chuyển hố lipoprotein Hình 1.3: Sự hình thành mảng xơ vữa động mạch 12 Hình 3.1: Tế bào gan bình thường (He x 250) 62 Hình 3.2: Tế bào gan khơng có tổn thương (He x 100) 62 Hình 3.3: Xung huyết nhẹ gan (ở vài thỏ) (He x 100) 63 Hình 3.4: Một phần nang dịch (ở vài thỏ) (He x 100) 63 Hình 3.5: Thận bình thường (He x 250) 64 Hình 3.6: Xung huyết cầu thận mô kẽ (He x 250) 64 Hình 3.7: Thối hố teo xung huyết (ở vài thỏ) (He x 250) 65 Hình 3.8: Tế bào gan tái tạo để thay (He x 400) 66 Hình 3.9 Tế bào gan giàu glycogen (He x 250) 66 Hình 3.10: Thận bình thường (He x 100) 67 Hình 3.11: Thận bình thường (He x 100) 67 ... diễn nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum) chủng DL1 Đánh giá tác dụng thuốc nghiên cứu mơ hình gây tăng cholesterol máu thực nghiệm Đánh giá tác dụng nấm Hồng chi Đà Lạt điều trị hội chứng rối. .. gây nên rối loạn lipid máu 1.2 RỐI LOẠN LIPID MÁU: 1.2.1 Tăng lipid máu tiên phát thứ phát: Tăng lipid máu chia làm hai loại tăng lipid máu tiên phát tăng lipid máu thứ phát Tăng lipid máu tiên... có tác dụng điều trị rối loạn lipid máu: 1.3.4.1 Các nghiên cứu nước ngồi: Có nhiều thuốc vị thuốc Trung Quốc nghiên cứu có tác dụng điều trị rối loạn lipid máu điển : * Bài Quế tinh phương (điều