BƯỚC đấu NGHIÊN cứu GIÁ TRỊ của kỹ THUẬT SÀNG lọc KHỒNG xâm lấn TRONG CHẨN đoán TRƯỚC SINH một số bất THƯỜNG NHIỄM sắc THỂ TẠIBỆNH VIỆN PHỤ sản hà nội năm 2016

1 SỞ Y TẾ HÀ NỘI BỆNH VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ TÊN ĐỀ TÀI: BƯỚC ĐẤU NGHIÊN CỨU GIÁ TRỊ CỦA KỸ THUẬT SÀNG LỌC KHỒNG XÂM LẤN TRONG CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH MỘT SỐ BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ TẠI BỆNH VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI NĂM 2016 - 2017 Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS Nguyễn Duy Ánh Nhóm nghiên cứu: Ths.Bs Hoàng Hải Yến Bs Đinh Thúy Linh Ths.Bs Nguyễn Hồng Phượng Ths.CNSH Nguyễn Thị Vân Anh NĂM 2018 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AF Amniotic fluid AFP Alfa feto-protein BoBs BACs-on-Beads BP Base pair cffDNA Cell free fetal DNA CMA Chromosomal microarray-based analysis CV Chrionic villus DNA Deoxyribonucleic acid DTBS Dị tật bẩm sinh FISH Fluorescent in situ hybridization NGS Next generation sequencing NIPS Noninvasive prenatal testing SNPs Single nucleotide polymorphisms NST Nhiễm sắc thể PAPP-A Pregnancy – associated plasma protein A PGD Preimplantation Genetic Diagnosis PN BoBs Prenatal-BoBs uE3 Unconjugated Estriol - Estriol không liên hợp βhCG Beta human chronic gonadotropin MPS Massively parallel sequencing MPSS Massively parallel shotgun sequencing NCVs Normalized chromosome values MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC SƠ ĐỒ DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU Bất thường nhiễm sắc thể (NST) nguyên nhân 50% trường hợp sảy thai, số nguyên nhân hàng đầu gây nên tử vong tàn tật cho trẻ sơ sinh toàn giới [1] Chiếm khoảng 83% bất thường lệch bội NST 21, 18, 13 NST giới tính gây hội chứng Down, Edwards, Patau, Turner , [2] Cho đến nay, giới chưa có biện pháp phòng ngừa tình trạng thai mắc hội chứng bất thường NST Chính vậy, việc phát sớm bất thường NST sàng lọc, chẩn đoán trước sinh tư vấn di truyền việc làm cần thiết nhằm giảm tỷ lệ sinh bất thường NST Các phương pháp sàng lọc trước sinh truyền thống cho bất thường lệch bội NST bao gồm siêu âm hình thái phân tích huyết từ máu mẹ thai kỳ thai kỳ Tuy nhiên, tỷ lệ phát lệch bội dao động từ 30-94% với tỷ lệ dương tính giả 5% tùy thuộc vào phương pháp sàng lọc sử dụng [3] Để chẩn đoán xác định, thai phụ có nguy cao thực thủ thuật xâm lấn sinh thiết gai rau chọc hút dịch ối để phân tích NST thai nhi, điều mang lại nguy thai với tỷ lệ 0.11% - 0.22% [4] Do đó, cần có phương pháp sàng lọc với tỷ lệ dương tính giả thấp đồng thời tỷ lệ phát cao hơn, thai phụ không cần chịu thủ thuật xâm lấn, tránh nguy ảnh hưởng đến mẹ thai [5] Việc phát DNA thai tự (cell-free fetal DNA - cffDNA) có nguồn gốc từ rau thai lưu hành máu mẹ Denis Lo cộng năm 1997 [6] mở khả thực xét nghiệm sàng lọc trước sinh không xâm lấn (NIPS) phát sớm thai lệch bội NST phương pháp giải trình tự hệ [7], [8], [9] Hơn nữa, NIPS có tỷ lệ phát trisomy 21 99% với tỷ lệ dương tính giả thấp 0.1% [11] Do cffDNA coi nguồn mẫu lý tưởng cho xét nghiệm sàng lọc trước sinh phát lệch bội nhiễm sắc thể thai Tại Việt Nam, lĩnh vực sàng lọc chẩn đoán trước sinh ngày phát triển với việc triển khai nhiều kỹ thuật Bệnh viện Phụ sản Hà Nội bệnh viện chuyên khoa hàng đầu Thủ đô, với việc thành lập phát triển Trung tâm sàng lọc, chẩn đoán trước sinh sơ sinh, việc ứng dụng kỹ thuật nhằm nâng cao chất lượng sàng lọc vấn đề cấp thiết Vì chúng tơi tiến hành đề tài “Bước đầu nghiên cứu giá trị kỹ thuật sàng lọc không xâm lấn chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể Bệnh viện Phụ sản Hà Nội năm 2016 – 2017” với mục tiêu: Xác định tỉ lệ thai có nguy bất thường nhiễm sắc thể kỹ thuật sàng lọc không xâm lấn NIPS Xác định tỉ lệ bất thường nhiễm sắc thể 13, 18, 21và nhiễm sắc thể giới tính nhóm thai phụ kết NIPS có nguy Đánh giá giá trị kỹ thuật sàng lọc không xâm lấn NIPS sàng lọc bất thường nhiễm sắc thể 13, 18, 21, nhiễm sắc thể giới tính Chương TỔNG QUAN 1.1 Bất thường nhiễm sắc thể thai thường gặp sàng lọc, chẩn đoán trước sinh 1.1.1 Tần suất, dạng bất thường nhiễm sắc thể thai 1.1.1.1 Tần suất Bất thường nhiễm sắc thể (NST) nguyên nhân 50% trường hợp sảy thai, số nguyên nhân hàng đầu gây nên tử vong tàn tật cho trẻ sơ sinh toàn giới [1] Chiếm khoảng 83% bất thường lệch bội NST 21, 18, 13 NST giới tính gây hội chứng Down, Edwards, Patau, Turner , [2] Tại Trung Quốc, năm có khoảng 16 triệu trẻ sinh, dị tật bẩm sinh chiếm khoảng 4-6% Bất thường nhiễm sắc thể chiếm tỷ lệ 1:160 trẻ sinh sống [12],[13] Thống kê ngành y tế cho thấy, năm Việt Nam có khoảng gần 1.5 triệu trẻ em sinh ra, tỷ lệ dị tật bẩm sinh chiếm khoảng 1.5-2% trẻ sinh sống Đáng lưu ý, năm có khoảng 1.4001.800 trẻ bị mắc bệnh Down, khoảng 250-250 trẻ mắc hội chứng Edwards Theo nghiên cứu tác giả Phùng Như Toàn năm 2003 Bệnh viện Từ Dũ, tỷ lệ bất thường NST 11.2% Năm 2004, tỷ lệ bất thường NST Bệnh viện Phụ sản Trung Ương 17.5% theo nghiên cứu tác giả Hoàng Thị Ngọc Lan cộng sự, nghiên cứu tác giả Trần Danh Cường năm 2005 11.6% thai phụ có nguy cao (tuổi thai phụ >35 tuổi, có tiền sử mang thai hay sinh bị bất thường số lượng nhiễm sắc thể), lệch bội NST 21 chiếm 50,79% [14] 1.1.1.2 Các dạng bất thường NST thai thường gặp Các bất thường NST nguyên nhân 50% trường hợp sảy thai tự nhiên tháng đầu thai kỳ nguyên nhân 7% tử vong sơ sinh khoảng 0,6% trẻ lúc sinh phát có bất thường NST Tuy nhiên, chiếm đến 83% trường hợp bất thường NST lệch bội NST 21, 18, 13, X Y sống sót đến sinh Hội chứng Down chiếm tỷ lệ cao 53%, tiếp đến hội chứng Edwards 13%, hội chứng Patau chiếm 5%, hội chứng Turner 8%, bất thường NST giới tính XXX, XXY, XYY chiếm 4%, lại bất thường gặp khác (Hình 1) [2] Hình 1.1: Tỉ lệ bất thường NST chẩn đoán trẻ