NGHIÊN cứu đặc điểm NHIỄM AEROMONAS TRÊN BỆNH NHÂN điều TRỊ tại BỆNH VIỆN hữu NGHỊ VIỆT TIỆP hải PHÒNG, năm 2016 – 2018

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI VŨ THỊ NỮ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM NHIỄM AEROMONAS TRÊN BỆNH NHÂN ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN HỮU NGHỊ VIỆT TIỆP HẢI PHÒNG, NĂM 2016 – 2018 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI VŨ THỊ NỮ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM NHIỄM AEROMONAS TRÊN BỆNH NHÂN ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN HỮU NGHỊ VIỆT TIỆP HẢI PHÒNG, NĂM 2016 – 2018 Chuyên ngành : Xét nghiệm y học Mã số : LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN HÙNG CƯỜNG HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập làm luận văn, nhận quan tâm, giúp đỡ nhiều nhà trường, quan, gia đình bạn bè Tơi xin chân thành cảm ơn: - Ban Giám hiệu, Bộ môn Vi – Ký sinh trùng lâm sàng, Khoa Kỹ thuật Y học, Phòng Đào tạo sau Đại học Trường Đại học Y Hà Nội - Phòng Kế hoạch tổng hợp – bệnh viện Hữu nghị Việt Tiệp Hải Phòng - Khoa Vi sinh – bệnh viện Hữu nghị Việt Tiệp Hải Phòng Đã tạo điều kiện thuận lợi cho q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn tốt nghiệp Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - TS Nguyễn Hùng Cường, người Thầy ln tận tình bảo, hướng dẫn tơi q trình thực đề tài hoàn thành luận văn - TS Trần Đức - trưởng khoa Vi sinh Th.S Lại Thị Quỳnh – phó khoa Vi sinh bệnh viện Hữu nghị Việt Tiệp Hải Phòng người giúp đỡ tơi trình thu thập số liệu khoa - TS Ngô Anh Thế - trưởng khoa Bệnh Nhiệt Đới – bệnh viện Hữu nghị Việt Tiệp Hải Phòng cung cấp cho tơi thơng tin hình ảnh bệnh nhân nằm điều trị khoa cho tơi nhiều ý kiến q báu để tơi hồn thành luận văn Cuối tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè dành quan tâm, động viên, giúp đỡ suốt trình học tập Hà Nội, ngày 01 tháng 10 năm 2019 Học viên Vũ Thị Nữ LỜI CAM ĐOAN Tơi Vũ Thị Nữ, học viên cao học khóa 26, chuyên ngành Kỹ thuật Y học, Trường Đại học Y Hà Nội xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn Thầy TS Nguyễn Hùng Cường Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp nhận sở nơi nghiên cứu cho phép lấy số liệu Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm cam kết Hà Nội , ngày 01 tháng 10 năm 2019 Người viết cam đoan Vũ Thị Nữ MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm vi khuẩn Aeromonas 1.1.1 Lịch sử phân loại .3 1.1.2 Đặc điểm sinh vật học 1.2 Khả gây bệnh 1.2.1 Cơ chế gây bệnh 1.2.2 Bệnh cảnh lâm sàng 1.2.3 Ổ nhiễm khuẩn khởi điểm, nhiễm trùng bệnh viện nhiễm trùng cộng đồng nhiễm khuẩn Aeromonas 11 1.3 Chẩn đoán vi sinh vật 12 1.3.1 Lấy bệnh phẩm 12 1.3.2 Nuôi cấy phân lập .12 1.3.3 Các phương pháp chẩn đoán Aeromonas 13 1.4 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm Aeromonas 18 1.4.1 Các yếu tố dịch tễ .18 1.4.2 Bệnh lý kèm theo 19 1.4.3 Một số kết xét nghiệm cận lâm sàng 19 1.5 Tình hình kháng kháng sinh Aeromonas 20 1.6 Một số nghiên cứu tình hình gây bệnh Aeromonas 21 1.6.1 Trên giới .21 1.6.2 Tại Việt nam .24 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tượng nghiên cứu 26 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 26 2.3 Thiết kế nghiên cứu 26 2.4 Phương pháp chọn mẫu 26 2.5 Các biến số số nghiên cứu 27 2.5.1 Đặc điểm chung ĐTNC số yếu tố liên quan đến nhiễm Aeromonas 27 2.5.2 Tỷ lệ loài Aeromonas phân lập 29 2.5.3 Mức độ nhạy cảm kháng sinh Aeromonas 29 2.6 Quy trình thực nghiên cứu 29 2.7 Phương pháp thu thập thông tin 29 2.8 Kỹ thuật xét nghiệm sử dụng nghiên cứu 30 2.8.1 Kỹ thuật nuôi cấy vi khuẩn 31 2.8.2 Kỹ thuật kháng sinh đồ .33 2.9 Sai số cách khống chế 35 2.9.1 Sai số 35 2.9.2 Cách khống chế 35 2.10 Xử lý số liệu 35 2.11 Đạo đức nghiên cứu 35 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 3.1 Đặc điểm chung ĐTNC 36 3.1.1 Tuổi đối tượng nghiên cứu 36 3.1.2 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu theo giới 37 3.1.3 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu theo địa dư 37 3.1.4 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo năm tháng năm .38 3.1.5 Bệnh lý kèm theo (bệnh lý nền) đối tượng nghiên cứu .39 3.1.6 Ổ nhiễm khuẩn khởi điểm 40 3.1.7 Một số đặc điểm cận lâm sàng đối tượng nghiên cứu 41 3.1.8 Số ngày nằm điều trị đối tượng nghiên cứu 44 3.1.9 Kết điều trị đối tượng nghiên cứu 44 3.2 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm khuẩn Aeromonas 45 3.2.1 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm khuẩn huyết Aeromonas ĐTNC .45 3.2.2 Các yếu tố tiên lượng liên quan đến nguy tử vong ĐTNC 50 3.3 Tỷ lệ loài Aeromonas phân lập 51 3.3.1 Các loài Aeromonas phân lập đối tượng nghiên cứu 51 3.3.2 Phân bố Aeromonas theo bệnh phẩm 52 3.4 Mức độ nhạy cảm kháng sinh Aeromonas 53 3.4.1 Mức độ nhạy cảm kháng sinh chung Aeromonas 53 3.4.2 Tính nhạy cảm kháng sinh số loài Aeromonas .55 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 56 4.1 Đặc điểm chung ĐTNC 56 4.1.1 Tuổi đối tượng nghiên cứu 56 4.1.2 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu theo giới 57 4.1.3 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu theo địa dư 58 4.1.4 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo năm tháng năm 59 4.2 Một số đặc điểm bệnh lý kèm theo, ổ nhiễm khuẩn khởi điểm, số đặc điểm cận lâm sàng, kết điều trị ĐTNC 60 4.2.1 Bệnh lý kèm theo (bệnh lý nền) đối tượng nghiên cứu .60 4.2.2 Ổ nhiễm khuẩn khởi phát 62 4.2.3 Một số đặc điểm cận lâm sàng đối tượng nghiên cứu 64 4.2.4 Số ngày nằm điều trị kết điều trị đối tượng nghiên cứu 68 4.3 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm khuẩn Aeromonas 69 4.3.1 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm khuẩn huyết Aeromonas .69 4.3.2 Một số yếu tố tiên lượng liên quan đến nguy tử vong ĐTNC 71 4.4 Tỷ lệ loài Aeromonas phân lập 72 4.4.1 Các loài Aeromonas phân lập đối tượng nghiên cứu 72 4.4.2 Phân bố Aeromonas theo bệnh phẩm 74 4.5 Mức độ nhạy cảm kháng sinh Aeromonas 77 4.5.1 Mức độ nhạy cảm kháng sinh chung Aeromonas 77 4.5.2 Tính nhạy cảm kháng sinh số lồi Aeromonas .80 KẾT LUẬN 84 KIẾN NGHỊ 86 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AIDS Acquired immunodeficiency syndrome (Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải) ALT Alanine aminotransferase APTT Thời gian thromboplastin phần hoạt hoá (bệnh/ (b/c) AST chứng) Aspartate aminotransferase BN Bệnh nhân COPD Viêm phổi tắc nghẽn mạn tính ĐTNC Đối tượng nghiên cứu ESBL Extended spectrum beta lactamase HGB Hemoglobin (Lượng huyết sắc tố thể tích máu) HIV Human immunodeficiency virus (Virus gây suy giảm miễn dịch) KSĐ Kháng sinh đồ Max Giá trị lớn MBL Metallo beta lactamase MH Mueller – Hinton Min Giá trị nhỏ NEU# Neutrophile Count (Số lượng bạch cầu đoạn trung tính) NKH Nhiễm khuẩn huyết NT Nhiễm trùng PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng khuếch đại gen) PCT Procalcitonin PLT Platelet Count (Số lượng tiểu cầu thể tích máu) PT % Tỷ lệ % phức hệ prothrombin TM Thiếu máu TSA Trypticase soy agar WBC White Blood Cell (Số lượng bạch cầu thể tích máu) ± SD Mean ± Standard Deviation (Giá trị trung bình ± Độ lệch chuẩn) DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số đặc điểm sinh vật hóa học lồi Aeromonas thường gây bệnh người Bảng 1.2 Bảng 1.3 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.16 Bảng 3.17 Bảng 3.18 Bảng 3.19 Bảng 3.20 Bảng 3.21 Bảng 3.22 Bảng 3.23 Các thử nghiệm sinh hóa thẻ GN 14 Các mồi sử dụng để khuếch đại PCR giải trình tự gen 16S rRNA, gyrB rpoB 17 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo tuổi 36 Một số bệnh lý kèm theo đối tượng nghiên cứu 39 Ổ nhiễm khuẩn khởi điểm 40 Thay đổi số lượng hồng cầu hemoglobin ĐTNC 41 Thay đổi số lượng bạch cầu ĐTNC 41 Thay đổi số lượng tiểu cầu ĐTNC 42 Thay đổi chức gan ĐTNC 42 Thay đổi chức thận ĐTNC 43 Thay đổi glucose điện giải ĐTNC 43 Số ngày nằm điều trị đối tượng nghiên cứu 44 Mối liên quan tuổi ĐTNC với NKH Aeromonas 45 Mối liên quan giới tính ĐTNC với NKH Aeromonas 46 Mối liên quan yếu tố địa dư với NKH Aeromonas .46 Mối liên quan bệnh xơ gan ĐTNC với NKH Aeromonas 47 Mối liên quan bệnh đái tháo đường ĐTNC với NKH Aeromonas 47 Mối liên quan yếu tố viêm gan virus ĐTNCvới NKH Aeromonas 48 Mối liên quan yếu tố mắc bệnh phổi mạn tính ĐTNC với NKH Aeromonas 48 Mối liên quan nguồn nhiễm khuẩn ĐTNCvới NKH Aeromonas 49 Mối liên quan yếu tố sốc ĐTNC với NKH Aeromonas 49 Một số yếu tố tiên lượng liên quan đến nguy tử vong ĐTNC 50 Tỷ lệ phân lập loài Aeromonas 51 Tỷ lệ nhạy cảm, đề kháng kháng sinh chung Aeromonas .53 Tỷ lệ nhạy cảm kháng sinh số loài Aeromonas 55 Bảng 4.1 Bảng 4.2 Tỷ lệ phân bố loài Aeromonas số nghiên cứu 73 Tỷ lệ nhạy cảm Aeromonas với số kháng sinh thử nghiệm số nghiên cứu 78 59 Figueras M.J., Alperi A., Saavedra M.J., et al (2009) Clinical relevance of the recently described species Aeromonas aquariorum J Clin Microbiol, 47(11), 3742-6 60 Al-Benwan K., Abbott S., Janda J.M., et al (2007) Cystitis caused by Aeromonas caviae J Clin Microbiol, 45(7), 2348-50 61 McCracken A.W and Barkley R (1972) Isolation of Aeromonas species from clinical sources Journal of clinical pathology, 25(11), 970-975 62 Hsueh P.R., Teng L.J., Lee L.N., et al (1998) Indwelling device-related and recurrent infections due to Aeromonas species Clin Infect Dis, 26(3), 651-8 63 Reines H.D and Cook F.V (1981) Pneumonia and bacteremia due to Aeromonas hydrophila Chest, 80(3), 264-7 PHỤ LỤC MẪU PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN NGHIÊN CỨU Số nghiên cứu: Số lưu trữ: A HÀNH CHÍNH Họ tên bệnh nhân: Ngày tháng năm sinh: ………/……./…… Giới: Nam  Tuổi: Nữ  Địa nơi sinh sống: Phường/ xã: Quận/huyện: Tỉnh/thành phố: Nghề nghiệp: Khoa điều trị: Ngày nhập viện (ngày/tháng/ năm): Ngày xuất viện/tử vong (ngày/tháng/ năm): Số điện thoại liên lạc người thân: 10 Tiếp nhận bệnh nhân: Trực tiếp  Chuyển từ tuyến  Ghi rõ tên sở tuyến chuyển: 11 Lý vào viện: 12 Chẩn đoán lúc nhập viện: 13 Chẩn đoán cuối cùng: B TIỀN SỬ 2.1 Bệnh lý Viêm gan virus mạn tính  Bệnh gan rượu  Xơ gan   Ung thư  Đái tháo đường  Suy thận Bệnh tim mạch  Lao  Nhiễm HIV  Sử dụng corticoide kéo dài:  Bệnh khác mạn tính khác Có  Khơng  Nếu có, ghi rõ: 2.2 Bệnh nhân có tiếp xúc với Nước: Có  Khơng  Bùn đất: Có  Khơng  Ăn thủy hải sản chưa chín trước bị bệnh: Có  Khơng  Bị tổn thương: Có  Khơng  Nếu có, ghi rõ: C LÂM SÀNG 3.1 Lý vào viện: ……………………vào ngày thứ ……… bệnh 3.2 Đặc điểm chung Triệu chứng bệnh: Sốt xuất vào ngày thứ………………… bệnh Điều trị kháng sinh tuyến trước/ trước NKBV nhà: 1.Có  2.Khơng  3.Khơng rõ  Tên kháng sinh (nếu có): Điều trị kháng sinh trước cấy máu: 1.Có  2.Khơng  Tên kháng sinh (nếu có): Nguồn nhiễm khuẩn: Ổ nhiễm khuẩn ban đầu: Bệnh viện  2.Cộng đồng  Gan, mật  Da  Ổ di bệnh: Tiết niệu  Thần kinh  Hơ hấp  Tiêu hóa  Sinh dục  Thủ thuật y tế  Gan, mật  Hô hấp  Tiết niệu  Tiêu hóa Da  6.Thần kinh  Khác (ghi rõ): 3.3 Các biểu lâm sàng 3.3.1 Triệu chứng tồn thân: * Ý thức: 1.Tỉnh  Kích thích, vật vã  3.Li bì, lơ mơ  4.Hơn mê  Glasgow.….điểm * Nhiệt độ: Nhiệt độ cao trước vào viện: …oC; Khi vào viện: … ……oC Khi biểu NKBV: …… oC; Nhiệt độ cao nằm viện: oC Mức độ sốt: 1.cao  2.vừa  Kiểu khởi phát sốt: 3.nhẹ  đột ngột  Tính chất sốt: 1.sốt nóng  Kiểu sốt: 1.liên tục  *Phù: 3.không rõ  3.rét run  2.dao động  5.ổ mủ  5.hạ thân nhiệt  2.từ từ  2.gai rét  *Da, niêm mạc: 1.bình thường  huyết  4.không sốt  3.sốt  2.xanh tái  6.nhợt  1.Có  4.khơng rõ  4.khơng rõ  3.xung huyết  4.xuất 7.vân tím  2.Khơng  3.3.2 Triệu chứng quan *Tuần hoàn: Mạch: …………… lần/phút Tiếng tim bệnh lý: * Hơ hấp: 1.Có  Huyết áp: ……… mmHg 2.Không  Tần số: ….… lần/phút Viêm phổi: 1.Có  2.Khơng  TD màng phổi: 1.Có  2.Khơng  Suy hơ hấp: 1.Có  2.Khơng  *Tiêu hóa: Đau bụng: 1.Có  2.Khơng  (1.gan mật ; 2.quanh rốn ; 3.thượng vị ;4.dọc đại tràng ) Vàng da 1.Có  2.Khơng  Gan to Tiêu chảy 1.Có  2.Khơng  1.Có  2.Khơng  Lách to 1.Có  2.Khơng  Nơn, buồn nơn 1.Có 2.Khơng  Hạch to 1.Có  2.Khơng  Xuất huyết tiêu hóa 1.Có  2.Khơng  Dịch ổ bụng 1.Có  2.Khơng  Ổ áp xe gan, mật 1.Có  2.Khơng  Chướng 1.Có  2.Khơng  Triệu chứng khác: *Tiết niệu: Tiểu buốt, tiểu rắt 1.Có  2.Khơng  Tiểu đục 1.Có  2.Khơng  Thiểu niệu 1.Có  2.Khơng  Vơ niệu 1.Có  2.Khơng  Tiểu đỏ 1.Có  2.Khơng  *Thần kinh: Hội chứng màng não: 1.Có  Đau hệ TN 1.Có  2.Khơng  2.Không  Triệu chứng khác: * Sốc: 1.Có  Vào ngày thứ ……… bệnh 2.Không  * Các biểu khác: D CẬN LÂM SÀNG 4.1 Công thức máu ngoại vi đơng máu Khi vào Có biểu Các tiêu viện NKBV Số lượng HC (T/L) Hb (g/L) Số lượng BC (G/L) BC ĐNTT (G/L; %) Số lượng TC (G/L) Tỷ lệ Prothrombin (%) Đánh giá 4.2 Sinh hóa máu Các tiêu Ure (mmol/l) Creatinin (µmol/l) Glucose (mmol/l) Protein/Albumin (g/l) AST/ALT (U/L) Bilirubin TP/TT(µmol/l) Na+ (mmol/l) K+ (mmol/l) CRP/CRP hs (mg/l) PCT (ng/ml) Lactate (mmol/l) Khi vào viện Có biểu NKBV Đánh giá 4.3 Xét nghiệm nước tiểu: *NTTQ: Bình thường  Protein 1.Có  2.Khơng  BC 1.Có  2.Khơng  Bất thường  Khơng XN  HC 1.Có  2.Khơng  Nitrit 1.Có  2.Khơng  4.4 Ni cấy vi khuẩn Loại bệnh phẩm Mã số BP Ngày Vi khuẩn phân lập 4.5 Kết kháng sinh đồ Kháng sinh Gentamicin (CN) Amikacin (AK) Amoxicillinclavulanic (AMC) Piperacillin - tazobactam (TZP) S I R Cefuroxime (CXM) Cefepime (FEP) Cefotaxime (CTX) Ceftriaxone (CRO) Ceftazidime (CAZ) Ciprofloxacin (CIP) Ertapenem (ETP) Imipenem (IPM) Meropenem (MEM) Trimethoprimsulfamethoxazol ( SXT) Chloramphenicol (CL) Tetracycline (TE) 4.6 Các xét nghiệm khác XQ ngực thẳng: Bình thường  Bất thường  Không làm  Nêu rõ hình ảnh bất thường: Siêu âm ổ bụng: Bình thường  Bất thường  Khơng làm  Nêu rõ hình ảnh bất thường: Xét nghiệm khác: E ĐIỀU TRỊ Kháng sinh điều trị Kháng sinh Hàm lượng Từ ngày Số ngày dùng …đến F KẾT QUẢ ĐIỀU TRỊ 6.1 Kết quả: Khỏi  6.2 Xử trí: Ra viện  Đỡ, giảm  Nặng thêm  Chuyển viện  Xin  Tử vong  Tử vong  Lý chuyển viện: Lý xin về: G THỜI GIAN ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN (NGÀY): PHỤ LỤC QUY TRÌNH NHUỘM GRAM  Chuẩn bị: - Dụng cụ:  Que cấy vô trùng; lam kính; đèn cồn, bật lửa - Hóa chất trang thiết bị:  Nước muối sinh lý; dầu soi  Bộ thuốc nhuộm Gram (dung dịch tím gentian, dung dịch lugol, cồn aceton, dung dịch đỏ fucsin)  Kính hiển vi quang học  Tiến hành: - Chuẩn bị tiêu nhuộm  Ghi thông tin bệnh nhân lên lam kính  Nhỏ giọt nước muối lên lam kính  Dùng que cấy vơ trùng lấy khuẩn lạc nghi ngờ dàn lam kính theo hình xốy ốc từ ngồi vị trí có giọt nước muối  Để khô tiêu tự nhiên  Cố định tiêu lửa đèn cồn - Nhuộm tiêu bản: + Phủ kín dung dịch tím gentian lên phiến đồ, chờ phút, rửa nhẹ nhàng nước + Nhỏ dung dịch lugol kín phiến đồ, để từ 30 giây đến phút, rửa nhẹ nhàng nước + Nhỏ dung dịch cồn aceton, nghiêng tiêu phức hợp tím hòa tan hết, rửa lại nhẹ nhàng nước + Nhỏ dung dịch đỏ fucsin, chờ phút, rửa nước - Để khơ tiêu Soi kính hiển vi vật kính x100 PHỤ LỤC KỸ THUẬT CẤY PHÂN VÙNG Mục đích: nhằm tách biệt vi khuẩn từ mẫu bệnh phẩm có nhiều loại vi khuẩn để thu khuẩn lạc riêng rẽ Nguyên lý: mật độ vi khuẩn giảm dần vùng Chuẩn bị Môi trường: thạch máu, Chocolate, McConkey, CLED,… Dụng cụ: que cấy, đèn cồn, bật lửa, bút ghi,… Tiến hành - Dùng que cấy đưa bệnh phẩm cần phân lập vi khuẩn vào môi trường nuôi cấy tạo vùng nguyên thủy Dùng que cấy tiệt trùng ria cấy qua vùng nguyên thủy mở rộng diện tích thành vùng chiếm diện tích khoảng 1/4 đĩa mơi trường - Đốt que cấy để tiệt trùng sau ria cấy vùng Những đường ria cắt vào đầu vài đường ria cuối vùng Diện tích cấy vùng khoảng 1/3 đĩa môi trường - Đốt que cấy để tiệt trùng sau ria cấy vùng Những đường ria cắt vào đầu vài đường ria cuối vùng Diện tích cấy vùng khoảng 1/3 đĩa môi trường Đĩa thạch sau cấy xong cất vào tủ ấm 37oC/ 18 – 24h Yêu cầu: * Đường cấy phải liền kề không chồng lên nhau, không làm nham nhở bề mặt môi trường * Vùng khuẩn lạc nằm chồng lên nhau, vùng khuẩn lạc nằm kề phân biệt khuẩn lạc, vùng loại khuẩn lạc nằm riêng rẽ hoàn toàn PHỤ LỤC KỸ THUẬT CẤY VÀ ĐỌC KẾT QUẢ BỘ SINH VẬT HĨA HỌC Mơi trường KIA + Tiến hành: dùng que cấy lấy vi khuẩn từ đĩa khuẩn lạc riêng rẽ, cắm thẳng que cấy xuống đáy ống (phần thạch đứng), sau ria theo hình ziczac bề mặt phần thạch nghiêng Để 370C/18 - 24h + Kết quả:  G (+), L (-): phần chân thạch chuyển sang màu vàng, phần thạch nghiêng màu đỏ  G (+), L (+): ống thạch chuyển sang màu vàng  G (-), L (-): ống có màu đỏ  Sinh H2S: ống KIA có màu đen  Sinh hơi: thạch bị nứt, bị đẩy lên, có bóng thạch Mơi trường Citrat: + Tiến hành: Lấy vi khuẩn từ đĩa khuẩn lạc riêng rẽ, kéo hai đường thẳng song song bề mặt thạch ria theo hình ziczac để 370C/18 - 24h + Kết quả:  Citrat (+): ống thạch chuyển từ màu xanh sang màu xanh dương  Cittrat (-): ống thạch có màu xanh ban đầu Môi trường thạch mềm: Để xác định tính chất di động vi khuẩn + Tiến hành: dùng que cấy nhọn lấy vi khuẩn cắm thẳng vào ống thạch mềm (2/3 ống) để 370C/18 - 24h + Kết quả:  Nếu vi khuẩn có khả di động vi khuẩn từ đường cấy mọc xung quanh giống hình rễ cây, làm đục mơi trường  Vi khuẩn khơng di động mọc đường cấy không làm đục màu môi trường Môi trường Ure - indol: + Tiến hành: dùng que cấy tròn lấy vi khuẩn hòa vào ống ure- indol để 370C/18 - 24h + Kết quả:  Urea (+): mơi trường có màu hồng cánh sen  Uurea (-): môi trường không đổi màu Indol: Đọc kết phải nhỏ dung dịch Kovac (3 giọt), lắc  Indol (+): có vòng màu đỏ bề mặt  Indol (-): khơng tạo vòng màu đỏ Mơi trường Clack - lubs: + Tiến hành: dùng que cấy tròn lấy vi khuẩn hòa vào ống mơi trường, để 370C/18 - 24h + Kết quả: RM: Để đọc kết phải nhỏ thuốc thử đỏ methyl (1- giọt)  RM (+): mơi trường có màu đỏ, hồng  RM (-): mơi trường khơng có màu đỏ, hồng VP: để đọc kết phải nhỏ α naptol KOH 40% (tỉ lệ 1:3), đọc kết sau 15 phút  VP (+): có vòng màu đỏ gạch V P(-): khơng có vòng màu đỏ gạch PHỤ LỤC Danh sách kháng sinh thử nghiệm với Aeromonas Tên kháng sinh Đường kính vùng ức chế Tên (mm) viết tắt S I R 13 - Gentamycin Amikacin CN AK ≥ 15 ≥ 17 14 15 - ≤ 12 ≤ 14 16 Amoxicillinclavulanic Ampicillinsulbactam Piperracillintazobactam Cefuroxime Cefepime Cefoxitin Cefotaxime Ceftriaxone AM C SA M TZ 14 ≥ 18 ≥ 15 ≥ 21 P 12 14 12 - ≤ 13 ≤ 11 ≤ 11 20 CX M FE P KF CT X CR O 17 ≥ 18 ≥ 18 15 17 15 17 ≤ 14 ≤ 14 15 ≥ 18 ≥ 26 ≥ 23 17 23 25 20 22 ≤ 14 ≤ 22 ≤ 19 Ciprofloxacin Levofloxacin CIP LE V 16 ≥ 21 ≥ 17 20 14 16 ET Ertapenem Imipenem Meropenem P IP M ME 16 ≥ 19 ≥ 16 ≥ 16 M Trimethoprimsulfamethoxazole ≤ 15 ≤ 13 18 14 15 14 - ≤ 15 ≤ 13 ≤ 13 15 SX T Aztreonam ≥ 16 ≥ 21 Chloramphenicol CL ≥ 18 Tetracycline TE ≥ 15 11 15 18 20 13 17 12 14 ≤ 10 ≤ 17 ≤ 12 ≤ 11 ... Nghiên cứu đặc điểm nhiễm Aeromonas bệnh nhân điều trị bệnh viện Hữu nghị Việt Tiệp Hải Phòng, năm 2016 – 2018 với mục tiêu sau: Mô tả số yếu tố liên quan đến nhiễm Aeromonas bệnh nhân điều trị bệnh. .. Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI VŨ THỊ NỮ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM NHIỄM AEROMONAS TRÊN BỆNH NHÂN ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN HỮU NGHỊ VIỆT TIỆP HẢI PHÒNG, NĂM 2016 – 2018 Chuyên ngành : Xét nghiệm y học Mã... gặp bệnh nhân lớn tuổi Tuổi trung bình bệnh nhân nhiễm Aeromonas Hàn Quốc theo kết nghiên cứu Rhee cộng sự, năm 2016 57 tuổi [27] Theo nghiên cứu Tang cộng năm 2014, nghiên cứu 91 bệnh nhân nhiễm