Nghiên cứu quy trình tách chiết beta glucan (β – glucan) từ bã men bia thu nhận tại công ty TNHH nhà máy bia heineken việt nam – đà nẵng bằng phương pháp sinh học

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH MƠI TRƯỜNG NGUYỄN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT BETA-GLUCAN (Β – GLUCAN) TỪ BÃ MEN BIA THU NHẬN TẠI CÔNG TY TNHH NHÀ MÁY BIA HEINEKEN VIỆT NAM – ĐÀ NẴNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC Đà Nẵng – Năm 2018 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH MÔI TRƯỜNG NGUYỄN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT BETA-GLUCAN (Β – GLUCAN) TỪ BÃ MEN BIA THU NHẬN TẠI CÔNG TY TNHH NHÀ MÁY BIA HEINEKEN VIỆT NAM – ĐÀ NẴNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC Ngành: Công Nghệ Sinh Học Người hướng dẫn: Ths Lê Vũ Khánh Trang Đà Nẵng – Năm 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố Đà Nẵng, tháng năm 2018 Tác giả khóa luận NGUYỄN THỊ THẢO ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận này, ngồi cố gắng nỗ lực thân, nhận ủng hộ, giúp đỡ tận tình thầy giáo, gia đình bạn bè Trước hết, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới Th.S Lê Vũ Khánh Trang – giảng viên Khoa Sinh – Môi Trường, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng tận tình bảo cho tơi suất q trình hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn tới thầy cô giáo môn Công nghệ sinh học, thầy cô thuộc Khoa Sinh – Môi Trường giảng dạy giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thực đề tài Cảm ơn Công ty TNHH Nhà Máy Bia Heineken Việt Nam – Đà Nẵng giúp đỡ tạo điều kiện cho làm nghiên cứu suốt thời gian qua Đồng thời, xin gửi lời tri ân tới gia đình tơi bạn bè sinh viên làm việc phòng thí nghiệm thuộc Khoa Sinh – Môi trường, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng tạo điều kiện, quan tâm động viên, góp phần cho tơi suất q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận thật tốt đẹp Xin chân thành cảm ơn! Sinh viên thực NGUYỄN THỊ THẢO iii DANH MỤC BẢNG BIỂU Số hiệu Tên bảng Trang bảng Bảng 1.1 Nguồn nguyên liệu chứa β-glucan Bảng 1.2 Thành phần nấm men 11 Bảng 1.3 Thành phần trọng lượng chất thành tế bào 16 nấm men Bảng 2.1 Theo dõi ảnh hưởng chế phẩm tới tăng trọng 26 cá Bảng 2.2 Theo dõi ảnh hưởng chế phẩm tới tỷ lệ sống sót 27 cá Bảng 3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình tách chiết β- 28 glucan Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ protease đến trình tách 29 chiết β-glucan Bảng 3.3 Ảnh hưởng thời gian xử lý protease đến trình 31 tách chiết β- glucan Bảng 3.4 Ảnh hưởng chế phẩm β –glucan lên khối lượng 36 cá sau 16 ngày Bảng 3.5 Ảnh hưởng chế phẩm β-glucan lên tỉ lệ sống sót 37 cá sau 16 ngày Bảng 3.6 Đánh giá tăng trưởng cá 39 Bảng 3.7 Đánh giá tỉ lệ sống sót cá 40 iv DANH MỤC HÌNH ẢNH Số hiệu Tên hình ảnh Trang hình ảnh Hình 1.1 Cấu trúc hóa học β- lucan Hình 1.2 Cấu trúc khơng gian β-glucan Hình 1.3 Sơ đồ sản xuất bia 10 Hình 1.4 Tế bào S cerevisiae 12 Hình 1.5 Cấu trúc thành ngồi nấm men 15 Hình 2.1 Bã nấm men lấy từ nhà máy 19 Hình 2.2 Cá rơ phi đầu vng 20 Hình 2.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 21 Hình 3.1 Sơ đồ quy trình tách chiết β-glucan 33 Hình 3.2 Chế phẩm giàu β-glucan 35 Hình 3.3 Biểu đồ tỷ lệ sống sót cá rơ phi đầu vng 37 Hình 3.4 Cá bị bệnh xuất huyết 38 v MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC BẢNG BIỂU iii DANH MỤC HÌNH ẢNH iv MỞ ĐẦU .1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN .2 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ BETA-GLUCAN (β-GLUCAN) 1.1.1 Cấu trúc .3 1.1.2 Tính chất 1.1.3 Vai trò β-glucan 1.1.4 Ứng dụng chế phẩm β – glucan chăn nuôi 1.1.5 Một số nguồn thu nhận β-glucan .8 1.2 GIỚI THIỆU VỀ BÃ THẢI MEN BIA .9 1.2.1 Quy trình sản xuất men bia .10 1.2.2 Nấm men Saccharomyces cerevisiae [7],[26] 11 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC VỀ β-GLUCAN 15 1.3.1 Các nghiên cứu nước .15 1.3.2 Các nghiên cứu nước .16 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .18 2.2.1 Bã thải nấm men bia 18 2.2.2 Cá rô phi đầu vuông (Anabas Testudinus) 19 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 20 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.3.1 Bố trí thí nghiệm .20 2.3.2 Phương pháp xác định độ ẩm [8] 21 vi 2.3.3 Phương pháp thu nhận β-glucan phương pháp sinh học 22 2.3.4 Phương pháp khảo sát điều kiện ảnh hưởng tới trình tách chiết βglucan phương pháp sinh học 22 2.3.5 Phương pháp xác định hàm lượng β-glucan 23 2.3.7 Phương pháp xử lý số liệu .27 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 27 3.1 KHẢO SÁT CÁC ĐIỀU KIỆN ẢNH HƯỞNG TỚI QUÁ TRÌNH TÁCH CHIẾT β-GLUCAN 27 3.1.1 Khảo sát nhiệt độ ảnh hưởng tới trình tách chiết β-glucan 28 3.1.2 Khảo sát nồng độ enzyme ảnh hưởng tới trình tách chiết β-glucan 29 3.2.3 Khảo sát thời gian ủ enzyme protease tới trình tách chiết β-glucan 30 3.3 QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT β –GLUCAN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC 32 3.3.1 Xây dựng quy trình tách chiết β-glucan 32 3.3.2 Thuyết minh quy trình .33 3.2 ỨNG DỤNG CHẾ PHẨM β-GLUCAN VÀO KHẨU PHẦN ĂN CỦA CÁ RÔ PHI ĐẦU VUÔNG 35 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm β-glucan lên khối lượng cá sau 16 ngày 35 3.4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm β-glucan ảnh hưởng tới tỉ lệ sống sót cá sau 16 ngày 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 KẾT LUẬN 38 KIẾN NGHỊ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 MỞ ĐẦU TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Trong năm gần đây, Việt Nam, nhà máy sản xuất bia ngày phát triển mạnh số lượng quy mô, mang lại giá trị kinh tế cho đất nước Tuy nhiên, với phát triển lượng bã thả men bia khổng lồ thải ngồi mơi trường Tính trung bình sản xuất 1000 lít bia 10 kg men bia thải với độ ẩm trung bình khoảng 85% [39] Trong lượng bã men chủ yếu để chế biến thức ăn cho vật nuôi dùng nguồn nguyên liệu rẻ tiền cho trình làm dịch chiết nấm men tự phân, lại thải trực tiếp ngồi mơi trường Thành tế bào nấm men chiếm khoảng 20% trọng lượng khô tế bào, β-gluan chiếm khoảng 50-60% lượng chất khô thành tế bào nấm men [24],[19],[20] Chính thế, việc sản xuất sản phẩm có giá trị kinh tế cao β-gluan mang lại lợi nhuận cho nhà máy đồng thời giảm thiểu tác động mặt môi trường Đã có nhiều nghiên cứu tách chiết β-gluan từ tế bào nấm men, nhiên nguồn nguyên liệu đầu vào loại bia, nhà máy khác Tại Công ty TNHH Nhà Máy Bia Heiniken Việt Nam - Đà Nẵng sử dụng nguồn nguyên liệu thay gạo với độ ẩm thích hợp 13-14% Tùy thuộc vào loại bia mà sử dụng nguyên liệu thay khác nhau, việc sử dụng nguyên liệu thay làm cho tỉ lệ tiếp men bia giống, thời gian ủ men công ty khác Mặt khác, có nhiều nghiên cứu tách chiết β – glucan sử dụng nhiều phương pháp khác nhau, ảnh hưởng tới q trình tách chiết β– glucan Trong đó, phương pháp sử dụng enzyme nghiên cứu nhiều, đa số nghiên cứu sử dụng enzyme protease tinh Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu sử dụng enzyme protease công nghiệp Nhà máy Heiniken Đà Nẵng sản xuất chủ yếu loại bia Larue, Tiger, sản lượng bình quân năm 2015 150 triệu lít/1 năm, thải tương đương 10% bã thải men bia [41] Để tận dụng nguồn ngun liệu tốt hơn, tách chiết hợp chất sinh học từ bã men bia thành chế phẩm hữu ích cho ngành chăn nuôi β-glucan từ thành tế bào nấm men dùng để sử dụng yếu tố kích thích hệ miễn dịch tác động tích cực đến hệ thống bảo vệ vật chủ, tăng tính đề kháng vật chủ đến hầu hết loại bệnh nhiễm khuẩn, nấm, virus nhiều loại kí sinh vật khác Ngồi ra, biết đến yếu tố miễn dịch hiệu điều trị ung thư chất chống oxy hóa, tái tạo da, làm mờ nếp nhăn nên dùng để sản xuất mỹ phẩm [8][15] Trước thực trạng vậy, đề tài “Nghiên cứu quy trình tách chiết beta-glucan (β – glucan) từ bã men bia thu nhận Công ty TNHH Nhà Máy Bia Heineken Việt Nam – Đà Nẵng phương pháp sinh học ” thực với mục đích thu nhận nguồn β-glucan tự nhiên ứng dụng sản xuất thức ăn gia súc MỤC TIÊU ĐỀ TÀI - Nghiên cứu quy trình tách chiết β-glucan từ bã men bia phương pháp sinh học - Ứng dụng chế phẩm β-glucan bổ sung vào phần ăn cá rô phi đầu vuông (Anabas Testudinus) Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN - Từ kết nghiên cứu đề tài tiền đề cho nghiên cứu tách chiết chất từ vi sinh vật - Nghiên cứu góp phần ứng dụng vào q trình xử lý bã men bia Cơng ty TNHH Heineken Việt Nam - Đà Nẵng - Chế phẩm giàu β-glucan ứng dụng trang trại nuôi cá giống nuôi gia cầm gia súc CHƯƠNG 41 dược phẩm mỹ phẩm, (thuộc đề tài KC 04-28) [4] Lý Thị Minh Hiền, Đoàn Hạnh Kiểm, Trần Thị Thu Chi (2015), Nghiên cứu quy trính tách chiết beta glucan từ tế bào Saccharomyces cerevisiae bã men bia Tạp chí khoa học trường đại hoc mở Hồ Chí Minhsố (40) 2015 [5] Nguyễn Văn Mùi (2001), Thực hành hóa sinh học, Nhà xuất KHKT [6] Nguyễn Văn Muôn, Luận văn Nghiên cứu thử nghiệm quy trình thu nhận chế phẩm giàu β-glucan oligoglucosamin, Trường Đại học Nông lâm TpHCM [7] Lương Đức Phẩm (2006), Vi Sinh Vật học Công nghiệp, Nhà xuất KHKT, Hà Nội [8] Nguyễn Ngọc Sơn (2013), “Nghiên cứu tách chiết beta-glucan từ thành tế bào nấm men”, luận văn thạc sĩ, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội, Hà Nội [9] Nguyễn Thành Tâm, Nguyễn Thị Kim Nguyệt,(2012), Ảnh hưởng emuglucan lên tăng trưởng tỷ lệ sống cá lóc bơng lau, Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, Vol 75, tr73-76 [10] Nguyễn Minh Trí, Ngơ Thị Hồi Dương Phạm Thị Mai, Đỗ Thị Ánh Hoà (2009), Thu nhận protease từ canh cấy chủng vi khuẩn Pseudomonas aerunosa CB07- xác định số tính chất enzyme protease thu được, Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản, số 4/2009 [11] Lê Ngọc Tú (2002), Hóa Sinh học Công nghiệp, Nhà xuất KHKT, Hà Nội [12] Nguyễn Minh Thông, Mai Vũ Thùy Dương, Đỗ Võ Anh Khoa, “Ảnh hưởng bổ sung beta-glucan vitamin C lên suất tăng trưởng heo cai sữa”, Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, (2014), 89-95 [13] Đặng Trần Tú Trâm, Ảnh hưởng β-glucan vào thức ăn đến khả 42 kháng bệnh trùng lông (Cryptocaryon irritans) gây cá nàng đào (Chatetodon auria), Tuyển Tập Nghiên Cứu Biến, 2015, tập 21, số 2: 142-149 [14] Nguyễn Hồ Thanh Uyên, Hàm lượng glucan số nấm bậc cao thuộc ngành Ascomycota Basidiomycota, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG Tp.HCM Tài liu ting Anh [15] Aguilar-Uscanga, B and J M Franỗois (2003) A study of the yeast cell wallcomposition and structure in response to growth conditions and mode cultivation [16] Bohn, J A.; BeMiller, J N (1-3)-Beta-d-glucans as biological response modifiers: a review of structure-functional activity relationships Carbohydrate Polymers 1995, 28 (1), 3-14 [17] Chan, G C., Chan, W K., & Sze, D M (2009) The effects of beta-glucan on human immune and cancer cells Journal of Hematology & Oncology, 2(25), 1-11 [18] Brown, G D., & Gordon, S (2003) Fungal beta-glucans and mammalian immunity Immunity, 19(3), 311-315 [19] Bohn, J A.; BeMiller, J N (1-3)-Beta-d-glucans as biological response modifiers: a review of structure-functional activity relationships Carbohydrate Polymers 1995, 28 (1), 3-14 [20] E.R Simard, M Bouksaim, “Process for brewer's yeast debittering” US patent 5716653 (1995) [21] Many, J N., K Vizhi (2014) Analysis of Different Extraction Methods on the Yieldand Recovery of β-Glucan from Baker’s Yeast (Saccharomyces Cerevisiae),International Journal of Innovative Science, Engineering and Technology, 1(6), pp.268-271 43 [22] Hunter Jr KW, RA Gault, MD Berner (2002), Preparation of microparticulate β- glucan from S cerevisiae for use in immune potentiation Lett appl microbiol 35: 267-271 [23] Huang L.G et al (2008) Extraction of two active polysaccharide from the yeast cell wall, Zeitschrift für Naturforschung 63c, 919-921 (2008) [24] Lui, X Y.; Wang, Q.; Cui, W S.; Lui, Z H A new isolation method of bD-glucans from spent yeast Saccharomyces cerevisiae Food Hydrocolloids 2008, 22, 239–247 [25] Misaki A et al (1967) Structure of the cell wall glucan of yeast (Saccharomyces cerevisiae), Carbohydrate Research, Elsevier Publishing Company, Amsterdam, printed in Belgium [26] Nimrichter, L.; Rodrigues, L M.; Rodrigues, G E.; Travassos, R L The multitude of targets for the immune system and drug therapy in the fungal cell wall Microbes and Infection 2005, 7, 789–798 [27] Shardrack O Asare, Optimized Acid/Base Extraction and Structural Characterization of β-glucan from Saccharomyces Cerevisiae; Electronic Theses and Dissertations, 5-2015 [28] Trần Minh Tâm (2013) Optimization of βeta-glucan extraction from waste brewer’s yeast saccharomyces cerevisiae using autolysis, enzyme, ultrasonic and combined enzyme – ultrasonic treatment, American Journal of Research Communication, 2013, 1(11): 149-158 [29] Roger Manson, (2011), What is beta glucan?, A Concise Guide to the Benefits and Uses of the Most Powerful Natural Immune Enhancer Known to Science [30] Russell L Blaylock, MD, Member (2012), Yeast β-1,3-glucan and Its Use Against Anthrax Infection and in the Treatment of Cancer , University of Mississippi Recent Patents 44 [31] Vassileios Varelas, P Tataridis, M Liouni and E T Nerantzis (2010) Application of different methods for the extraction of yeast β-glucan, eJournal of Science & Technology (e-JST) [32] Javmen, A., S Grigiškis, R Gliebute (2012) β-glucan extraction fromSaccharomyces cerevisiae yeast using Actinomyces rutgersensis 88 yeast lysing enzymatic complex Biologija, 58(2), pp 51-59 [33] Vaibhav Shah, M.Pharm (2009), Molecular and funtional analysis of betaglucan-mediated microglial, Presented in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree Doctor of Philosophy in the Graduate School of The Ohio State University [34] Vetvicka, V (2011) Glucan-immunostimulant, adjuvant, potential drug World Journal of Clinical Oncology, 2(2), 115-119 [35] Vassileios Varelas1,* , P Tataridis2 , M Liouni1 , E T Nerantzis2, Application of different methods for the extraction of yeast β-glucan [36] Vesna ZECHNER-KRPAN (2009), Potential Application of Yeast βGlucans in Food Industry, review article [37] Vetvicka, V.; Dvorak, B.; Vetvickova, J.; Richter, J.; Krizan, J.; Sima, P.; Yvin, J C Orally administered marine (1→3)-b-D-glucan Phycarine stimulates both humoral and cellular immunity International Journal of Biological Macromolecules 2007, 40, 291- 298 Tài liệu Internet [39] https://www.ncbi.nlm.nih.gov [40] https://vi.wikipedia.org/wiki/Beta-glucan [41] http://heineken-vietnam.com.vn [42] https://www.ncbi.nlm.nih.gov [43] https://tepbac.com/tin-tuc 45 PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG βGLUCAN Phương pháp xác định hàm lượng β-glucan Bảng 1.1 Giá trị OD nồng độ khác Nồng độ Giá trị OD 0.558 0.767 0.968 1.199 1.418 1.653 1.875 y = 0,2205x + 0,3236 R² = 0,9995 1,8 1,6 1,4 OD 1.1 1,2 0,8 0,6 0,4 0,2 0 Nồng độ saccharose(ug) Hình 1.1: Đồ thị đường chuẩn Phương trình đường chuẩn saccharose có dạng: y = 0.2205x + 0.3236 PHỤ LỤC KẾT QUẢ TÁCH CHIẾT β-GLUCAN 2.1 Chế phẩm protease mua thị trường - Mua Cơng ty TNHH Sinh phẩm số Khánh Hòa - Hoạt độ enzyme: 1000UI/g - Nhiệt độ hoạt động: 25-70oC - pH = 7-10 - Protease thu nhận từ vi khuẩn Bacillus licheniformis 2.1 Kết thí nghiệm q trình tách chiết β-glucan Bảng 2.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình tách chiết β-glucan Nhiệt độ rửa bã nấm men (oC) 30 60 90 Khối lượng β-glucan (g) Hiệu suất thu hồi (%) 0.37 18.5 0.34 17 0.39 19.5 0.54 27 0.52 26 0.51 25.5 0.63 31.5 0.64 32 0.67 33.5 Bảng 2.2 Ảnh hưởng nồng độ protease đến trình tách chiết βglucan Nồng độ enzyme (%) 0.3 0.5 0.7 0.9 Khối lượng β-glucan (g) Hiệu suất thu hồi (%) 0.38 19 0.36 18 0.32 16 0.65 32.5 0.66 33 0.62 31 0.57 28.5 0.61 30.5 0.59 29.5 0.6 30 0.59 29.5 0.54 27 Bảng 2.3 Ảnh hưởng thời gian xử lý enzyme protease đến trình tách chiết β- glucan Thời gian 12 24 Khối lượng β-glucan (g) Hiệu suất thu hồi(%) 0.68 34 0.63 31.5 0.65 32.5 0.59 29.5 0.5 25 0.52 26 0.49 24.5 0.42 21 0.45 22.5 2.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm β-glucan lên cá rô phi Bảng 2.4 Ảnh hưởng chế phẩm β-glucan ảnh hưởng tới khối lượng cá Ngày 16 Nghiệm thức A Nghiệm thức B Tăng trọng cá nghiệm thức A (g) Tăng trọng nghiệm thức B (g) 106 104 5.30 5.2 103 105 5.15 5.25 102 103 5.10 5.15 118 108 7.37 7.20 116 107 7.25 7.13 113 105 7.06 7.00 Bảng 2.5 Ảnh hưởng chế phẩm β-glucan tới tỷ lệ sống sót cá Ngày 10 12 14 16 Số lượng cá Số lượng cá Tỷ lệ cá Tỷ lệ cá sống sống sót sống sót sống sót nghiệm thức nghiệm thức nghiệm thức nghiệm thức A (con) B (con) A (%) B (%) 20 20 100 100 20 20 100 100 20 20 100 100 20 20 100 100 20 19 100 95 19 20 95 100 20 19 100 95 20 18 100 90 19 20 95 100 19 18 95 90 20 18 100 90 19 19 95 95 18 17 90 85 18 18 90 90 18 16 90 80 18 17 90 85 18 17 90 85 17 16 85 80 17 15 85 75 17 17 85 85 16 14 80 70 17 14 85 70 16 16 80 80 16 14 80 70 15 14 80 70 16 15 80 75 15 13 75 70 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Q TRÌNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI 3.1 Hình ảnh trình xử lý tách chiết β-glucan Hình 3.1: Chế phẩm protease Bã thải men bia Bã thải sau ly tâm Hình 3.2: Quá trình tiền xử lý Bã thải sau sấy Rửa nước vô khuẩn Xử lý NaOH Xử lý Etanol Xử lý enzyme Xử lý Aceton Chế phẩm Hình 3.3 Quá trình tách chiết tạo chế phẩm Nồng độ đường chuẩn Nồng độ chế phẩm thí nghiệm Hình 3.4 Đo hàm lượng đường thí nghiệm 3.2 Hình ảnh nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm β-glucan lên cá rô phi đầu vuông Lô A: Sử dụng chế phẩm Lô B: Không sử dụng chế phẩm Cá lô A3 sau thí nghiệm Cá lơ B3 sau thí nghiệm nghiệm Cá ni thùng Thức ăn cá Hình 3.5 Hình ảnh trình đánh giá chế phẩm β-glucan ... Nghiên cứu quy trình tách chiết beta- glucan (β – glucan) từ bã men bia thu nhận Công ty TNHH Nhà Máy Bia Heineken Việt Nam – Đà Nẵng phương pháp sinh học ” thực với mục đích thu nhận nguồn β -glucan. .. HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH MƠI TRƯỜNG NGUYỄN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT BETA- GLUCAN (Β – GLUCAN) TỪ BÃ MEN BIA THU NHẬN TẠI CÔNG TY TNHH NHÀ MÁY BIA HEINEKEN VIỆT... VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.2.1 Bã thải nấm men bia - Bã men bia Saccharomyces cerevisiae sử dụng nghiên cứu bã nấm men thải từ Công ty TNHH nhà máy bia Heineken Việt Nam