Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT iCa Canxi ion hó a ICU Intensive care unit – Khoa hồ i sứ c cấp cứu CaT Canxi toàn phần huyết thanh 1
Trang 1Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: BÁC SĨ ĐA KHOA
HÀ NỘI – 2019
Trang 2Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
NGÀNH BÁC SĨ ĐA KHOA
Kho ́ a: QH.2013Y
Người hướng dẫn: 1 TS.BS Bùi Tuấn Anh
2 TS Vu ̃ Thi ̣ Thơm
HÀ NỘI – 2019
Trang 3Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
LỜI CẢM ƠN
Trong quá trình học tập và thực hiện khóa luận tốt nghiệp, tôi đã nhận được sự quan tâm giúp đỡ của các thầy cô, nhà trường, cơ quan, bệnh viện, gia đình và bè bạn
Lờ i đầu tiên, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất tới TS.BS Bùi Tuấn
Anh – Trươ ̉ ng Khoa Hóa sinh – Bê ̣nh viê ̣n Ba ̣ch Mai và TS Vũ Thi ̣ Thơm đã
luôn quan tâm giúp đỡ và hướng dẫn tôi, để tôi có thể hoàn thành bản khóa luận tốt nghiệp này
Tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ của các bác sĩ, nhân viên Khoa
Hó a sinh – Bê ̣nh viê ̣n Ba ̣ch Mai đã hết sức hỗ trợ và tạo điều kiện cho tôi thực hiện đề tài này Bên cạnh đó, tôi xin gửi tới các thầy cô Khoa Y Dược - Đại học Quốc gia Hà Nội, đặc biệt là các thầy cô Bộ môn Y dược học cơ sở lòng biết
ơn sâu sắc Sự dìu dắt, quan tâm, dạy dỗ, chỉ bảo tận tình và chu đáo của các thầy cô trong suốt 6 năm học vừa qua đã giúp tôi có thêm hành trang kiến thức, bản lĩnh và nhiệt huyết để có thể thực hiện thật tốt công tác thực tế sau này
Cuối cùng, tôi xin dành lời cảm ơn của mình tới gia đình và bạn bè, những người đã luôn ở bên động viên, giúp đỡ và cho tôi sự hỗ trợ tuyệt vời nhất
Bản khóa luận còn có những thiếu sót, tôi rất mong nhận được sự chỉ bảo, đóng góp ý kiến của các thầy cô để đề tài được hoàn thiện hơn
Trang 4Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
iCa Canxi ion hó a
ICU Intensive care unit – Khoa hồ i sứ c cấp cứu
CaT Canxi toàn phần huyết thanh
1,25(OH)2D 1,25 – dihydroxy vitamin D, calcitriol
PTH Parathyroid hormon – Hormon tuyến cận giáp
25OHD 25 – hydroxy vitamin D, calcidiol
ISE Ion Selective Electrode – Phương pháp điện cực chọn lọc
ion IFCC The International Federation of Clinical Chemistry – Liên
đoàn Quốc tế về Hóa sinh lâm sàng CKD – MBD Metabolic Bone Disease in Chronic Kidney Disease – Rố i
loạn chuyển hóa xương và khoáng chất ở bê ̣nh nhân mắc
bệnh thâ ̣n ma ̣n tính KDIGO Kidney Disease Improving Global Outcomes – Hội Thâ ̣n
học Quốc tế
eGFR Estimated Glomerular Filtration Rate – Mứ c lo ̣c cầu thâ ̣n
Trang 5Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
Bảng 2.5 Phân nhó m bê ̣nh nhân
Bảng 2.6 Mứ c đô ̣ tương hơ ̣p theo Alman 1991 dựa trên chỉ số kappa
Bảng 3.1 Tỷ lê ̣ bê ̣nh nhân phân bố theo nhóm
Bảng 3.2 Sự khác biê ̣t giá tri ̣ iCa giữa đo bằng ISE và tính bằng công thức
Bảng 3.3 Đô ̣ xác thực kết quả của công thức so với đo bằng ISE trực tiếp Bảng 3.4 Đô ̣ nha ̣y, đô ̣ đă ̣c hiê ̣u, giá tri ̣ dự đoán dương tính, giá tri ̣ dự đoán
âm tính của các công thức trong chẩn đoán ha ̣ canxi máu Bảng 3.5 Đô ̣ nha ̣y, đô ̣ đă ̣c hiê ̣u, giá tri ̣ dự đoán dương tính, giá tri ̣ dự đoán
âm tính của các công thức trong chẩn đoán tăng canxi máu Bảng 3.6 So sánh sự khác biê ̣t giá tri ̣ iCa giữa các công thức và đo bằng
ISE trực tiếp ở nhóm chứng Bảng 3.7 So sánh sự khác biê ̣t giá tri ̣ iCa giữa các công thức và đo bằng
ISE trực tiếp ở những bê ̣nh nhân mắc bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n tính Bảng 3.8 So sánh mức đô ̣ phù hơ ̣p giữa công thức tính và đo bằng ISE
trực tiếp ở nhóm bê ̣nh nhân mắc bệnh thận mạn tính Bảng 3.9 So sánh sự khác biê ̣t giá tri ̣ iCa hóa giữa các công thức và đo
bằng ISE trực tiếp ở những bê ̣nh nhân có giảm albumin Bảng 3.10 So sánh mức đô ̣ phù hơ ̣p giữa công thức tính và đo bằng ISE
trực tiếp ở nhóm bê ̣nh nhân có giảm albumin máu
Trang 6Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
DANH SÁCH CÁC HÌNH
Hình 1.1 Phân bố củ a canxi, phospho, magie trong cơ thể
Hình 1.2 Các da ̣ng tồ n ta ̣i của canxi trong cơ thể
Hình 1.3 Điều hòa nồng đô ̣ canxi huyết thanh của hormon PTH
Hình 1.4 Sơ đồ cấu ta ̣o của điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion canxi
Hình 1.5 Sơ đồ cấu ta ̣o phương pháp điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion
Hình 2.1 Máy phân tích điê ̣n giải 9180 hãng Roche
Hình 2.2 Hệ thống máy phân tích hóa sinh Roche (COBAS 8000)
Hình 2.3 Quy trình xét nghiệm các chỉ số hóa sinh trong nghiên cứu
Hình 2.4 Sơ đồ nghiên cứu
Hình 3.1 Biểu đồ Bland - Altman so sánh sự khác biê ̣t kết quả giữa
công thứ c và đo bằng ISE trực tiếp của công thức 1,2,3,4
Hình 3.2 Biểu đồ Bland - Altman so sánh sự khác biê ̣t kết quả giữa
công thứ c và đo bằng ISE trực tiếp của công thức 5,6,7,8
Trang 7Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN
DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT
DANH SÁCH CÁC BẢNG
DANH SÁCH CÁC HÌNH
ĐẶT VẤN ĐỀ 1
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3
1.1 Đại cương 3
1.1.1 Canxi trong tự nhiên và trong các tổ chức sống 3
1.1.2 Phân loại các dạng tồn tại của canxi trong cơ thể 4
1.1.3 Điều hòa nồng độ canxi trong cơ thể 5
1.1.4 Ý nghĩa lâm sàng của canxi 7
1.1.4.1.Tăng canxi máu 7
1.1.4.2 Hạ canxi máu 8
1.1.4.2.1 Bệnh thâ ̣n ma ̣n tính 8
1.1.4.2.2 Giảm albumin máu 9
1.2 Phương pháp đo điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c canxi ion trực tiếp 10
1.2.1 Khái niệm chung 10
1.2.2 Cấu tạo chung 11
1.2.3 Nguyên lí hoạt động 11
1.3 Phương pháp tính bằng công thức 13
1.4 Ca ́ c nghiên cứu trên thế giới và ở Viê ̣t Nam 14
CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16
2.1 Đối tươ ̣ng nghiên cứu 16
2.2 Phương pháp nghiên cứu 16
2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 16
2.2.2 Các chỉ số nghiên cứu 16
2.2.3 Phương pháp thu thập số liệu 17
2.2.4 Phương tiện nghiên cứu 18
2.2.5 Xử lý số liệu 20
2.2.6 Đạo đức nghiên cứu 21
2.2.7 Sơ đồ nghiên cứu 21
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 23
Trang 8Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
3.1 Đặc điểm chung của quần thể nghiên cứu 23
3.2 Đánh giá độ chính xác và độ các thực của công thức tính so với phương pháp đo điện cực chọn lọc 23
3.1.1 Đô ̣ chính xác và đô ̣ xác thực của các công thức so với đo bằng điê ̣n cực chọn lo ̣c ion trên tất cả các đối tượng bệnh nhân 23
3.1.2 So sánh trên nhóm chứng 28
3.1.3 So sánh trên bê ̣nh nhân mắc bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n tính 29
3.1.4 So sánh trên đối tươ ̣ng có giảm albumin máu 30
CHƯƠNG IV: BÀN LUẬN 32
4.1 Về đô ̣ chính xác và độ xác thực của các công thức tính toán canxi ion ho ́ a so với đo điện cực chọn lọc ion trực tiếp 32
4.1.1 Đánh giá đô ̣ chính xác và đô ̣ xác thực của công thức tính canxi ion hóa… 32
4.1.2 Đánh giá đô ̣ nha ̣y, đô ̣ đă ̣c hiê ̣u, giá tri ̣ dự đoán âm tính và giá tri ̣ dự đoán dương tính trong chẩn đoán ha ̣ canxi má và tăng canxi máu 33
4.2 Về đa ́ nh giá đô ̣ chính xác của các công thức trên đối tượng mắc bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n tính và đối tượng có giảm albumin máu 34
4.2.1 Đánh giá đô ̣ chính xác các công thức tính toán trên đối tượng mắc bê ̣nh thận ma ̣n tính 34
4.2.2 Đánh giá đô ̣ chính xác các công thức tính toán trên đối tượng giảm albumin máu 35
KẾT LUẬN 37
KIẾN NGHI ̣ 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC
Trang 9Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
ĐẶT VẤN ĐỀ
Canxi là mô ̣t chất khoáng phong phú trong cơ thể con người có vai trò quan trọng trong nhiều enzyme, hoa ̣t đô ̣ng thần kinh – cơ, là mô ̣t chất truyền tin thứ hai và cần thiết cho nhiều hoa ̣t đô ̣ng sinh lý của cơ thể [29] Canxi đươ ̣c
tìm thấy chủ yếu ở trong xương [5, 30] Trong huyết thanh, canxi tồ n ta ̣i ở ba
dạng chính là: (a) Canxi ion hóa (canxi tự do, ký hiê ̣u là iCa) – là dạng hoạt động sinh lý và chịu trách nhiệm cho một loạt các hoạt động trao đổi chất và cân bằng nội môi, (b) da ̣ng liên kết với protein, (c) da ̣ng ta ̣o phức với các anion như citrat, lactat hoă ̣c phosphat [5, 8, 29] Sự thay đổi của nồng đô ̣ canxi ion
hóa trong máu đã dẫn đến tình tra ̣ng bê ̣nh lý phổ biến là biểu hiê ̣n của tăng canxi máu hay ha ̣ canxi máu trên lâm sàng Vì vâ ̣y, viê ̣c đi ̣nh lượng nồng đô ̣ iCa là rất cần thiết ở những cơ sở y tế điều tri ̣ nô ̣i trú, đă ̣c biê ̣t là các cơ sở y tế chăm sóc đă ̣c biê ̣t như hồi sức cấp cứu (ICU)
Trong hơn 50 năm qua, phương pháp phổ biến nhất để đánh giá tình trạng canxi là đo nồng độ canxi toàn phần (CaT) trong huyết tương [25] Sau đó, Moore cù ng Mc-Lean và Hastings đã chỉ ra rằng da ̣ng hoa ̣t đô ̣ng của canxi trong cơ thể chỉ là iCa [30] Vì vâ ̣y, viê ̣c sử du ̣ng nồng đô ̣ CaT để chẩn đoán không còn chính xác trên lâm sàng, thay vào đó đã có mô ̣t số nghiên cứu đưa
ra các công thức ước tính nồng đô ̣ iCa dựa trên các chỉ số là CaT và protein toàn phần Năm 1967, phương pháp đo nồng độ iCa lần đầu tiên được báo cáo bởi Ross [39], sử du ̣ng các điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion và dựa vào sự thay đổi điê ̣n thế thu được để tính toán nồng đô ̣ của iCa, phương pháp này đã giúp cho viê ̣c
đi ̣nh lươ ̣ng iCa đươ ̣c dễ dàng và chính xác hơn Tuy nhiên, vì nhiều lý do bao gồm chi phí mua trang thiết bi ̣, kỹ thuâ ̣t phân tích, vấn đề tiêu chuẩn hóa viê ̣c lấy và xử lý mẫu nên mô ̣t số bê ̣nh viê ̣n, nhiều phòng xét nghiê ̣m không thể đo trực tiếp nồng đô ̣ iCa [21, 34] Mô ̣t loa ̣t các công thức tính gián tiếp iCa dựa trên các chỉ số hóa sinh thông thường với phương pháp đi ̣nh lượng đơn giản đươ ̣c xây dựng Mă ̣c dù vâ ̣y, sử dụng các công thức này vẫn có những sai số dẫn đến việc chẩn đoán sai tình tra ̣ng bê ̣nh, đă ̣c biê ̣t trong mô ̣t số bê ̣nh lý có yếu tố ảnh hưởng đến sự phân bố cũng như tình tra ̣ng iCa thực tế trong cơ thể như bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n tính, bệnh hạ albumin huyết, hay viêm tu ̣y cấp Trên thế giớ i đã có những nghiên cứu đánh giá về đô ̣ chính xác của các công thức tính toán so với phương pháp ISE trực tiếp Tuy nhiên, đến nay vẫn chưa có mô ̣t sự
Trang 10Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
thố ng nhất nào đươ ̣c đưa ra về công thức phù hơ ̣p sử du ̣ng trên lâm sàng cho từng đối tượng bệnh nhân nói trên
Tại Viê ̣t Nam, hiê ̣n nay chưa có nhiều nghiên cứu đánh giá về chỉ số iCa, việc áp du ̣ng các công thức còn phu ̣ thuô ̣c vào bác sĩ cận lâm sàng Các nghiên
cứ u lâm sàng đánh giá về rối loa ̣n nồng đô ̣ canxi máu đa số sử du ̣ng chỉ số CaT Chính vì vâ ̣y, chúng tôi tiến hành nghiên cứu “Đánh giá tri ̣ số iCa đo
bằng phương pha ́ p đo bằng điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion trực tiếp và phương pháp
ti ́nh gián tiếp” với hai mu ̣c tiêu:
Trang 11Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đại cương
1.1.1 Canxi trong tự nhiên và trong các tổ chức sống
Trong tự nhiên, canxi (Ca) là kim loại phong phú đứng thứ ba sau nhôm
và natri chiếm khoảng 3% vỏ trái đất [10] Cation canxicó trong muối của các hỗn hợp khác nhau [10, 36] Ion canxi là một cation phổ biến thứ năm trong cơ thể, nó đóng vai trò quan trọng trong các quá trình sinh lý và sinh hóa của tế bào Tổng lượng canxi trong cơ thể người trưở ng thành khoảng 1kg [8, 33, 41] Canxi cù ng với các khoáng chất khác là phospho và magie được tìm thấy ở 3 khu vực chính: xương, mô mềm và dịch ngoại bào (Hình 1.1) [5] Bộ xương chứa 99% canxi của cơ thể dưới dạng hợp chất hydroxyapatit Mô mềm và dịch ngoại bào chứa khoảng 1% canxi của cơ thể [5, 8, 36, 41] Có rất ít canxi trong bào tương các tế bào, nồng độ canxi trong máu cao hơn gấp 5,000 đến 10.000 lần trong bào tương của các tế bào cơ tim và tế bào cơ trơn [4]
Hi ̀nh 1.1: Phân bố của canxi, phospho, magie trong cơ thể [5]
Trang 12Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
1.1.2 Phân loại các dạng tồn tại của canxi trong cơ thể
Canxi huyết thanh tồ n tại dưới 3 dạng: (a) iCa chiếm khoảng 50%, (b) phức chất của canxi (liên kết với phosphat, bicarbonate, sulfate…) chiếm khoảng 10% và (c) dạng gắn với protein chiếm khoảng 40%, trong đó 80% gắn với albumin và 20% gắn với globulin (Hình 1.2) [5, 8, 10, 29, 33] Canxi có thể tái phân bố giữa 3 dạng phụ thuộc vào sự thay đổi của nồng độ protein và các anion, thay đổi pH hoặc thay đổi số lượng của iCa và CaT Canxi được chia ra
ở cả khu vực ngoại bào và nội bào trong đó canxi nội bào có vai trò quyết định trong nhiều chức năng sinh lý, bao gồm: co cơ, bài tiết hormon, chuyển hóa glycogen và phân chia tế bào Canxi ngoại bào giúp duy trì tính ổn định của canxi nội bào, quá trình khoáng hóa xương, đông máu, điện thế màng tế bào Ngoài ra, nó cũng giúp ổn định màng bào tương, ảnh hưởng đến tính thấm và tính kích thích màng Canxi hòa tan trong cơ thể chủ yếu nằm ở dịch ngoại bào với nồng độ tương đương trong huyết thanh và dịch kẽ [5]
Hi ̀nh 1.2: Các da ̣ng tồn ta ̣i của canxi trong cơ thể [5]
Nồ ng độ canxi tổng số (CaT) bao gồ m tất cả các da ̣ng của canxi huyết thanh là một xét nghiệm thường quy trong hóa sinh lâm sàng Sự ra đời của các máy hóa sinh tự động giú p viê ̣c đi ̣nh lươ ̣ng CaT trở nên nhanh chóng, dễ dàng
và chi phí thấp Định lượng CaT phu ̣ thuô ̣c vào nhiều yếu tố bao gồm albumin,
các anion, pH máu… [18] Chỉ số CaT có giá trị trong chẩn đoán một số bệnh
lý liên quan tới các dạng tồn tại phức hợp của canxi (như liên kết protein) Tuy
Canxi ion hóa
50%
Canxi tạo phức 10%
Canxi gắn albumin 80% Canxi gắn
globulin 20%
Canxi gắn protein 40%
Trang 13Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
nhiên, một số bệnh lý khác như hạ canxi huyết, các nhà khoa học chứng minh rằng chỉ số iCa có giá trị cho chẩn đoán lâm sàng hơn là chỉ số CaT [18] Bên cạnh đó, iCa là dạng hoạt động sinh lý của canxi và nồng độ của nó rất quan trọng với nhiều chức năng sinh lý khác Chính vì vậy, việc định lượng iCa là điều rất cần thiết Trước đây, việc đo nồng độ iCa rất khó khăn, đòi hỏi trang thiết bị đắt tiền, thời gian lâu, độ chính xác thấp và yêu cầu các biện pháp xử lý mẫu đặc biệt Tuy nhiên, trong những năm gần đây tại nhiều khoa xét nghiê ̣m, iCa huyết thanh được định lượng bằng phương pháp đo điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion Điều này đã mở ra những khả năng chẩn đoán chính xác các bệnh lý liên quan tới rối loạn canxi, đặc biệt là canxi ở dạng ion hóa
1.1.3 Điều hòa nồng độ canxi trong cơ thể
Cân bằng nồ ng độ canxi trong máu được điều hòa chủ yếu nhờ hệ thống nội tiết thông qua 3 cơ chế khác nhau, đó là sự hấp thu ta ̣i đường ruột, sự tái hấp thu ở ống thận và sự tái hấp thu ta ̣i xương Các yếu tố tham gia các quá trình này bao gồm hormon tuyến cận giáp và thu ̣ thể của nó, 1,25- dihydroxy vitamin D (1,25(OH)2D) và thu ̣ thể vitamin D cũng như nồ ng đô ̣ iCa và thu ̣ thể
củ a canxi [33] iCa điều chỉnh cân bằng nô ̣i môi bằng cách gắn với thụ thể của
nó trên màng tế bào Nồng độ iCa huyết thanh được kiểm soát bằng cơ chế điều
hòa ngược âm tính phụ thuộc nồ ng đô ̣ iCa, phospho, hormon parathyroid hormon (PTH), calcitriol, calcitonin và vitamin D Các cơ chế điều hòa này giúp duy trì nồng độ iCa huyết thanh ở nồng độ ổn định [40] Hormon tuyến cận giáp (PTH) có tác dụng làm tăng iCa huyết thanh, điều hòa canxi tại xương (Hình 1.3) thông qua việc giúp tái hấp thu canxi từ xương, tăng khả năng tái hấp thu canxi và bài tiết phospho tại thận, tăng hoạt đô ̣ng của enzym 1-α- hydroxylase chuyển 25- hydroxy vitamin D (25OHD) thành chất chuyển hóa hoạt tính là 1,25(OH)2D (calcitriol) và tăng hấp thu canxi ở ruột Bên cạnh PTH, calcitonin là một hormon tiết ra ở tế bào cạnh nang của tuyến giáp hay còn được gọi là tế bào C, có tác dụng đối lập với PTH, làm giảm nồng độ iCa trong huyết tương [38, 40]
Trang 14Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
Hi ̀nh 1.3: Điều hòa nồng đô ̣ canxi ion hóa huyết thanh của hormon PTH
[25]
Trong các loại protein huyết thanh, canxi chủ yếu gắn với albumin tại 30
vị trí liên kết trên phân tử này Khi liên kết, phức hệ canxi-albumin hoạt động như một hệ đệm canxi giúp duy trì nồng độ iCa ổn định iCa ở trạng thái cân bằng với canxi liên kết protein nên nếu có sự thay đổi về nồng độ iCa thì sẽ có
sự giải phóng đồng thời từ một trong số 30 vị trí liên kết của canxi trên phân tử albumin Hệ đệm iCa/canxi-albumin có độ nhạy cao với pH, những thay đổi về
độ pH làm thay đổi điện tích trên các nhóm chức của axit amin trên albumin, dẫn đến thay đổi số lượng canxi ion hóa hay iCa Trong trường hợp pH tăng như nhiễm kiềm đường hô hấp gây ra do tăng thông khí thì sẽ dẫn đến iCa bị giảm do albumin tích điê ̣n âm, nên tăng lươ ̣ng ion canxi gắn albumin và ngược lại khi pH giảm sẽ làm cho nồng độ iCa tăng [8]
Trang 15Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
1.1.4 Ý nghĩa lâm sàng của canxi
Nồng độ canxi trong máu luôn được điều hòa bằng những yếu tố như hormon theo cơ chế điều hòa ngược nên nó luôn được giữ ở mức ổn định Tuy nhiên, trong một số trường hợp sinh lý hay bệnh lý dẫn đến những rối loạn chuyển hóa canxi, được chia ra: tăng canxi máu và hạ canxi máu [5] Các bất thường về nồng đô ̣ canxi huyết thường gă ̣p ở bê ̣nh nhân bi ̣ bê ̣nh cấp tính Hạ canxi máu và tăng canxi máu là các thuật ngữ được sử dụng trên lâm sàng để chỉ nồng độ canxi huyết thanh thấp hay cao bất thường Tăng canxi máu hay hạ canxi máu đều cho thấy sự rối loạn nghiêm trọng của sự cân bằng nội môi canxi Mặc dù cơ chế lâm sàng rất phức tạp, rối loạn cân bằng nội môi canxi có thể được phân loại dựa trên ba cơ chế chính của cân bằng nồng đô ̣ canxi máu [33] Dưới đây trình bày một số bệnh lý rối loạn canxi huyết thường gặp
1.1.4.1 Tăng canxi máu
Tỷ lê ̣ tăng canxi máu chiếm từ 1% đến 2% dân số nói chung và 15% trong số bệnh nhân điều tri ̣ nô ̣i trú [20] Khoảng 90% các trường hợp là tăng canxi máu thứ phát sau cường câ ̣n giáp nguyên phát và tăng canxi máu liên quan đến bê ̣nh lý ác tính Ở người trưởng thành, tỷ lê ̣ tăng canxi máu trong
bệnh cường câ ̣n giáp nguyên phát dao đô ̣ng từ 0,2% đến 0,8%, tăng theo tuổi
và chiếm khoảng 2% trong số các bê ̣nh ung thư, đối với nhi khoa thì tỉ lê ̣ này
là 0,4% đến 1,3% Ở bê ̣nh nhân điều tri ̣ nô ̣i trú thì tỷ lê ̣ nhập viện vì cường câ ̣n giáp nguyên phát là 60% và bê ̣nh lý ác tính là 30-40% (Hình 5) [20, 32] Nguyên nhân chính gây tăng canxi máu là do hormon tuyến câ ̣n giáp dư thừa hoặc do lượng canxi đầu vào lớn hơn lượng canxi đào thải ra ngoài
Các nguyên nhân gây tăng canxi máu khác như suy thâ ̣n, nhiễm đô ̣c, nhiễm kim loại nă ̣ng như lithium, các thuốc như Tamoxifen, Thiazide,… mô ̣t số nguyên nhân hiếm gặp như tăng canxi máu gia đình, ngộ độc vitamin D Trong đó, dùng thuốc lợi tiểu Thiazid gây tăng bài tiết canxi ở quai Henle dẫn đến sự phát triển của sỏi thâ ̣n và ung thư thâ ̣n [7] Tăng canxi máu thường dẫn đến các triê ̣u chứng phổ biến là mê ̣t mỏi, khó chi ̣u, chán ăn, buồn nôn, nôn, đau
bụng và táo bón Ngoài ra do ức chế khử cực thần kinh cơ và cơ tim nên xuất hiện yếu cơ và rối loa ̣n dẫn truyền ở tim Mô ̣t nguyên nhân khác gây tăng canxi
máu có thể do viê ̣c hủy xương nhanh gây loãng xương, biểu hiê ̣n bằng đau mỏi
Trang 16Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
xương, đo mâ ̣t đô ̣ xương thấy t-score nhỏ hơn -2,5 [2, 3] Tăng canxi máu tiên
lươ ̣ng tốt nếu xảy ra sau mô ̣t rối loa ̣n lành tính và tiên lượng kém nếu khi nguyên nhân là thứ phát như khối u và những trường hơ ̣p này cần phải nhâ ̣p viện thường xuyên [5, 32]
− Thiếu vitamin D hoă ̣c kháng vitamin D
− Suy tuyến câ ̣n giáp: tự miễn hoă ̣c sau phẫu thuâ ̣t
− Kháng PTH
− Bê ̣nh thâ ̣n hoă ̣c bê ̣nh gan giai đoa ̣n cuối
− Thiếu hoă ̣c tăng cao magie máu
− Truyền phosphat hoă ̣c truyền máu
− Thuốc: biphosphonate tiêm tĩnh ma ̣ch liều cao, thuốc điều tri ̣ ung thư, thuố c kháng nấm, kháng sinh, thuố c chố ng co giâ ̣t, thuốc lơ ̣i tiểu quai
− Hô ̣i chứng Fanconi
− Sốc nhiễm trùng hoă ̣c vết bỏng nă ̣ng
− Giảm albumin máu
Thận có vai trò quan tro ̣ng trong viê ̣c điều hòa nồng đô ̣ canxi máu thông qua sự tái hấp thu, bài tiết canxi qua ống thâ ̣n và tiết men 1 α – hydrolase chuyển 25OHD thành da ̣ng hoa ̣t đô ̣ng là 1,25(OH)2D Ở bê ̣nh nhân mắc bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n
tính, do giảm chức năng bài tiết, tái hấp thu của ống thâ ̣n cũng như chức năng
nội tiết dẫn đến hiê ̣n tươ ̣ng cường câ ̣n giáp tra ̣ng thứ phát gây ra rối loa ̣n cân bằng canxi trong máu xảy ra gây tăng tỷ lê ̣ mắc bê ̣nh và tử vong Trên bê ̣nh nhân mắ c bệnh thâ ̣n ma ̣n, tình tra ̣ng tăng yếu tố tăng trưởng Fibroblast 23 gây ức chế enzym 1 α- hydrolase làm giảm chuyển 25OHD thành 1,25(OH)2D dẫn đến giảm hấp thu canxi ở ruô ̣t, giảm tái hấp thu canxi từ xương và ống thâ ̣n, từ
Trang 17Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
đó làm giảm nồng đô ̣ canxi máu [25, 32, 48, 51] Có bằng chứng cho thấy các protein liên kết chặt chẽ của tế bào biểu mô ruô ̣t bi ̣ thay đổi trong bê ̣nh nhân suy thận ma ̣n dẫn đến ảnh hưởng đến sự vâ ̣n chuyển nô ̣i bào của tế bào [50]
Bệnh nhân mắc bê ̣nh thâ ̣n ma ̣n tính bi ̣ rối loa ̣n chuyển hóa muối khoáng (CKD – MBD) – yếu tố dự báo tỷ lê ̣ mắc bê ̣nh và tỷ lê ̣ tử vong, thường xảy ra ở giai đoa ̣n sớm của suy thâ ̣n ma ̣n và nă ̣ng dần lên Bê ̣nh nhân có thể bi ̣ ha ̣ canxi máu dễ dẫn đến mất xương, loãng xương, tăng nguy cơ gãy xương, ngươ ̣c la ̣i, tăng canxi máu gây ra vôi hóa mô mềm, đô ̣ng ma ̣ch, van tim [8, 9, 25] Một nguyên nhân khác gây ra tình trạng rối loạn canxi máu là việc mất protein qua đường nước tiểu trong một số nguyên nhân gây ra bệnh lý thận mạn tính như suy thận cấp, mạn, hội chứng thận hư, viêm cầu thận cấp…Năm 2012, theo KDIGO chia thành 5 giai đoa ̣n suy thâ ̣n ma ̣n, trong đó giai đoa ̣n 3 tách thành 3a và 3b và sự thay đổi nồ ng đô ̣ canxi máu được phát hiê ̣n bắt đầu từ giai đoa ̣n sớm của bê ̣nh [20]
Canxi gắn vớ i albumin là mô ̣t da ̣ng của canxi trong máu, nồng đô ̣ albumin biến thiên có ảnh hưởng đến nồng đô ̣ canxi trong máu Trong trường
hợp toan máu, làm albumin tích điê ̣n dương, dẫn đến giảm gắn với canxi gây
ra tình tra ̣ng tăng canxi máu và ngươ ̣c la ̣i với pH máu giảm Một số bệnh lý thường gây giảm albumin máu như bệnh lý về gan, bệnh lý về thận, ngoài ra, một số tình trạng nhiễm trùng, bỏng cũng gây giảm albumin máu Suy dinh dưỡng cũng là một nguyên nhân quan trọng gây giảm albumin máu Gan là cơ quan chịu trách nhiệm của sản xuất albumin chính trong cơ thể, việc giảm tổng hợp albumin có thể dẫn đến việc giảm gắn canxi với albumin, tuy nhiên không phải trường hợp nào cũng gây ra rối loạn canxi máu do cơ thể tự thích nghi, điều hòa nồng độ iCa trong máu để không gây ra biểu hiện nào trên lâm sàng Khi cơ thể mất albumin máu qua đường niệu trong các bệnh lý về thận như suy thận cấp, mạn, hội chứng thận hư, viêm cầu thận cấp….dẫn đến canxi mất theo albumin ra ngoài cơ thể Ngoài ra, trong trường hợp bệnh nhân có sang chấn, stress nặng, nhiễm trùng nặng, bỏng cũng dẫn đến tình trạng giảm protein do
sử dụng nhiều để tổng hợp các protein pha cấp điều này cũng dẫn đến giảm một phần albumin máu [8, 18]
Trang 18Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
1.2 Phương pháp đo điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c canxi ion trực tiếp
Hiện nay, định lượng iCa được chỉ định rất hạn chế tại một số khoa chăm sóc đặc biệt như khoa ICU, khoa cấp cứu hay phòng mổ Duy trì cân bằng nô ̣i môi iCa máu đóng vai trò quan trọng trong việc quản lý các bệnh nhân nặng
Do đó, để định lượng iCa, mẫu máu cần được thu thập, xử lý đúng cách và phân tích một cách chính xác Một trong những lý do mà định lượng iCa không đươ ̣c chỉ định xét nghiệm thường quy đó là yêu cầu về việc thu thập và bảo quản mẫu máu đòi hỏi chính xác hơn nhiều so với xét nghiệm định lượng CaT [25] Sự ra đời của phương pháp đo điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion đã cho phép phân tích nhanh chóng, trực tiếp iCa trong huyết thanh, kết quả chính xác và giảm thời gian phân tích
1.2.1 Khái niệm chung
Phương pháp đo nồng độ canxi ion hóa huyết thanh đầu tiên được báo cáo vào năm 1967 bởi Ross và được dựa trên trao đổi ion phospho hữu cơ Phương pháp điện cực chọn lọc ion sau đó được cải tiến và tính chọn lọc của
nó được hoàn thiện trong khoảng thời gian từ năm 1967 đến 1975 [15, 39] Sau đó, Moore đã nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng phép đo canxi ion và nhận thấy rằng phương pháp điện cực chọn lọc ion chỉ phản ứng với các ion canxi tự do trong huyết thanh chứ không phải các ion canxi liên kết với protein và canxi phức hợp Phương pháp điện cực chọn lọc ion là một phương pháp phân tích điện hóa hiện đại, phương pháp sử dụng các điện cực chọn lọc ion – các điện cực màng tạo ra một điện thế nhờ sự chuyển động của ion có trong dung dịch
và thể hiện mức độ chọn lọc nhất định đối với ion Điện thế có thể được đo bằng dụng cụ đo pH hoặc Vôn kế Điện cực chọn lọc ion đầu tiên là điện cực thủy tinh được phát minh bởi Cremer in 1906 [27] Liên đoàn Quốc tế về hóa học lâm sàng (IFCC) đã có những khuyến cáo về quy trình xét nghiệm ISE trực tiếp đố i vớ i ion canxi [11] Có hai phương pháp xác đi ̣nh nồ ng đô ̣ iCa là phương pháp đo bằng ISE trực tiếp và gián tiếp, trong đó phương pháp đo trực tiếp không đòi hỏi pha loãng mẫu bê ̣nh phẩm, đo lường ion canxi trong huyết tương
vì vâ ̣y các chất hòa tan như lipid, protein khi tăng cao không ảnh hưởng đến phép đo Phương pháp gián tiếp chỉ cần mô ̣t lượng mẫu nhỏ, khi pha loãng dựa trên thể tích toàn phần của mẫu vì thế khi protein hay lipid máu cao sẽ ảnh hưởng đến kết quả [6]
Trang 19Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
1.2.2 Cấu tạo chung
Cấu tạo chung bao gồm điện cực chọn lọc ion và màng chọn lọc ion (Hình 1.4) [15, 19] Điện cực chọn lọc ion và màng chọn lọc nằm trên cùng một trục, để đo được canxi ion hó a người ta cần dùng điện cực canxi Điện cực canxi
là một điện cực màng được sử dụng để đo sự có mặt của ion canxi có trong mẫu chất lỏng Màng là thiết bị cảm ứng, có tính chọn lọc do nó chỉ cho phép ion canxi bám trên bề mặt của vỏ điện cực Có nhiều loại màng như màng thủy tinh, màng chất rắn, chất lỏng và màng chất liệu tổng hợp [8, 11] Màng chọn lọc ion canxi có gắn chất mang ion canxi, do đó chỉ ion canxi được phép đi qua màng, còn các ion khác thì không thể đi qua
Hi ̀nh 1.4: Sơ đồ cấu ta ̣o của điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion canxi [15, 19] 1.2.3 Nguyên lí hoạt động
Nguyên lý hoạt động của điện cực chọn lọc ion phụ thuộc vào tương tác giữa các ion chuyển động tự do trong mẫu với màng vật liệu làm cảm biến Màng chọn lọc ion có tác dụng ngăn cách giữa dung dịch mẫu và dung dịch chất điện ly, trong đó nồng độ của ion đó trong dung dịch chất điện ly đã biết còn nồng độ trong dung dịch mẫu là chưa biết Màng chọn lọc ion có cấu trúc đặc biệt, nó phản ứng với những chất nằm trong dung dịch chất điện ly mà có mặt trong dung dịch mẫu Màng hoạt động như một bộ trao đổi ion Thế củ a điê ̣n cực chuẩn đã biết và điê ̣n cực cần đo là chưa biết Để xác định giá trị chênh lệch điện thế giữa bên trong và bên ngoài màng người ta sử dụng một dụng cụ
đo điện thế Galvanic với các điện cực Calomel (Hình 1.5) Bằng cách sử dụng
Trang 20Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
một dung dịch chuẩn, một đường kết nối giữa mẫu và điện cực được thiết lập, thế chuyển tiếp được hình thành tại lớp tiếp giáp giữa mẫu và dung dịch chuẩn
Từ đó tính toán được nồng đô ̣ trong dung di ̣ch mẫu [6, 19, 31] Điện cực chọn lọc ion cũng bị ảnh hưởng bởi nồng độ của ion đo được Tuy nhiên, điện cực chuẩn được xây dựng để tạo ra điện thế mà không phụ thuộc vào thành phần mẫu cần đo Sự chênh lệch của các điện thế này được ghi lại bằng vôn kế, có thể mô tả bằng phương trình Nernst:
n: số electron trao đổi
Hi ̀nh 1.5: Sơ đồ cấu ta ̣o của phương pháp đo điê ̣n cực cho ̣n lo ̣c ion [6]
Trang 21Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
1.3 Phương pha ́ p tính bằng công thức
Hiện nay, chỉ số canxi ion hóa là mô ̣t chỉ số quan tro ̣ng và tốt nhất để đánh giá tình tra ̣ng canxi hoa ̣t đô ̣ng trong cơ thể Các tài liệu y khoa đã nghiên cứu đưa ra các công thức dự đoán nồng độ iCa trong cơ thể kể từ năm 1935 Phương pháp hiê ̣u quả nhất để đi ̣nh lượng iCa là phương pháp đo bằng ISE trực tiếp Tuy nhiên, phương pháp này có những nhươ ̣c điểm bao gồm chi phí cao, quy trình nghiêm ngă ̣t trong kỹ thuâ ̣t xử lý và lấy mẫu vì vâ ̣y ở rất nhiều phòng thí nghiê ̣m với những điều kiê ̣n không phù hơ ̣p, không thể thực hiê ̣n đi ̣nh lươ ̣ng iCa bằng phương pháp này Do đó, các bác sĩ lâm sàng đã đưa ra các công thức
tính toán để nhằm dự đoán về nồng đô ̣ iCa trong máu [34] Mô ̣t số công thức đươ ̣c sử du ̣ng rô ̣ng rãi và xem như là mô ̣t phương pháp thay thế để chẩn đoán
tình tra ̣ng canxi hoa ̣t đô ̣ng trong máu
Các công thức được sử dụng để dự đoán iCa dựa trên các thông số có thể đo được là canxi toàn phần, protein toàn phần, albumin huyết thanh và creatinin máu Trong đó, đi ̣nh lươ ̣ng canxi toàn phần hiê ̣n nay sử du ̣ng các phương pháp là đo mâ ̣t đô ̣ quang, phương pháp hấp thu ̣ nguyên tử, phương pháp đo điểm cuối [5] Protein toàn phần được đo bằng phương pháp biuret trên máy phân tích tự động và albumin máu được phân tích bằng phương pháp sử dụng chất chỉ thị pH đỏ tía bromocresol [26]
Các công thức tính gián tiếp canxi ion hóa được tìm kiếm trên các bài
báo công bố trước đây Các công thức đã công bố bị hạn chế do chỉ xây dựng dựa trên cơ sở dữ liệu của người bệnh trưởng thành và không tính riêng cho từng bệnh cụ thể Tính đến nay, có 8 công thứ c đươ ̣c sử du ̣ng trong nghiên cứu (Bảng 4), trong đó, công thức 1 và 2 thường đang được các bác sĩ lâm sàng sử
dụng ta ̣i Bê ̣nh viê ̣n Ba ̣ch Mai hiện nay
Ba ̉ ng 1.1: Các công thức sử du ̣ng tính canxi ion hóa huyết thanh Công
Trang 22Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
4 Potgen, 1976
𝑖𝐶𝑎 = 0,25 × (24 × 𝐶𝑎𝑇 −(𝐾 3⁄ )) (𝐾 + 6)⁄
CKI-EPI 2009 [28]
1.4 Ca ́ c nghiên cứu trên thế giới và ở Viê ̣t Nam
Mặc dù trên thế giới viê ̣c sử du ̣ng ISE trực tiếp để đo nồng đô ̣ iCa là phổ biến hơn nhiều so vớ i ở Viê ̣t Nam, tuy nhiên các nhà nghiên cứu vẫn đưa ra
một số báo cáo đánh giá về đô ̣ chính xác của các công thức tính toán so với phương pháp đo ISE trực tiếp
Năm 2004, Dickerson và cô ̣ng sự đã đánh giá trên 100 đối tượng bê ̣nh nhân đa chấn thương nă ̣ng đươ ̣c hỗ trơ ̣ dinh dưỡng, kết luâ ̣n rằng các công thức
dự đoán ha ̣ canxi máu ở nhóm đối tượng này thiếu đô ̣ nha ̣y và thường cho tỷ lê ̣
âm tính giả không chấp nhâ ̣n đươ ̣c và đưa ra khuyến nghi ̣ không nên sử du ̣ng
các công thức dự đoán nồng đô ̣ iCa mà nên đo bằng ISE trực tiếp trên nhóm đối tươ ̣ng này [14] Năm 2005, Byrnes và cô ̣ng sự kết luâ ̣n trên đối tượng nă ̣ng sau mổ, các công thức hiê ̣u chỉnh CaT không thể phân loa ̣i chính xác ở 38% trường hợp [13] Năm 2005, Sava và cô ̣ng sự đã kết luâ ̣n có sự khác biê ̣t có ý nghĩa thống kê kết quả giữa đo bằng ISE trực tiếp và công thức tính iCa [37], kết quả giống với nghiên cứu của Mir và cô ̣ng sự năm 2016 trên đối tượng có nồ ng độ albumin khác nhau [30] và tương tự như nghiên cứu của Jafri và cô ̣ng
Trang 23Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
53% và 85% trên đối tươ ̣ng bê ̣nh nhân suy thâ ̣n ma ̣n tính [23] Năm 2013, nghiên cứ u trên 50 đối tươ ̣ng trẻ sơ sinh, Basseto và cô ̣ng sự kết luâ ̣n không có
sự khác biê ̣t giữa 2 phương pháp này [9] Năm 2016, Antonio đưa ra 3 công thứ c mới có khả năng dự đoán chính xác hơn các công thức đưa ra trước đó, giú p dự đoán ban đầu nhưng không thể thay thế hoàn toàn phương pháp ISE trực tiếp ở những bê ̣nh nhân điều tri ̣ nô ̣i trú [29]
Như vâ ̣y, các nghiên cứu hiê ̣n nay trên thế giới vẫn chưa có sự thống nhất về việc sử du ̣ng công thức nào trên đối tượng bê ̣nh nhân nào mă ̣c dù có nhiều nghiên cứ u đưa ra các công thức mới nhằm tăng đô ̣ chính xác dự đoán nồ ng độ iCa trên tất cả đối tượng bê ̣nh nhân nói chung và trên các đối tượng riêng như bê ̣nh nhân nă ̣ng, bê ̣nh nhân suy thâ ̣n hay bê ̣nh nhân có thay đổi nồng
đô ̣ albumin Ở Viê ̣t Nam, viê ̣c sử du ̣ng máy đo ISE trực tiếp là chưa phổ biến, tuy vậy chưa có nghiên cứu đánh giá viê ̣c sử du ̣ng công thức tính toán thay cho việc đo bằng ISE trực tiếp trong thực hành lâm sàng, tuy vâ ̣y, hiê ̣n nay ta ̣i các
cơ sở y tế tuyến dưới trung ương, mô ̣t số phòng thí nghiê ̣m tư nhân chưa có điều kiê ̣n đo nồng đô ̣ iCa bằng ISE trực tiếp vẫn sử du ̣ng các công thức để dự đoán Chính vì vâ ̣y, nghiên cứu này là cần thiết để đánh giá đô ̣ chính xác của
các công thức dự đoán trên đối tươ ̣ng người Viê ̣t Nam
Trang 24Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tươ ̣ng nghiên cứu
Các bệnh nhân (140) được lựa chọn vào nghiên cứu theo phương pháp chọn mẫu thuâ ̣n tiê ̣n từ tháng 6 năm 2018 đến tháng 12 năm 2018 tại Khoa Hóa sinh, Bệnh viện Bạch Mai Các bệnh nhân này được lựa chọn về ba nhóm nghiên cứu là bệnh thận mạn tính (nhóm 2), giảm albumin máu (nhóm 3) và nhóm chứng (nhóm 1) với các tiêu chuẩn lựa chọn và loại trừ dưới đây:
Tiêu chuẩn lựa chọn
− Bệnh nhân từ độ tuổi 18 đến 80 tuổi
− Được làm xét nghiệm hóa sinh bao gồm nồng độ canxi ion hóa, canxi toàn phần, albumin máu, protein máu và creatinin máu ta ̣i khoa Hóa sinh,
Bệnh viê ̣n Ba ̣ch Mai
− Bê ̣nh nhân có mức lo ̣c cầu thâ ̣n giảm < 90 ml/phút/1,73m2 được xếp
vào nhóm 2
− Bê ̣nh nhân có giảm albumin máu < 35g/L được xếp vào nhóm 3
Tiêu chuẩn loại trừ
− Bệnh nhân không được làm xét nghiệm đầy đủ các chỉ số trên
− Bê ̣nh nhân thuô ̣c các khoa điều tri ̣ hồi sức cấp cứu, hồi sức tích cực, sau phẫu thuật
2.2 Phương pha ́ p nghiên cứu
2.2.1 Thiết kế nghiên cứu
Nghiên cứu mô hình hỗn hợp từ tháng 6 năm 2018 đến tháng 12 năm
2018
2.2.2 Các chỉ số nghiên cứu
Ba ̉ ng 2.1: Khoảng tham chiếu của canxi ion hóa, canxi toàn phần, protein
toa ̀n phần, albumin và creatinin trong máu [1]
Mư ́ c đô ̣
Thấp Trung bi ̀nh Cao
Canxi ion hó a (mmol/L) < 1,17 1,17 – 1,29 ≥ 1,29 Canxi toàn phần
Protein toàn phần (g/L) < 66 66 – 87 ≥ 87
Chi ̉ số
Trang 25Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
Ba ̉ ng 2.2: Phân đô ̣ suy thâ ̣n theo KDIGO 2012 [16]
Giai đoa ̣n Mư ́ c lo ̣c cầu thâ ̣n (ml/phút/1,73m 2 )
2.2.3 Phương pháp thu thập số liệu
Các thông tin chung được thu thập tại phần mềm quản lý bê ̣nh nhân; các xét nghiệm hóa sinh được thực hiện và thu thập dữ liệu tại Khoa hóa sinh, Bệnh viện Ba ̣ch Mai Công thức tính toán iCa được sử dụng trong nghiên cứu này được trình bày ở bảng 2.3
Ba ̉ ng 2.3: Các công thức sử du ̣ng tính canxi ion hóa huyết thanh Công
CKI-EPI 2009 [16, 28]
Trang 26Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
Ba ̉ ng 2.4: Công thức tính mức lo ̣c cầu thâ ̣n theo CKD-EPI 2009 [16] Giơ ́ i Creatinin (µmol/L) Công thư ́ c
Nữ ≤ 62 𝑒𝐺𝑅𝐹 = 144 × (𝐶𝑟𝑒 × 0,0113 0,7)⁄
−0,329
× 0,993𝑡𝑢ô ̉𝑖
> 62 𝑒𝐺𝑅𝐹 = 144 × (𝐶𝑟𝑒 × 0,0113 0,7)⁄ −1,209 × 0,993𝑡𝑢ô ̉𝑖Nam ≤ 80 𝑒𝐺𝑅𝐹 = 141 × (𝐶𝑟𝑒 × 0,0113 0,9)⁄ −0,411 × 0,993𝑡𝑢ô ̉𝑖
> 80 𝑒𝐺𝑅𝐹 = 141 × (𝐶𝑟𝑒 × 0,0113 0,9)⁄ −1,209 × 0,993𝑡𝑢ô ̉𝑖
2.2.4 Phương tiện nghiên cứu
Trang thiết bị
− Máy phân tích điện giải tự đô ̣ng 9180, hãng Roche (Thụy Sĩ) sử du ̣ng để đo nồng đô ̣ iCa bằng phương pháp ISE trực tiếp (hình 5.2)
Hi ̀nh 2.1 Máy phân tích điê ̣n giải 9180 hãng Roche
− Hệ thống máy phân tích hóa sinh COBAS 8000, hãng Roche (Thụy sĩ)
Trang 27Copyright @ School of Medicine and Pharmacy, VNU
Hình 2.2 Hệ thống máy phân tích hóa sinh Roche (COBAS 8000) Hóa chất
− Hóa chất định lượng canxi toàn phần, canxi ion hóa, protein toàn phần, albumin, creatinin của công ty Roche (Thụy Sĩ)
− Huyết thanh kiểm tra mức 1 và mức 2 của Randox
− Ống nghiệm chống đông bằng Heparin, nước chất, nước RO
Nguyên lý của phương pháp phân tích
− Canxi toàn phần được định lượng theo phương pháp màu thông qua phương trình:
𝐶𝑎 2+ + 𝑜 − 𝑐𝑟𝑒𝑠𝑜𝑙𝑝ℎ𝑡𝑎𝑙𝑒𝑖𝑛 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑙𝑒𝑥𝑜𝑛𝑒 𝑝𝐻 𝑘𝑖ề𝑚→ 𝑝ℎứ𝑐 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑖𝑢𝑚 − 𝐶𝑃𝐶
− Canxi ion hóa được đo bằng phương pháp ISE trực tiếp
− Albumin định lượng theo phương pháp so màu:
𝐴𝑙𝑏𝑢𝑚𝑖𝑛 + 𝐵𝐶𝐺𝑝𝐻=4.1→ 𝐴𝑙𝑏𝑢𝑚𝑖𝑛 𝐵𝐶𝐺 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑙𝑒𝑥
− Protein toàn phần được định lượng theo phương pháp so màu dựa trên nguyên tắc phản ứng Biure Độ đậm của màu tỷ lệ với nồng độ protein trong mẫu