Phương pháp nhuộm giemsa – chẩn đoán ký sinh trùng đường máu

PHƯƠNG PHÁP NHUỘM GIEMSA – CHẨN ĐOÁN KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG MÁU Ứngdụng Tìmkýsinhtrùngđườngmáu: Lêdạngtrùng bò, chó; Biêntrùng bò; Theileria bò; Tiênmaotrùng Dụngcụchuẩnbị Độngvậtthínghiệmđểlấymáu Xi-lanh, kim, daomổ/kéo, panh Phiếnkínhsạch, lamen, KHV, dầusoikính, giáphơiphiếnkính ThuốcnhuộmGiemsa, Cồntuyệtđốihoặc 90° (cồnMetanol) Tiếnhành a Cáchlấymáu i Nênlấymáukhi vậtbịsốt (bệnhTheileriathìlấymáusaungàythứ từkhi vậtsốt) ii TrướcvàsaukhilấymáuphảisáttrùngnơilấymáubằngEtehoặccồn 70° iii Lấymáutĩnhmạch tai đốivớitrâu, bò, ngựa, lợn, thỏ; lấy cánhđốivớigiacầm; Vớitrâu, bò, dêcừucóthểlấy tĩnhmạchcổ; Vớichuộtbạchcóthểlấymáubằngcáchcắtchópđi b Dànmáu i Lấymộtgiọtmáuđườngkínhkhoảng – 4mm nhỏlênbềmặtphiếnkínhcáchmộtđầuchừng0,5cm (trườnghợpkínhmàithìcầnxácđịnhchínhxácmặtkính) ii Dùngmépmộtlákínhphẳngđặt phíatráigiọtmáu, đẩyngượctrênphiếnkínhvớigócgiữaphiếnkínhvàlákínhkhoảng 40 - 45° sauđóđểmáukhơtựnhiên iii Cốđịnhtiêubảnbằngcồntuyệtđốitrongkhoảng – phút iv Dùngbútmựcviếtnhãnlênphiếnkính c Nhuộmtiêubảnđãphếtkính i NhỏthuốcnhuộmGiemsa (cầnphalỗngthuốcnhuộmtheochỉdẫncủanhàsảnxuấtnếucầnthiết) lênbềmặttiêubảnđãđượcphiếtkính Để 15 – 20 phút (Giemsađặc) 1h (Giemsalỗng) d Rửa i Dùngnướccấttrungtínhđểrửa Khơngđổmạnhnước, khơnggiộinướctrựctiếpvàochỗphiếtkính ii Đểtiêubảnkhơtựnhiên, tránhbụi, nắng Kiểmtratiêubảnphiếtkính Sửdụngkínhhiểnvivớivậtkính 40x 100x kếthợpvớidầusoikínhđểkiểmtravàtìmkýsinhtrùng Thaotácphiếtkính