NGHIÊN cứu TÍNH KHÁNG THUỐC của VI KHUẨN đối với các THUỐC CHỐNG LAO HÀNG 1 ở BỆNH NHÂN LAO PHỔI tại BỆNH VIỆN PHỔI TRUNG ƯƠNG

BỘ Y TẾ BỆNH VIỆN PHỔI TRUNG ƯƠNG ĐỀ CƯƠNG NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ NGHIÊN CỨU TÍNH KHÁNG THUỐC CỦA VI KHUẨN ĐỐI VỚI CÁC THUỐC CHỐNG LAO HÀNG Ở BỆNH NHÂN LAO PHỔI TẠI BỆNH VIỆN PHỔI TRUNG ƯƠNG Tên chủ nhiệm đề tài: TS Nguyễn Văn Hưng HÀ NỘI, THÁNG NĂM 2016 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .3 Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Tình hình bệnh lao 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Tại Việt Nam 1.1.3 Tình hình bệnh lao kháng thuốc 1.2 Các thuốc chống lao 1.2.1 Rifampycin: .10 1.2.2 Isoniazid .10 1.2.3 Pyrazynamid 10 1.2.4 Streptomycin 11 1.2.5 Ethambutol 11 1.3 Vi khuẩn lao tính kháng thuốc 11 1.3.1 Vi khuẩn lao .11 1.3.2 Định nghĩa kháng thuốc .12 1.3.3 Cơ chế kháng thuốc vi khuẩn 12 1.3.4 Phân loại kháng thuốc 13 1.4 Các kỹ thuật chẩn đoán vi khuẩn lao kháng PZA 13 1.4.1 Phương pháp xác định kiểu gen 14 1.4.2 Phương pháp tìm enzyme pyrazinamidase 14 1.4.3 Phương pháp làm kháng sinh đồ vi khuẩn lao PZA môi trường lỏng 14 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 2.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.1.1 Bệnh nhân nghiên cứu .15 2.1.2 Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân .15 2.1.3 Tiêu chuẩn chẩn đoán lao phổi AFB(+) .15 2.1.4 Các nhóm bệnh nhân nghiên cứu .15 2.1.5 Tiêu chuẩn loại trừ .16 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 16 2.3 Thiết kế nghiên cứu 16 2.4 Cỡ mẫu chọn mẫu .16 2.5 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu xét nghiệm vi sinh 16 2.5.1 Xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm Zielh - Neelsen 17 2.5.2 Xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm huỳnh quang đèn LED .17 2.5.3 Nuôi cấy đờm định danh vi khuẩn lao môi trường lỏng .19 2.5.4 Kháng sinh đồ vi khuẩn lao với thuốc SM, RMP, INH, EMP môi trường lỏng hệ thống BACTEC - MGIT 20 2.5.5 Kháng sinh đồ vi khuẩn lao môi trường lỏng với PZA hệ thống BACTEC - MGIT 20 2.6 Phương pháp thu thập số liệu 21 2.7 Nội dung nghiên cứu .21 2.7.1 Tình hình kháng thuốc bệnh nhân nghiên cứu 21 2.7.2 So sánh tính kháng thuốc vi khuẩn PZA nhóm bệnh nhân 21 2.8 Kỹ thuật xử lý phân tích số liệu 22 2.9 Kế hoạch nghiên cứu .22 2.9.1 Nhân lực .22 2.9.2 Kế hoạch nghiên cứu 22 2.9.3 Dự kiến tổng kinh phí 22 2.10 Đạo đức nghiên cứu .22 Chương 3: DỰ KIẾN KẾT QUẢ 23 3.1 Tình hình kháng thuốc vi khuẩn .23 3.2 So sánh tính kháng thuốc vi khuẩn PZA nhóm bệnh nhân 25 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tình hình dịch tễ bệnh lao Việt Nam năm 2014 Bảng 2.1 Nhận định kết theo quy định CTCLQG 17 Bảng 2.2 Nhận định kết xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm huỳnh quang đèn LED 18 Bảng 2.3 So sánh ghi kết xét nghiệm AFB phương pháp nhuộm 18 Bảng 2.4 Nồng độ thuốc chống lao môi trường MGIT 20 Bảng 3.1 Tỷ lệ kháng thuốc chung 23 Bảng 3.2 Tỷ lệ kháng riêng loại thuốc 23 Bảng 3.3 Tỷ lệ kháng đơn thuốc 23 Bảng 3.4 Đặc điểm kháng thuốc theo số lượng thuốc bị kháng 24 Bảng 3.5 Tỷ lệ kháng đa thuốc 24 Bảng 3.6 So sánh tỷ lệ kháng riêng R, H số đa kháng 24 Bảng 3.7 Mối liên quan kháng đa thuốc mức độ dương tính vi khuẩn 25 Bảng 3.8 Mối liên quan vi khuẩn kháng đa thuốc bệnh nhân lao có bệnh mãn tính phối hợp 25 Bảng 3.9 So sánh tỷ lệ kháng riêng PZA với thuốc khác 25 Bảng 3.10 Tỷ lệ kháng PZA phối hợp với loại thuốc 26 Bảng 3.11 Tỷ lệ kháng PZA phối hợp với kiểu kháng thuốc khác 26 Bảng 3.12 Tỷ lệ kháng PZA nhóm bệnh nhân lao phổi điều trị lại bệnh nhân đa kháng .26 Bảng 3.13 Tỷ lệ kháng PZA nhóm bệnh nhân đa kháng không đa kháng 27 Bảng 3.14 Tỷ lệ kháng PZA đơn kết hợp với thuốc khác .27 Bảng 3.15 Mối liên quan kháng PZA mức độ dương tính vi khuẩn.27 Bảng 3.16 Mối liên quan kháng PZA bệnh nhân lao có bệnh mãn tính phối hợp .27 CÁC CHỮ VIẾT TẮT AFB Acid - Fast - Bacilli (trực khuẩn kháng cồn kháng acid) AIDS Accquired Immuno Deficency Syndrome (Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải) CTGLQG .Chương trình chống lao quốc gia EMB(E) Ethambutol HIV Human Immunodeficiency Virus INH(H) Isoniazid MDR Multydrug-resistant (kháng đa thuốc) MTB .Mycobacterium Tuberculosis (vi khuẩn lao) PZA(Z) Pyrazinamid RMP(R) Rifampicin SM(S) .Streptomycin TCYTTG (WHO) Tổ chức Y tế giới (World Health Organization) ĐẶT VẤN ĐỀ Theo tổ chức y tế giới (TCYTTG - WHO Report 2015 - Global Tuberculosis Control) công tác chống lao giới đạt nhiều thành tựu đáng kể, xu hướng dịch tễ bệnh lao tồn cầu nói chung có chiều hướng giảm Mặc dù bệnh lao vấn đề sức khỏe cộng đồng tồn cầu Tình hình dịch tễ bệnh lao kháng thuốc có diễn biến phức tạp xuất hầu hết quốc gia [25] Việt Nam đánh giá quốc gia có cơng tác chống lao mạnh, hoạt động hiệu so với nước khu vực giới Trong thời gian qua công tác chống lao Việt Nam đạt thành cơng định, tình hình dịch tễ bệnh lao Việt Nam có chiều hướng thuyên giảm Tuy nhiên Việt Nam nước có gạnh nặng lao cao, đặc biệt nước có gánh nặng bệnh lao đa kháng thuốc cao giới[25][5] Mấy năm gần bệnh lao đa kháng thuốc CTCLQG thu dung, đưa vào quản lý, theo dõi điều trị, bước đầu thu kết tốt, tỷ lệ điều trị thành công cao đạt 70% Tuy nhiên người ta nhận thấy tỷ lệ năm sau giảm so với năm trước Điều cho thấy bệnh lao đa kháng thuốc thách thức lớn cơng tác chống lao[5] Nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn giúp nắm rõ tình hình kháng thuốc bệnh nhân lao nay, góp phần giúp cho việc kiểm sốt tình hình bệnh lao nói chung tình hình lao phổi kháng thuốc nói riêng tốt Pyrazinamid (PZA) thuốc chống lao mạnh sử dụng hầu hết công thức điều trị từ lao đến lao điều trị lại, bệnh lao trẻ em, bệnh lao phụ nữ mang thai… đặc biệt đưa vào công thức điều trị cho bệnh nhân lao đa kháng thuốc giai đoạn cơng trì[23] Việc sử dụng rộng rãi lâu dài PZA trình điều trị lao làm tăng khả kháng thuốc vi khuẩn thuốc Vì nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn lao PZA giai đoạn cần thiết Tại Việt Nam nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn lao phong phú Tuy nhiên có cơng trình nghiên cứu đầy đủ tính kháng thuốc vi khuẩn loại thuốc chống lao hàng đặc biệt tính kháng vi khuẩn lao PZA Chúng tiến hành nghiên cứu đề tài nhằm mục tiêu: Mô tả tình hình kháng thuốc hàng vi khuẩn lao bệnh nhân lao phổi điều trị bệnh viện phổi Trung ương Tìm hiểu tính kháng thuốc vi khuẩn PZA nhóm bệnh nhân lao mới, lao tái phát kháng đa thuốc Chương TỔNG QUAN 1.1 Tình hình bệnh lao 1.1.1 Trên giới Theo TCYTTG (WHO Report 2015 - Global Tuberculosis Control) xu hướng dịch tễ bệnh lao tồn cầu nói chung có chiều hướng giảm với tỷ lệ mắc giảm thời gian dài, tốc độ giảm khoảng 2%/năm Tuy nhiên bệnh lao tiếp tục vấn đề sức khỏe tồn cầu TCYTTG ước tính năm 2014 tồn cầu có khoảng 9,6 triệu người mắc lao, 13% số mắc lao có đồng nhiễm HIV Bệnh lao nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ bệnh nhiễm trùng với khoảng 1,3 triệu người tử vong lao, cao so với số bệnh nhân tử vong HIV/AIDS bệnh nhân lao đồng nhiễm HIV tử vong tính ngun nhân HIV Cũng theo ước tính TCYTTG năm 2014 có khoảng 510.000 phụ nữ 140.000 trẻ em tử vong lao[25] Khu vực Đơng Nam Á Tây Thái Bình Dương chiếm khoảng 58% số 9,6 triệu người mắc lao giới Trong Ấn Độ, Indonesia Trung Quốc lại có số lượng bệnh nhân lớn toàn cầu chiếm tỷ lệ 23%, 10%, 10%[25] Châu phi chiếm 28% tổng số 9,6 triệu người mắc lao khu vực có gánh nặng lao cao tồn cầu với tỷ lệ lao thể 281/100.000 dân cao gấp lần so với tỷ lệ trung bình giới (133/100.000 dân) [25] 1.1.2 Tại Việt Nam Cũng giống xu hướng chung tồn cầu, tình hình dịch tễ bệnh lao Việt Nam có chiều hướng giảm Tháng năm 2013 TCYTTG CTCLQG Việt Nam ước tính tỷ lệ mắc lao Việt Nam giai đoạn 19902010 giảm khoảng 4,6% hàng năm, tỷ lệ mắc giảm 2,6% hàng năm, tỷ lệ tử vong lao giảm 4,4% hàng năm[5] Mặc dù Việt Nam nước có gánh nặng bệnh lao cao, đứng thứ 14 20 nước có số người bệnh lao cao tồn cầu, đồng thời đứng thứ 11 số 20 nước có gánh nặng bệnh lao kháng đa thuốc cao giới[25][5] Ước tính tình hình dịch tễ bệnh lao Việt Nam năm 2014 sau [5]: Bảng 1.1 Tình hình dịch tễ bệnh lao Việt Nam năm 2014 Ước tính gánh nặng bệnh lao 2014 Tử vong lao (loại trừ HIV) Lao mắc thể (bao gồm HIV+) Lao mắc thể (bao gồm Số lượng Tỷ lệ (trên (nghìn người) 17 (11-23) 100.000 dân) 18 (12-25) 180 (76-330) 198 (83-362) 140 (116- 130 (110-150) HIV+) Lao/HIV dương tính mắc Tỷ lệ phát thể (%) 167) (5,7-8,5) 7,6 (6,1-9,2) 77 (65-94) Tỷ lệ kháng đa thuốc bệnh (2,5-5,4) nhân (%) Tỷ lệ kháng đa thuốc bệnh 23 (17-30) nhân điều trị lại (%) % bệnh nhân lao xét nghiệm 73% HIV % HIV dương tính số người xét nghiệm HIV 1.1.3 Tình hình bệnh lao kháng thuốc 5% Ngược lại với xu hướng thuyên giảm bệnh lao nói chung, tình hình dịch tễ bệnh lao kháng thuốc giới lại có diễn biến phức tạp, trở thành thách thức khó khăn lớn công tác chống lao Hiện bệnh lao kháng đa thuốc xuất hầu hết quốc gia giới[25] Song song với trình sử dụng thuốc chống lao công tác điều trị, khả đề kháng vi khuẩn ngày gia tăng Năm 2000 TCYTTG IUATLD (Hội Chống lao Bệnh phổi Quốc Tế) đưa tỷ lệ MDR trung bình bệnh nhân lao giới 1%, tỷ lệ kháng chung 11%[3] Nhưng đến năm 2014 ước tính tỷ lệ MDR bệnh nhân lao 3,5% bệnh nhân điều trị lại 20,5%[25][5] Năm 2014 toàn cầu số bệnh nhân xét nghiệm xác định lao MDR tăng cao tất thời kỳ trước đó, bao gồm 58% số bệnh nhân điều trị lại 12% số bệnh nhân Tỷ lệ tăng so với năm 2013 17% 8,5%[25] Cũng năm 2014, 111.000 bệnh nhân lao MDR bắt đầu điều trị, tăng 14% so với năm 2013 Tuy nhiên tỷ lệ điều trị thành công chung giới đạt xấp xỉ 50%, thấp so với mục tiêu TCYTTG điều trị thành công cho >= 75% trường hợp[25] Trong năm gần tình hình kháng PZA vi khuẩn lao bắt đầu trở thành mối quan tâm công tác chống lao Một số nước giới công bố tỷ lệ kháng vi khuẩn lao PZA dao động từ 0,8% đến 59%[11] [12][14][18] Năm 2015 Michael G.Whitfield tiến hành rà soát lại nghiên cứu tình hình kháng PZA vi khuẩn lao nước tất khu vực giới Theo nghiên cứu ước tính gánh nặng bệnh lao kháng PZA hàng năm toàn cầu 1,4 triệu người có khoảng 270.000 người số bệnh nhân MDR Tỷ lệ kháng PZA bệnh nhân lao thể 16,2%, nhóm bệnh nhân có nguy mắc MDR cao 41,3% nhóm bệnh nhân MDR 60,5%[19] mơi trường lỏng, xét nghiệm kháng sinh đồ vi khuẩn lao môi trường lỏng với thuốc chống lao SM, RMP, INH, EMB xét nghiệm kháng sinh đồ vi khuẩn lao môi trường lỏng với thuốc chống lao PZA 2.5.1 Xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm Zielh - Neelsen - Nguyên lý: Mycobacteria (trong có vi khuẩn lao) có lớp vách sáp dày lên khó bắt màu với thuốc nhuộm thơng thường có tính kháng cồn acid Phương pháp nhuộm Zielh - Neelsen thuốc nhuộm có chứa phenol hơ nóng nhuộm nên Fuchsin ngấm qua lớp vách vi khuẩn, tẩy màu dung dịch cồn - acid 3% AFB giữ màu đỏ Fuchsin tế bào vi khuẩn khác bị tẩy màu đỏ, nhuộm tạo tương phản AFB màu đỏ màu xanh sáng [2] Bảng 2.1 Nhận định kết theo quy định CTCLQG Số lượng AFB AFB/100 vi khuẩn - AFB/100 vi khuẩn 10 - 99 AFB/100 vi khuẩn - 10 AFB/1 vi trường (soi 50 vi tường) >10 AFB/1 vi trường (soi 20 vi tường) Kết Dương tính Dương tính Phân loại Âm tính Ghi số lượng AFB cụ thể 1+ Dương tính 2+ Dương tính 3+ 2.5.2 Xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm huỳnh quang đèn LED Nguyên lý: Mycobacteria có lớp vách sáp dày, nhuộm Auramine thấm vào vi khuẩn có phenol dung dịch nhuộm, tẩy màu dung dịch acid cồn AFB giữ màu vàng auramine có tính kháng acid, nhuộm xanh methylene để tạo màu tối, cho ánh sáng phát quang Khi soi ánh sáng huỳnh quang AFB phát quang màu vàng sáng tương phản rõ ràng tối Kinh hiển vi huỳnh quang có ưu điểm soi nhanh kính hiển vi quang học với nhuộm Zielh - Neelsen đặc biệt có giá trị phòng xét nghiệm có 17 khối lượng cơng việc lớn Kỹ thuật có độ nhạy cao mẫu bệnh phẩm có vi khuẩn vi số vi trường quan sát nhiều [2] Bảng 2.2 Nhận định kết xét nghiệm AFB nhuộm soi trực tiếp phương pháp nhuộm huỳnh quang đèn LED Số lượng AFB quan sát vật kính 20 X AFB/1 dòng - 29 AFB/1 dòng 30 - 299 AFB/1 dòng 10 - 100 AFB/1 VT (soi 10 vi tường) >100 AFB/1 vi trường (soi vi tường) Kết Phân loại Dương tính Dương tính Âm tính Ghi số lượng AFB cụ thể 1+ Dương tính 2+ Dương tính 3+ Bảng 2.3 So sánh ghi kết xét nghiệm AFB phương pháp nhuộm Kết Nhuộm ZN (phóng đại 1000 lần) dòng = cm = 100 VT AFB/1 dòng - AFB/1 dòng Nhuộm huỳnh quang (phóng đại 200 lần) dòng = cm = 30 VT AFB/1 dòng - 29 AFB/1 dòng Nhuộm huỳnh quang (phóng đại 400 lần) dòng = cm = 40 VT AFB/1 dòng - 19 AFB/1 dòng - 10 AFB/1 VT (soi 50 vi tường) >10 AFB/1 vi trường (soi 20 vi tường) 30 - 299 AFB/1 dòng 10 - 100 AFB/1 VT (soi 10 vi tường) >100 AFB/1 vi trường (soi vi tường) 20 - 199 AFB/1 dòng - 50 AFB/1 VT (soi 20 vi tường) >50 AFB/1 vi trường (soi vi tường) Âm tính Ghi số lượng AFB cụ thể 1+ 10 - 99 AFB/1 dòng 2+ 3+ 2.5.3 Nuôi cấy đờm định danh vi khuẩn lao mơi trường lỏng Vi khuẩn lao có khả phát triển môi trường lỏng tạo thành hạt vụn phát hệ thống máy nuôi cấy tự động Thời gian cho kết 18 dương tính từ - 14 ngày tùy thuộc số lượng số lượng vi khuẩn có mẫu đờm Kỹ thuật ni cấy vi khuẩn lao môi trường lỏng MGIT hệ thống tự động BACTEC - MGIT 960 Định nghĩa: hệ thống BACTEC - MGIT hệ thống máy nuôi cấy phát tự động phát triển vi khuẩn lao cấy vào môi trường MGIT Nguyên lý: hệ thống máy BACTEC - MGIT giám sát liên tục phát quang tuýp cấy dựa vào đơn vị sinh trưởng (GU) Các bước tiến hành: - Mẫu đờm xử lý theo phương pháp: NALC - NaOH phương pháp Petroff cải tiến - Môi trường nuôi cấy: dung dịch Grouth Supplement - PANTA pha từ dung dịch MGIT Grouth Supplement bột MGIT - PANTA, chứa tuýp MGIT - Đờm sau xử lý cấy vào tuýp MGIT có chứa dung dịch Grouth Supplement - PANTA đưa vào hệ thống máy BACTEC Kết quả: máy tự động kiểm tra ống cấy báo kết tín đèn âm Mẫu dương tính máy báo đèn đỏ, mẫu âm tính máy báo đèn xanh Mẫu MGIT dương tính tiến hành nhuộm Zielh - Neelsen để xác định có AFB sau tiến hành định danh vi khuẩn lao phương pháp sắc ký miễn dịch huỳnh quang tìm kháng nguyên MPT 64 với thử nghiệm Capilia - TB (TB cID SD) thử nghiệm dương tính cho kết Mycobacteria Tuberculosis[2] 19 2.5.4 Kháng sinh đồ vi khuẩn lao với thuốc SM, RMP, INH, EMP môi trường lỏng hệ thống BACTEC - MGIT - Chủng làm kháng sinh đồ: chủng Mycobacteria Tuberculosis từ mẫu nuôi cấy môi trường lỏng MGIT định danh phương pháp sắc ký miễn dịch huỳnh quang Bảng 2.4 Nồng độ thuốc chống lao môi trường MGIT Thuốc SM INH RMP EMP Nồng độ 1.0 µg/ml 0.1 µg/ml 1.0 µg/ml 5.0 µg/ml - Nguyên lý: hệ thống BACTEC - MGIT giám sát liên tục phát quang tuýp cấy dựa vào đơn vị sinh trưởng (GU) - Tiến hành cấy huyền dịch vi khuẩn vào tuýp chứng vào tuýp có thuốc, đậy nắp xếp giá theo thứ tự đưa vào hệ thống máy BACTEC - MGIT - Kết quả: kết kháng sinh đồ báo cáo đến 13 ngày tuýp chứng đạt 400 GU dựa so sánh định lượng phát triển Mycobacteria Tuberculosis tuýp chứng tuýp có thuốc Ngưỡng kháng thuốc 100 GU Tuýp có thuốc có số GU < 100 nhạy cảm Tuýp có thuốc có số GU >= 100 kháng thuốc Máy tự động đọc kết quả: nhạy (S), kháng (R)[2] 2.5.5 Kháng sinh đồ vi khuẩn lao môi trường lỏng với PZA hệ thống BACTEC - MGIT Nguyên lý, bước tiến hành cách đọc kết tương tự kháng sinh đồ môi trường lỏng với thuốc SM, RMP, INH, EMB Do đặc điểm PZA có tác dụng vi khuẩn lao mơi trường có pH trung tính nên khơng làm kháng sinh đồ vi khuẩn lao PZA với thuốc SM, RMP, INH, EMB Người ta phải dùng môi trường 20 7H9 với pH 5,9 để làm kháng sinh đồ vi khuẩn lao với PZA Ở môi trường pH acid vi khuẩn lao phát triển tốt, mặt khác PZA phát huy tác dụng vi khuẩn lao - Chủng làm kháng sinh đồ: chủng Mycobacteria Tuberculosis thuần, định danh phương pháp sắc ký miễn dịch huỳnh quang làm kháng sinh đồ môi trường lỏng với thuốc SM, RMP, INH, EMB - Nồng độ PZA mơi trường MGIT 100 µg/ml[2] 2.6 Phương pháp thu thập số liệu Xây dựng mẫu bệnh án nghiên cứu Thu thập thông tin chung, thông tin lâm sàng cận lâm sàng điền vào mẫu bệnh án nghiên cứu 2.7 Nội dung nghiên cứu 2.7.1 Tình hình kháng thuốc bệnh nhân nghiên cứu - Tỷ lệ kháng thuốc chung bệnh nhân nghiên cứu - Tỷ lệ kháng thuốc nhóm bệnh nhân - Tỷ lệ kháng đa thuốc chung - Tỷ lệ kháng đa thuốc nhóm bệnh nhân - Mối liên quan vi khuẩn kháng đa thuốc với số yếu tố khác 2.7.2 So sánh tính kháng thuốc vi khuẩn PZA nhóm bệnh nhân - Tỷ lệ kháng PZA chung - Tỷ lệ kháng PZA nhóm bệnh nhân - Tỷ lệ kháng PZA bệnh nhân kháng đa thuốc - Sự kết hợp kháng PZA với thuốc khác - Mối liên quan kháng PZA số yếu tố khác 2.8 Kỹ thuật xử lý phân tích số liệu - Xử lý số liệu theo phương pháp thống kê y học - Số liệu phân tích chương trình SPSS 16.0 trường đại học Y Hà Nội 21 2.9 Kế hoạch nghiên cứu 2.9.1 Nhân lực - Chủ nhiệm đề tài: Tiến sỹ Nguyễn Văn Hưng - Thư ký: Bác Sỹ Nguyễn Thị Phượng - Nghiên cứu viên: người 2.9.2 Kế hoạch nghiên cứu - Thu thập số liệu: từ tháng 5/2016 đến tháng 8/2017 - Xử lý phân tích số liệu: từ tháng đến tháng 10/2017 - Thời gian hoàn thành báo cáo kết quả: tháng 11/2010 2.9.3 Dự kiến tổng kinh phí 10 triệu đồng 2.10 Đạo đức nghiên cứu - Báo cáo cấp có thẩm quyền phê duyệt: Bệnh viện Phổi trung ương - Đối tượng nghiên cứu tự nguyện tham gia nghiên cứu, có quyền rút lui khỏi nghiên cứu thời điểm - Đối tượng nghiên cứu sau chẩn đoán điều trị theo phác đồ phù hợp - Đối tượng tham gia nghiên cứu nhận thông tin kết nghiên cứu để phục vụ cho việc theo dõi điều trị bệnh - Mỗi bệnh nhân có mã số riêng để đảm bảo bí mật thông tin cá nhân kết nghiên cứu 22 Chương DỰ KIẾN KẾT QUẢ 3.1 Tình hình kháng thuốc vi khuẩn Bảng 3.1 Tỷ lệ kháng thuốc chung Lao phổi SL % Nhóm Điều trị lại SL % Cộng SL % Nhạy cảm Kháng thuốc Bảng 3.2 Tỷ lệ kháng riêng loại thuốc Nhóm Lao phổi SL Thuốc Điều trị lại % SL % Cộng SL % S R H E Z Bảng 3.3 Tỷ lệ kháng đơn thuốc Nhóm Lao phổi Điều trị lại Cộng SL % SL % SL % Thuốc S R H E Z Bảng 3.4 Đặc điểm kháng thuốc theo số lượng thuốc bị kháng Nhóm Kháng thuốc Nhiều thuốc Lao phổi SL Điều trị lại % SL 23 % Cộng SL % Đa kháng Bảng 3.5 Tỷ lệ kháng đa thuốc Lao phổi SL % Nhóm Nhạy cảm Khơng Điều trị lại SL % Cộng SL % đa kháng Đa kháng Bảng 3.6 So sánh tỷ lệ kháng riêng R, H số đa kháng Nhóm Lao phổi SL Điều trị lại % SL Kháng R H RH 24 % Cộng SL % Bảng 3.7 Mối liên quan kháng đa thuốc mức độ dương tính vi khuẩn Nhóm ≤1+ SL 2+ % SL 3+ % SL % Kháng Nhạy cảm Không đa kháng Đa kháng Bảng 3.8 Mối liên quan vi khuẩn kháng đa thuốc bệnh nhân lao có bệnh mãn tính phối hợp Nhóm Khơng có bệnh Có bệnh mãn mãn tính SL % tính SL % Cộng SL % Nhạy cảm Khơng đa kháng Đa kháng 3.2 So sánh tính kháng thuốc vi khuẩn PZA nhóm bệnh nhân Bảng 3.9 So sánh tỷ lệ kháng riêng PZA với thuốc khác Nhóm Lao phổi Điều trị lại Cộng SL % SL % SL Thuốc Z S R H E Bảng 3.10 Tỷ lệ kháng PZA phối hợp với loại thuốc Nhóm Kháng Z+S Lao phổi SL Điều trị lại % SL 25 % % Cộng SL % Z+H Z+R Z+E Bảng 3.11 Tỷ lệ kháng PZA phối hợp với kiểu kháng thuốc khác Nhóm Lao phổi Kháng Z+1 thuốc Z+2 thuốc Z+3 thuốc Z+4 thuốc SL Điều trị lại % SL Cộng % SL % Bảng 3.12 Tỷ lệ kháng PZA nhóm bệnh nhân lao phổi điều trị lại bệnh nhân đa kháng Nhóm Lao phổi PZA Nhạy cảm Kháng SL % Điều trị lại Đa kháng SL SL % 26 % Cộng SL % Bảng 3.13 Tỷ lệ kháng PZA nhóm bệnh nhân đa kháng khơng đa kháng Nhóm Khơng đa kháng PZA Nhạy cảm Kháng SL Đa kháng % SL Cộng % SL % Bảng 3.14 Tỷ lệ kháng PZA đơn kết hợp với thuốc khác Nhóm Lao phổi SL PZA Kháng đơn Kháng kết hợp Điều trị lại % SL Cộng % SL % Bảng 3.15 Mối liên quan kháng PZA mức độ dương tính vi khuẩn Nhóm ≤1+ PZA Nhạy cảm Kháng SL 2+ % SL 3+ % SL Cộng % SL % Bảng 3.16 Mối liên quan kháng PZA bệnh nhân lao có bệnh mãn tính phối hợp Nhóm PZA Nhạy cảm Kháng Khơng có bệnh phối hợp SL % Có bệnh phối hợp SL 27 % Cộng SL % TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT CTCLQG (2007) “Hướng dẫn quản lý điều trị bệnh lao kháng thuốc Việt Nam” Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.22 CTCLQG (2012), “Hướng dẫn quy trình thực hành chuẩn xét nghiệm vi khuẩn lao”, Hà Nội 2012 CTCLQG (2014), “Báo cáo tổng kết hoạt động chương trình chống lao năm 2013 phương hướng hoạt động năm 2014”, Bộ Y tế, tr.37, 38, 39 CTCLQG (2015), “Báo cáo tổng kết hoạt động chương trình chống lao năm 2014 phương hướng hoạt động năm 2015”, Bộ Y tế, tr.5, 6, 33 CTCLQG (2016), “Báo cáo tổng kết hoạt động chương trình chống lao năm 2015”, tr.5, 6 Nguyễn Văn Hưng, Đinh Ngọc Sỹ (2011), “Nghiên cứu tính nhạy cảm với Pyrazinamide MTB Việt Nam”, Tạp chí Y học Việt Nam, (số 1), tr 25-28 Phạm Thu Hằng (2012), “Nghiên cứu mức độ nhạy cảm với Pyrazinamide Mycobacterium năm 2011”, Luận văn thạc sỹ Y học Bộ quốc phòng, Học viện Quân Y, tr.59 Trường đại học Y Hà Nội Bộ môn lao bệnh phổi (2014), “Bệnh học lao” Nhà xuất Y học tr.138; 139; 140 TIẾNG ANH A P Davies, O J Billington, T D McHugh et al (2000), “Comparison of Phenotypic and Genotypic Methods for Pyrazinamide Susceptibility Testing with Mycobacterium tuberculosis”, Journal of Clinal Microbiology, pp 3686-3688 10 Ando H, Mitarai S, Kondo Y, et al (2010), “Pyrazinamide resistance in multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis isolates in Japan”, US National Library of Medicine National Institutes of Health 11 Choi J.C, Song Yong Lim S.Y, Suh G.Y, et al (2007), “Drug Resistance Rates of Mycobacterium tuberculosis at a Private Referral Center in Korea”, J Korea Med Sci 2007; 22, pp.677-81 12 Dao Nguyen, Brassard P, Westley J, et al (2003), “Widespread Pyrazinamide - Resistant Mycobacterum tuberculosis Family in a Low Incidence Setting” Journal of Clinical Microbiology, July, pp.1878-2883 13 Dawn Verdugo, Dorothy Fallows, Shama Ahuja, et al (2010), “Epidemiologic Correlates of Pyrazinamide-Resistant Mycobacterium tuberculosis in New York City”, AAC, JournalsASM.org 14 ESR report - Institute of Environmental Science & Research (2005), “Antituverculosis drug resistance in New Zealand 2005”, Institute of Environment Science & Research Limited, New Zealand 15 Hoa NB, Sy DN, Nhung NV, Tiemersma EW, Borgdorff MW, Cobelens FGJ (2011), A national survey of tuberculosis prevalence in Vietnam” Bull World Health Organization, 88: pp.273-280 16 Jirarut Jonmalung, Therdsak Prammananan, et al (2010), “Surveillance of pyrazinamide susceptibility among multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis isolates from Siriraj Hospital, Thailand”, BMC Microbiology 2010 (10) pp.258 17 Kwok Chiu Chang, Wing Wai Yew, Ying Zhang (2011), “Pyrazinamide Susceptibility Testing in Mycobacterium tuberculosis: a Systematic Review with Meta-Analyses”, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, pp 4499-4505 18 M Mansjö, J Werngren, S Hoffner, et al (2014), “Pyrazinamide resistance in Swedish multidrug-resistant tuberculosis 2003-2013” International Journal of Mycobacteriology Volume 4, Supplement 1, March 2015, pp 125 19 Michael G Whitfield, Heidi M Soeters, Robin M Warren, et al (2015), “A Global Perspective on Pyrazinamide Resistance: Systematic Review and Meta-Analysis” PLOS one, US National Library of Medicine National Institutes of Health 20 Mphalhlee M, Heidi et al (2008), “Pyrazinamide Resistance among South Afican Multidrug - Resistant Mycobacterium tuberculosis isolates”, J Clin Microbiol, 2008 October; 46 (10), pp.3459-3464 21 Qiang Xia, Li-li Zhao, Feng Li, et al (2015), “Phenotypic and Genotypic Characterization of Pyrazinamide Resistance among Multidrug-Resistant Mycobacterium tuberculosis Isolates in Zhejiang, China” Antimicrobial Agents and Chemotherapy 22 Rüsch-Gerdes S, Pfyffer GE, Casal M, Chadwick M, Siddiqi S (2006), “Multicenter laboratory validation of the BACTEC MGIT 960 technique for testing susceptibilities of Mycobacterium tuberculosis to classical second-line drugs and newer antimicrobials” Jclin Microbial 44: 688-92 23 WHO (2000), “Anti - Tuberculosis drug - resistance in the World”, Report number 2, WHO/Tb/278,15 24 WHO (2008), “Anti - Tuberculosis drug resistance in the word”, Report No.4 WHO/TB/2008; 25 WHO (2015), “Global Tuberculosis Report 2015, 20 th Edition” 26 WHO REPORT (2005), “Global Tuberculosis Control Surveillance, Planning, Financing”, pp.14 PHỤ LỤC MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU I HÀNH CHÍNH Họ tên bệnh nhân: Tuổi Giới: Nam Nữ Nghề nghiệp: Địa chỉ: Ngày vào viện: Số lưu trữ: II PHÂN LOẠI BỆNH Mới Tái phát Bỏ trị Thất bại điều trị III TIỀN SỬ BỆNH MÃN TÍNH PHỐI HỢP Đái tháo đường Suy Thận Goute Viêm khớp Bệnh hệ thống Khác (ghi rõ): Khơng có bệnh mãn tính IV KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM AFB ĐỜM TRỰC TIẾP