Nghiên cứu đột biến PC và đột biến BCP của HBV trên bệnh nhân viêm gan b mạn tại khoa truyền nhiễm bệnh viện bạch mai

1 ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm gan vi rút B (viêm gan B) vấn đề sức khỏe mang tính toàn cầu Theo báo cáo Tổ chức Y tế Thế giới (WHO: World Health Organization 2012), 3/4 dân số giới sống vùng có tỷ lệ nhiễm vi rút viêm gan B (HBV: Hepatitis B virus) 2%, ước tính có tỷ người bị nhiễm HBV khoảng 240 triệu người nhiễm HBV mạn, riêng vùng Châu Á - Thái Bình Dương chiếm tới 75% số trường hợp [47] Nhiều tiến khoa học kỹ thuật ứng dụng chẩn đoán điều trị viêm gan B mạn định lượng HBV-ADN, xác định kiểu gen HBV, đột biến PC/BCP đột biến kháng thuốc Nhiễm HBV mạn tiến triển âm thầm, biểu đa dạng, từ thể nhẹ không triệu chứng đến thể trung bình có khơng có triệu chứng kèm theo thay đổi xét nghiệm sinh học (viêm gan mạn) bệnh cảnh nguy hiểm (xơ gan, ung thư tế bào gan) Vi rút viêm gan B có tốc độ đột biến cao Đột biến xảy vị trí genome, tần suất vai trò đột biến hai vùng gene pre-S/S Precore/Core prmoter tập trung nghiên cứu nhiều Các đặc điểm vi rút kiểu gene, đột biến, tải lượng vi rút ảnh hưởng tới tiến triển bệnh Kiểu gen B C kiểu gen HBV thường gặp châu Á [25] Xơ gan tổn thương mô học mức độ nặng thường gặp nhiều bệnh nhân nhiễm vi rút kiểu gen C [23] Các đột biến vùng gen tiền lõi (Precore-PC) (G1896A) vùng điều hòa chép lõi (Basal Core Promoter-BCP) A1762T/G1764A xác định chế phân tử gây nên thể bệnh viêm gan vi rút mạn HBeAg âm tính [9] Biến thể vi rút mang đột biến PC/BCP không tổng hợp kháng nguyên HBeAg Đột biến BCP A1762T/G1764A coi dấu ấn sinh học để xác định bệnh nhân có nguy tiến triển tới xơ gan [14] ung thư tế bào gan [18] 2 Việt Nam nước nằm vùng lưu hành HBV cao với tỷ lệ người mang HBsAg từ - 30% [37], với đường lây truyền từ mẹ sang nên tỷ lệ chuyển thành mạn tính cao Nguy tiến triển thành xơ gan HCC trường hợp nhiễm HBV mạn cao gấp 15 - 100 lần so với người khơng bị nhiễm [5] Chính tiến hành nghiên cứu “Nghiên cứu đột biến PC đột biến BCP HBV bệnh nhân viêm gan B mạn khoa Truyền nhiễm - Bệnh viện Bạch Mai.” với hai mục tiêu: MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU: Xác định đột biến CP/BCP HBV bệnh nhân viêm gan B mạn Mối tương quan đột biến PC/BCP với kiểu gen HBV, HBeAg, antiHBe tải lượng HBV-ADN 3 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tình hình nhiễm vi rút viêm gan B mạn giới Việt Nam 1.1.1 Tình hình giới Viêm gan B mạn bệnh truyền nhiễm có khắp nơi giới HBV nguyên nhân thường gặp số vi rút gây bệnh gan mạn người Theo thống kê WHO (2012), ước tính khoảng 50 triệu người nhiễm HBV hàng năm tồn giới có khoảng 500 - 700 nghìn người chết năm hậu bệnh suy gan cấp, xơ gan HCC [47] Hình 1.1: Phân bố nhiễm vi rút viêm gan B mạn giới năm 2006 [46] Vi rút viêm gan B nguyên nhân 60 - 80% HCC toàn giới nguyên nhân gây tử vong châu Phi, châu Á Tỷ lệ nhiễm HBV giới thay đổi từ 0,1% vùng lưu hành thấp đến 20% vùng lưu hành cao, thay đổi theo khu vực địa lý, quần thể dân cư [35] Những nơi giới coi lưu hành HBV cao 8% dân số có HBsAg 4 (Hepatitis B surface antigen) dương tính Trong khu vực 70 - 90% dân số thường có chứng huyết nhiễm HBV trước Sự phân bố nhiễm HBV xác định mức độ dịch lưu hành Vùng dịch lưu hành cao (≥ 8%): Chủ yếu Trung Quốc, Đông Nam Á, Châu Phi cận sa mạc Sahara, quần đảo Thái Bình Dương [28] Vùng dịch lưu hành trung bình (2 - 7%): Vùng Địa Trung Hải, Nam Âu, Bắc Mỹ, Đông Âu (gồm Nga), Trung Đông, Trung Á, Nhật Bản, Ấn Độ, phần Nam Trung Mỹ vv [28] Vùng dịch lưu hành thấp (0,05) khơng có mối liên quan (OR=1 p>0,05) (biểu đồ 3.3 bảng 3.2) Nghiên cứu Choi JW (Hàn Quốc) lại nhận thấy ALT BN HBeAg (-) có đột biến PC G1896A cao so với BN khơng có đột biến (93,3 ± 134,2 so với 51,6 ± 82 (U/l) với p=0,014) BN có đột biến BCP A1762T/G1764A thấp so với BN khơng có đột biến (60,4 ± 90,9 so với 122,3 ± 197,4 (U/l) với p=0,204) [13] Nhưng với tải lượng HBV-ADN tác giả Choi JW thấy BN có đột biến BCP tải lượng HBV-ADN thấp BN khơng có đột biến BCP, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p=0,455) BN có đột biến PC G1986A cao chủng tự nhiên (p=0,026) [13] 39 39 KẾT LUẬN Nghiên cứu 125 BN viêm gan B mạn điều trị Khoa Truyền nhiễm Bệnh viện Bạch Mai từ 8/2010 đến 2/2014 chúng tơi có số kết luận sau: Đặc điểm đột biến PC/BCP vi rút viêm gan B bệnh nhân viêm gan B mạn Chủng HBV có đột biến vùng PC/BCP chiếm tỷ lệ cao (69,5%) với đột biến PC G1896A, BCP A1762T, BCP G1764A 29,8%; 47,9% 44,6% Tỷ lệ phối hợp đột biến BCP A1762T/G1764A 42,9%, có 4,2% BN có phối hợp đột biến Có mối liên quan tỷ lệ thuận đột biến PC/BCP với tuổi tuổi BN tăng tỷ lệ đột biến PC/BCP tăng Mối liên quan đột biến PC/BCP với kiểu gen HBV, HBeAg, antiHBe tải lượng HBV-ADN Đột biến PC G1896A kiểu gen B cao kiểu gen C (37,5% so với 9,4%), ngược lại đột biến BCP A1762T, BCP G1764A lại cao kiểu gen C (76,7% 80,7%) so với kiểu gen B (36,8% 30,2%) Có mối liên quan tỷ lệ thuận đột biến PC/BCP với tình trạng HBeAg âm tính Tải lượng HBV-ADN trung bình BN nhiễm HBV chủng tự nhiên cao so với chủng HBV có đột biến PC/BCP, cao chủng tự nhiên (7,2 ± 1,5 log10IU/ml) thấp chủng có phối hợp đột biến PC/BCP (5,4 ± 1,4 log10IU/ml) 40 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Đơng Thị Hồi An Phạm Hồng Phiệt (2003), "Kỹ thuật định týp gen siêu vi viêm gan B Multiplex PCR bệnh nhân nhiễm siêu vi viêm gan B mạn tính", Y học thành phố Hồ Chí Minh 7, tr 145-150 Phạm Thị Lệ Hoa, Huỳnh Trung Hiếu Nguyễn Thị Cẩm Hưng (2010), "Đột biến Precore core promoter bệnh nhân viêm gan B mạn tính bệnh viện nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh", Y học TP Hồ Chí Minh 14(1), tr 440-446 Bùi Hữu Hoàng Phạm Hoàng Phiệt (2003), "Kiểu gen siêu vi viêm gan B bệnh nhân xơ gan ung thư gan nguyên phát", Y học thành phố Hồ Chí Minh 7(1), tr 145-150 Nguyễn Cơng Long (2007), Nghiên cứu mối liên quan nồng độ HBV-DNA máu với kiểu gen HBeAg người lành người bệnh gan mạn tính HBsAg (+), Thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội Phan Thị Phi Phi, Trần Thị Chính Trương Mộng Long (1993), "Góp phần nghiên cứu ung thư tế bào gan nguyên phát Việt Nam Tần suất HBsAg huyết người lành người bị ung thư tế bào gan", Y học Việt Nam 1(171), tr 26-30 Trần Ngọc Quế (2003), Nghiên cứu tình hình nhiễm HIV, HBV, HCV đối tượng sinh viên - học sinh cho máu Viện Huyết học - Truyền máu, Luận văn Thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội Nguyễn Trường Sơn (2005), Nghiên cứu tỷ lệ kiểu gen vi rút viêm gan B số người lành mang vi rút người mắc bệnh gan mạn tính, Luận văn Thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội B S Blumberg, H J Alter S Visnich (1965), "A "NEW" ANTIGEN IN LEUKEMIA SERA", JAMA 191, tr 541-6 W F Carman et al (1989), "Mutation preventing formation of hepatitis B e antigen in patients with chronic hepatitis B infection", Lancet 2(8663), tr 588-91 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Ranjit Chauhan et al (2006), "Basal core promoter, precore region mutations of HBV and their association with e antigen, genotype, and severity of liver disease in patients with chronic hepatitis B in India", Journal of Medical Virology 78(8), tr 1047-1054 Chien-Hung Chen et al (2007), "Clinical significance and evolution of core promoter and precore mutations in HBeAg-positive patients with HBV genotype B and C: a longitudinal study", Liver International 27(6), tr 806-815 Chien-Hung Chen et al (2005), "Clinical Significance of Hepatitis B Virus (HBV) Genotypes and Precore and Core Promoter Mutations Affecting HBV e Antigen Expression in Taiwan", Journal of Clinical Microbiology 43(12), tr 6000-6006 Jong Won Choi et al (2009), "Hepatitis B e antigen-negative mutations in the precore and core promoter regions in Korean patients", Journal of Medical Virology 81(4), tr 594-601 C M Chu et al (2012), "Basal core promoter mutation is associated with progression to cirrhosis rather than hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis B virus infection", Br J Cancer 107(12), tr 2010-5 C M Chu et al (2002), "Precore stop mutant in HBeAg-positive patients with chronic hepatitis B: clinical characteristics and correlation with the course of HBeAg-to-anti-HBe seroconversion", J Clin Microbiol 40(1), tr 16-21 D S Dane, C H Cameron M Briggs (1970), "Virus-like particles in serum of patients with Australia-antigen-associated hepatitis", Lancet 1(7649), tr 695-8 Liver European Association for the Study of the (2009), "EASL Clinical Practice Guidelines: Management of chronic hepatitis B", Journal of Hepatology 50(2), tr 227-242 Z L Fang et al (2008), "HBV A1762T, G1764A mutations are a valuable biomarker for identifying a subset of male HBsAg carriers at extremely high risk of hepatocellular carcinoma: a prospective study", Am J Gastroenterol 103(9), tr 2254-62 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 Scott K Fung et al (2006), "Hepatitis B virus genotypes, precore and core promoter variants among predominantly Asian patients with chronic HBV infection in a Canadian center", Liver International 26(7), tr 796-804 B Hoang et al (1985), "[Prevalence of hepatitis B viral markers in Vietnamese blood donors]", Rev Fr Transfus Immunohematol 28(3), tr 227-36 T T Huy et al (2004), "Characteristics of core promoter and precore stop codon mutants of hepatitis B virus in Vietnam", J Med Virol 74(2), tr 228-36 J H Kao (2011), "Molecular epidemiology of hepatitis B virus", Korean J Intern Med 26(3), tr 255-61 J H Kao et al (2000), "Hepatitis B genotypes correlate with clinical outcomes in patients with chronic hepatitis B", Gastroenterology 118(3), tr 554-9 Peter Karayiannis, William F Carman Howard C Thomas (2013), "Molecular Variants of the Precore, Core, and Core Promoter Regions of Hepatitis B Virus, and Their Clinical Significance", Viral Hepatitis, John Wiley & Sons, Ltd, tr 127-142 K Kidd-Ljunggren, Y Miyakawa A H Kidd (2002), "Genetic variability in hepatitis B viruses", J Gen Virol 83(Pt 6), tr 1267-80 Mariko Kobayashi et al (2008), "Change of hepatitis B virus genotypes in acute and chronic infections in Japan", Journal of Medical Virology 80(11), tr 1880-1884 Ching-Lung Lai Stephen Locarnini (2008), Hepatitis B virus, Second edition, International Medical Press Daniel Lavanchy (2007), "Epidemiology", Viral Hepatitis, Blackwell Publishing Ltd, tr 181-192 Yun-Fan Liaw (2013), "Natural History of Chronic Hepatitis B Virus Infection", Viral Hepatitis, John Wiley & Sons, Ltd, tr 143-153 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 C L Lin J H Kao (2011), "The clinical implications of hepatitis B virus genotype: Recent advances", J Gastroenterol Hepatol 26 Suppl 1, tr 123-30 C J Liu et al (2006), "Role of hepatitis B viral load and basal core promoter mutation in hepatocellular carcinoma in hepatitis B carriers", J Infect Dis 193(9), tr 1258-65 Chun-Jen Liu et al (2006), "Role of Hepatitis B Virus Precore/Core Promoter Mutations and Serum Viral Load on Noncirrhotic Hepatocellular Carcinoma: A Case-Control Study", Journal of Infectious Diseases 194(5), tr 594-599 A S Lok B J McMahon (2009), "Chronic hepatitis B: update 2009", Hepatology 50(3), tr 1-36 Souphalone Luangsay Fabien Zoulim (2013), "Structure and Molecular Virology", Viral Hepatitis, John Wiley & Sons, Ltd, tr 63-80 Brian J McMahon (2005), "Epidemiology and Natural History of Hepatitis B", Seminars in liver disease 25(Supplement 1), tr 3-8 L H Nguyen et al (2009), "Prevalence of hepatitis B virus genotype B in Vietnamese patients with chronic hepatitis B", Hepatol Int 3(3), tr 461-7 V T Nguyen, M L McLaws G J Dore (2007), "Highly endemic hepatitis B infection in rural Vietnam", J Gastroenterol Hepatol 22(12), tr 2093-100 Yanli Qin et al (2009), "Prevalence of basal core promoter and precore mutations in Chinese chronic hepatitis B patients and correlation with serum HBeAG titers", Journal of Medical Virology 81(5), tr 807-814 X Ren et al (2010), "Hepatitis B virus genotype and basal core promoter/precore mutations are associated with hepatitis B-related acute-on-chronic liver failure without pre-existing liver cirrhosis", Journal of Viral Hepatitis 17(12), tr 887-895 Ming Shi et al (2012), "Hepatitis B virus genotypes, precore mutations, and basal core promoter mutations in HBV-infected Chinese patients with persistently normal alanine aminotransferase and low serum HBVDNA levels", Brazilian Journal of Infectious Diseases 16, tr 52-56 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 H Sumi et al (2003), "Influence of hepatitis B virus genotypes on the progression of chronic type B liver disease", Hepatology 37(1), tr 19-26 T T Thuy le et al (2005), "Distribution of genotype/subtype and mutational spectra of the surface gene of hepatitis B virus circulating in Hanoi, Vietnam", J Med Virol 76(2), tr 161-9 T C Tseng et al (2009), "Association of baseline viral factors with response to lamivudine therapy in chronic hepatitis B patients with high serum alanine aminotransferase levels", Antivir Ther 14(2), tr 203-10 A Utama et al (2011), "Association of core promoter mutations of hepatitis B virus and viral load is different in HBeAg(+) and HBeAg(-) patients", World J Gastroenterol 17(6), tr 708-16 P Vutien et al (2013), "Precore and basal core promoter mutations in Asian American patients with hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B", Alimentary Pharmacology & Therapeutics 37(4), tr 464-472 C M Weinbaum et al (2008), "Recommendations for identification and public health management of persons with chronic hepatitis B virus infection", MMWR Recomm Rep 57(RR-8), tr 1-20 World Health Organization (WHO) (2012), "Prevention and control of viral hepatitis infection: framework for global action.", Geneva, WHO L Xiao et al (2011), "Hepatitis B virus genotype B with G1896A and A1762T/G1764A mutations is associated with hepatitis B related acuteon-chronic liver failure", J Med Virol 83(9), tr 1544-50 Hwai-I Yang et al (2008), "Associations Between Hepatitis B Virus Genotype and Mutants and the Risk of Hepatocellular Carcinoma", Journal of the National Cancer Institute 100(16), tr 1134-1143 R Zoutendijk et al (2013), "Precore and core promoter mutants are associated with higher HBeAg seroconversion but low disease remission rates in HBV patients treated with nucleos(t)ide analogues", J Viral Hepat 20(5), tr 322-7 BỘ Y TẾ BỆNH VIỆN BẠCH MAI BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP CƠ SỞ NGHIÊN CỨU ĐỘT BIẾN TIỀN NHÂN (PRE-CORE) VÀ ĐỘT BIẾN BCP (BASAL CORE PROMOTER) CỦA VI RÚT VIÊM GAN B TRÊN BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TẠI KHOA TRUYỀN NHIÊM BỆNH VIỆN BẠCH MAI Chủ nhiệm đề tài: Ths Nguyễn Văn Dũng Đơn vị thực hiện: Khoa Truyền nhiễm - Bệnh viện Bạch Mai HÀ NỘI - 2015 BỘ Y TẾ BỆNH VIỆN BẠCH MAI BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP CƠ SỞ NGHIÊN CỨU ĐỘT BIẾN TIỀN NHÂN (PRE-CORE) VÀ ĐỘT BIẾN BCP (BASAL CORE PROMOTER) CỦA VI RÚT VIÊM GAN B TRÊN BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TẠI KHOA TRUYỀN NHIÊM BỆNH VIỆN BẠCH MAI Những người thực hiện: Nguyễn Văn Dũng, Trịnh Thị Ngọc, Nguyễn Thị Lan Anh, Bùi Thị Lan Anh, Đỗ Thị Diễm Trinh, Đỗ Huy Dương Đơn vị thực hiện: Khoa Truyền nhiễm - Bệnh viện Bạch Mai Đơn vị phối hợp: Phòng xét nghiệm sinh học phân tử - Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương HÀ NỘI - 2015 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ gốc tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt A Adenine Nucleotit adenin AASLD American Association for the Hiệp hội Gan mật Mỹ ADV ALT APASL AST BCP BN cccDNA CI EASL ETV Study of Liver Diseases Adefovir dipivoxil Alanin amino transferase Asia Pacific Association for the Study of Liver Aspartat amino transferase Basal Core Promoter Là loại thuốc kháng vi rút Hiệp hội Gan mật châu Á Thái Bình Dương Hoạt hóa lõi Bệnh nhân Covalently Closed Circular DNA Confidence Interval Khoảng tin cậy European Association for the Hiệp hội Gan mật châu Âu Study of the Liver Entecavir Là loại thuốc kháng vi rút FDA G HBV HCV HCC IU KN KT Max Min NA OR PC PCR RT SD TB TDF T ULN WHO Food and Drug Administration Guanine Hepatitis B virus Hepatitis C virus Hepatocellular Carcinoma International Unit Maximum Minimum Nucleos(t)ide Analog Odd Ration Pre-core Polymerase Chain Reaction Reverse transcriptase Standard deviation Tenofovir disoproxil fumarate Thymine Upper limit of normal World Health Organization Cơ quan thuốc thực phẩm Nucleotit guanin Vi rút viêm gan B Vi rút viêm gan C Ung thư tế bào gan Đơn vị quốc tế Kháng nguyên Kháng thể Giá trị cao Giá trị thấp Dẫn chất nucleos(t)it Tỷ suất chênh Vùng gen tiền lõi Phản ứng chuỗi polymerase Men chép ngược Độ lệch chuẩn Trung bình Là loại thuốc kháng vi rút Nucleotit thymin Trên giới hạn bình thường Tổ chức Y tế Thế giới MỤC LỤC Trang phụ bìa Danh mục chữ viết tắt Mục lục Danh mục bảng Danh mục hình DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ ... khơng b nhiễm [5] Chính chúng tơi tiến hành nghiên cứu Nghiên cứu đột biến PC đột biến BCP HBV b nh nhân viêm gan B mạn khoa Truyền nhiễm - B nh viện B ch Mai. ” với hai mục tiêu: MỤC TIÊU NGHIÊN... 69,5% BN có từ đột biến PC/ BCP trở lên Khi phân tích phân b đột biến PC/ BCP chủng HBV đột biến có 20,3% chủng đột biến cao đột biến PC G1896A (11,9%) Trong 49,2% chủng HBV xuất từ loại đột biến. .. ALT trung b nh nhóm đột biến PC/ BCP cho thấy ALT trung b nh nhóm BN nhiễm chủng HBV có đột biến PC 161,7 ± 134,5 U/l cao so với chủng HBV phối hợp đột biến PC/ BCP, đột biến BCP chủng HBV tự nhiên,