CÁC CHỈ số ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG sắt VITAMIN a và PHƯƠNG PHÁP xác ĐỊNH

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ Y TẾ NGUYỄN THỊ DIỆP ANH CÁC CHỈ SỐ ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG SẮT VITAMIN A VÀ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CHUYÊN ĐỀ TIẾN SĨ HÀ NỘI – 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ Y TẾ NGUYỄN THỊ DIỆP ANH CÁC CHỈ SỐ ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG SẮT, VITAMIN A VÀ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH NGƯỜI HƯỚNG DẪN CHUYÊN ĐỀ: PGS.TS Lê Bạch Mai CHO ĐỀ TÀI NCS: Nghiên cứu số số hóa sinh liên quan đến tình trạng dinh dưỡng sắt, vitamin A phụ nữ mang thai bổ sung thực phẩm Chuyên ngành : Hóa Sinh Y Học Mã số : 62720112 CHUYÊN ĐỀ TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2016 MỤC LỤC MỞ ĐẦU I VAI TRÒ CỦA SẮT VÀ VITAMIN A TRONG CƠ THỂ .2 1.1 Vai trò sắt thể 1.2 Vai trò vitamin a thể II MỘT SỐ CHỈ SỐ ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG SẮT VÀ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH .4 2.1 Sắt huyết 2.2 FERRITIN 12 2.3 TRANSFERRIN 16 2.4 THỤ THỂ TRANSFERRIN .18 2.5 HEPCIDIN .20 2.6 Xét nghiệm khả mang sắt toàn thể .24 2.7 Xét nghiệm đo lượng sắt thể 25 2.8 Xét nghiệm đánh giá độ bão hòa sắt 25 III MỘT SỐ CHỈ SỐ ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG VITAMIN A VÀ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH 26 3.1 Vitamin a huyết 26 3.2 Vitamin a sữa mẹ 29 3.3 Retinol Binding Protein 31 KẾT LUẬN 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC HÌNH Hình 1: Vai trò vitamin A .2 Hình 2: Quá trình phân giải tổng hợp Rodopxin .3 Hình 3: Mơ hình hệ thống AAS .8 Hình 4: Hình ảnh mơ tả giai đoạn phản ứng phương pháp ELISA 16 Hình 5: Chu trình vật chuyển sắt thể 21 Hình 6: Hepcidin tương tác với ferroportin kiểm sốt sắt thể .22 Hình 7: Mơ tả giai đoạn phản ứng xác định hepcidin ELISA 23 Hình 8: Sơ đồ bước tiến hành phản ứng xác định nồng độ hepcidin phương pháp ELISA .24 Hình 9: Bộ dụng cụ iCheck FRORO 30 Hình 10: Sơ đồ bước tiến hành phản ứng xác định nồng độ RBP phương pháp ELISA .33 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS Hấp thụ nguyên tử: Atomic Absorption Spectroscopy ELISA Enzyme-linked Immunosorbent Assay Fer Ferritin Hb Hemoglobin HPLC High- Performance liquid chromatography IB Iron Body ICP-MS Khối phổ plasma cảm ứng: Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometer IGF-I Insulin-Like Growth Factor-1 RBP Retinol Binding Protein RSD Relative standard deviation Tf Transferrin Tf-R Transferrin receptor TIBC Total Iron Binding Capacity VitA Vitamin A MỞ ĐẦU Sắt Vitamin A hai ba vi chất quan trọng (sắt, vitamin A, iốt) cần thiết cho sống [1] Trong thể, sắt có mặt tất tế bào với nhiều chức vận chuyển oxy từ phổi tới tổ chức dạng hemoglobin (Hb), tăng cường sử dụng oxy tổ chức bắp dạng myoglobin, đóng vai trò trung gian vận chuyển điện tử tế bào dạng cytochrom, sắt tham gia vào thành phần số enzym oxy hóa khử tế bào [2], [3], [4] Thiếu hụt sắt thể gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến tổng hợp hemoglobin, gây thiếu máu thiếu sắt, ảnh hưởng đến hoạt động chuyển hóa tế bào Ngược lại tải sắt thể nguy hiểm thúc đẩy sản xuất gốc tự do, gây hậu nghiêm trọng ứ đọng sắt mô làm rối loạn chức mô quan [5] Cũng sắt, vitamin A có vai trò quan trọng phát triển thể, vitamin A tham gia trì tính nhạy cảm mắt thu nhận ánh sáng, đảm bảo cho mắt hoạt động bình thường Vitamin A có vai trò tăng trưởng, tham gia vào biệt hóa tế bào bảo vệ tồn vẹn biểu mô niêm mạc - hàng rào quan trọng bảo vệ thể khỏi xâm nhập vi khuẩn từ bên ngoài, thiếu vitamin A q trình lớn bị ngừng trệ [6] Nhờ nỗ lực nhà khoa học việc nghiên cứu, ngày có nhiều số đánh giá tình trạng sắt Vitamin A thể Một số xét nghiệm trở nên thường quy dự phòng chẩn đốn bệnh Nhiều tiến kỹ thuật kỹ thuật đo quang, miễn dịch, kỹ thuật sắc ký … ứng dụng để đánh giá tình trạng sắt, vitamin A Chuyên đề nhằm mục tiêu sau: Phân tích số ý nghĩa chúng đánh giá tình trạng sắt thể Đánh giá kỹ thuật xác định số đánh giá tình trạng vitamin A thể I VAI TRÒ CỦA SẮT VÀ VITAMIN A TRONG CƠ THỂ 1.1 Vai trò sắt thể Sắt thành phần dinh dưỡng có tầm quan trọng sống Trong thể sắt có mặt tất tế bào với nhiều chức vận chuyển oxy từ phổi tới tổ chức dạng hemoglobin (Hb), tăng cường sử dụng oxy tổ chức bắp dạng myoglobin, đóng vai trò trung gian vận chuyển điện tử tế bào dạng cytochrom, sắt tham gia vào thành phần số men oxy hóa khử tế bào Thiếu hụt sắt thể gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến tổng hợp hemoglobin, gây thiếu máu thiếu sắt, ảnh hưởng đến hoạt động chuyển hóa tế bào [2],[3],[4] Ngược lại tải sắt thể nguy hiểm thúc đẩy sản xuất gốc tự do, gây hậu nghiêm trọng ứ đọng sắt mô làm rối loạn chức mô quan 1.2 Vai trò vitamin a thể Tên hóa học vitamin A retinol Trong thể người, vitamin A tồn số dạng hoạt động khác aldehyd (retinal), acid (retinoic adid) Hình 1: Vai trò vitamin A Một vai trò quan trọng vitamin A chức đặc hiệu chế nhìn, tham gia trì tính nhạy cảm mắt thu nhận ánh sáng Sắc tố nhạy cảm với ánh sáng nằm tế bào que, võng mạc Rodopxin Trong bóng tối, retinal kết hợp với opsin (là protein) để tổng hợp rhodopsin, giúp võng mạc nhận hình ảnh điều kiện thiếu ánh sáng Sau đó, sáng rhodopsin lại bị phân huỷ cho opsin all-trans-retinal, alltrans-retinal vào máu để trở lại thành cis-retinol [7] Hình biểu diễn trình phân giải tổng hợp Rodopxin Ánh sáng Rodopxin Opsin + Retinal Tối Retinol Hình 2: Quá trình phân giải tổng hợp Rodopxin Trong điều kiện bình thường, phân giải tổng hợp trình trì trạng thái cân bằng, tốc độ phân giải tổng hợp Khi thiếu vitamin A tốc độ tái tạo Rodopxin chậm lại Vì việc bổ sung vitamin A thường xuyên từ thức ăn hàng ngày cần thiết để trì trình trên, đảm bảo cho mắt hoạt động bình thường [7],[8] Vitamin A có vai trò quan trọng hình thành trì chức bảo vệ tồn vẹn biểu mơ, hàng rào bảo vệ chống nhiễm trùng Khi thiếu vitamin A tế bào tiết chất nhày phần lớn biểu mơ giảm số lượng kích thước thay tế bào sản xuất keratin Hậu chứng khơ giác mạc với tượng sừng hố kết mạc giác mạc mắt mô khác, cuối dẫn đến mù lòa [11] Những mơ nhạy cảm với VitA da, đường hô hấp, tuyến nước bọt, mắt tinh hồn Vitamin A có vai trò quan trọng việc trì nồng độ bình thường hormon tăng trưởng IGF-I (Insulin-Like Growth Factor - I) phát triển bình thường trẻ , [12] Khi thiếu vitamin A trình lớn trẻ bị ngừng trệ, chí tụt cân Thiếu vitamin A làm xương mềm mảnh bình thường, q trình vơi hố bị rối loạn [11],[13] Vitamin A tăng cường khả miễn dịch thể Vitamin A có tác dụng qua trung gian tế bào, qua đáp ứng miễn dịch dịch thể Liên quan lympho T, B, bạch cầu đa nhân trung tính Thiếu vitamin A làm giảm sức đề kháng với bệnh tật, dễ mắc bệnh nhiễm khuẩn, dễ bị nhiễm khuẩn nặng, đặc biệt sởi, tiêu chảy, viêm đường hô hấp làm tăng nguy tử vong trẻ nhỏ Mới đây, người ta thấy vitamin A có khả làm tăng sức đề kháng với bệnh nhiễm khuẩn, uốn ván, lao, sởi, phòng ngừa ung thư… [9] VitA có vai trò tạo máu Thiếu vitamin A làm cho chuyển hố sắt bị rối loạn Giảm vitamin A, ảnh hưởng đến hàm lượng hemoglobin Người ta thấy bổ sung vitamin A đơn kết hợp với kẽm, sắt… làm giảm tỷ lệ thiếu máu cộng đồng Bổ sung vitamin A, làm tăng huyết sắc tố, giảm receptor transferin huyết thanh, cải thiện số erythropoiesis [6] II MỘT SỐ CHỈ SỐ ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG SẮT VÀ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH Tình trạng sắt thể thay đổi từ mức thừa sắt thiếu máu thiếu sắt Từ trước có nhiều phương pháp sử dụng để đánh giá tình trạng sắt cá thể bao gồm xác định lượng sắt ăn vào, Hb, thể tích trung bình tế bào, số trung bình hồng cầu, proporphyrin hồng cầu tự do, nhuộm sắt tủy xương… Ngày có thêm nhiều số để đánh giá tình trạng sắt thể như: đo sắt huyết thanh, ferritin, transferrin (Tf), transferrin- receptor (Tf-R), khả gắn sắt tồn phần, độ bão hòa Tf [14] 2.1 Sắt huyết Trong điều kiện bình thường, nồng độ sắt huyết phản ánh Fe3+ gắn với transferrin mà với Hb tự huyết tương Xét nghiệm định lượng sắt huyết giúp thăm dò tình trạng thiếu máu Tình trạng thiếu hụt sắt gây thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc: Nồng độ sắt huyết thấp (thường nhỏ µmol/L) với hệ số bão hòa transferrin giảm nặng (