NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN ETHYL ACETATE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC THU HÁI TẠI QUẢNG NAMĐÀ NẴNG

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ LINH THẢO NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN ETHYL ACETATE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC THU HÁI TẠI QUẢNG NAM-ĐÀ NẴNG LUẬN VĂN CỬ NHÂN HOÁ HỌC Đà Nẵng- Năm 2019 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ LINH THẢO NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN ETHYL ACETATE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC THU HÁI TẠI QUẢNG NAM-ĐÀ NẴNG Chuyên ngành : Hóa hữu LUẬN VĂN CỬ NHÂN HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC ThS ĐỖ THỊ THÚY VÂN Đà Nẵng-Năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Đinh Thị Linh Thảo LỜI CẢM ƠN Lời em xin chân thành cảm ơn quý thầy cô khoa tồn thể thầy phịng thí nghiệm thuộc Khoa Hóa Trường Đại học Sư Phạm – Đại họ Đà Nẵng, giúp đỡ hỗ trợ em kiến thức sở vật chất để em hồn thành tốt báo cáo khóa luận Em xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến cô Th.s Đỗ Thị Thúy Vân giao đề rài hướng dẫn, đồng thời giúp đỡ hỗ trợ em suốt trình làm đề tài, Em xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Sinh- Môi trường Đại học Sư Phạm – Đại học Đà Nẵng, Trường Đại học Bách Khoa Đà Nẵng tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành đề tài Trong suốt q trình làm khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót bước đầu làm quen với việc nghiên cứu Vì vậy, em mong nhận góp ý tận tình thấy giáo để khóa luận hoàn chỉnh Đà Nẵng, ngày 20 tháng 04 năm 2019 Sinh viên Đinh Thị Kinh Thảo MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm Bố cục luận văn CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY ĐU ĐỦ 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ TRONG NƯỚC 1.3 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ NGOÀI NƯỚC 1.4 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY ĐU ĐỦ 13 1.5 CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO 25 1.5.1 Phương pháp MTT 26 1.5.2 Phương pháp SRB 26 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 27 2.1.1 Nguyên liệu 27 2.1.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 27 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.2.1 Phương pháp chiết mẫu thực vật 27 2.2.3 Phương pháp xác định thành phần hóa học dịch chiết 28 2.3 ĐỊNH TÍNH MỘT SỐ LỚP CHẤT TRONG HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 29 2.3.1 Alkaloid 29 2.3.2 Flavonoid 29 2.3.3 Coumarin 29 2.3.4 Saponin 30 2.3.5 Đường khử 30 2.3.6 Polyphenol 30 2.3.7 Steroid 30 2.3.8 Axit hữu 31 2.3.9 Chất béo 31 2.3.10 Carotene 31 2.3.11 Polysaccarid 31 2.3.12 Iridoid 31 2.4 SƠ ĐỒ ĐIỀU CHẾ CÁC CAO CHIẾT 32 2.5 THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA DỊCH CHIẾT ETHYL ACETATE 33 2.5.1 Quy trình chiết xuất dịch chiết hoa Đu đủ đực để nghiên cứu tác dụng ức chế tế bào ung thư 33 2.5.2 Các dòng tế bào 34 2.5.3 Phương pháp 34 2.5.4 Thử độc tế bào 34 2.6 ĐỊNH DANH SƠ BỘ MỘT SỐ HỢP CHẤT HÓA HỌC TRONG CAO CHIẾT ETHYL ACETATE 35 2.7 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL 35 2.7.1 Chiết xuất cao chế phẩm: 35 2.7.2 Mô tả: 35 2.7.3 Cắn không tan nước: 36 2.7.4 Mất khối lượng làm khô (Phụ lục 9.6-DĐVN IV): 36 2.7.5 Tro toàn phần (Phụ lục 9.8-DĐVN IV): 36 2.7.6 Kim loại nặng: 37 2.7.7 Độ pH (Phụ lục 6.2-DĐVN IV): 37 2.7.8 Định tính lớp chất hóa học: 37 2.7.9 Hoạt tính kháng vi sinh vật: 37 2.7.10 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư cao chiết ethanol hoa đu đủ đực: 38 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH CÁC LỚP CHẤT TRONG HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 39 3.2 THỬ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT ETHYL ACETATE TỪ HOA ĐU ĐỦ ĐỰC 40 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA HỌC DỊCH CHIẾT ETHYL ACETATE BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS 41 3.4 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL 44 3.4.1 Chiết xuất cao dược liệu: 44 3.4.2 Mô tả: 44 3.4.3 Cắn không tan nước: 44 3.4.4 Mất khối lượng làm khô: 45 3.4.5 Tro toàn phần: 45 3.4.6 Kim loại nặng 46 3.4.7 Độ pH: 46 3.4.8 Định tính: 47 3.4.9 Hoạt tính kháng vi sinh vật 49 3.4.10 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 52 KẾT LUẬN 52 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BuOH: Butanol CD3OD: Methanol- D CHCl3: Chloroform D: Dichlomethane DMSO: Dimethyl sunfoxide DEPT: Distortionless enhancement by polarisation transfer EtOAc: Etylacetate EtOH: Ethanol GC-MS: Gas chromatography-Mass spectrometry MeOH: Methanol Me: Methyl SRB: Sulforhodamine B UV: Ultraviolet DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Số hiệu Tên bảng Trang 1.1 Thành phần hóa học Đu đủ 12 1.2 1.3 Tác dụng chất chiết từ Đu đủ lên các dòng tế bào ung thư khác điều kiện in vitro Hoạt tính chống ung thư glucosinolate, phenolic, flavonoid, carotenoid alcaloid Đu đủ 17 22 3.1 Định tính các lớp chất hoa Đu đủ đực 39 3.2 Hoạt tính độc tế bào phân đoạn dịch chiết n-hexane 40 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 Thành phần hóa học dịch chiết ethyl acetat hoa Đu đủ đực Kết khảo sát cắn không tan nước cao đặc hoa đu đủ Kết khảo sát khối lượng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hàm lượng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nước Kết định tính các nhóm chất cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc hoa đu đủ đực Kết khảo sát hoạt tính gây độc tế bào ung thư cao đặc hoa đu đủ đực 41 44 45 45 46 47 47 50 51 Hình 3.4 Phổ MS 9,12-Octadecadienoic acid(Z,Z) 3.4 KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO CHIẾT ETHANOL Từ nghiên cứu dựa theo DĐVN IV, đề xuất tiêu chuẩn cao dược liệu hoa đu đủ đực với định hướng làm nguyên liệu thuốc gây độc tế bào ung thư từ hoa đu đủ đực sau: 3.4.1 Chiết xuất cao dược liệu: Cao đặc hoa đu đủ đực bào chế từ hoa đu đủ đực (Carica papaya L.) theo phương pháp thích hợp, để chế phẩm có hàm lượng hoạt chất ổn định 3.4.2 Mô tả: Cao hoa đu đủ đực cao đặc quánh, mềm, đồng Màu nâu đậm Mùi nồng, đặc trưng dược liệu Vị lợ, đắng 3.4.3 Cắn không tan nước: Không quá 3% Kết khảo sát cắn không tan nước cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.4 Bảng 3.4 Kết khảo sát cắn không tan nước cao đặc hoa đu đủ đực STT mmẫu (g) mcắn (g) C (%) 1,000 0,021 2,100 1,000 0,021 2,100 44 1,000 0,022 2,200 CTB (%) 2,133 Nhận xét: Cắn không tan nước trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 2,133%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không quá 3% 3.4.4 Mất khối lượng làm khô: Không quá 20% Kết khảo sát khối lượng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết khảo sát khối lượng làm khô cao đặc hoa đu đủ đực STT mmẫu (g) mmẫu sau làm khô (g) W (%) 1,000 0,853 14,700 1,000 0,853 14,700 1,000 0,852 14,800 WTB (%) 14,733 Nhận xét: Mất khối lượng làm khơ trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 14,733%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không quá 20% 3.4.5 Tro tồn phần: Khơng quá 35% Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.6 Bảng 3.6 Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc hoa đu đủ đực STT mcốc (g) mmẫu (g) m cốc mẫu sau tro hóa T (%) (g) 34,452 1,000 34,559 45 10,700 32,365 1,000 32,472 10,700 36,283 1,000 36,389 10,600 TTB (%) 10,667 Nhận xét: Tro tồn phần trung bình cao đặc hoa đu đủ đực 10,667%, đạt yêu cầu theo quy định DĐVN IV không quá 35% 3.4.6 Kim loại nặng Kết khảo sát hàm lượng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết khảo sát hàm lượng số kim loại nặng cao đặc hoa đu đủ đực Hàm lượng cao Kim loại nặng đặc hoa đu đủ đực (mg/kg) Hàm lượng cho phép (mg/kg) 5,273.10-4 ≤ 0,05 2+ 6,591.10-4 ≤ 30 2+ 4,502.10-3 ≤ 40 2+ Pb Cu Zn Nhận xét: Hàm lượng số kim loại nặng khảo sát cao đặc hoa đu đủ đực mức cho phép theo định số 46/2007/QĐ-BYT nên không ảnh hưởng đến sức khỏe người 3.4.7 Độ pH: Dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực 1% (kl/tt) nước phải có pH từ 5,0 đến 6,0 Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nước thể Bảng 3.8 46 Bảng 3.8 Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nước Lần đo Trung bình pH 5,610 5,620 5,620 5,610 5,610 5,614 Nhận xét: Độ pH trung bình dung dịch cao đặc hoa đu đủ đực nước 5,614 3.4.8 Định tính: Chế phẩm phải thể phép thử định tính các nhóm hợp chất có khả gây độc tế bào ung thư từ hoa đu đủ đực Kết định tính các nhóm hợp chất có khả gây độc tế bào ung thư từ cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.9 Bảng 3.9 Kết định tính nhóm chất cao đặc hoa đu đủ đực STT Nhóm chất Saponin Alcaloid Coumarin Thuốc thử đặc hiệu Phản ứng tạo bọt Tạo cột bọt bền Kết Kết luận sơ + Có Mayer Kết tủa trắng +++ Dragendroff Kết tủa cam ++ Wagner Kết tủa nâu ++ Phản ứng đóng mở Tạo dung dịch đục vong lacton Phản ứng Cyanidin Hiện tượng Dung dịch chuyển sang + Dung dịch NaOH 10% Dung dịch chuyển sang màu vàng đậm 47 Có + màu tím đỏ Flavonoid Có Có + Dung dịch FeCl3 Dung dịch chuyển sang + màu xanh đen Đường khử Polyphenol Fehling A Fehling Kết tủa đỏ gạch B Dung dịch FeCl3 5% Dung dịch chuyển sang màu xanh ++ Có +++ Có thẫm Dung Thuốc thử Salkowski chuyển dịch sang ++ màu xanh Steroid Phản Chất béo Acid hữu 10 Carotenoid ứng Dung Lieberman- chuyển Bourchard màu xanh lục sang Hơ nóng cho bay Để lại vết mờ hết dung môi Phản giấy lọc ứng với Không Na2CO3 tinh thể tượng Phản ứng với H2SO4 Dung dịch có đậm đặc Có dịch màu xanh lá + + Có - Khơng có ++ Có Nhận xét: Sơ kết luận cao đặc hoa đu đủ đực có chứa các hoạt chất: Alcaloid, Flavonoid, saponin, đường khử, polyphenol, steroid, coumarin, carotene, chất béo Ghi chú: Dấu (+) : Phản ứng dương tính (++) : Phản ứng dương tính rõ (+++) : Phản ứng dương tính rõ (-) : Khơng có 48 3.4.9 Hoạt tính kháng vi sinh vật Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.10 Bảng 3.10 Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc hoa đu đủ đực 49 a b Chất đối chứng cho các chủng vi khuẩn Chất đối chứng cho nấm Gram + Tên mẫu Nấm men Gram - Enteroc Staphylo Bacill Escher occus coccus us ichia faecalis aureus cereus coli ATCC2 ATCC25 ATCC ATCC 99212 923 13245 25922 Pseudo monas aerugin osa ATCC2 7853 Salmon ella enterica ATCC1 3076 Candida albicans ATCC10 231 MIC Cao đặc hoa đu đủ 256 - - - - - 128 256 256 128 32 256 128 - 16 64 256 256 - 128 128 64 16 - - - - - - đực Steptomyc ina Tetramyci na Kanamyci na Nistatinb Cyclohexa 32 mideb Nhận xét: Kết Bảng 3.10 cho thấy cao đặc hoa đu đủ đực biểu hoạt tính kháng vi khuẩn Enterococcus faecalis (ATCC299212) với giá trị MIC 256 µg/mL có khả ức chế phát triển nấm Candida albicans (ATCC10231) với giá trị MIC 128 µg/mL 50 3.4.10 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư Kết khảo sát hoạt tính gây độc tế bào ung thư cao đặc hoa đu đủ đực thể Bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết khảo sát hoạt tính gây độc tế bào ung thư cao đặc hoa đu đủ đực Mẫu TB sống sót (CS %) N.độ (µg/mL) A549 Hep3B % TB sống Sai số % TB sống Control MCF-7 Sai số % TB sống Sai số 100,00 2,40 100,00 1,89 100,00 3,76 Cao đặc hoa 30 58,67 3,12 88,31 2,53 74,04 1,25 đu đủ đực 100 66,47 2,05 63,27 1,71 57,25 3,12 Camptotheci 0,5 µM 76,00 2,27 48,73 1,35 62,82 2,10 n* 10 µM 41,77 1,25 28,27 2,64 42,66 2,08 Camptothecin *: Chất đối chứng dương hoạt động ổn định thí nghiệm Nhận xét: Kết Bảng 3.11 cho thấy cao đặc hoa đu đủ đực thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư dòng tế bào ung thư phổi A549, ung thư gan Hep3B, ung thư vú MCF-7 nồng độ 30 µg/mL 100 µg/mL với các mức độ khác 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN -Đã định tính sơ các lớp chất thường gặp thực vật phản ứng hóa học cho kết quả: mẫu hoa Đu đủ đực dùng nghiên cứu có các lớp chất là: alkaloid, flavonoid, saponin steroid, đường khử, polyphenol, sterol, coumarin, polysaccarid, carotene, chất béo - Từ nguyên liệu ban đầu, các phương pháp khác thu dịch chiết ethyl acetate Đã thử hoạt độc tế bào dịch chiết ethyl acetate các dòng tế bào ung thư phổi (A549), ung thư gan (Hep 3B), ung thư vú (MCF-7), kết cho thấy phân đoạn dịch chiết ethyl acetate thể hoạt tính mức trung bình đến yếu với phần trăm tế bào sống sót từ 5,88±1,56 µg/mL đến 98,02±2,21 µg/mL - Đã định danh sơ thành phần hóa học cao ethyl acetate phương pháp phổ GC/MS có 10/10 cấu tử định danh với hàm lượng lớn bao gồm: Sitosterol (34.83%); n-Hexadecanoic acid (15.53%); – 9,12-Octadecadienoic acid(Z,Z) (14.33%); Campesterol (11.61%) - Đã xây dựng tiêu chuẩn sở cao chiết ethanol hoa đu đủ đực KIẾN NGHỊ - Phâp lập xác định cấu trúc chất phân lập từ các phân đoạn hoa Đu đủ đực - Thăm dò các hoạt tính gây độc tế bào các chất phân lập từ hoa đu đủ đực 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [2] Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Hà Nội [3] Nguyễn Văn Đàm, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, Nxb Y học, Hà Nội [4] Trần Thanh Hải (2016) Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học hoa Đu đủ đực, Luận văn Thạc sĩ Dược học, Học viện Quân Y, Bộ Quốc phòng [5] Trần Thanh Hà, Trịnh Thị Điệp (2012), “Hai cycloratane triterpene lần phân lập từ lá đu đủ (Carica papaya L.)”, Tạp chí hóa học, Tập 50 (4A), tr 166169 [6] Hồ Thị Hà (2014), Nghiên cứu hoạt tính sinh học số hợp chất chiết tách từ đu đủ (Carica papaya Linn), Luận án Tiến sĩ Sinh học, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội [7] Giang Thị Kim Liên Đỗ Thị Lệ Uyên (2015), “Khảo sát thành phần hoá học số dịch chiết từ hoa đu đủ đực thu hái Đà Nẵng”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ ĐHĐN, Số 03 (88), tr 119 [8] Đỗ Tất Lợi (1986), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [9] Phạm Kim Mãn cộng (2001), “Nghiên cứu thuốc Panacrin ức chế u dùng điều trị ung thư”, Tạp chí dược liệu, (2+3), tr 58-62 [10] Hà Thị Bích Ngọc, Trần Thị Huyền Nga, Nguyễn Văn Mùi (2007), “Điều tra hợp chất carotenoid số thực vật Việt Nam”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 23, tr 130-134 [11] Lê Thị Thanh Phương (2017) Nghiên cứu phân lập số hợp chất từ phân đoạn dịch chiết Chloroform hoa Đu đủ đực thu hái Quảng Nam-Đà Nẵng, Luận văn Thạc sĩ Hóa Hữu cơ, Trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng 53 [12] Nguyễn Văn Rư, Vũ Quang Thái (2013), “Tách chiết chymopapain từ nhựa đu đủ xanh (Carica papaya L.) chế thử thành dạng bột để pha tiêm” Tạp chí Hóa học, 50.6, tr 767-771 [13] Đỗ Thị Thảo (2006), Nghiên cứu xác định khả phòng chống ung thư chất hóa học số thuốc Việt Nam, Luận án Tiến sĩ Sinh học [14] Trần Thế Tục, Đoàn Thế Lư (2004), Cây đu đủ kỹ thuật trồng, Nxb Lao động Xã hội, Hà Nội [15] Nguyễn Tường Vân, Đặng Hồng Vân, Phạm Gia Khôi, Trần Mạnh Bình, Phan Quốc Kinh (1983), “Chiết xuất xác định carpaine alkaloid lá Đu đủ”, Tạp chí dược học, số Tiếng Anh [16] Okunola A., Alabi, Muyideen T Haruna, Chinedu P Anokwuru, Tomisin Jegede, Harrison Abia, Victor U Okegbe and Babatunde E Esan (2012), “Comparative studies on antimicrobial properties of extracts of fresh and dried leaves of Carica papaya (L) on clinical bacterial and fungal isolates, Pelagia Research Library”, Advances in Applied Science Research, 3(5), pp 3107-3114 [17] Maisarah A.M., Nurul Amira B., Asmah R and Fauziah O (2013), “Antioxidant analysis of different parts of Carica papaya L.”, International Food Research Journal, 20(3), pp 1043-1048 [18] Ikeyi Adachukwu, Ogbonna O and Eze Faith V (2013), “Phytochemical analysis of paw paw (Carica papaya) leaves”, International Journal of Life Sciences Biotechnology and Pharma Research, Vol 2(3), pp 346-351 [19] Eno AE, Owo OI, Itam EH, Konya RS (2000), “Blood pressure depression by the fruit juice of Carica papaya L in renal and DOCA-induced hypertension in the rat”, Phytother Res, Jun; 14(4):235-9 [20] Adlin Afzan, Noor Rain Abdullah, Siti Zaleha Halim, Badrul Amini Rashid (2012), “Repeated dose 28 days oral toxicity study of Carica papaya L leaf extract in Sprague dawley rats”, Molecules 2012, 17, pp 4326-4342 54 [21] Adeolu Alex, Adedapo and Vivian Eguonor, Orherhe (2013), “Antinociceptive and anti-inflammatory studies of the aqueous leaf extract of Carica papaya in laboratory animals” Asian J.EXP.BIOL.SCI, Vol 4(1), pp 89-96 [22] Moses Alo, Ukpai Agwu Eze, Chukwudi Anyim (2012), “Invitro antimicrobial activities of extracts of magnifera indica, carica papaya and psidium guajava leaves on salmonella typhi isolates”, World J Public Health Sciences, 1(1):1 [23] Antonella Canini, Daniela Alesiani, Giuseppe D’Arcangelo, Pietro Tagliatesta (2007), “Gas chromatography-mass spectrometry analysis of phenolic compounds from Carica papaya L leaf”, Journal of food composition and analysis, Vol 20, pp 584-590 [24] Stephen Chinwendu, Ukpabi Emmanuel O., Chukwu Henry C., Ezikpe Chizaram (2015), Chemical Composition Of Carica Papaya Flower (Paw-Paw), International Journal of Scientific Research and Engineering Studies (IJSRES), Volume 2, Issue [25] Sunday Ahamefula Ezekwe and Paul Chidoka Chikezie (2017), “GC-MS Analysis of Aqueous extract of Unripe fruit of Carica papaya”, Journal of Nutrion & Food Sciences, 7:3, pp 2-5 [26] Satrija F, Nansen P, Bjorn H, Murtini S, He S., (1994), “Effect of papaya latex against Ascaris suum in naturally infected pigs”, J Helminthol Dec, 68(4):343-6 [27] Sheikh Fauziya and R Krishnamurthy (2013), “Papaya (Carica papaya): Source material for anticancer”, CIB Tech Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 2(1), pp 25-34 [28] Aravind G., Debjit Bhowmik, Duraivel S., Harish G (2013), “Traditional and medicinal uses of carica papaya”, Journal of medicinal plants studies, Vol 1, Issue 1, pp 7-15 [29] Ayoola G.A., Coker H.A.B., Adesegun S.A., Adepoju-Bello A.A., Obaweya K., Ezennia E.C., Atangbayila T.O (2008), “Phytochemical screening and antioxidant activities of some selected medicinal plants used for malaria therapy in 55 southwestern Nigeria”, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 7(3), pp 1019-1024 [30] Srikanth G.S., Manohar Babu S., Kavitha CH.N., Bhanoji Rao M.E., Vijaykumar N., Pradeep CH (2010), “Studies on in - vitro antioxidant activities of Carica papaya aqueous leaf extract”, Research journal of pharmaceutical, Biological and Chemical sciences, Vol 1, pp 59-65 [31] Krishna K.L., Paridhavi M and Jagruti A Patel (2008), “Review on nutritional, medicinal and pharmacological properties of papaya (Carica papaya Linn.)”, Natural product radiance, Vol 7(4), pp 364-373 [32] K Kayalvizhi, Dr L Cathrine K Sahira Banu (2015), “Phytochemical and antibacterial studies on the leaf extracts of female Carica papaya.linn”, International Journal of PharmTech Research, Vol 8(7), pp 166-170 [33] Marline Nainggolan and Kasmirul (2015), “Cytotoxicity activity of male Carica papaya L flowers on MCF-7 breast cancer cells” Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 7(5), pp 772-775 [34] Thao T T Nguyen, Paul N Shaw, Marie-Odile Parat and Amitha K Hewavitharana (2013), “Anticancer activity of Carica papaya: A review”, Mol.Nutr.Food Res, 57, pp 153-164 [35] T Oduola, T.O Idowu, I.S Bello, F.A Adeniyi, E.O Ogunyemi (2012), “Heamatological respone to intake of unpripe Carica papaya fruit extract and the isolation and characterization of Caricapinoside: A new antisickling agent from the extract”, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, Vol 5(3), pp 7781 [36] Noriko Otsuki, Nam H Dang, Emi Kumagai, Akira Kondo, Satoshi Iwata, Chikao Morimoto (2010), “Aqueous extract of Carica papaya leaves exhibits anti tumor activity and immunomodulatory effects”, Journal of Ethnopharmacology, 127, pp 760 - 767 56 [37] Aysun ozkan, Hamide gubbuk, Esma gunes, Ayse erdogan (2011), “Antioxidant capacity of juice from different papaya (Carica papaya L.) cultivars grown under greenhouse conditions in Turkey”, Turk J Biol, 35(2011), pp 619-625 [38] Giordani R., Cardenas M.L., Moulin-Traffort J., Regli P., (1996), “Fungicidal activity of latex sap from Carica papaya and antifungal effect of D(+)-glucosamine on Candida albicans growth” Mycoses, 39, pp 103-110 [39] John R., Van (1998), “Mechanism of Action of Non Stervidal Anti inflammatory Drug”, The American Jour of Med March 30, Vol 104 (3A), pp 2s3s [40] Kermanshai R, McCarry BE, Rosenfeld J, Summers PS, Weretilnyk EA, Sorger GJ (2001), “Benzyl isothiocyanate is the chief or sole anthelmintic in papaya seed extracts”, Phytochemistry, Jun; 57(3):427-35 [41] Asmah Rahmat, Rozita Rosli, Wan Nor I`zzah Wan Mohd Zain, Susi Endrini and Huzaimah Abdullah Sani (2002), “Antiproliferative Activity of Pure Lycopene Compared to Both Extracted Lycopene and Juices from Watermelon (Citrullus vulgaris) and Papaya (Caricapapaya) on Human Breast and Liver Cancer Cell Lines”, Journal of Medical Sciences, Vol 2, Issue 2, pp 55-58 [42] Rumiyati, Sismindari dan Ariyani (2006), “Effect of protein fraction of Carica papaya L leaves on the expressions of p53 and Bcl-2 in breast cancer cells line”, Majalah Farmasi Indonesia, 17(4), pp 170-176 [43] David S., Seigler, Guido F., Pauli, Adolf Nahrstedt, Rosemary Leen (2002), “Cyanogenic allosides and glucosides from passiflora edulis and carica papaya”, Phytochemistry, Vol 60, pp 873-882 [44] Rahman S., Imran M., Muhammad N., Hassan N., Chisthi A.K., Khan A.F., Sadozai K.S and Khan S.M (2011), “Antibacetial screening of leaves and stem of Carica papaya L.”, Journal of Medicinal Plants Research, Vol 5(20), pp 51675171 [45] Govindachari T.R., Naga rajan K and Viswanathan N (1965), “Carpaine and pseudocarpaine”, Tetrahedron letters, No 24, pp 1907-1916 57 [46] Chung-Shih Tang (1979), “New macrocyclic Δ1–piperideine alkaloids from papaya leaves: dehydrocarpaine I and II”, Phytochemistry, Vol 18, pp 651-652 [47] Ashok Kumar U., Manjunath C., Thaminzhmani T., Ravi Kiran Y., Brahmaiah Y (2012), “A review on immunomodulatory activity plants”, Indian Journal of Novel Drug delivery, 4(2), pp 93-103 [48] Bamidele V, Owoyele, Olubori M, Adebukola, Adeoye A, Funmilayo and Ayodele O, Soladoye (2008), “Anti-inflammatory activities of ethanolic extract of Carica papaya leave”, Inflammopharmacology, 16, pp 168-173 [49] Abrham W.B., (1978), Techniques of Animal and Clinical toxicology, Med Pub, Chicago [50] Vijay Yogiraj (2014), “Carica papaya Linn: An Overview ”, International Journal of Herbal Medicine, Vol 2(5), pp 1-8 58 ... ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ LINH THẢO NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO PHÂN ĐOẠN ETHYL ACETATE VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ CỞ CAO CHIẾT ETHANOL CỦA HOA ĐU ĐỦ ĐỰC... chiết ethanol hoa Đu đủ đực thu hái Quảng Nam – Đà Nẵng? ?? Mục tiêu nghiên cứu Xác định thành phần hóa học, hoạt tính gây độc tế bào phân đoạn ethyl acetate xây dựng tiêu chuẩn sở cao chiết ethanol. .. vậy, thành phần hóa học phận Đu đủ nghiên cứu Tuy nhiên cơng trình nghiên cứu chủ yếu quả, cơng trình nghiên cứu phận khác rễ, thân, hạt,… Đu đủ phận hoa Đu đủ đực 1.4 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH