B ộ YTẾ B ộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐAI DƯƠC HÀ NƠI • HOC • • • NGƠ THỊ QUỲNH MAI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HOC • VÀ TÁC Dụ NG CHố NG OXY • HÓA CỦA CÂY DÂY CHIề U ( TETRACERA SCANDENS ( L ) M E R R , DILLENIACEAE) LUậ• N Vă N THAC s ĩ DƯƠC Họ• C • • DƯỢC LIỆU - DƯỢC CỔ TRUYỀN 60 73 10 Người hướng dẫn khoa học: TSKH Nguyễn Minh Khởi TRƯỜNG ĐH DƯỢC HÀ NỘI Ngày ,J*^ĩháng A'f&m 20.i£ Số ĐKCB: i) i l l H N I 2011 17ô T nhận thức bệnh tật on on on OD □ Thừa nhận bị trầm cảm có bệnh lũ lũ lũ 1□ □ Thừa nhận có bệnh quy cho thức ăn, khí hậu, làm nhiều, virus, cần nghỉ, 2D 20 2D 2D □ Phủ nhận bệnh hồn tồn ® II a n=7 II (-* Oi II o II as © Tổng điểm HAMD 17: CHỦNG NHẬN CỦA c SỞ ĐlỂU TRỊ , ngày tháng năm 2005 Bác sĩ theo dõi nghiên cứu (Họ tên chữ ký) PHIẾU THEO DÕI TÁC DỤNG KHƠNG MONG MUỐN (ADR) Có ADR xảy thời gian nghiên cứu khơng: □ Có, xin ghi lại □ TT C c biểu tá c dụng không mong muốn (ADR) Ngày bắt đáu (Ngày/ Ngày kết tháng/năm) tháng/năm) thúc (Ngày/ Độ nặng* i=Nhẹ 2=TB 3=Nặng Hành động thực Mối quan hệ vói l=K hơng 2=Giảm liều 3=Tăng liều 4=Ngưng tạm thời l=K hông liên quan 2=Không chắn 5= Ngưng hẳn 5=Rõ ràng có thuốc nghiên cứu 3=CĨ the 4=CĨ khả Kết bệnh l=Phục hồi 2=Phục hồi, để lại di chứng 3=Vẫn 4=Chết 5=Khơng có số liệu =Khơng thể làm 7=Dùng thuốc Nếu bệnh nhân bỏ dở nghiên cứu ADR, xin khoanh tròn vào số thứ tự Ghi chú: l=Nhẹ: không cản trở hoạt động thể; 2=Trung bình: cản trở khơng dáng kể đến hoạt động thể; 3=Nặng: cản trở đáng kể đến hoạt động thể nhân Bác sĩ theo dõi nghiên cứu (Họ tên chữ ký) DANH SÁCH BỆNH NHÂN DÙNG AMITRIPTYLIN TT Sô hổ sơ Họ tên Tuổi TT Số hồ sơ Họ tên Tuổi 8423 Nguyễn Thị Ngát 20 20 3768 Linh Thị Hoa 39 9542 Phạm Thị Hằng 31 21 5698 Nguyễn Thị Vân 29 3543 Vũ Thị Nga 27 22 4654 Nguyễn Thị Huyền 42 3211 Phạm Văn Lưu * 23 23 8790 Hồ Thị Lý 19 9321 Quách Thị Ninh 35 24 9065 Phạm Văn An 31 0089 Nguyễn Thị Nhu 18 25 4575 Ngơ Hồng Hà 20 0129 Nguyễn Hồng Na 23 26 2435 Nguyễn Thị Linh 23 2342 Trần Thị Hoa 28 27 6587 Nguyễn Thị Vụ 24 0078 Nguyễn Quang Hưng 39 28 0156 Mai Thị Trúc * 20 10 0789 Lê Thị Hạnh 40 29 6760 Ngô Thị Nga 32 11 0856 Khổng Thị Hằng 22 30 7345 Nguyễn Thị Thuý 41 12 0987 Ân Thị Hạnh 20 31 5421 Lại Thị Linh 21 13 0023 Bùi Thị Huệ 35 32 3213 Nguyễn Thị Linh 33 14 0045 Nguyễn Văn Duy 21 33 4653 Hà Tuấn Anh 37 15 0267 Hoàng Thị Lợi 24 34 1324 Nguyễn Thị Lan 23 16 0543 Nguyễn Thị Hảo 31 35 6098 Nguyễn Thị Hoa 38 17 1254 Nguyễn Thị Nga 25 36 3079 Đào Thị Kim 23 18 1456 Nguyễn Thị Hương 32 37 3481 Nguyễn Văn Thanh 22 19 1789 Võ Thị Thuỳ 36 38 1270 Đỗ Thị Bình 29 *: Bệnh nhân ngừng điều trị DANH SÁCH BỆNH NHÂN DÙNG MIRTAZAPIN TT Sô hồ sơ Họ tên Tuổi TT Sỏ hồ sơ Họ tên Tuổi 8525 Trần Thị Hà 21 20 5068 Nguyễn Thu Hà 29 9042 Phạm Thuý Hằng 38 21 8698 Lê Thị Hường 37 4333 Hồ Thị Lưu 20 22 6654 Đào Thị Thu 29 3001 Phạm Thị An 24 23 8890 Ngô Thị Minh 24 9091 Nguyễn Lan Anh 29 24 9965 Nguyễn Thuý Bình 23 0689 Nguyễn Văn Bách 18 25 4075 Chu Bảo Hoà 27 0139 Phạm Văn Bảo 19 26 1335 Lê Thị Liên 42 2309 Hà Thị Nụ 36 27 2387 Đinh Thị Thu 45 0098 Nguyễn Thị Bang 31 28 0956 Đặng Thị Hải 30 10 0721 Nguyễn Kim Quy 28 29 6060 Lâm Kiều Oanh 21 11 0398 Nguyễn Thanh Hà 35 30 5045 Dương Hồng Điệp 31 12 0675 Mai Thị Diêm 21 31 2421 Đỗ Văn Duy 40 13 0090 Lại Thị Yến 22 32 3813 Đỗ Đình Hoan 32 14 0040 Vũ Thị Hương 20 33 4953 Vũ Thị Ngọ 21 15 0260 Nguyễn Hồng Hạnh 25 34 1024 Tơ Thị Hồi 39 16 0506 Trần Vân Anh 28 35 7098 Mai Xuân Hoa 34 17 1024 Nguyễn Thị Lê 23 36 9079 Lê Kim Thanh 39 18 1421 Đỗ Thanh Hương 20 37 8481 Lê Thanh Tâm 24 19 1709 Nguyễn Thị Quế 26 38 0270 Đào Thu Huyền 40 X Á C N H Ậ N C ẻ A B ỆN H V IỆ N T T T W I — ' ‘ả G,* M ĐƠC LỜI CẢM ƠN Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TSKH Nguyễn Minh Khởi TS Phương Thiện Thương, người thầy theo sát tận tình hướng dẫn em suốt trình thực luận văn Em xin chân thành cảm ơn động viên, hướng dần đóng góp ý kiến ThS Nguyễn Trang Thúy, Khoa Dược lý Viện Dược liệu thời gian qua Em xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo phòng ban, môn trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện cho em suốt nhừng năm học vừa qua Em xin cảm ơn thây cô giáo, anh chị bạn đồng nghiệp Viện Dược liệu giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em trình học tập trình làm luận văn Viện Cuối cùng, em muốn gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè, người động viên giúp đỡ em trình học tập, thực luận văn sống Hà Nội, ngày tháng năm 2011 Ngô Thị Quỳnh Mai MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐÈ .1 Chương TỎNG QUAN 1.1 CHI TETRACERA 1.1.1 Đặc điểm thực vật phân b ố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng công dụng 1.2 CÂY DÂY CHIỀU (TETRACERA SCANDENS) 1.2.1 Đặc điểm thực vật phân b ố 1.2.2 Thành phần hóa học 1.2.3 Tác dụng công dụng 1.3 QUÁ TRÌNH OXY HÓA TRONG c o T H Ẻ 10 1.3.1 Sinh lý oxy hóa 10 1.3.2 Bệnh lý liên quan đến oxy h ó a 10 1.3.3 Các chất chống oxy h ó a 14 1.4 CHẤT CHÓNG OXY HÓA TRONG TÂN DƯỢC VÀ THỤC VẬT 16 1.4.1 Chất chống oxy hóa thuốc tân dược 16 1.4.2 Các chất chống oxy hóa có nguồn gốc thực vật 17 1.5 M ỘT SÓ PHƯƠNG PH Á P XÁC ĐỊNH H OẠ T Đ ộ CHÓ NG OXY HÓA 20 1.5.1 Một số phưong pháp xác định gốc tự dạng hoạt đ ộ n g 20 1.5.2 Phương pháp xác định số Io d 22 1.5.3 Thử tác dụng ức chế peroxy hóa lip id 22 1.5.4 Thử tác dụng số enzym theo chế chống oxy h ó a 23 1.5.5 Thử tác dụng chổng oxy hóa in vivo 25 Chuông NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIÉT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U .26 2.1 NGUYÊN LIỆU VÀ TRANG THIÉT B Ị 26 2.1.1 Nguyên liệ u 26 2.1.2 Trang thiết b ị 26 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ 27 2.2.1 Chuẩn bị mẫu thử 27 2.2.2 Phân lập xác định cấu trúc chất phân lập 27 2.2.3 Thử tác dụng chống oxy hóa mơ hình in vitro .28 2.2.4 Thử tác dụng chống oxy hóa bảo vệ gan mơ hình in v iv o 29 Chương KÉT QƯẢ THỤC NGHIỆM 30 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN c ứ u VỀ HÓA H Ọ C 30 3.1.1 Định tính sơ nhóm chất dược liệu 30 3.1.2 Chiết xuất phân đoạn dược liệu 36 3.1.3 Phân tích SKLM 37 3.1.4 Phân lập nhận dạng chất từ phân đoạn ethylacetat 39 3.2 KÉT QUẢ THỬ TÁC DỤNG CHÓNG OXY HÓA ỈN V ITR O 47 3.2.1 Tác dụng dọn gốc tự DPPH 47 3.2.2 Tác dụng chống peroxy hóa lipid 50 3.2.3 Tác dụng ức chế xanthin oxidase 52 3.3 KÉT QUA THỦ TÁC DỤNG CHĨNG OXY HĨA BẢO VỆ GAN TRÊN MƠ HÌNH IN V IVO 54 Chuong BÀN LU Ậ N 57 KÉT LƯẬN VÀ KIÉN NGHỊ 61 TÀI LIỆU THAM K H Ả O .63 PHỤ L Ụ C 68 Phụ lục l ĩ Các phổ ưv, IR, MS, 13C-NMR, 'H -N M R chất (1) 68 Phụ lục 2: Các phổ v , IR, MS, l3C-NMR, 'H -N M R chất (2) 79 Phụ lục 3: Các phổ v , IR, MS, 13C-NMR, 'H -N M R chất (3) 90 Phụ lục 4: Giấy xác nhận tên khoa h ọ c .101 Phụ lục 5: Bài báo khoa học công b ố 103 DANH MỤC CÁC CHỮ VIÉT TẮT ABTS: 2,2’-Azinobis ( -ethylbenzothiazolin- -sulphonat) BuOH: phân đoạn /7-buthanol DPPH: 1,1 -diphenyl-2-picrylhydrazyl EtOAc: phân đoạn ethylacetat EtOH: phân đoạn ethanol IR: Phổ hồng ngoại (Infraged spectrum) LPIA: Lipid peroxidation inhibitor activity MDA: Malonyl dialdehyd M eO H: Methanol MS: Phổ khối lượng (Mass spectrum) ROS: Các dạng oxy hoạt động (Reactive oxygen species) SKLM : Sac ký lớp mỏng SOD: superoxyd dismutase ƯV: Phố tử ngoại (Ultraviolet spectrum) XO: Xanthin oxidase Y HCT: Y học cổ truyền T H Ư G M G -T E - M e O D - l H Current Data Parameters NAME 111THU0NG_TE34 EXPNO PROCNO F2 - Acqui sition Parameters 20100529 Date_ 15.11 Time INSTRUM PROBHD mm Multinucl PULPROG zg30 65536 TD MeOD SOLVENT NS 16 DS SWH 10000.000 Hz 0.152588 Hz FIDRES AQ 3.2769001 sec 80.G RG 50.000 usee DW 6.00 usee DE 304.1 K TE D1 1.00000000 sec MCREST 0.00000000 sec 0.01500000 sec MCWRK avSOO ======== CHANNEL fl ======== NUC1 1H PI 11.00 usee PL1 -3.00 dB SFOl 500.1335009 MHz F2 - Processing parameters SI 327 68 SF 500.1300008 MHz 11 10 A A o o o m o CNJ VX) CN C h o Ch r \) U1 o I V Ln o o II II II M II II il II 3 o o M o o F-» Ư1 o o o o o o o o o o o o o rn FA rn rn CO VO UD VD VD WD l£> CO o U) o o o o o o to o o o o o o o o o U) M o M cn LJ fO o CT\ VO CO CO Ư1 o o u ? CO u> 02» o o t o u» o H Ư1 to § UD rr /TN o o z o w o c >< H3 s (D o ft u K* 0) f—1 r t M CO h3 d o z DJ H § ro rt M 0) OJ *-< M t o tCi w Õ i Q I o w o ■TJ d H H in m CO ^ ^ n H Ch CO 'í o cr> 00 00 ì CŨ \£> »sD LD LO