Vòng đời của một thực vật bắt đầu từ hạt. Hạt nẩy mầm hình thành chồi và rễ. Cây phát triển sinh dƣỡng đến một giai đoạn nhất định thì ra hoa, thụ phấn và tạo hạt. Giai đoạn tạo hạt cũng chính là giai đoạn kết thúc một vòng sinh trƣởng và phát triển của thực vật và khi hạt nẩy mầm sẽ mở ra một vòng đời mới. Thế giới thực vật vô cùng phong phú và đa dạng, có những cây hoàn thành vòng đời trên chỉ trong ba tháng đến một năm nhƣng cũng có những cây phải mất đến vài năm. Do vậy, cùng với sự phát triển của công nghệ sinh học hiện đại, con ngƣời đã dần dần chuyển sang nhân giống cây trong ống nghiệm để rút ngắn vòng đời của thực vật, từ đó có thể kiểm soát hầu hết cơ chế của các quá trình diễn ra trong cuộc sống của thực vật. Việc nghiên cứu điều khiển thực vật ra hoa trong ống nghiệm cũng là một phần của mục đích trên. Nếu con ngƣời hiểu rõ cơ chế và có thể điều khiển thực vật ra hoa trong ống nghiệm dễ dàng thì đây sẽ là một công cụ rất hữu ích trong việc nghiên cứu sinh lý thực vật; rút ngắn giai đoạn sinh trƣởng sinh dƣỡng ở các thực vật có giai đoạn sinh trƣởng dài, làm cây ra hoa sớm; và một đóng góp to lớn cho nông nghiệp đó là xây dựng một hệ thống có ý nghĩa trong vi nhân giống, cải thiện giống cây trồng, phục hồi các tính trạng quý, tạo cây có năng suất cao, chất lƣợng tốt,… Hơn nữa, trong cuộc sống hiện đại mà hoa kiểng là một phần không thể thiếu của con ngƣời thì việc thƣơng mại hóa hoa trong ống nghiệm rất có tiềm năng phát triển trong tƣơng lai do hoa trong ống nghiệm có nhiều ƣu điểm vƣợt trội nhƣ là nhỏ, gọn, không tốn diện tích, không tốn công chăm sóc,…rất thích hợp để trang trí trong những văn phòng làm việc hiện đại cũng nhƣ làm quà tặng.
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dischidia pectinoides Pearson) (Drosera burmannii Vahl) 2007 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 Dischidia pectinoides (Drosera burmannii Vahl) Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 ii : - - - TS. - , L . - n. iii NGUYỄN THỊ NGỌC TÚ, Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Tháng 08/2007 KHẢO SÁT SỰ RA HOA TRONG ỐNG NGHIỆM Ở CÂY LAN SÒ (Dischidia pectinoides Pearson) và CÂY BẮT RUỒI (Drosera burmannii Vahl)” Hội đồng hƣớng dẫn: TS. Trần Thị Dung Đề tài đƣợc thực hiện từ tháng 03/2007 đến tháng 08/2007 tại Bộ môn Công nghệ sinh học Trƣờng Đại học Nông Lâm Tp.HCM. Cây lan sò và cây bắt ruồi in vitro đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng cảm ứng ra hoa với các yếu tố cảm ứng đƣợc sử dụng là GA 3 , BA, cƣờng độ ánh sáng và sự gia tăng nồng độ KH 2 PO 4 , giảm nồng độ NH 4 NO 3 . Những kết quả thu đƣợc: Đối với cây lan sò - Môi trƣờng thích hợp nhất để cây lan sò ra hoa trong ống nghiệm (đạt tỉ lệ 44,4%) là môi trƣờng MS có bổ sung GA 3 1,5mg/l. Cây ra nụ sau 78 ngày nuôi cấy và ra hoa sau 95,5 ngày, trung bình đạt 7 hoa/cây. - Môi trƣờng có bổ sung BA hoặc thay đổi cƣờng độ ánh sáng không có ảnh hƣởng nhiều trên sự ra hoa của cây lan sò in vitro. Đối với cây bắt ruồi - Việc thay đổi nồng độ KH 2 PO 4 và NH 4 NO 3 không có ảnh hƣởng tốt trên sự ra hoa của cây bắt ruồi in vitro. Cây chỉ ra nụ nhƣng tỉ lệ không cao hơn so với đối chứng. Tất cả các nụ đều không nở thành hoa. iv ABSTRACT NGUYEN THI NGOC TU, Nong Lam University, HCM city, August, 2007. “The study of flowering in vitro in Dischidia pectinoides Pearson and Drosera burmannii Vahl.” Supervisor: Tran Thi Dung, Ph.D The subject was studied from 3/2007 to 8/2007 at the Department of Biotechnology at Nong Lam University. Dischidia pectinoides and Drosera burmannii in vitro were cultured in basic medium Murashige and Skoog (MS) and the supplement with different plant growth regulator such as: GA 3 , BA; the change of the intensity of light, KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 . Results: In Dischidia pectinoides The best medium for flower induction is MS medium supplemented with 1.5mg/l GA 3 . The plants has formed flower buds after 78 days and bloomed after 95.5 days. There are 7 flowers in plant. The effect of MS medium supplemented with BA or changed the intensity of light isn’t clearly. In Drosera burmannii The change of KH 2 PO 4 and NH 4 NO 3 concentrations didn’t effect in fowering in vitro in Drosera burmannii. The plants was formed flower buds, but ratio isn’t higher when compared with control treatment. All of flower buds didn’t bloom. v CHƢƠNG TRANG Trang tựa . i Lời cảm tạ ii Tóm tắt iii Mục lục v Danh sách các bảng . viii Danh sách các hình x Chƣơng 1: MỞ ĐẦU 1 1.1. Đặt vấn đề . 1 1.2. Mục đích yêu cầu 2 1.2.1. Mục đích 2 1.2.2. Yêu cầu 2 Chƣơng 2:TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3 2.1. Giới thiệu về đối tƣợng nghiên cứu 3 2.2.1. Giới thiệu khái quát về cây lan sò . 3 2.1.2. Giới thiệu khái quát về cây bắt ruồi . 5 2.2. Các yếu tố ảnh hƣởng lên sự ra hoa ngoài tự nhiên 6 2.2.1. Độ tuổi cây . 7 2.2.2. Môi trƣờng . 7 2.2.2.1. Tình trạng dinh dƣỡng . 7 2.2.2.2. Nhiệt độ . 8 2.2.2.3. Quang kỳ 8 2.2.2.4. Hiện tƣợng xuân hóa (hay sự thọ hàn) . 13 2.3. Các yếu tố ảnh hƣởng lên sự ra hoa in vitro . 15 2.3.1. Độ tuổi cây . 16 vi 2.3.2. Dinh dƣỡng 16 2.3.2.1. Nồng độ đƣờng 16 2.3.2.2. Hàm lƣợng photpho và nitơ 17 2.3.3. Các chất điều hòa sinh trƣởng . 18 2.3.3.1. Cytokinins 18 2.3.3.2. Auxins . 19 2.3.3.3. Gibberellins . 19 2.3.4. Các yếu tố khác . 20 2.4. Sự phát triển hoa in vitro . 22 2.5. Các nghiên cứu ra hoa in vitro 23 2.5.1. Trên thế giới 23 2.5.2. Trong nƣớc 24 Chƣơng 3: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 26 3.2 Nội dung 26 3.3 Bố trí thí nghiệm 26 3.3.1 Nội dung 1: Khảo sát sự ra hoa in vitro của cây lan sò 27 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự tạo sò và ra hoa in vitro của cây lan sò. . 26 Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng của nồng độ GA 3 đến sự ra hoa in vitro của cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa . 27 Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự tạo sò và ra hoa in vitro của cây lan sò. 28 3.3.2 Nội dung 2: Khảo sát sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 28 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của nồng độ KH 2 PO 4 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi. 28 Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng của nồng độ NH 4 NO 3 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 29 3.4. Chỉ tiêu theo dõi 29 vii 3.4.1 Theo dõi khả năng tạo chồi và sinh trƣởng . 29 3.4.2 Theo dõi sự ra hoa 29 3.5 Phƣơng pháp tiến hành . 30 3.5.1 Môi trƣờng nuôi cấy . 30 3.5.2 Chuẩn bị mẫu cấy . 30 3.5.3 Điều kiện nuôi cấy 30 3.5.4 Xử lý số liệu . 30 Chƣơng 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 31 Chƣơng 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 51 5.1. Kết luận . 51 5.2. Đề nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC 1 PHỤ LỤC 2 viii : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự tạo sò và ra hoa trên cây lan sò trong ống nghiệm 26 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ GA 3 đến sự ra hoa in vitro ở cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa 27 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự tạo sò và ra hoa in vitro trên cây lan sò 28 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ KH 2 PO 4 đến sự ra hoa in vitro trên cây bắt ruồi . 28 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ NH 4 NO 3 đến sự ra hoa in vitro trên cây bắt ruồi. . 29 . Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự gia tăng số chồi của cây lan sò in vitro . 31 . Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự gia tăng lá của cây lan sò in vitro 32 . Ảnh hƣởng của nồng độ GA 3 đến số chồi của cây lan sò in vitro trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa. . 34 4. Ảnh hƣởng của nồng độ GA 3 đến sự sinh trƣởng lá của cây lan sò in vitro trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa . . 36 . Ảnh hƣởng của nồng độ GA 3 đến sự ra hoa in vitro của cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa 37 . Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự gia tăng số chồi của cây lan sò in vitro . 42 . Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự gia tăng số lá của cây lan sò in vitro . 42 8. Ảnh hƣởng của nồng độ KH 2 PO 4 đến sự sinh trƣởng chiều cao ix của cây bắt ruồi in vitro 45 . Ảnh hƣởng của nồng độ KH 2 PO 4 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 46 . Ảnh hƣởng của nồng độ NH 4 NO 3 đến sự sinh trƣởng chiều cao của cây bắt ruồi in vitro 47 . Ảnh hƣởng của nồng độ NH 4 NO 3 đến sự ra hoa của cây bắt ruồi in vitro 48 . nụ đều không nở thành hoa. iv ABSTRACT NGUYEN THI NGOC TU, Nong Lam University, HCM city, August, 2007. “The study of flowering in vitro in Dischidia. sự ra hoa, tuy nhiên quan trọng nhất là: sự cạnh tranh giữa phát triển dinh dƣỡng và phát triển sinh sản, sự thi u dinh dƣỡng nhẹ (trên mức tối thi u), và