Cảm ơn các bạn đã quan tâm đến tài liệu! Nhưng mình đăng lên đây chỉ mục đích là cho các khóa sau ( K44--> sau) tham khảo, do bài nay mình làm và nộp cũng như các bạn vào năm nay nên các bạn K43 CTUMP mình khuyên k nên sử dụng, vì sẽ trùng làm ảnh hưởng đến kết quả của nhau. Mặt khác, nó chỉ là bài tự học do cá nhân mình làm, nên chắc chắn sẽ có sai sót, mong các bạn nếu có tải về được thông cảm.Một lần nữa, cảm ơn các bạn, chúc các bạn học tốt !@@
Họ tên : Nguyễn Trọng Cường MSSV: 1753010882 – Lớp YQ43 BÀI TỰ HỌC HÓA SINH CÁC DẠNG LIPID VẬN CHUYỂN TRONG MÁU- Ý NGHĨA TRONG THỰC HÀNH LÂM SÀNG Danh mục từ viết tắt: XVĐM: Xơ vữa động mạch LPL: Lipoprotein lipase LCAT : Lecithin–cholesterol acyl transferase ACAT: AcylCoA- Cholesterol acyl transferase LP :Lipoprotein Apo: Apolipoprotein HMGCoA reductase: TG: Triglycerid PL: Phospholipid CE: Cholesterol ester CM: Chylomicron VLDL: Very Low Density Lipoprotein LDL: Low Density Lipoprotein HDL: High Density Lipoprotein Lp(a): Lipoprotein (a) BMV: Bệnh mạch vành PTL: Phân tử lượng HTGL: Hepatic TG lipase DẠNG LIPID VẬN CHUYỂN TRONG MÁU Lipid vận chuyển máu dạng kết hợp với protein gọi lipoprotein (LP).Lipid máu gồm : acid béo (AB) , Phospholipid (PL), triglycerid (TG), cholesterol (tự este) Riêng acid béo kết hợp với albumin phức hợp khơng gọi LP 1.1 Cấu trúc lipoprotein Lipoprotein Machebocuf mơ tả năm 1929 Ngồi thành phần protein, lipoprotein có thành phần khác phospholipid, triglycerid, sterid cholesterol Lipoprotein có dạng hình cầu, đường kính khoảng 100- 500 A Các phân tử lipid protein liên kết với chủ yếu liên kết Vander Waalls Theo mơ hình Shen (1977), phân tử lipoprotein gồm: I apoprotein phospholipid chiếm phần vỏ bên ngoài, phần trung tâm gồm triglycerid cholesterol este, phần cholesterol tự Phần vỏ có chiều dày khoảng nm, phân cực đảm bảo tính hồ tan phân tử lipoprotein huyết tương Các apoprotein khác cấu trúc chuỗi peptid định, có loại apoprotein khác tìm thấy lipoprotein huyết tương người Phần protein lipoprotein giữ vai trò định chất nhận diện chúng màng tế bào hoạt hóa enzym chúng Khác với LP màng, LP huyết tương có cấu trúc mixen Phần nhân tiểu phân gồm lipid không phân cực TG, CE Bao quanh nhân thành phần phân cực protein, PL, cholesterol tự Lúc hình thành LP có cấu trúc lớp PL kép (hình dĩa) Sau có lồng ghép lipid khơng phân cực ( TG, CE) vào hai lớp PL làm cho chúng tách tạo thành LP có cấu trúc hình cầu với vỏ lớp PL đơn Fredrickson, Gotto số tác giả khác nghiên cứu quy luật liên kết Protein – Lipid hình thành LP xác định liên kết protein phospholipid LP làm tăng lượng protein có cấu trúc xoắn α Nếu hệ thống LP cho thêm cholesterid ( Ester hóa với acid oleic) triglycerid tỉ lệ % protein có cấu trúc xoắn α tăng lên phức hợp protein –lipid trở thành dạng mixen Những cơng trình nghiên cứu làm sở cho việc tạo nên LP nhân tạo từ hợp phần chúng Trong LP chuỗi xoắn Protein thẳng góc với Acid béo PL chím phần PL đảm bảo cho tiếp xúc nhóm mang điện tích protein PL Các nhóm liên kết với liên kết tĩnh điện Các liên kết kỵ nước protein PL thực phần đầu chuỗi hydratcarbon acid béo PL ( từ C 2-C5) Phần lại sâu vào nhân tiểu phân LP liên kết với TG , CE liên kết kỵ nước Cholesterol tự mặt ngồi tiểu phân LP , nhóm OH hướng mơi trường nước Như lớp vỏ LP gồm Protein, PL cholesterol tự dễ dàng di chuyển từ LP sang LP khác, từ LP sang tế bào ngoại biên Mối liên kết thành phần LP chủ yếu liên kết kỵ nước nên LP dễ dàng tách lipid nhận lipid vào Để phù hợp với cấu trúc ( chủ yếu liên kết kỵ nước liên kết đồng hóa trị ) người ta gọi tiểu phân LP khơng gọi gọi phân tử LP Hình 1:Cấu trúc Lipoprotein 1.2 Phân loại lipoprotein 1.2.1 Phân loại dựa vào tính chất tích điện LP phương pháp điện di Tương ứng với vị trí globulin , điện di LP phân tác loại LP sau: - α1LP hay αLP α2LP hay pre β LP β LP CM không di chuyển , tạo thành băng nhỏ vùng xuất phát Trong trường hợp bất thường LP gặp γLP 1.2.2 Phân loại dựa vào tỷ trọng phương pháp siêu ly tâm Sự khác tỉ trọng LP khác tỉ lệ hai thành phân lipid protein Tỉ trọng lipid khoảng 0,9g/mL protein gần 1,28g/ml/ Bằng siêu ly tâm người ta tìm thấy sáu loại LP sau: - Hạt mỡ (chylomicron-CM) Nổi dung dịch có tỉ trọng 0,95g/ml/ Đóng thành lớp crem để huyết 4oC qua đêm test nghiệm tủ lạnh Hình thành ruột non Vận chuyển TG có nguồn gốc thức ăn ( ngoại sinh) Thành phần lipid chiếm 98-99,5% , thành phần protein 0,5-2% Tỉ số protein : lipid =1:100 LP tỉ trọng thấp (Very Low Density Lipoprotein-VLDL) Nổi dung dịch có tỉ trọng 0,95-1,006 g/ml - Được tổng hợp gan Vận chuyển TG nội sinh Thành phần lipid 90-92%, protein 8-10% Tỉ số protein:lipid =1:9 LP tỷ trọng trung gian (Intermediate Density Lipoproteins -IDL) Nổi dung dịch có tỷ 1,006-1,092 g/ml Được tạo thành q trình chuyển hóa VLDL tìm thấy nồng độ thấp huyết tương người bình thường - Tỉ lệ protein :lipid khơng định LP tỷ trọng thấp ( Low Density Lipoproteins- LDL) - Nổi dung dịch có tỷ trọng 1,019-1,063g/ml - Được tạo thành q trình chuyển hóa VLDL - Vận chuyển cholesterol máu - Tỷ lệ protein: lipid= 1:4 LP tỷ cao ( High Density Lipoprotein –HDL) - Nổi dung dịch có tỷ trọng 1,063-1,210 g/ml - Tỷ lệ protein:lipid=1:1 - Có loại HDL phân biệt dựa thành phần , hình dạng chức năng: + HDL1 HDLc ( 1,055-1,085g/ml) + HDL2 (1,063-1,120g/ml) (1,120- 1,210g/ml) + HDL3 - HDL tổng hợp gan ruột dạng hình đĩa với lớp PL kép, sau chuyển thành dạng dình ầu huyết tương - Tỷ lệ HDL1 / HDL2 có tầm quan trọng đặc biệt chức HDL Lipoprotein (a) [Lp(a)] - Nổi dung dịch có tỉ trọng 1,055-1,110 g/ml - Thành phần lipid gần giống LDL 1.2.3 - Tương quan hai phương pháp phân loại αLP HDL β LP LDL Pre β LP VLDL Lp(a) γLP LpX (LP bất thường) Bảng 1: Tính chất thành phần hóa học LP 1.3 Chuyển hóa Lipoprotein Nghiên cứu cách đánh dấu phóng xạ thành phần protein lipid LP cho thấy có thay đồi apo ( apo C) lipid (cholesterol ester TG) LP lưu thông máu Sự trao đổi lipid LP máu nhờ protein vận chuyển sau đây: CETP (cholesterol ester transfer protein ) làm nhiệm vụ vận chuyển cholesterol ester từ HDL đến VLDL Trọng lượng phân tử CETP khoảng 60.000 Nó tổng hợp gan liên kết với HDL PLTP (phospholipid transfer protein) vận chuyển PL LP , đặc biết từ lipid giàu TG đến HDL làm dễ dàng cho hoạt động enzym LCAT PLTP tổng hợp từ gan có trọng lượng phân tử khoảng 41.000 Quá trình trao đổi protein , lipid gắn liền với thủy phân LP lòng mạch , biến đổi lẫn bắt giữ LP tổ chức Chuyển hóa trung gian LP q trình rát phức tạp 1.3.1 Chuyển hóa Chylomicron (CM) Số lượng CM (Chylomicron) hình thành tế bào màng nhầy ruột tương ứng với lượng Lipid hấp thu vào từ thức ăn từ mỡ trung tính CM giàu TG ( triglycerid) giàu Apo AI , AII, AIV B48 Protein PL CM tổng hợp tế bào ruộ t , khả tổng hợp có hạn tăng lượng thức ăn lipid đưa vào tới mức khơng làm tăng số lượng CM mà làm tăng kích thước ( đến µm ) CM vào hệ thống tuần hồn qua ống ngực sau đến gan bị thối hóa Lúc đầu CM khơng có apoprotein cần thiết cho thủy phân TG (apo C) cho nhận dạng CM thụ thể tế bào gan ( apo E) Khi vào máu, CM apo AI , AIV nhận apo C E Lipoprotein Lipase ( LPL) thành mao mạch thủy phân phần lớn TG nhân CM nhờ hoạt hóa apo CII Acid béo TG giải phóng tế bào cơ, tế bào mô mỡ thu nhận Những thành phần bề mặt CM ( apo C, AI, Cholesterol tự do, PL ) trở thành dư thừa , chúng giải phóng vận chuyển đến HDL tham gia vào thành phần HDL Tiểu phân CM lại ( sau thủy phân phần lớn TG) gọi CM dư ( CM remnant).Chúng nhận biết thụ thể tế bào gan thông qua nhận biết apo E có bề mặt CM Kết CM bị gan bắt giữ bị thối hóa gan Con đường chuyển hóa CM gọi đường chuyển hóa ngoại sinh ( lipid CM có nguồn gốc từ thức ăn ) Con đường bắt đầu sau ăn kết thúc khoảng 8h sau bữa ăn Do máu lúc đói ( sau ăn 10h) người bình thường phải khơng có CM Nếu có CM ( test nghiệm tủ lạnh dương tính) phải nghĩ tới rối loạn LP huyết kiểu I IV Hình 2: Chuyển hóa CM 1.3.2 Chuyển hóa VLDL Lipid tổng hợp gan đưa vào máu thành phần VLDL, VLDL1 Trong máu VLDL1 bị biến đổi thành VLDL2 IDL LDL Chỉ có số tiểu phân VLDL ( 1,5 mmol/L thường có kiểu B tần số bị bệnh tim mạch cao Hình 6: LDL dạng thái A LDL dạng thái B 1.3.4 Chuyển hóa HDL đường vận chuyển ngược cholesterol HDL không chứa thành phần đặc trưng cho apo B LDL Các thành phần ln biến đổi có tương tác với LP khác phụ thuộc vào hoạt động enzym LDL enzym vận chuyển gốc acyl ( Lecithin – cholesterol acyl Tranferase LCAT) Có loại HDL pre β HDL , HDL2 VÀ HDL3 Chức vận chuyển ngược cholesterol từ tế bào ngoại biên gan HDL thực thông qua chuyển hóa loại HDL HDL sinh (Nascent HDL) có nguồn gốc từ gan từ nguyên liệu bề mặt CM Lúc đầu HDL có dạng đĩa với lớp PL kép (pre β HDL) Thành phần PL , apo AI cholesterol tự Nhờ enzym LCAT cholesterol tự ester hóa thành cholesterol ester (CE) Chất đưa vào nhân , lớp PL làm cho tiểu phân HDL từ hình đĩa chuyển thành hình cầu HDL3 tiếp tục nhận PL , cholesterol tự từ bề mặt tế bào ngoại biên , ester hóa tiểu phân HDL3 chuyển thành HDL2 giàu CE CETP vận chuyển CE từ HDL2 sang VLDL dư Chất bị bắt giữ gan thụ thể nhận biết VLDL dư CE chuyển gan Sau chuyển CE cho VLDL dư, HDL2 nhận TG từ VLDL trở thành HDL2 giàu TG chất thíc hợp HTGL Enzym hoạt động thủy phân phần TG HDL2 giải phóng acid béo tự HDL2 chuyển ngược lại thành tiểu phân HDL3 nhỏ nặng Một chu trình vân chuyển ngược cholesterol lại HDL3 Sự biến đổi HDL3 thành HDL2 không u cầu nhận cholesterol tự mà có nhận phân tử apo AI , tỉ lệ apo AI/apo AII HDL2 cao HDL3 Ngoài việc chuyển CE gan gián tiếp qua thụ thể VLDL, tiểu phân HDL chuyển trực tiếp cách gắn với đĩa apo E/phospholipid(được tạo từ đại thực bào) gọi HDLE Những HDLE giàu cholesterol apo E giữ lại gan nhờ thụ thể nhận biết apo E chúng bị thối hóa gan Cơ chế giải thích vai trò bảo vệ thành mạch, chống ứ đọng cholesterol HDL ; giải thích cho mối tương quan nghịch nồng độ HDL nguy BMV tìm thấy nhiều nghiên cứu dịch tễ học Hình 7: chuyển hóa HDL Hình 8: Liên quan chuyển hóa CM, VLDL, HDL Tóm lại thơng qua chuyển hóa LP vận chuyển Lipid theo chiều hướng khác nhau: - - CM vận chuyển lipid ngoại sinh ( có nguồn gốc thức ăn) từ ruột gan VLDL LDL vận chuyển lipid nội sinh ( thể tổng hợp) từ gan đến tế bào ngoại biên có tế bào thành mạch Nếu LP tăng lên máu , Lipid chuyển nhiều vào thành mạch , ứ đọng nguy cho phát triển xơ vữa động mạch Vì VLDL LDL gọi LP gây xơ vữa HDL vận chuyển ngược Lipid ( cholesterol ) dư thừa từ tế bào ngoại biên gan để gan oxy hóa đào thải ngồi theo đường ruột Qúa trình vận chuyển giúp cho tế bào ngoại biên không bị ứ đọng lipid , chống lại tượng sinh xơ vữa, Vì HDL gọi LP chống sinh xơ vữa Rối loạn LP huyết theo chiều hướng tăng LP gây xơ vữa giảm LP chống sinh xơ vữa hai có nguy phát triển XVĐM 2 Ý NGHĨA TRONG THỰC HÀNH LÂM SÀNG Những xét nghiệm lipid , apoprotein cần phải biện luận với kết xét nghiệm LP lipid, apoprotein thành phần cấu tạo LP Như biết lipid chủ yếu cholesterol, triglycerid, phospholipid có mặt loại LP với tỷ lệ khác , việc tăng hay giảm lipid loại LP có ý nghĩa quan trọng đánh giá XVĐM tăng hay giảm lipid tồn phần huyết tương Ví dụ : tăng cholesterol LDL yếu tố gây xơ vữa cholesterol tăng HDL yếu tố giảm xơ vữa Tương tự , tăng Apo B nguy cao XVĐM Apo B thành phần LDL Tăng Apo AI tăng HDL – yếu tố bảo vệ thành mạch Các loại LP huyết tương phân tách phương pháp điện di SLT trình bày Việc định lượng LP labo lâm sàng thường làm gián tiếp định lượng cholesterol LP 2.1 Định lượng Cholesterol tồn phần máu *Bình thường:150-260mg/dl (3,9-6,7 mmol/L) *Thay đổi bệnh lý: - Tăng: >260mg/dl + Tăng tiên phát: bệnh tăng lipid gia đình , cholesterol tồn phần lên tới 8-10g/L + Tăng thứ phát: Bệnh gan: vàng da tắc mật, viêm nhiễm độc loạn glycogen gan Bệnh thận: HCTH , viêm thân tăng ure, lupus đỏ Bệnh tụy: sau phẫu thuật tụy, viêm tụy cấp-mãn, đái tháo đường Bệnh tuyến giáp: suy tuyến giáp tiên- thứ phát, phù niêm thiếu iod Các rối loạn chuyển hóa lipid : xơ vữa động mạch, tăng huyết áp -Giảm: 11mmol/L dẫn đến viêm tụy cấp - Giảm : xơ gan, số bệnh mãn tính, suy kiệt, cường giáp 2.3 2.4 Định lượng HDL- Cholesterol Khoảng 25% cholesterol huyết tương vận chuyển HDL Gía trị bình thường HDL-C > 35mg/dl Gía trị HDL-C bị ảnh hưởng nhiều yếu tố hút thuốc , tập luyện, tuổi, giới Nhiều cơng trình nghiên cứu chứng minh HDL-C yếu tố nguy độc lập với Cholesterol tồn phần Có mối tương quan nghịch HDL-C tần suất BMV HDL-C < 35mg/dl rõ nguy BMV nam nữ Định lượng LDL- Cholesterol LDL-C có mối tương quan thuận với tần số chết BMV Bảng 2:Tần suất nhồi máu tim (NMCT) hệ số nguy tương ứng với nồng độ LDL-C Nồng độ LDL-C (mg/dl) Tần suất NMCT Hệ số nguy 190 0,8 9,5 19,1 38,7 9,4 1,0 11,9 23,8 48,4 117,3 Gía trị bình thường 4,5 mmol/L) 2.5 Lp(a) Lp(a) chứng minh yếu tố nguy độc lập với BMV đặc biệt có tăng đồng thời Lp(a) LDL-C Lp(a) thường định lượng phương pháp miễn dịch độ đục có trị số bình thường